期刊文献+
共找到6篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
耐热β-半乳糖苷酶基因在枯草芽孢杆菌中的克隆和表达 被引量:8
1
作者 傅晓燕 陈卫 张灏 《中国酿造》 CAS 北大核心 2004年第8期16-18,共3页
用PCR的方法从嗜热脂肪芽孢杆菌(Bacillus stearothermophilis ATCC8005)染色体DNA中扩增到耐热β- 半乳糖苷酶基因bgaB,装载到大肠-枯草穿梭质粒pZZ01中,并将其转化到枯草杆菌宿主WB600中进行表达。在1%的淀粉培养基上摇瓶培养,36h时... 用PCR的方法从嗜热脂肪芽孢杆菌(Bacillus stearothermophilis ATCC8005)染色体DNA中扩增到耐热β- 半乳糖苷酶基因bgaB,装载到大肠-枯草穿梭质粒pZZ01中,并将其转化到枯草杆菌宿主WB600中进行表达。在1%的淀粉培养基上摇瓶培养,36h时酶活达到24U/mL,和大肠杆菌pET系统相当。同时产酶出现了2个增长时期,第1阶段在对数生长期,第2阶段在静止期,这和重叠启动子P43的性质是相吻合的。 展开更多
关键词 耐热β-半乳糖苷酶 枯草芽孢杆菌 重叠启动子 克隆和表达
在线阅读 下载PDF
耐热β-半乳糖苷酶基因bgaB在枯草芽孢杆菌中的整合表达 被引量:5
2
作者 张灏 夏雨 +2 位作者 傅晓燕 陈卫 丁霄霖 《无锡轻工大学学报(食品与生物技术)》 CSCD 北大核心 2003年第6期1-4,14,共5页
来源于嗜热脂肪芽胞杆菌Bacillusstearothermophilus的耐热β 半乳糖苷酶基因bgaB被克隆到大肠杆菌-枯草芽胞杆菌穿梭质粒pMA5中,然后将外源基因及其表达调控序列亚克隆到枯草芽胞杆菌整合载体pSAS144中,转化Bacillussubtilis受体菌BD1... 来源于嗜热脂肪芽胞杆菌Bacillusstearothermophilus的耐热β 半乳糖苷酶基因bgaB被克隆到大肠杆菌-枯草芽胞杆菌穿梭质粒pMA5中,然后将外源基因及其表达调控序列亚克隆到枯草芽胞杆菌整合载体pSAS144中,转化Bacillussubtilis受体菌BD170,在5μg/mL的氯霉素抗性平板上筛选抗性转化子.经摇瓶发酵后,得到耐热乳糖酶的比酶活为0.32U/mg,是出发菌株比酶活的2倍. 展开更多
关键词 耐热β-半乳糖苷酶 枯草芽孢杆菌 基因表达 整合
在线阅读 下载PDF
耐热β-半乳糖苷酶基因在大肠杆菌中的表达 被引量:9
3
作者 葛佳佳 陈卫 张灏 《无锡轻工大学学报(食品与生物技术)》 CSCD 北大核心 2002年第3期296-298,共3页
将来自嗜热脂肪芽孢杆菌IAM 110 0 1的高温乳糖酶基因bgaB亚克隆到具强启动子的大肠杆菌载体 pKK 2 2 3 3中 ,经IPTG诱导后 ,表达出的重组蛋白质仍具有耐高温活性 ,其相对分子质量与天然蛋白质相似 ,表达量为 1.5U/mg ,比出发菌株高
关键词 耐热β-半乳糖苷酶基因 大肠杆菌 表达
在线阅读 下载PDF
耐热β-半乳糖苷酶重组菌WB600/pMA5-bgaB发酵条件的研究 被引量:1
4
作者 陈卫 陈海琴 +2 位作者 田丰伟 赵建新 张灏 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期1-5,共5页
