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山东省耐利福平结核分枝杆菌rpoB基因突变的研究 被引量:6
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作者 王海英 徐勇 +4 位作者 邓云峰 潘晞 Edward Graviss 马欣 刘志敏 《中国防痨杂志》 CAS 2005年第5期289-292,共4页
目的分析山东省利福平耐药结核菌株rpoB基因突变特点。方法本研究为回顾性调查,135株样本分别取自1997、2000及2003年的流行病学调查和医院的临床样本。采用PCR直接基因测序法分析rpoB基因突变。结果135株结核菌中,60株为利福平耐药菌株... 目的分析山东省利福平耐药结核菌株rpoB基因突变特点。方法本研究为回顾性调查,135株样本分别取自1997、2000及2003年的流行病学调查和医院的临床样本。采用PCR直接基因测序法分析rpoB基因突变。结果135株结核菌中,60株为利福平耐药菌株,其中55株(91.7%)rpoB基因的利福平耐药决定区(RRDR)有突变。突变频率依次为密码子531(60.0%),526(29.1%)和516(7.3%)。1株耐药菌同时发生了少见的3个密码子(511,515,518)的多核苷酸突变。75株敏感菌株中,仅3株(4.0%)有突变,均发生在密码子533,包括一个新发现的突变基因型CTG(Leu)→ATG(Met)。结论来自山东省结核菌中,利福平耐药表型与rpoB基因突变的符合率为94.1%,并提示密码子533突变与利福平耐药表型相关性较低。 展开更多
关键词 分枝杆菌 结核 RPOB基因 基因测序 耐利福平结核分枝杆菌 RPOB基因突变 山东省 结核菌株 流行病学调查 临床样本 药菌株 药表型 回顾性调查
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单耐利福平结核分枝杆菌耐药分子机制研究 被引量:6
2
作者 逄宇 李桂莲 +5 位作者 王玉峰 宋媛媛 李强 欧喜超 董海燕 赵雁林 《中国防痨杂志》 CAS 2012年第5期275-279,共5页
目的探讨单耐利福平结核分枝杆菌中耐药相关基因突变以及药物外排泵两种不同耐药机制的功能。方法从国家结核病参比实验室2007—2008年全国耐药基线调查菌株库中挑选单耐利福平的菌株23株。采用直接测序法检测利福平耐药相关基因rpoB突... 目的探讨单耐利福平结核分枝杆菌中耐药相关基因突变以及药物外排泵两种不同耐药机制的功能。方法从国家结核病参比实验室2007—2008年全国耐药基线调查菌株库中挑选单耐利福平的菌株23株。采用直接测序法检测利福平耐药相关基因rpoB突变情况。提取rpoB无突变菌株的RNA后反转录并采用real-timePCR方法检测20个药物外排泵基因的表达量,对比菌株最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)实验结果,筛选可能与利福平药物外排相关的基因,并选用大肠埃希菌为模式生物,构建表达载体,检测过表达目的外排泵的大肠埃希菌对利福平的耐药程度以验证。结果在23株单耐利福平的菌株中,有16株(69.6%)检测到rpoB突变,其中包括531位点突变9株,526位点突变6株及533位点突变1株。Ser531Leu、His526Asp表现为高浓度耐药,其MIC分别为192μg/ml和256μg/ml;而突变类型His526Gly、His526Leu、His526Arg和Leu533Pro表现为低浓度耐药,其MIC分别为0.75μg/ml、4μg/ml、2μg/ml和0.5μg/ml。在rpoB未突变菌株中,通过real-time PCR发现Rv2936、Rv0783和Rv0933的转录水平与MIC呈正相关。在对照组和转入pEASY-E1-Rv0933的大肠埃希菌中MIC均为8μg/ml,而转入pEASY-E1-Rv2936和pEASY-E1-Rv0783的大肠埃希菌的MIC均有不同程度的提高,分别为32μg/ml和16μg/ml。结论不同耐药突变类型导致的耐药程度不同,Rv2936和Rv0783可能是与利福平耐药相关的的药物外排泵基因。 展开更多
关键词 分枝杆菌 结核 利福平 抗药性 细菌
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基因芯片检测耐利福平结核分枝杆菌准确性的Meta分析 被引量:6
3
作者 冉兵 蔡林 《中国防痨杂志》 CAS 2015年第1期56-65,共10页
目的对基因芯片方法在检测耐利福平结核分枝杆菌的准确性进行系统评价,为基因芯片技术应用于临床检测耐药结核分枝杆菌的必要性提供证据。方法计算机检索The Cochrane Library(2014年第1期)、PubMed、EMbase、Wanfang Data、CNKI数... 目的对基因芯片方法在检测耐利福平结核分枝杆菌的准确性进行系统评价,为基因芯片技术应用于临床检测耐药结核分枝杆菌的必要性提供证据。方法计算机检索The Cochrane Library(2014年第1期)、PubMed、EMbase、Wanfang Data、CNKI数据库,检索时限均为建库至2014年2月。由2位研究者根据纳人与排除标准独立筛选文献、提取资料,采用评价诊断准确性质量研究(quality assessment of diagnostic accuracy studies,QUADAS)条目评价纳入研究论文的方法学质量,检出相关文献223篇,按照标准纳入22篇文献。