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副溶血性弧菌耐热直接相关溶血素基因的克隆与序列分析被引量：8: 1; 作者苏建新聂军吴振龙《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2002年第6期515-517,共3页; 目的探讨克隆副溶血弧菌(Vp)耐热直接相关溶血素基因的方法。方法用PCR技术扩增目的基因,双酶切载体pGEX-3X和目的基因DNA,连接并转化大肠杆菌DH5琢。对重组质粒进行PCR鉴定、酶切鉴定和序列分析。结果凝胶电泳显示,标准株Vp14-91基因组... 展开更多; 关键词副溶血性弧菌耐热直接相关溶血素序列分析基因克隆; 在线阅读下载PDF 职称材料

产耐热直接相关溶血素的副溶血性弧菌PCR检测及其表型分析被引量：3: 2; 作者刘代新宁喜斌《华北农学报》 CSCD 北大核心 2008年第B10期114-117,共4页; 运用PCR技术成功建立了检测产耐热直接相关溶血素(TRH)的副溶血性弧菌的方法,并应用该方法从1株标准株和其他3种不同来源的37株副溶血性弧菌中的13株扩增出0.5 kb的trh基因特异性扩增带;产TRH的副溶血性弧菌中1株标准株,12株分离自腹泻... 展开更多; 关键词副溶血性弧菌耐热直接相关溶血素 PCR 尿素酶; 在线阅读下载PDF 职称材料

副溶血性弧菌不耐热溶血素的生物信息学分析与分子动力学模拟: 3; 作者张德福于振兴 +4 位作者张明吕欣然张永勤张国清励建荣《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第12期251-257,I0009-I0012,共11页; 副溶血性弧菌是一种革兰氏阴性人畜共患致病菌,可引发人类胃肠炎等食源性疾病。副溶血性弧菌具有多种毒力因子,热不稳定溶血素(thermolabile hemolysin,TLH)即是其中之一。该研究对副溶血性弧菌的tlh基因进行了克隆及测序,对tlh基因编码... 展开更多; 关键词基因克隆副溶血性弧菌不耐热溶血素(tlh) 生物信息学分析分子动力学模拟; 在线阅读下载PDF 职称材料

副溶血弧菌耐热直接溶血素DAS-ELISA检测方法的建立被引量：2: 4; 作者白雪欣胡宸艺 +6 位作者金志颖万伟李月王菁李岩伟高姗王景林《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期666-672,共7页; 目的建立副溶血弧菌耐热直接溶血素的双抗体夹心ELISA(double antibody sandwich ELISA,DAS-ELISA)检测方法。方法本研究通过PCR技术扩增副溶血弧菌耐热直接溶血素基因序列,并将其克隆至pET-28a载体后进行原核表达,对表达蛋白进行纯化... 展开更多; 关键词耐热直接溶血素多克隆抗体 DAS-ELISA; 在线阅读下载PDF 职称材料

宁波副溶血性弧菌临床株毒力基因与多位点序列分型研究被引量：4: 5; 作者高红宋启发 +2 位作者徐景野郑剑沈玄艺《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期240-243,共4页; 目的了解宁波地区副溶血性弧菌临床分离株毒力基因分布以及分子分型特征。方法收集来源于食物中毒和散发腹泻患者副溶血弧菌菌株,利用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测耐热直接溶血素基因(tdh)和耐热直接溶血素相关... 展开更多; 关键词副溶血性弧菌耐热直接溶血素基因耐热直接溶血素相关溶血素基因多位点序列分型; 在线阅读下载PDF 职称材料

快速检测致病性副溶血弧菌的Dot-ELISA方法的建立被引量：4: 6; 作者王艳何再平 +3 位作者黄忠荣张磊萍王权蒋蔚《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2018年第5期48-52,共5页; 本研究选用硝酸纤维素膜作固相载体,以出现明显清晰斑点者判为阳性结果,成功建立了检测致病性副溶血弧菌耐热直接溶血素(direct heat hemolysin,TDH)的斑点酶联免疫吸附试验(Dot-ELISA)方法。根据棋盘试验,确定免疫血清最佳工作浓度为1:... 展开更多; 关键词副溶血弧菌耐热直接溶血素 DOT-ELISA 检测; 在线阅读下载PDF 职称材料