耐热β-半乳糖苷酶相比酵母来源的中温乳糖酶用于低乳糖牛奶的生产具有潜在的优越性。在已将来源于嗜热脂肪芽孢杆菌的耐热β-半乳糖苷酶基因(bgaB)克隆入枯草芽孢杆菌得到重组菌WB600/pMA5-bgaB后,对此重组菌的发酵条件进行了研究。重... 耐热β-半乳糖苷酶相比酵母来源的中温乳糖酶用于低乳糖牛奶的生产具有潜在的优越性。在已将来源于嗜热脂肪芽孢杆菌的耐热β-半乳糖苷酶基因(bgaB)克隆入枯草芽孢杆菌得到重组菌WB600/pMA5-bgaB后,对此重组菌的发酵条件进行了研究。重组菌WB600/pMA5-bgaB在发酵过程中具有良好的遗传稳定性,可溶性淀粉和胰蛋白胨是重组菌生长和酶活表达的适合碳源和氮源。WB600/pMA5-bgaB适宜的摇瓶培养条件为接种量3%~5%,装液量30~50/250 mL(三角瓶),起始pH7.0,摇床转速220r/min。在7L反应器中进行分批发酵,研究表明,pH调控和溶氧控制对提高工程菌发酵产酶具有明显帮助,pH控制在7.0,溶氧控制在50%可提高发酵酶活;补料培养后菌体密度OD_(600)可达到47,酶活达到37.5U/mL,比在初始条件下提高了10倍。 展开更多
关键词 耐热β-半乳糖苷酶 重组枯草杆菌 发酵
在线阅读 下载PDF
耐热β-半乳糖酶在乳酸克鲁维酵母及毕赤酵母中的表达研究 被引量:4
5
作者 董艺凝 王霁昀 +2 位作者 陈海琴 张灏 陈卫 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期168-171,175,共5页
将嗜热脂肪芽孢杆菌来源的耐热β-半乳糖酶基因bgaB分别插入穿梭质粒pKLAC1、pPIC9k的α-因子信号肽下游,构建bgaB基因的乳酸克鲁维酵母真核表达载体pKLAC1-bgaB及毕赤酵母真核表达载体pPIC9k-bgaB。载体经酶切线性化后采用电击方法分... 将嗜热脂肪芽孢杆菌来源的耐热β-半乳糖酶基因bgaB分别插入穿梭质粒pKLAC1、pPIC9k的α-因子信号肽下游,构建bgaB基因的乳酸克鲁维酵母真核表达载体pKLAC1-bgaB及毕赤酵母真核表达载体pPIC9k-bgaB。载体经酶切线性化后采用电击方法分别转化到乳酸克鲁维酵母K.lactis GG799及毕赤酵母GS115中,并通过同源区各自整合到宿主基因组中。重组酶进行镍柱纯化、Western Blot杂交鉴定及酶学性质分析。结果表明,耐热β-半乳糖苷酶在酵母表达系统中可以实现外源表达且热稳定性保持良好,但不能被酵母系统有效分泌。 展开更多
关键词 耐热β-半乳糖苷酶 乳酸克鲁维酵母 毕赤酵母 学性质
在线阅读 下载PDF
黑曲霉DL116产乳糖酶发酵条件的研究 被引量:4
6
作者 杜海英 李宁 +2 位作者 韩军 于宏伟 贾英民 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期60-64,共5页
为确定产高温乳糖酶的黑曲霉菌株DL116的最佳发酵培养条件,研究了突变菌株产乳糖酶的发酵培养基成分及培养条件。结果表明:DL116产乳糖酶的最佳培养基成分为:果胶2.5%,豆粕粉6%,玉米浆9%,(NH4)2SO40.1%,K2HPO41%,Tween-80 0.3%;最佳培... 为确定产高温乳糖酶的黑曲霉菌株DL116的最佳发酵培养条件,研究了突变菌株产乳糖酶的发酵培养基成分及培养条件。结果表明:DL116产乳糖酶的最佳培养基成分为:果胶2.5%,豆粕粉6%,玉米浆9%,(NH4)2SO40.1%,K2HPO41%,Tween-80 0.3%;最佳培养条件:温度30℃,初始pH 5.0,装液量30 mL/250 mL,接种量104个/mL。在此条件下培养,β-半乳糖苷酶酶活力达83.89 U/mL,是初始发酵条件下酶活力的1.89倍。 展开更多
关键词 黑曲霉 耐热β-半乳糖苷酶 发酵条件 优化
在线阅读 下载PDF
上一页 1 下一页 到第
使用帮助 返回顶部