采用Meta-DiSc1.4软件对其敏感度(SEN)、特异度(SPE)、阳性似然比(+LR)、阴性似然比(-LR)、诊断比值比(DOR)进行异质性检验和合并分析,绘制汇总受试者工作特征(SROC)曲线,计算曲线下面积(AUC)。结果共纳入22篇文献(包括一篇多中心研究文献),25个研究,包括4879株经传统药敏试验鉴定结核分枝杆菌菌株,其中耐RFP菌株(1314株)、敏感菌株(3565株)。基因芯片技术检测Mtb对RFP耐药的SEN△并为0.89[95%CI(0.87-0.91)]、SPF合并为0.98[95%CI(0.97-0.98)]、+LR为30.891-95%CI(22.15-43.06)]、-LR为0.10[95%CI(0.07-0.15)]、DOR合并为354.06[95%CI(212.09-591.07)]、AUC为0.9833。结论基因芯片方法具有较好的诊断价值;以传统药敏法为金标准,基因芯片方法特异度、敏感度,诊断OR值均较高,说明其在Mtb对RFP耐药检出率较高,可作为临床结核分枝杆菌耐药检测的辅助手段。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 利福平 寡核苷酸序列分析 结核 抗多种药物性 细菌蛋白质类 META分析
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西安市耐利福平结核分枝杆菌rpoB基因的突变型分析 被引量:2
4
作者 杜蓬 李峰 +1 位作者 董兆麟 陈超 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期19-23,共5页
目的西安市结核分枝杆菌临床分离株rpoB基因RRDR的基因型分析。方法采用PCR-单链构象多态性(PCR-SSCP)分析32株结核分枝杆菌耐RFP株和10株RFP敏感株的rpoB基因PCR产物,并对8株具有代表性的菌株rpoB基因片段通过DNA测序进行验证。结果 r... 目的西安市结核分枝杆菌临床分离株rpoB基因RRDR的基因型分析。方法采用PCR-单链构象多态性(PCR-SSCP)分析32株结核分枝杆菌耐RFP株和10株RFP敏感株的rpoB基因PCR产物,并对8株具有代表性的菌株rpoB基因片段通过DNA测序进行验证。结果 rpoB基因PCR-SSCP分析灵敏度为56.3%(18/32),特异性为80%(8/10)。8株结核分枝杆菌rpoB基因经测序,6株耐RFP菌株中有5株的rpoB基因突变均发生在531或526密码子上。其中有两株在526密码子均发生了双碱基突变;1株PCR-SSCP呈现阴性的耐RFP结核分枝杆菌存在513密码子突变;两株RFP敏感株出现PCR-SSCP假阳性,其rpoB基因均涉及2~3个密码子的突变,其中518密码子突变型AAC→GAC为首次报道。结论 531和526密码子除了单点突变之外,亦出现同密码子双碱基突变型;RFP敏感株多密码子突变型值得关注。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 利福平 RPOB基因 突变
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PCR荧光探针技术对结核分枝杆菌复合群及利福平耐药性检测性能的评价 被引量:4
5
作者 李静 姜琦 +1 位作者 江渊 沈鑫 《中国防痨杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期1250-1258,共9页
目的:评价PCR荧光探针技术检测痰液样本中结核分枝杆菌复合群(Mycobacterium tuberculosis complex,MTBC)和利福平耐药性效果,为进一步开展“结核分枝杆菌复合群及利福平耐药核酸检测试剂盒”多中心临床试验提供可行性研究数据。方法:... 目的:评价PCR荧光探针技术检测痰液样本中结核分枝杆菌复合群(Mycobacterium tuberculosis complex,MTBC)和利福平耐药性效果,为进一步开展“结核分枝杆菌复合群及利福平耐药核酸检测试剂盒”多中心临床试验提供可行性研究数据。方法:采用前瞻性研究方法,参照入组标准收集2021年12月至2022年8月上海市3家结核病定点医院肺科门诊就诊的205例初诊疑似肺结核患者的3份痰液样本(即时痰、夜间痰、晨痰),分别进行痰涂片、BACTEC MGIT 960(MGIT 960)、GeneXpert MTB/RIF(Xpert)和PCR荧光探针法检测,评价PCR荧光探针法对痰液样本中MTBC及利福平耐药性的检测效能。另对随机选取同期上海市疾病预防控制中心结核病实验室菌株库中保存的96株MTBC临床菌株(包括利福平表型耐药菌株47株和利福平表型敏感菌株49株)分别进行PCR荧光探针法和Xpert检测利福平耐药性,分析两种检测方法对利福平耐药相关基因突变的检出情况。结果:205例疑似肺结核患者中,PCR荧光探针法对MTBC的检出率为22.44%(46/205),与MGIT 960[21.95%(45/205)]、Xpert[20.98%(43/205)]和痰涂片[16.10%(33/205)]的差异均无统计学意义(χ^(2)=0.014,P=0.904;χ^(2)=0.129,P=0.719;χ^(2)=2.650,P=0.104)。