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可溶性耐药相关钙结合蛋白的生物质谱分析与鉴定 被引量:1
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作者 刘宁 齐静 +3 位作者 吕磊 刘志强 刘淑莹 杨纯正 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2005年第6期1046-1048,共3页
The protein profiles of the drug-resistant cell line K562/A02 and its sensitive parental cell line K562 were compared by using high resolution two-dimensional gel electrophoresis with IPG strip of pH 4\^7\5\^9. One pr... The protein profiles of the drug-resistant cell line K562/A02 and its sensitive parental cell line K562 were compared by using high resolution two-dimensional gel electrophoresis with IPG strip of pH 4\^7\5\^9. One protein spot was found to be differentially expressed, which was identified as the soluble resistance-related calcium binding protein(sorcin). Tandem mass spectrometric analysis of one tryptic peptide by a TOF-TOF analyzer as well as the western blot analysis substantiates the result derived from peptide mapping fingerprint data. 展开更多
关键词 可溶性相关结合蛋白 基质辅助激光解吸离子化飞行时间质谱 二维凝胶电泳
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可溶性耐药相关钙结合蛋白 被引量:2
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作者 张蓓蓓 吴毓 李庆伟 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期942-946,共5页
可溶性耐药相关钙结合蛋白(sorcin)是一个21·6kD的胞浆蛋白,具有典型的EF手臂(EF-hand)钙结合位点,广泛存在于多种组织中,在心肌细胞中含量最丰富.Sorcin可与肌浆网钙离子通道RyR相互作用,影响心肌细胞兴奋——收缩偶联.另一方面,s... 可溶性耐药相关钙结合蛋白(sorcin)是一个21·6kD的胞浆蛋白,具有典型的EF手臂(EF-hand)钙结合位点,广泛存在于多种组织中,在心肌细胞中含量最丰富.Sorcin可与肌浆网钙离子通道RyR相互作用,影响心肌细胞兴奋——收缩偶联.另一方面,sorcin在肿瘤耐药细胞中大量表达,它可以与细胞中钙离子结合,引起细胞内游离钙离子浓度下降,然后导致钙离子所介导的磷酸酶活性降低,使得具有排药功能的P-gp糖蛋白磷酸化水平下降,最终导致耐药.一旦明确引发和维持细胞耐药的作用机制,就可为克服肿瘤耐药提供新的靶点.同时随着RyR活性抑制作用研究的深入,有望通过sorcin转基因技术治疗心力衰竭.本文主要对sorcin的结构特点和生物学特性进行综述,并初步分析其耐药机制. 展开更多
关键词 可溶性相关结合蛋白 离子通道
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可溶性耐药相关钙结合蛋白在乳腺癌组织中的表达及其与预后关系 被引量:1
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作者 孙宇萍 王树滨 +3 位作者 陈亦欣 徐敏 刘雅洁 陈伟暨 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2004年第12期682-685,共4页
目的:探讨可溶性耐药相关钙结合蛋白(Solubleresistance-relatedcalciumbindingprotein,Sorcin)在乳腺癌组织中的表达,评估其在乳腺癌预后中的作用。方法:采用免疫组织化学方法(IHC)检测60例手术切除的乳腺癌组织中Sorcin的表达,并分析... 目的:探讨可溶性耐药相关钙结合蛋白(Solubleresistance-relatedcalciumbindingprotein,Sorcin)在乳腺癌组织中的表达,评估其在乳腺癌预后中的作用。方法:采用免疫组织化学方法(IHC)检测60例手术切除的乳腺癌组织中Sorcin的表达,并分析其与临床、病理特征的关系及对预后的影响。结果:1)Sorcin在乳腺癌组织中的阳性表达率为56.7%(34/60);2)Sorcin与月经状况、肿瘤大小、淋巴结转移、组织分级和激素受体状况均无明显差异(P>0.05);3)Kaplan-Meier生存分析结果表明Sorcin表达与无瘤生存期和总生存期均无明显差异(P>0.05);4)COX单因素分析和多因素分析显示肿瘤大小、淋巴结转移和ER与无瘤生存期及总生存期(P<0.05)明显相关,PR与总生存期(P<0.05)明显相关。结论:Sorcin在乳腺癌组织中具有高表达,与乳腺癌的无瘤生存期和总生存期皆无明显差异。 展开更多