副溶血性弧菌毒力因子及耐药机制研究进展被引量：8: 7; 作者张健朱秋华 +9 位作者张明王丽卫董浩曾仙童白梧桐郭晓华申照华宋钢张德福励建荣《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期301-307,共7页; 副溶血性弧菌是水产品中主要的致病菌之一,既可造成养殖水产品的疾病与死亡,也可引起人类的胃肠炎等疾病,不仅具有潜在的食品安全隐患,也对消费者健康造成潜在危害。该文主要阐述了副溶血性弧菌的毒力因子耐热直接溶血素(thermostable d... 展开更多; 关键词副溶血性弧菌耐热直接溶血素 T3SS 耐药机制质粒; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名副溶血性弧菌耐热直接相关溶血素基因的克隆与序列分析被引量：8: 1; 作者苏建新聂军吴振龙; 机构第一军医大学流行病学教研室; 出处《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2002年第6期515-517,共3页; 基金广东省卫生厅医学科研课题(A2000347); 文摘目的探讨克隆副溶血弧菌(Vp)耐热直接相关溶血素基因的方法。方法用PCR技术扩增目的基因,双酶切载体pGEX-3X和目的基因DNA,连接并转化大肠杆菌DH5琢。对重组质粒进行PCR鉴定、酶切鉴定和序列分析。结果凝胶电泳显示,标准株Vp14-91基因组DNA的PCR产物长约600 bp。阳性克隆的PCR产物也为一长约600 bp的条带,经双酶切可切出一约600 bp的条带。DNA测序结果表明与GenBank中的序列有99.1%的同源性。结论利用该方法成功克隆了目的基因,为制备用于现场检测的基因探针和Vp的保护性疫苗以及Vp的致病机制研究奠定了基础。; 关键词副溶血性弧菌耐热直接相关溶血素序列分析基因克隆; Keywords Vibrio parahaemolyticus thermostable direct hemolysin-related hemolysin Escherichia coli cloning, molecular sequence analysis; 分类号 R378.3 [医药卫生—病原生物学] Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名产耐热直接相关溶血素的副溶血性弧菌PCR检测及其表型分析被引量：3: 2; 作者刘代新宁喜斌; 机构上海海洋大学食品学院; 出处《华北农学报》 CSCD 北大核心 2008年第B10期114-117,共4页; 基金上海市科学技术委员会资助(06dz05129); 文摘运用PCR技术成功建立了检测产耐热直接相关溶血素(TRH)的副溶血性弧菌的方法,并应用该方法从1株标准株和其他3种不同来源的37株副溶血性弧菌中的13株扩增出0.5 kb的trh基因特异性扩增带;产TRH的副溶血性弧菌中1株标准株,12株分离自腹泻病人排泄物或呕吐物,1株分离自水产动物养殖用水;并且产TRH与尿素酶阳性的副溶血性弧菌菌株之间的具有一一对应的关系,结果认定尿素酶阳性是产TRH的副溶血性弧菌菌株的表现型。; 关键词副溶血性弧菌耐热直接相关溶血素 PCR 尿素酶; Keywords Vibrio parahaemolyticus TRH PCR Urase; 分类号 TS201.3 [轻工技术与工程—食品科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名副溶血性弧菌不耐热溶血素的生物信息学分析与分子动力学模拟: 3; 作者张德福于振兴张明吕欣然张永勤张国清励建荣; 机构渤海大学食品科学与工程学院山东美佳集团有限公司锦州市农业农村综合服务中心水产技术推广站; 出处《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第12期251-257,I0009-I0012,共11页; 基金渤海大学海洋研究院开放课题(BDHYYJY2024003) 渤海大学食品科学与工程学院预研项目。; 文摘副溶血性弧菌是一种革兰氏阴性人畜共患致病菌,可引发人类胃肠炎等食源性疾病。副溶血性弧菌具有多种毒力因子,热不稳定溶血素(thermolabile hemolysin,TLH)即是其中之一。该研究对副溶血性弧菌的tlh基因进行了克隆及测序,对tlh基因编码的TLH蛋白进行了生物信息学分析及结构和功能预测。结果表明,TLH蛋白由418个氨基酸组成,预测分子质量为47.36 kDa。在TLH蛋白中确定了几个保守的结构域和基序,包括SGNH水解酶结构域和GDSL基序;对TLH蛋白的三维结构进行了同源建模及验证,在此基础上通过分子动力学模拟分析其稳定性、与4-硝基苯基月桂酸酯(p-nitrophenylaurate,PNPL)的相互作用能力及结合底物对结构紧密度和残基灵活性的影响,揭示了催化三联体Ser153-His390-Asp393周边是一个重要的药物靶点活性口袋,具有高度保守的残基序列,并在底物结合后表现出残基灵活性差异。该研究分析了副溶血性弧菌TLH蛋白的性质和结构,可以为保障水产品的安全性、提高水产品原料安全评价水平提供理论支持。