以临床诊断为参照标准,PCR荧光探针法、Xpert、MGIT 960和痰涂片检测MTBC的敏感度(95%CI)分别为48.10%(36.93%~59.56%)、48.10%(36.93%~59.56%)、50.63%(39.23%~61.97%)和40.51%(29.79%~52.15%),特异度(95%CI)分别为93.65%(87.47%~97.12%)、96.03%(90.52%~98.53%)、96.03%(90.52%~98.53%)和99.21%(95.01%~99.96%),一致率分别为76.10%(156/205)、77.56%(159/205)、78.54%(161/205)和76.59%(157/205),Kappa值分别为0.453、0.482、0.507和0.446。PCR荧光探针法检测痰液样本中MTBC的涂阴和极低级别阳性样本的检出率[10.73%(19/177)]与Xpert检测结果[8.47%(15/177)]的差异无统计学意义(χ^(2)=0.793,P=0.373)。PCR荧光探针法在检出MTBC的46份样本中同时检出6份样本发生利福平耐药基因突变,突变率为13.04%(6/46);而Xpert在检出MTBC的43份样本中仅同时检出1份样本发生利福平耐药基因突变,突变率为2.33%(1/43)。在96株临床菌株中,两种分子检测方法均检测到56株菌株发生利福平耐药基因突变,除2株探针突变类型不一致外,其他探针突变类型均一致,且多发生在probe E(529~533)和FAM通道(531/533突变)。结论:以临床诊断为参照标准,PCR荧光探针法检测MTBC的效能与MGIT 960、Xpert和痰涂片基本相当,且与Xpert检测MTBC临床菌株的利福平耐药性效果一致,认为PCR荧光探针法不仅是一种等同于Xpert检测功能的新技术,还具有操作简单、价格低于Xpert、真正实现一体化和全封闭等优势。建议在临床推广过程中进一步优化PCR荧光探针法以提高MTBC检出率,并开展多中心临床试验验证研究。 展开更多
关键词 分枝杆菌 结核 抗药性 细菌 利福平 微生物敏感性试验 分子诊断技术
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InnowaveDX MTB/RIF对结核分枝杆菌复合群及利福平耐药检测性能的评估 被引量:1
6
作者 刘梅 吴霞 +4 位作者 古旭 李娜娜 张万敏 张小可 兰远波 《中国防痨杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期70-74,共5页
目的:评估InnowaveDX MTB/RIF(简称“InnowaveDX”)检测结核分枝杆菌复合群(Mycobacterium tuberculosis complex,MTBC)及MTB利福平耐药性的性能。方法:采用前瞻性研究方法,连续纳入2023年3月1日至6月30日遵义医科大学附属医院具有结核... 目的:评估InnowaveDX MTB/RIF(简称“InnowaveDX”)检测结核分枝杆菌复合群(Mycobacterium tuberculosis complex,MTBC)及MTB利福平耐药性的性能。方法:采用前瞻性研究方法,连续纳入2023年3月1日至6月30日遵义医科大学附属医院具有结核病相关体征/症状,或胸部X线检查结果提示疑似结核病的患者作为研究对象,共纳入104例。其中,93例诊断为结核病(包括68例经病原学阳性确诊,25例病原学阴性经临床诊断确诊),11例临床诊断为非结核病。收集研究对象的痰液、支气管肺泡灌洗液、尿液、淋巴结穿刺液、脑脊液、脓液及胸腔积液,行涂片抗酸杆菌染色镜检、培养、InnowaveDX和GeneXpert MTB/RIF(简称“Xpert”)检测,评价InnowaveDX对结核病和MTB利福平耐药性的检测效能。结果:以病原学及临床诊断结果为参照,InnowaveDX检测结核病的敏感度、特异度、一致率、Kappa值分别为92.5%(86/93)、100.0%(11/11)、93.3%(97/104)、0.72;Xpert检测结核病的敏感度、特异度、一致率、Kappa值分别为93.6%(87/93)、100.0%(11/11)、94.2%(98/104)、0.75。InnowaveDX和Xpert检测痰标本阳性率均为91.5%(65/71),差异无统计学意义(χ^(2)=0.000,P=1.000);检测其他类型标本(支气管肺泡灌洗液、尿液、淋巴结穿刺液、脑脊液、脓液及胸腔积液)阳性率分别为95.5%(21/22)和100.0%(22/22),差异无统计学意义(Fisher精确概率法,P=1.000)。以Xpert检测MTB利福平耐药性结果为参照,InnowaveDX检测MTB利福平耐药的敏感度为97.0%(32/33),特异度为92.2%(47/51),Kappa值为0.88。结论:InnowaveDX对于MTBC具有较好的检测效能,且适用于不同类型的标本,检测MTB利福平耐药性结果与Xpert一致性好。 展开更多
关键词 分枝杆菌 结核 抗药性 细菌 利福平 诊断
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结核分枝杆菌利福平耐药的分子机制及检测技术 被引量:1
7
作者 杨国元 黄福岚 杨彩虹 《畜牧兽医科技信息》 2024年第3期24-26,共3页