关键词 乳腺癌 可溶性相关结合蛋白 预后 免疫组织化学
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反义人钙周期素结合蛋白编码基因转染对胃癌细胞多药耐药性的影响 被引量:4
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作者 胡文华 尹芳 樊代明 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期588-591,共4页
目的 研究hCacyBP编码基因在胃癌多药耐药机制中的作用。方法 采用Northern杂交 ,检测SGC790 1细胞及SGC790 1/ADR细胞中hCacyBPmRNA表达水平的差异。将hCacyBPcDNA克隆到 pcDNA3.1中 ,构建反义核酸真核表达载体 pcDNA3.1/hCacyBP ,... 目的 研究hCacyBP编码基因在胃癌多药耐药机制中的作用。方法 采用Northern杂交 ,检测SGC790 1细胞及SGC790 1/ADR细胞中hCacyBPmRNA表达水平的差异。将hCacyBPcDNA克隆到 pcDNA3.1中 ,构建反义核酸真核表达载体 pcDNA3.1/hCacyBP ,并转染耐阿霉素人胃癌细胞 ,用RT PCR检测转染细胞中hCacyBPmRNA水平的变化。用MTT比色法和FCM ,分别检测SGC790 1/ADR细胞、pcDNA3.1/hCacyBP 和 pcDNA3.1分别转染的SGC790 1/ADR细胞 ,对ADR的药物敏感性和胞内ADR的蓄积浓度。结果 Northern杂交证实 ,SGC790 1/ADR细胞中hCacyBPmRNA表达的水平显著高于SGC790 1细胞。成功地构建了pcDNA3.1/hCacyBP 。以 pcDNA3.1/hCacyBP 转染的SGC790 1/ADR细胞中hCacyBPmRNA的表达水平 ,显著低于空载体转染及未转染的SGC790 1/ADR细胞。MTT检测表明 ,转染pcDNA3.1/hCacyBP 的细胞 ,对ADR的药物敏性较空载体转染及未转染的SGC790 1/ADR细胞有所增高 ,生存率较后两者为低。FCM显示 ,转染 pcD NA3.1/hCacyBP 的SGC790 1/ADR细胞、转染 pcDNA3.1及未转染的SGC790 1/ADR细胞内ADR的蓄积浓度 ,分别为6 .72、5 .6 2和 5 .5 4。结论 hCacyBP碥码基因对胃癌细胞的MDR有一定的影响 。 展开更多
关键词 反义人周期素结合蛋白 编码基因 胃癌 聚合酶链反应 基因转染 流式细胞仪
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Sorcin蛋白质高表达与胃癌细胞多药耐药的关系 被引量:9
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作者 易红 杨轶轩 +3 位作者 汤参娥 陈主初 张桂英 肖志强 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期340-344,349,共6页
目的:应用蛋白质组学技术筛选胃癌耐药相关的蛋白质。方法:以胃癌细胞SGC7901和长春新碱诱导的耐药胃癌细胞SGC7901/VCR为研究对象,应用二维聚丙烯酰胺凝胶电泳(2-DE)技术分离两种细胞的总蛋白,图像分析识别差异表达的蛋白质点,基质辅... 目的:应用蛋白质组学技术筛选胃癌耐药相关的蛋白质。方法:以胃癌细胞SGC7901和长春新碱诱导的耐药胃癌细胞SGC7901/VCR为研究对象,应用二维聚丙烯酰胺凝胶电泳(2-DE)技术分离两种细胞的总蛋白,图像分析识别差异表达的蛋白质点,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)及电喷雾串联质谱(ESI-Q-TOF)对差异表达的蛋白质点进行鉴定。Western blot验证差异蛋白质的表达水平,反义核酸技术分析差异蛋白与胃癌耐药的关系。结果:可溶性耐药相关性钙结合蛋白(sorcin)在SGC7901/VCR细胞中高表达,反义核酸抑制sorcin表达可增强SGC7901/VCR对长春新碱的化疗敏感性。结论:Sorcin蛋白质高表达与胃癌细胞多药耐药密切相关。 展开更多
关键词 胃癌 二维电泳 质谱 可溶性相关性结合蛋白
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Sorcin表达水平影响卵巢癌患者化学药物治疗耐药及生存时间 被引量:3
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作者 张淑军 邓梦霞 +3 位作者 王前 蒋艳平 徐倩 曹兰琴 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期1113-1119,共7页