; 关键词基因克隆副溶血性弧菌不耐热溶血素(tlh) 生物信息学分析分子动力学模拟; Keywords gene cloning Vibrio parahaemolyticus thermolabile hemolysin(tlh) bioinformatics analysis molecular dynamics simulation; 分类号 TS254.1 [轻工技术与工程—水产品加工及贮藏工程] TS201.3 [轻工技术与工程—食品科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名副溶血弧菌耐热直接溶血素DAS-ELISA检测方法的建立被引量：2: 4; 作者白雪欣胡宸艺金志颖万伟李月王菁李岩伟高姗王景林; 机构安徽医科大学基础医学院军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室; 出处《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期666-672,共7页; 基金 “十三五”国家重点研发计划子课题(No.2018YFC1602505)。; 文摘目的建立副溶血弧菌耐热直接溶血素的双抗体夹心ELISA(double antibody sandwich ELISA,DAS-ELISA)检测方法。方法本研究通过PCR技术扩增副溶血弧菌耐热直接溶血素基因序列,并将其克隆至pET-28a载体后进行原核表达,对表达蛋白进行纯化和鉴定,随后用高纯度的重组蛋白免疫新西兰白兔制备多克隆抗体,得到抗体后利用分子互作测定抗体的亲和力,并利用该抗体建立检测副溶血弧菌耐热直接溶血素的DAS-ELISA方法。通过棋盘法对该方法的反应条件进行优化,建立标准曲线,并对建立的DAS-ELISA方法进行性能评价及初步应用。结果本实验制备的多克隆抗体亲和力可达1×10^(-8),使用该高亲和力抗体建立的DAS-ELISA方法灵敏度为78 ng/mL,定量范围为78~312 ng/mL;与创伤弧菌溶细胞毒素(Vibrio vulnificus hemolysin,VVH)、产气荚膜梭菌α毒素(Clostridium perfringensαtoxin,CPA)以及产气荚膜梭菌ε毒素(epsilon toxin,ETX)均无交叉反应;利用扇贝、花蛤和魁蚶制备海鲜模拟样本,在上述3种模拟样本内添加重组蛋白构建标准曲线,评价本方法复杂基质中检出能力时发现灵敏度均并未发生改变;同时在上述3种模拟样本中添加菌液上清评价本方法检测天然毒素能力,检出率为100%。结论成功构建了一种用于副溶血弧菌耐热直接溶血素检测的DAS-ELISA方法,该方法特异性强、灵敏度高,适用于复杂基质检测,有望开发成副溶血弧菌耐热直接溶血素快速诊断试剂盒,具有良好的应用前景。; 关键词耐热直接溶血素多克隆抗体 DAS-ELISA; Keywords thermostable direct hemolysin polyclonal antibody DAS-ELISA; 分类号 Q933 [生物学—微生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名宁波副溶血性弧菌临床株毒力基因与多位点序列分型研究被引量：4: 5; 作者高红宋启发徐景野郑剑沈玄艺; 机构宁波市疾病预防控制中心; 出处《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期240-243,共4页; 基金宁波市科学技术局基金项目资助(No.2012B82018 No.2011C50041)~~; 文摘目的了解宁波地区副溶血性弧菌临床分离株毒力基因分布以及分子分型特征。方法收集来源于食物中毒和散发腹泻患者副溶血弧菌菌株,利用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测耐热直接溶血素基因(tdh)和耐热直接溶血素相关溶血素基因(trh),利用多位点序列分型(multi-locus sequence typing,MLST)进行分子分型。结果2006—2012年共分离临床株248株,选择48株进行毒力基因和MLST分型研究。42株tdh+,为93.75%;11株trh+,为22.92%。48株菌株可分为9个ST型和一个未分型,ST3有32株,占66.67%;ST265有5株,占10.42%;ST120有3株,占6.25%。ST3克隆群中tdh+/trh-菌株有25株,占78.16%。与全国其他地区比较,在宁波临床株中发现ST262。结论 tdh+型是宁波地区副溶血性弧菌优势菌株。有9种ST型,以ST3克隆为主,其次为ST265和ST120。ST3克隆中以tdh+/trh-型为主。另发现1个独特的ST262菌株。; 关键词副溶血性弧菌耐热直接溶血素基因耐热直接溶血素相关溶血素基因多位点序列分型; Keywords Vibrio parahaemolyticus tdh trh multi-locus sequence typing; 分类号 R378.3 [医药卫生—病原生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名快速检测致病性副溶血弧菌的Dot-ELISA方法的建立被引量：4: 6; 作者王艳何再平黄忠荣张磊萍王权蒋蔚; 机构上海出入境检验检疫局动植物与食品检验检疫技术中心中国农业科学院上海兽医研究所; 出处《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2018年第5期48-52,共5页; 基金上海市自然科学基金项目(17ZR1437200) 实验动物7种重要相关质量相关病原体检测新技术的研究(17ZR1437200); 文摘本研究选用硝酸纤维素膜作固相载体,以出现明显清晰斑点者判为阳性结果,成功建立了检测致病性副溶血弧菌耐热直接溶血素(direct heat hemolysin,TDH)的斑点酶联免疫吸附试验(Dot-ELISA)方法。