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耐盐芽孢杆菌R1高效壳聚糖酶异源表达及特性分析 被引量:2
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作者 王建荣 王永华 +4 位作者 祝木金 王平 陈微 余思 钟斌 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期10-19,共10页
采用同源克隆获得耐盐芽孢杆菌壳聚糖酶(CsnBh46)基因,并异源表达制备重组耐盐芽孢杆菌壳聚糖酶,通过表征分析获得重组CsnBh46酶学特性。CsnBh46全长278个氨基酸,三维结构显示其分为上下两个半球,包含9个α螺旋和2个β折叠。在7 L发酵罐... 采用同源克隆获得耐盐芽孢杆菌壳聚糖酶(CsnBh46)基因,并异源表达制备重组耐盐芽孢杆菌壳聚糖酶,通过表征分析获得重组CsnBh46酶学特性。CsnBh46全长278个氨基酸,三维结构显示其分为上下两个半球,包含9个α螺旋和2个β折叠。在7 L发酵罐中,重组工程菌bh-5的最高酶活力和总蛋白质质量浓度分别为6375 U/mL和4.3 g/L。纯化后的重组CsnBh46最适反应pH和温度分别为6.0和60℃,金属离子Mn^(2+)、Ca^(2+)和Mg^(2+)对重组CsnBh46具有激活作用。重组CsnBh46最适底物为脱乙酰度95%胶体壳聚糖。重组CsnBh46能够高效水解胶体壳聚糖并且根据反应时间可以定向制备不同聚合度壳寡糖。本研究为CsnBh46产业化应用提供参考。 展开更多
关键词 耐盐芽孢杆菌r1 壳聚糖酶 毕赤酵母 重组表达 壳寡糖
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