结核病是一种由结核分枝杆菌引起的人畜共患病,长期以来不仅给人类健康产生巨大威胁,也给养殖场(户)造成巨大的经济损失。利福平作为一个关键性药物,在结核病漫长的治疗历程中发挥了里程牌作用,但随着药物的使用,结核分支杆菌对利福平... 结核病是一种由结核分枝杆菌引起的人畜共患病,长期以来不仅给人类健康产生巨大威胁,也给养殖场(户)造成巨大的经济损失。利福平作为一个关键性药物,在结核病漫长的治疗历程中发挥了里程牌作用,但随着药物的使用,结核分支杆菌对利福平的耐药性愈发普遍,给结核病治疗带来了挑战。本文对结核分枝杆菌利福平耐药的机制及检测技术做一简单概述,以期为临床上治疗结核病制定合理用药方案提供参考。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 利福平 分子机制 药检测
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超敏结核分枝杆菌和利福平耐药基因检测技术在结核病诊断中的应用进展
8
作者 张永恒 岳菀潞 秦刚 《中国感染与化疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期469-475,共7页
1结核病现状结核病是严重危害人类健康的传染性疾病之一,是仅次于新型冠状病毒感染的第二大传染病杀手,是全球第13大死因[1]。2022年10月27日,世界卫生组织(World Health Organization,WHO)发布《2022全球结核病报告》[2](以下简称报告... 1结核病现状结核病是严重危害人类健康的传染性疾病之一,是仅次于新型冠状病毒感染的第二大传染病杀手,是全球第13大死因[1]。2022年10月27日,世界卫生组织(World Health Organization,WHO)发布《2022全球结核病报告》[2](以下简称报告)指出,2021年全球新发结核病患者约1060万人,其中儿童约120万人。受新型冠状病毒的影响,全球结核病发病率与2020年相比上升了3.6%,打破了过去20年间每年约2%的下降趋势。2019年至2021年,全球因结核病死亡人数有所增加,2021年全球共有160万人死于结核病,相当于倒退到2017年的水平。2020年至2021年全球耐药结核病负担增加了3%,2021年报告了45万例利福平耐药结核病例,需要治疗的耐药结核患者中仅有36%的人接受了治疗,并且全球耐药结核的成功治疗率只有60%。2021年全球结核病基本医疗服务支出也从2019年的60亿美元下降至54亿美元,而2022年所需的费用为130亿美元[2],资金缺口巨大。 展开更多
关键词 结核 分子生物学 超敏结核分枝杆菌利福平药基因 快速诊断
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应用基因芯片快速检测结核分枝杆菌利福平耐药基因的研究 被引量:13
9
作者 李锋 李凫坚 +1 位作者 陈园园 王静 《中国防痨杂志》 CAS 2011年第3期188-189,共2页
在全球范围内,结核分枝杆菌耐药率不断上升,高耐药和耐多药菌株不断出现和传播,对化疗疗效及结核病流行产生很大影响。利福平(RFP)作为1种主要的抗结核药物,对其耐药常常导致化疗失败。快速检测RFP耐药菌株对了解细菌耐药性有较大意... 在全球范围内,结核分枝杆菌耐药率不断上升,高耐药和耐多药菌株不断出现和传播,对化疗疗效及结核病流行产生很大影响。利福平(RFP)作为1种主要的抗结核药物,对其耐药常常导致化疗失败。快速检测RFP耐药菌株对了解细菌耐药性有较大意义。我们收集了76株临床分离RFP耐药菌株,扩增rpoB基因的核心位点,并进行自主设计DNA芯片检测,并进行DNA直接测序,了解本地区耐利福平结核分枝杆菌rpoB基因的突变特征。 展开更多
关键词 耐利福平结核分枝杆菌 药基因 快速检测 基因芯片 DNA直接测序 RPOB基因 应用 药菌株
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海南地区2020株结核分枝杆菌耐药特征分析
10
作者 吴海丰 翁敏华 +2 位作者 吴秋萍 周贵忠 李文庭 《海南医科大学学报》 北大核心 2025年第9期652-658,共7页
目的:了解近年来海南地区肺结核患者耐药特征,为海南地区结核病防控策略的制定提供新的数据支持。方法:收集2018年1月1日~2022年12月31日海南医学院第二附属医院(海南省结核病医院)痰液或肺泡灌洗液结核分枝杆菌培养阳性的菌株2020株,... 目的:了解近年来海南地区肺结核患者耐药特征,为海南地区结核病防控策略的制定提供新的数据支持。方法:收集2018年1月1日~2022年12月31日海南医学院第二附属医院(海南省结核病医院)痰液或肺泡灌洗液结核分枝杆菌培养阳性的菌株2020株,采用比例法对标本进行8种抗结核药物敏感性试验,对2020株菌株进行耐药性分析。结果:2020株结核分枝杆菌总耐药率36.2%(732/2020),单耐药率12.0%(242/2020),利福平耐药率23.2%(469/2020),耐多药率18.9%(383/2020),广泛耐药率1.3%(26/2020);8种药物单耐药率由高至低顺位为异烟肼(25.9%,524/2020)、利福平(23.2%,469/2020)、链霉素(17.2%,348/2020)、氧氟沙星(12.6%,254/2020)、乙胺丁醇(9.1%,184/2020)、卷曲霉素(2.0%,41/2020)、卡那霉素(1.9%,39/2020)、丙硫异烟胺(0.9%,19/2020);复治耐药率较初治耐药率明显升高(χ^(2)=443.460,P<0.05);732例耐药患者中,男性占比82.6%(605/732),女性占比17.4%(127/732),但男性较女性总耐药率无明显差异(χ^(2)=0.059,P>0.05);4组年龄组中以41~60岁年龄组耐药率最高,各年龄组总耐药率存在显著差异(χ^(2)=10.136,P<0.05);近年来每年耐药肺结核发病数呈上升趋势;海南省不同地区耐药肺结核病例数分布不均,沿海地区多于中部地区。结论:海南地区肺结核耐药情况依然严峻,应加强肺结核耐药检测,做好重点人群耐药筛查,严格实行肺结核规范化治疗及管理,预防耐药结核病扩散。 展开更多
