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应用聚合酶链反应技术克隆猪源大肠杆菌耐热肠毒素基因 被引量:4
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作者 王嘉福 冉雪琴 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 1997年第4期3-4,共2页
以质粒DNA为模板,利用聚合酶链反应(PCR)技术扩增和克隆了猪大肠杆菌耐热毒素基因DNA片段;核苷酸序列分析表明。
关键词 大肠杆菌 耐热肠毒素基因 聚合酶链反应 克隆
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猪大肠杆菌不耐热肠毒素基因的PCR检测 被引量:1
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作者 陈芳 池仕红 +5 位作者 陈汉林 杨林 刘为民 张浩吉 王政富 马春全 《广东畜牧兽医科技》 2007年第6期32-33,共2页
以产肠毒素性大肠埃希氏菌(ETEC)不耐热肠毒素(LT)保守序列为靶序列,设计合成了一对可扩增336 bp目的片段的引物,建立了检测ETEC不耐热肠毒素(LT)基因的PCR方法。该方法对987p+、鼠伤寒沙门氏杆菌、猪肺疫巴氏杆菌和链球菌的检测结果均... 以产肠毒素性大肠埃希氏菌(ETEC)不耐热肠毒素(LT)保守序列为靶序列,设计合成了一对可扩增336 bp目的片段的引物,建立了检测ETEC不耐热肠毒素(LT)基因的PCR方法。该方法对987p+、鼠伤寒沙门氏杆菌、猪肺疫巴氏杆菌和链球菌的检测结果均为阴性。对15株分离自腹泻仔猪的待检菌株进行检测,有3株LT基因阳性。结果表明:该方法的特异性和敏感性较高,可用于ETEC的临床快速诊断和流行病学调查。 展开更多
关键词 肠毒素性大肠埃希氏菌(ETEC) 耐热肠毒素基因(LT) PCR
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用PCR检测鸡大肠杆菌耐热肠毒素基因
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作者 戴鼎震 汤厚宽 +1 位作者 汪银才 程太平 《中国动物检疫》 CAS 2000年第7期26-27,共2页
用1对合成的特异性核苷酸片段,通过聚合酶链反应(PCR),以鸡致病性大肠菌20个血清型菌株提取的染色体为模板进行扩增,标准阳性对照(pSLM400)及扩增到 16个大小为 150 hp的 DNA阳性片段,其它 6株及阳性... 用1对合成的特异性核苷酸片段,通过聚合酶链反应(PCR),以鸡致病性大肠菌20个血清型菌株提取的染色体为模板进行扩增,标准阳性对照(pSLM400)及扩增到 16个大小为 150 hp的 DNA阳性片段,其它 6株及阳性对照株 pEWD299未扩增到产物。斑点杂交表明,所扩增的阳性条带与标准耐热肠毒素基因( ST)杂交后呈强阳性。 展开更多
关键词 聚合酶链反应 鸡大肠杆菌 耐热肠毒素基因(ST)
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小肠结肠炎耶尔森菌耐热性肠毒素B基因(ystB)初步研究 被引量:16
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作者 王鑫 邱海燕 +11 位作者 肖玉春 许彦梅 金东 崔志刚 郑翰 罗霞 顾玲 汪华 朱凤才 史智扬 景怀琦 徐建国 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2005年第6期449-453,共5页
目的研究小肠结肠炎耶尔森菌的耐热性肠毒素B基因(ystB)的分布特征。方法通过聚合酶链反应(PCR)、DNA探针杂交方法与序列分析检测致病性和非致病性小肠结肠炎耶尔森菌携带ystB基因的情况。结果98株非致病性小肠结肠炎耶尔森菌中52株携带... 目的研究小肠结肠炎耶尔森菌的耐热性肠毒素B基因(ystB)的分布特征。方法通过聚合酶链反应(PCR)、DNA探针杂交方法与序列分析检测致病性和非致病性小肠结肠炎耶尔森菌携带ystB基因的情况。结果98株非致病性小肠结肠炎耶尔森菌中52株携带ystB基因,占53.06%。全部48株致病性小肠结肠炎耶尔森菌均不携带该基因。结论ystB基因仅存在于部分生物1A型非致病性小肠结肠炎耶尔森菌,而不存在于致病性菌株中。 展开更多