目的:探讨可溶性耐药相关钙结合蛋白质(soluble resistance-related calcium-binding protein,Sorcin)与卵巢癌化学药物治疗(以下简称化疗)耐药的关系及对患者生存时间的影响。方法:采用免疫组织化学方法检测27例卵巢癌化疗耐药和37例... 目的:探讨可溶性耐药相关钙结合蛋白质(soluble resistance-related calcium-binding protein,Sorcin)与卵巢癌化学药物治疗(以下简称化疗)耐药的关系及对患者生存时间的影响。方法:采用免疫组织化学方法检测27例卵巢癌化疗耐药和37例卵巢癌化疗敏感患者组织中Sorcin的表达情况,分析Sorcin与卵巢癌患者化疗耐药及临床病理特征的相关性;采用Log-rank检验对患者生存时间与Sorcin进行单因素影响分析;采用Cox回归模型分析各临床病理因素与生存时间之间的关系;采用Kaplan-Meier方法分析化疗耐药组与敏感组的生存率。结果:卵巢癌化疗耐药组的Sorcin免疫组织化学半定量评分显著高于敏感组(P<0.001)。64例卵巢癌患者Sorcin的表达在不同年龄组、有无腹水组、有无大网膜转移组、不同临床分期、不同病理分级和组织类型组间的比较差异均无统计学意义(P>0.05)。64例卵巢癌患者的Sorcin表达与生存时间呈负相关(r=–0.326,P<0.05)。Log-rank检验显示Sorcin的表达升高对卵巢癌患者的生存时间有影响(P<0.05)。Cox回归模型分析显示化疗耐药对生存时间有显著性影响[相对危险度(RR)为8.635,P<0.001]。患者年龄、有无腹水、有无大网膜转移、临床分期、病理分级、组织类型对生存时间均无影响(P>0.05)。Kaplan-Meier生存曲线显示化疗敏感组的生存率明显优于耐药组(P<0.05)。结论:Sorcin可能与卵巢癌化疗耐药相关。Sorcin表达水平可能影响卵巢癌患者的生存时间。化疗耐药是卵巢癌患者预后不良的独立危险因素。 展开更多
关键词 卵巢癌 化疗 可溶性相关结合蛋白 免疫组织化学 临床病理特征 生存时间
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汉防己甲素对K562/A02细胞株SORCIN基因表达的影响 被引量:7
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作者 李静 陈宝安 +14 位作者 朱敏生 高峰 丁家华 高冲 孙耘玉 程坚 王骏 赵刚 宋慧慧 马燕 鲍文 孙新臣 成红艳 许文林 沈惠玲 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2008年第1期65-69,共5页
本研究旨在探讨汉防己甲素(Tet)在逆转K562/A02细胞耐药与耐药相关的可溶性钙结合蛋白(SORCIN)基因表达之间的关系,为Tet的临床应用提供新的理论基础。通过MTT法筛选出所需浓度Tet,与K562/A02细胞株孵育培养48小时后,通过MTT检测Tet对... 本研究旨在探讨汉防己甲素(Tet)在逆转K562/A02细胞耐药与耐药相关的可溶性钙结合蛋白(SORCIN)基因表达之间的关系,为Tet的临床应用提供新的理论基础。通过MTT法筛选出所需浓度Tet,与K562/A02细胞株孵育培养48小时后,通过MTT检测Tet对柔红霉素(DNR)细胞毒性的影响,用RT-PCR方法检测SORCIN基因表达的变化,用Western blot方法检测sorcin表达蛋白的变化。结果表明:在所选浓度范围内,Tet可以增强DNR对K562/A02的细胞毒作用,(Tet浓度为0,0.5,1.0,2.0mg/L时DNR和Tet的IC50分别为11.3±0.17,5.15±0.10,3.91±0.06,2.52±0.04mg/L,p<0.01);K562/A02细胞中SORCIN基因高表达,且随着Tet浓度的增加SORCIN的表达先增强后减弱(Tet浓度为0.5mg/L时增强,1.0和2.0mg/L时减弱,p<0.05);K652细胞中sorcin蛋白低表达,K562/A02细胞中sorcin蛋白高表达,且随着Tet浓度的增加先增强后减弱(Tet浓度为0.5mg/L时增强、1.0和2.0mg/L时减弱,p<0.05)。结论:MTT检测显示Tet对K562/A02耐药逆转呈浓度依赖性,Tet可能通过调整SORCIN基因及蛋白的表达参与逆转K562/A02的耐药性,但并不与其耐药逆转作用完全相关。 展开更多
关键词 耐药相关性可溶性钙结合蛋白 汉防己甲素 K562/A02细胞株
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Sorcin的表达影响人胶质瘤细胞对顺铂的敏感性
8
作者 刘宁 孙连坤 +2 位作者 杨晓春 马丽伟 苏静 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期1202-1206,共5页
目的:研究可溶性耐药相关钙结合蛋白(sorcin)在人胶质瘤细胞对顺铂敏感性中的作用。方法:构建pSilencerTM3.1-H1-sorcin siRNA表达质粒;质粒转染人胶质瘤U251细胞;RT-PCR和Western blotting法检测sorcin mRNA和蛋白表达的变化;MTT法检测... 目的:研究可溶性耐药相关钙结合蛋白(sorcin)在人胶质瘤细胞对顺铂敏感性中的作用。方法:构建pSilencerTM3.1-H1-sorcin siRNA表达质粒;质粒转染人胶质瘤U251细胞;RT-PCR和Western blotting法检测sorcin mRNA和蛋白表达的变化;MTT法检测U251细胞的生存率;Western blotting检测耐药相关蛋白的表达变化。结果:经酶切和测序鉴定,成功构建pSilencerTM3.1-H1-sorcin siRNA表达载体;将该表达载体转染U251细胞,RT-PCR和Western blotting结果显示sorcin mRNA和蛋白表达量降低(P<0.05);MTT结果显示,抑制sorcin表达可增强U251细胞对顺铂的敏感性(P<0.05);同时发现抑制U251细胞的sorcin表达能降低耐药相关蛋白P-糖蛋白(P-gp)和多药耐药相关蛋白1(MRP1)的蛋白水平(P<0.05)。结论:抑制sorcin表达增强U251细胞对顺铂的敏感性,其作用机制可能与降低耐药相关蛋白P-gp和MRP1的表达有关,提示sorcin可能与胶质瘤细胞顺铂耐药有关。 展开更多
关键词 神经胶质瘤 顺铂 可溶性相关结合蛋白
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