关键词 海南省 结核分枝杆菌 药特征 结核
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结核分枝杆菌rpoB基因突变特征与利福平耐药水平关系的研究 被引量:22
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作者 胡族琼 刘燕文 +6 位作者 周文 高璐璐 陈俊宇 谢伟胜 周德旺 曾少芳 钟炳棠 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期39-44,50,共7页
目的了解结核分枝杆菌rpoB基因突变特征与利福平耐药水平的关系。方法测定266株(109株利福平耐药株,157株利福平敏感株)结核分枝杆菌利福平MIC值及其rpoB基因序列,分析不同突变特征的菌株其利福平MIC值的差异。结果 109株利福平耐药株r... 目的了解结核分枝杆菌rpoB基因突变特征与利福平耐药水平的关系。方法测定266株(109株利福平耐药株,157株利福平敏感株)结核分枝杆菌利福平MIC值及其rpoB基因序列,分析不同突变特征的菌株其利福平MIC值的差异。结果 109株利福平耐药株rpoB基因皆发生错义突变,常见突变密码子531与526的突变频率分别为69.7%与17.4%。利福平耐药株中单密码子突变株占82.6%,多重密码子突变株占17.4%。531单密码子突变株与526单密码子突变株之间平均利福平MIC值差异无统计学意义(P=0.87),但两独立样本T检验分析显示,多重密码子突变株平均利福平MIC值(115.8μg/mL)显著高于单密码子突变株平均利福平MIC值(48.4μg/mL)(t=2.659,P=0.016)。利福平敏感株未发生错义突变。5.5%(6/109)的利福平耐药株仅在rpoB基因起始端发生突变,突变密码子分别是247,251和253。结论 531与526是最常见突变密码子,且以单密码子突变为主;531与526单密码子突变株之间利福平耐药水平差异无统计学意义,但多重密码子突变株利福平耐药水平显著高于单密码子突变株利福平耐药水平;rpoB基因起始端突变可能是除利福平耐药决定区域之外导致利福平耐药的第2个耐药决定区;rpoB基因DNA序列分析有助于结核分枝杆菌利福平耐药表型和耐药水平的预测。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 rpoB突变 利福平 药水平 最低抑菌浓度
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基因芯片技术检测结核分枝杆菌利福平和异烟肼耐药性临床应用评价 被引量:38
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作者 许榕青 李丹 +2 位作者 林银霞 黄明翔 陈新朝 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期43-48,共6页
目的评价基因芯片技术检测结核分枝杆菌利福平和异烟肼耐药性的临床应用效果。方法利用基因芯片技术对涂阳肺结核患者的痰标本和临床分离株进行利福平和异烟肼耐药基因位点检测,比较痰标本与菌株检测结果的差异;并以BACTEC MGIT 960药... 目的评价基因芯片技术检测结核分枝杆菌利福平和异烟肼耐药性的临床应用效果。方法利用基因芯片技术对涂阳肺结核患者的痰标本和临床分离株进行利福平和异烟肼耐药基因位点检测,比较痰标本与菌株检测结果的差异;并以BACTEC MGIT 960药敏试验结果为对照评价基因芯片的检测性能。另外,通过对999株鉴定为结核分枝杆菌的临床分离菌株进行rpoB、katG和inhA基因耐药相关区域扩增产物测序,以验证基因芯片对核酸序列检测的准确性。结果在涂阳的1 108例标本中有100例经基因芯片菌种鉴定为非结核分枝杆菌。其余的1 008例痰标本基因芯片结果与BACTEC MGIT960培养阳性的菌株基因芯片结果比较仅有9例结果不一致,符合率为99.1%。以BACTEC MGIT960培养法药敏结果为对照,999株菌株基因芯片法检测利福平耐药性的符合率为98.1%,异烟肼的耐药性的符合率为94.5%。与DNA测序法相比,基因芯片法检测利福平和异烟肼耐药性的准确率分别为99.6%和99.8%。结论基因芯片技术能够快速、准确地进行结核分枝杆菌利福平和异烟肼的耐药性检测,并能直接用于痰标本检测。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 利福平 异烟肼 药性 基因芯片