关键词 小肠结肠炎耶尔森菌 耐热肠毒素B基因DNA序列
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肠毒性大肠埃希菌肠毒素LTa基因特异性EMA-PCR检测方法的建立
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作者 赵素君 曹冶 +6 位作者 谢晶 李江凌 王秋实 叶勇刚 罗丹丹 叶健强 廖党金 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2012年第11期8-11,共4页
由于传统PCR技术无法区分样品中的死细菌与活细菌,为避免因样品中含有死细菌而造成的假阳性检测结果,本研究根据肠毒性大肠埃希菌(ETEC)不耐热肠毒素LTa基因设计特异性引物,利用叠氮溴乙锭(EMA)处理菌液,沸水浴法制备细菌裂解液,优化PC... 由于传统PCR技术无法区分样品中的死细菌与活细菌,为避免因样品中含有死细菌而造成的假阳性检测结果,本研究根据肠毒性大肠埃希菌(ETEC)不耐热肠毒素LTa基因设计特异性引物,利用叠氮溴乙锭(EMA)处理菌液,沸水浴法制备细菌裂解液,优化PCR条件,建立一种检测肠毒性大肠埃希菌活菌肠毒素基因的EMA-PCR方法。肠毒性大肠埃希菌CVCC196、CVCC197、CVCC200均能扩增出大小为438bp的特异性条带,而其他对照菌株未扩增出条带。经EMA处理,除了完全死菌组外,含有10mL/L~1 000mL/L活菌的混合悬液均可扩增出目的片段。因此,成功建立了一种快速、有效的检测肠毒性大肠埃希菌活菌肠毒素基因的EMA-PCR方法,该方法较传统PCR大大提高了检测的准确性,灵敏度可达19cfu/mL。 展开更多
关键词 肠毒性大肠埃希菌 耐热肠毒素基因 叠氮溴乙锭-聚合酶链反应 检测
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猪大肠埃希菌肠毒素基因的多重PCR检测 被引量:1
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作者 陈芳 王丙云 +3 位作者 杨林 黄良宗 刘为民 马春全 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期122-124,共3页
以产肠毒素性大肠埃希菌(Enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)耐热肠毒素(STa、STb)基因和不耐热肠毒素(LT)基因保守序列为靶序列,设计合成了3对可扩增目的片段为182、108和336 bp的引物,建立了检测ETEC耐热肠毒素基因和不耐热肠毒... 以产肠毒素性大肠埃希菌(Enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)耐热肠毒素(STa、STb)基因和不耐热肠毒素(LT)基因保守序列为靶序列,设计合成了3对可扩增目的片段为182、108和336 bp的引物,建立了检测ETEC耐热肠毒素基因和不耐热肠毒素基因的多重PCR方法.该方法对肠出血性大肠埃希菌(EHEC)EDL933、猪链球菌Streptcoccus、鼠伤寒沙门氏杆菌Salmonella typhimrium和猪肺疫巴氏杆菌Pasteurella pneumotropic的检测结果均为阴性,并且能检测到102cfu/mL稀释度的标准菌.对11株分离自广东佛山地区腹泻仔猪的待检菌株进行检测,结果为:含STa基因的菌株为5株;含STb基因为2株;含LT基因为3株,其中2株同时具有STb和LT基因.结果表明:该方法的特异性和敏感性较高,可用于ETEC的临床快速诊断和流行病学调查. 展开更多
关键词 肠毒素性大肠埃希菌(ETEC) 耐热肠毒素(STa STb)基因 耐热肠毒素(LT)基因 多重PCR
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