根据棋盘试验,确定免疫血清最佳工作浓度为1:100,酶标二抗最佳工作浓度为1:1000。特异性检测结果表明,TDH阳性的副溶血弧菌可以呈现明显清晰斑点,而不能产生TDH的副溶血弧菌及其他对照菌(如嗜水气单胞菌、大肠杆菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌)均无斑点显示。该方法与PCR方法的符合率为82.5%。本研究所建立的Dot-ELISA检测方法简便、快速,特异性和敏感性较高,适合基层和现场的初步筛选。; 关键词副溶血弧菌耐热直接溶血素 DOT-ELISA 检测; Keywords Vibrio parahaemolyticu direct heat hemolysin(TDH) Dot-ELISA detection; 分类号 S852.612 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名副溶血性弧菌毒力因子及耐药机制研究进展被引量：8: 7; 作者张健朱秋华张明王丽卫董浩曾仙童白梧桐郭晓华申照华宋钢张德福励建荣; 机构渤海大学食品科学与工程学院中国科学院过程工程研究所生化工程国家重点实验室山东美佳集团有限公司锦州市龙海馨港科技有限公司凌海市达莲海珍品养殖有限责任公司; 出处《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期301-307,共7页; 基金国家重点研发计划项目(2019YFD0901702) 国家自然科学基金项目(31801662)。; 文摘副溶血性弧菌是水产品中主要的致病菌之一,既可造成养殖水产品的疾病与死亡,也可引起人类的胃肠炎等疾病,不仅具有潜在的食品安全隐患,也对消费者健康造成潜在危害。该文主要阐述了副溶血性弧菌的毒力因子耐热直接溶血素(thermostable direct hemolysin,TDH)以及分泌系统T3SS1、T3SS2在菌株体内的作用机理,并对副溶血性弧菌产生耐药性的5种机制——产生生物被膜、质粒介导耐药、产生灭活酶或钝化酶类、外排泵主动排出抗菌药物、药物靶点发生改变进行了综述。; 关键词副溶血性弧菌耐热直接溶血素 T3SS 耐药机制质粒; Keywords Vibrio parahaemolyticus thermoslable direct hemolysin(TDH) T3SS mechanism of drug resistance plasmid; 分类号 TS254.1 [轻工技术与工程—水产品加工及贮藏工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	副溶血性弧菌耐热直接相关溶血素基因的克隆与序列分析	苏建新聂军吴振龙	《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心	2002	8	在线阅读下载PDF 职称材料
2	产耐热直接相关溶血素的副溶血性弧菌PCR检测及其表型分析	刘代新宁喜斌	《华北农学报》 CSCD 北大核心	2008	3	在线阅读下载PDF 职称材料
3	副溶血性弧菌不耐热溶血素的生物信息学分析与分子动力学模拟	张德福于振兴张明吕欣然张永勤张国清励建荣	《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心	2024	0	在线阅读下载PDF 职称材料
4	副溶血弧菌耐热直接溶血素DAS-ELISA检测方法的建立	白雪欣胡宸艺金志颖万伟李月王菁李岩伟高姗王景林	《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心	2022	2	在线阅读下载PDF 职称材料
5	宁波副溶血性弧菌临床株毒力基因与多位点序列分型研究	高红宋启发徐景野郑剑沈玄艺	《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心	2015	4	在线阅读下载PDF 职称材料
6	快速检测致病性副溶血弧菌的Dot-ELISA方法的建立	王艳何再平黄忠荣张磊萍王权蒋蔚	《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心	2018	4	在线阅读下载PDF 职称材料
7	副溶血性弧菌毒力因子及耐药机制研究进展	张健朱秋华张明王丽卫董浩曾仙童白梧桐郭晓华申照华宋钢张德福励建荣	《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心	2022	8	在线阅读下载PDF 职称材料