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结核分枝杆菌rpoB基因突变与多重耐药及利福平耐药程度的相关性 被引量:9
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作者 庞茂银 张文宏 +2 位作者 陈澍 胡忠义 翁心华 《复旦学报(医学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第3期228-230,238,共4页
目的 研究结核分枝杆菌rpoB基因突变与多重耐药及利福平耐药程度强弱之间的关系。 方法 应用绝对浓度法测定 5 8株结核分枝杆菌对 4种一线抗结核药物的药敏特性 ,对耐利福平结核分枝杆菌的耐药谱进行分析。同时对含有核心突变区的结... 目的 研究结核分枝杆菌rpoB基因突变与多重耐药及利福平耐药程度强弱之间的关系。 方法 应用绝对浓度法测定 5 8株结核分枝杆菌对 4种一线抗结核药物的药敏特性 ,对耐利福平结核分枝杆菌的耐药谱进行分析。同时对含有核心突变区的结核分枝杆菌rpoB基因片段进行PCR扩增和DNA测序 ,分析rpoB基因突变与多重耐药的关系 ,以及突变位点和突变性质与利福平耐药强弱的相关性。结果  5 8株结核分枝杆菌中 ,利福平耐药株 36株 ,敏感株 2 2株。 36株耐药株均存在rpoB基因突变 ,其中 88.9% (32 / 36 )至少对利福平和异烟肼同时耐药。 90 .0 %的利福平高度耐药株 (18/ 2 0 )与rpoB基因 5 31位和 5 2 6位密码子突变相关。密码子 5 31位和 5 2 6位各有 1株双碱基突变 ,且均为多重耐药株。结论 结核分枝杆菌rpoB基因突变所致的利福平耐药株大部分对异烟肼耐药 ,因此单独检测rpoB基因突变即可初步筛选多重耐药的结核分枝杆菌 ; 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 RPOB基因 突变 多重 利福平 药程度 相关性
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微孔板Alamar Blue显色法检测结核分枝杆菌临床分离株利福平和异烟肼耐药性研究 被引量:14
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作者 李桂莲 张敬蕊 +3 位作者 赵秀芹 杨骜 连璐璐 万康林 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期319-322,326,共5页
目的评价微孔板Alamar Blue显色法检测结核分枝杆菌临床分离株利福平和异烟肼耐药性的可行性。方法用微孔板Alamar Blue显色法对41株和70株结核分枝杆菌临床分离株分别检测利福平和异烟肼的最小抑菌浓度,记录获得结果时间,利用ROC曲线... 目的评价微孔板Alamar Blue显色法检测结核分枝杆菌临床分离株利福平和异烟肼耐药性的可行性。方法用微孔板Alamar Blue显色法对41株和70株结核分枝杆菌临床分离株分别检测利福平和异烟肼的最小抑菌浓度,记录获得结果时间,利用ROC曲线确定利福平和异烟肼的最佳耐药阈值,并和传统的药物敏感性实验罗氏比例法进行比较。结果微孔板Alamar Blue显色法获得结果平均时间为8d,利福平和异烟肼的最佳耐药阈值均为0.5μg/mL,以罗氏比例法为金标准,利福平的灵敏度和特异度均为100.0%,异烟肼的灵敏度和特异度分别为96.6%和100.0%。结论微孔板Alamar Blue显色法是一种简便、敏感、快速的药物敏感性检测方法,可用于结核分枝杆菌临床分离株利福平和异烟肼耐药性的快速检测。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 利福平 异烟肼 药性 Alamar Blue显色法
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利福平耐药实时荧光定量核酸扩增技术检测痰标本中结核分枝杆菌及其耐药性的研究 被引量:97
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作者 张治国 欧喜超 +3 位作者 孙倩 杜春英 高铁杰 赵雁林 《中国防痨杂志》 CAS 2013年第1期13-16,共4页
目的评估利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术(Xpert Mtb/RIF)对结核病及利福平耐药性的检测效能。方法选取588例初诊患者痰标本,分别进行涂片镜检、固体培养、传统比例法药敏试验和XpertMtb/RIF检测,分析Xpert Mtb/RIF方法检测痰... 目的评估利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术(Xpert Mtb/RIF)对结核病及利福平耐药性的检测效能。方法选取588例初诊患者痰标本,分别进行涂片镜检、固体培养、传统比例法药敏试验和XpertMtb/RIF检测,分析Xpert Mtb/RIF方法检测痰标本中Mtb及其耐药性的敏感度和特异度。结果以固体培养试验结果作为金标准,Xpert Mtb/RIF方法检测痰标本Mtb的敏感度和特异度为95.0%(345/363)和89.6%(147/164),以传统比例法药敏试验结果为金标准,Xpert Mtb/RIF方法检测利福平耐药的敏感度和特异度分别为89.1%(41/46)和96.3%(289/300)。结论Xpert Mtb/RIF检测敏感度和特异度较高,在Mtb及其利福平耐药快速检测方面具有比较好的应用前景。 展开更多
关键词 分枝杆菌 结核 利福平 抗药性 细菌 核酸扩增技术 敏感性与特异性
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河南省耐多药结核分枝杆菌利福平耐药基因rpoB的突变特征 被引量:10
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作者 赵玉玲 杨洪毅 +3 位作者 马晓光 石洁 李辉 赵东阳 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2012年第2期166-169,共4页
目的:分析河南省耐多药(MDR)结核分枝杆菌利福平耐药相关基因rpoB的突变特征。方法:收集150株MDR结核分枝杆菌,应用PCR扩增利福平耐药相关基因rpoB编码区全长并测序,以结核分枝杆菌H37Rv标准株DNA序列为参比序列,分析菌株的突变特征。结... 目的:分析河南省耐多药(MDR)结核分枝杆菌利福平耐药相关基因rpoB的突变特征。方法:收集150株MDR结核分枝杆菌,应用PCR扩增利福平耐药相关基因rpoB编码区全长并测序,以结核分枝杆菌H37Rv标准株DNA序列为参比序列,分析菌株的突变特征。结果:MDR菌株rpoB基因编码区存在突变者占97.2%(140/144),突变在利福平耐药决定区(RRDR)内者占96.5%(139/144),RRDR内和RRDR外同时存在突变者占99.3%(139/140);突变热点依次为rpoB531、rpoB526和rpoB516。发现未被记录的15个突变位点和4个突变类型,其中rpoB1284位点突变可能是多态性位点,与利福平耐药无关。结论:检测河南地区结核分枝杆菌rpoB基因RRDR内位点的突变可预测MDR结核分枝杆菌的耐药性。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 多药 利福平 RPOB 突变
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结核分枝杆菌及利福平耐药核酸扩增检测成本分析 被引量:21
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作者 欧喜超 夏辉 +7 位作者 李强 逄宇 赵冰 张治英 李俊晨 章建康 池俊英 赵雁林 《中国防痨杂志》 CAS 2013年第9期723-728,共6页
目的比较固体培养、比例法药敏和结核分枝杆菌及利福平耐药核酸扩增(XpertMtb/RIF)(简称“Xpert”)检测在中国基层实验室应用的检测成本。方法选取4个县(区)级结核病防治机构收集3次固体培养和Xpert检测成本数据,2个省参比实验... 目的比较固体培养、比例法药敏和结核分枝杆菌及利福平耐药核酸扩增(XpertMtb/RIF)(简称“Xpert”)检测在中国基层实验室应用的检测成本。方法选取4个县(区)级结核病防治机构收集3次固体培养和Xpert检测成本数据,2个省参比实验室收集3次对硝基苯甲酸(PNB)菌群鉴定和比例法利福平药敏试验成本数据。采用要素法计算每种方法单位检测成本,计算每例患者不同检测方法的检测成本。在不同结核病患病率人群中,以固体培养试验为金标准,比较Xpert检测在不同检测效能下检出1例结核病患者的成本。在不同利福平耐药率的可疑人群中,以传统药敏试验为金标准,比较Xpert检测在不同检测效能下检出1例利福平耐药结核病患者的成本。调整Xpert检测设备和试剂价格后,分析Xpert检测的单位成本。结果固体培养、菌群鉴定、利福平药敏试验和Xpert检测的单位检测成本分别为47.87、46.73、82.86和118.62元。传统方法检测每例结核病患者所需成本(2份培养,1份传代,1份PNB鉴定试验)为172.57元。传统方法检测每例耐药结核病患者的平均成本(2份固体培养,1份传代,1份PNB鉴定及药敏试验)为208.84元。当Xpert检测结核病或利福平耐药特异度为85%时,如果检测敏感度大于70%,在结核病患病率或利福平耐药结核病患病率1%~70%的任何人群中,Xpert检出1例结核病或利福平耐药结核病患者的成本均低于传统方法。试剂价格变化对于检测成本的影响远远大于设备价格变化的影响。结论Xpert检测是一种比传统方法更经济并快速的检测方法,适合在中国基层实验室推广。 展开更多
关键词 分枝杆菌 结核 利福平 抗药性 细菌 核酸扩增技术 成本及成本分析
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MTBDR plus方法快速检测北京地区临床结核分枝杆菌分离株利福平和异烟肼耐药性效果评价 被引量:26
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作者 菅记涌 王嫩寒 +4 位作者 易俊莉 邢青 刘晓雪 王甦民 洪峰 《中国防痨杂志》 CAS 2010年第10期611-614,共4页
目的评估MTBDR plus试剂盒在北京地区快速检测利福平和异烟肼的耐药性的效果。方法筛选169例临床结核分枝杆菌分离株,以国际标准的比例法作为对照,探讨该试剂盒在临床上应用的敏感性和特异性以及突变分布频率。结果在北京地区使用MTBDR ... 目的评估MTBDR plus试剂盒在北京地区快速检测利福平和异烟肼的耐药性的效果。方法筛选169例临床结核分枝杆菌分离株,以国际标准的比例法作为对照,探讨该试剂盒在临床上应用的敏感性和特异性以及突变分布频率。结果在北京地区使用MTBDR plus检测利福平和异烟肼的敏感性和特异性分别为96.9%、85.3%和93.2%、98.1%。rpoB基因频率最高的突变位点是S531L(55.2%),其次是D516V(8.3%)、H526Y(7.3%)和H526D(3.1%)。katG基因频率最高的突变位点是S315T1(62.9%),而inhA是C15T位点(21.6%)。结论 MTBDR plus是一个敏感、特异和快速的诊断利福平、异烟肼耐药性和MDR的有效方法。 展开更多
关键词 分枝杆菌 结核 抗药性 细菌 微生物敏感性试验 利福平 异烟肼
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Xpert结核分枝杆菌/利福平试验对结核病及耐多药结核病诊断价值的Meta分析 被引量:18
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作者 尹青琴 焦伟伟 +8 位作者 孙琳 肖婧 吴喜蓉 刘芳 苗青 徐放 韩锐 田建岭 申阿东 《中国循证儿科杂志》 CSCD 2012年第5期341-348,共8页
目的评估Xpert结核分枝杆菌/利福平(MTB/RIF)试验对结核病的诊断价值。方法检索PubMed、Medline、中国知网、万方数据库等,收集Xpert MTB/RIF试验对结核病诊断价值的文献,检索起止时间均为建库至2012年6月。2名研究者独立进行资料提取... 目的评估Xpert结核分枝杆菌/利福平(MTB/RIF)试验对结核病的诊断价值。方法检索PubMed、Medline、中国知网、万方数据库等,收集Xpert MTB/RIF试验对结核病诊断价值的文献,检索起止时间均为建库至2012年6月。2名研究者独立进行资料提取和文献质量评估。采用Meta-Disc1.4软件进行Meta分析。结果共纳入26篇文献,其中2篇文献涉及儿童病例,包含了13270例来自临床患者的检测标本。Meta分析结果显示,Xpert MTB/RIF试验诊断结核病的汇总敏感度为87%(95%CI:86%~88%)、特异度为97%(95%CI:97%~97%)。按照结核病的类型和患者年龄进行亚组分析,Xpert MTB/RIF试验诊断肺结核的敏感度高于肺外结核病,90%(95%CI:89%~91%)vs76%(95%CI:72%~79%);诊断涂阴菌阳性和涂阳菌阳性结核病的敏感度分别为74%(95%CI:71%~76%)和99%(95%CI:98%~99%);对儿童肺结核的诊断敏感度比成人肺结核低,74%(95%CI:65%~83%)vs90%(95%CI:89%~92%)。Xpert MTB/RIF试验诊断耐多药结核病的敏感度为96%(95%CI:94%~97%),特异度为98%(95%CI:98%~99%)。结论 Xpert MTB/RIF试验诊断结核病的价值较高,尤其是成人结核病及耐多药结核病。Xpert MTB/RIF试验在儿童结核病中的诊断价值由于纳入文献较少,尚待进一步研究。 展开更多
关键词 Xpert结核分枝杆菌/利福平试验 结核 诊断价值 META分析
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某院结核分枝杆菌利福平和异烟肼耐药基因特征 被引量:11
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作者 刘厚明 陈珊 +1 位作者 黄莎莎 单万水 《中国感染控制杂志》 CAS 北大核心 2018年第6期490-495,共6页
目的了解某院结核分枝杆菌(MTB)利福平耐药相关基因rpo B及异烟肼耐药相关基因kat G、inh A的突变特征,为耐药结核病的预防和治疗提供科学依据。方法收集83例结核病患者痰标本,分离培养MTB,采用BD960液体法检测利福平、异烟肼耐药性,提... 目的了解某院结核分枝杆菌(MTB)利福平耐药相关基因rpo B及异烟肼耐药相关基因kat G、inh A的突变特征,为耐药结核病的预防和治疗提供科学依据。方法收集83例结核病患者痰标本,分离培养MTB,采用BD960液体法检测利福平、异烟肼耐药性,提取菌株DNA,采用聚合酶链反应扩增rpo B、kat G、inh A全基因,对扩增产物进行测序分析。结果 83株样本中,39株对利福平耐药,51株对异烟肼耐药。耐利福平菌株rpo B基因突变率为97.44%(38/39),531位点突变率60.53%(23/38),526位点突变率23.68%(9/38),32株出现多位点联合突变。耐异烟肼菌株kat G基因突变率为98.04%(50/51),共发现16种突变类型,其中以kat G 315位点突变为主,占70.00%(35/50),1株为kat G与inh A联合突变。结论该院耐多药MTB产生耐药性与rpo B和kat G基因突变相关,检测MTB耐多药相关基因突变可为早期快速诊断耐药结核病提供参考依据。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 利福平 异烟肼 多药 基因突变
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