人8-羟基鸟嘌呤糖苷酶1与年龄相关性白内障关系的临床研究 被引量：2

1

作者 李晨 管怀进 《临床眼科杂志》 2014年第6期481-485,共5页

目的探讨与年龄相关性白内障(ARC)患者晶状体上皮细胞(LECs)中参与DNA损伤后碱基清除修复途径的氧化损伤修复基因—人8-羟基鸟嘌呤糖苷酶1(HOGG1)水平与ARC的关系。方法收集三种ARC(皮质性、核性、后囊下性)LECs样本,以透明晶状体LECs... 目的探讨与年龄相关性白内障(ARC)患者晶状体上皮细胞(LECs)中参与DNA损伤后碱基清除修复途径的氧化损伤修复基因—人8-羟基鸟嘌呤糖苷酶1(HOGG1)水平与ARC的关系。方法收集三种ARC(皮质性、核性、后囊下性)LECs样本,以透明晶状体LECs为对照组,用免疫组化、RT-PCR方法测定HOGG1在LECs的表达情况。结果对照组LECs中可见HOGG1的表达,三种ARC患者LECs中可见HOGG1表达较对照组增高(F=107.62,P<0.01),但三种ARC之间没有统计学差异。对照组与ARC组HOGG1均位于细胞质和细胞核。说明ARC LECs的细胞核和细胞质中HOGG1的表达量上调。结论 HOGG1表达上调参与ARC的发生发展。 展开更多

关键词 年龄相关性白内障 8-羟基鸟嘌呤糖苷酶1 晶状体上皮细胞

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气相色谱/氢火焰检测器检测HL-60细胞DNA中氧化损伤产物8-羟基鸟嘌呤的研究 被引量：3

2

作者 张海涛 祝其锋 +2 位作者 莫丽儿 庄海旗 蔡春 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 1999年第3期262-263,共2页

用0．4mmol／LH2O2处理HL－60细胞株24h，采用气相色谱／氢火焰检测器（GC／FID）检测DNA氧化损伤产物8-羟基鸟嘌呤，并用气相色谱质谱仪选择性离子检测（CGC／MS－SIM）对其进一步鉴定。所用方法的平均回收率为81．7％，RSD小于5％。

关键词 dna损伤 氧化损伤 HL-60细胞 羟基鸟嘌呤

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羟基自由基和鸟嘌呤-胞嘧啶碱基对反应的密度泛函理论研究（英文） 被引量：2

3

作者 李敏杰 刁玲 +2 位作者 寇莉 李重杲 陆文聪 《物理化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2015年第6期1007-1014,共8页

为了解决年龄衰老、基因突变和癌症等问题,理解DNA的氧化损伤机理非常重要.本文利用密度泛函方法和极化连续介质模型在液相条件下研究了羟基自由基夺取鸟嘌呤-胞嘧啶(GC)碱基对上5个氢原子的反应机理.研究结果表明,所有的脱氢反应路径... 为了解决年龄衰老、基因突变和癌症等问题,理解DNA的氧化损伤机理非常重要.本文利用密度泛函方法和极化连续介质模型在液相条件下研究了羟基自由基夺取鸟嘌呤-胞嘧啶(GC)碱基对上5个氢原子的反应机理.研究结果表明,所有的脱氢反应路径都是放热过程,热力学上五个脱氢反应路径形成自由基的稳定性顺序是(H2b-GC)·>(GC-H4b)·>(GC-H6)·>(GC-H5)·^(H8-GC)·,其中H2b反应路径的能量变化最大,说明该反应平衡时的转化率最高.动力学上,相对于反应复合物的局部反应能垒大小顺序是H2b<H4b<H5<H6<H8,可以看出在H2b夺取路径中能垒最小,表明了该反应能在室温下迅速完成,和实验结果一致.综合考虑热力学和动力学方面的分析,发现H2b夺取反应最容易进行,次之是H4b夺取反应,然后是H6和H5.而H8的夺取反应很难发生,和实验观察到的8位加成产物现象一致. 展开更多

关键词 dna氧化损伤 羟基自由基 鸟嘌呤-胞嘧啶碱基对 反应机理 密度泛函理论

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氡吸入染毒对大鼠肺组织的DNA氧化损伤效应 被引量：3

4

作者 聂继华 武彦文 +3 位作者 陈志海 吴昭昭 杜厚兵 童建 《辐射研究与辐射工艺学报》 CAS CSCD 2011年第3期169-173,共5页

研究吸入放射性气体氡及其子体对大鼠肺组织的DNA损伤效应。采用雄性Wistar大鼠16只,随机分为4组,每组4只。动物整体暴露于多功能生态氡室,吸入氡及其子体的累积剂量分别达到64、121和236工作水平月(Working level month,WLM)。激光共... 研究吸入放射性气体氡及其子体对大鼠肺组织的DNA损伤效应。采用雄性Wistar大鼠16只,随机分为4组,每组4只。动物整体暴露于多功能生态氡室,吸入氡及其子体的累积剂量分别达到64、121和236工作水平月(Working level month,WLM)。激光共聚焦检测肺泡灌洗液(BALF)细胞内活性氧(Reactive oxygenspecies,ROS)水平,ELISA法检测肺组织8-羟基脱氧鸟苷(8-hydroxydeoxyguanosine,8-OHdG)含量、RT-PCR检测肺组织8羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶1型(8-oxoguanine DNA-glycosylase type 1,OGG1)mRNA和8-羟基脱氧三磷酸鸟嘌呤核苷酶(Nucleoside diphosphate linked moiety X-type motif 1,MTH1)mRNA相对表达水平。氡吸入染毒后肺组织8-OHdG含量显著升高,BALF细胞ROS增加,OGG1和MTH1表达呈下降趋势。氡及其子体吸入可导致肺组织细胞的DNA氧化损伤,主要表现为8-OHdG含量的增加和修复酶活性的降低。 展开更多

关键词 氡及其子体 活性氧 8-羟基脱氧鸟苷 8羟基鸟嘌呤dna糖苷酶1型 8-羟基脱氧三磷酸鸟嘌呤 核苷酶

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DNA氧化损伤产物及其检测方法 被引量：13

5

作者 蔡凌霜 曾昭睿 吴采樱 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期88-93,共6页

介绍了DNA氧化损伤对生物体的影响 ,主要的DNA氧化损伤产物8_羟基鸟嘌呤和5_羟基胞嘧啶的形成及其检测方法 ,并对目前DNA氧化损伤产物研究存在的问题进行了讨论。

关键词 氧自由基 dna 氧化 损伤 8-羟基鸟嘌呤 5-羟基胞嘧啶 检测 癌症 临床诊断

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辐射诱发细胞内活性氧增高与DNA氧化损伤研究 被引量：14

6

作者 朱茂祥 杨陟华 +2 位作者 龚诒芬 陆颖 曹珍山 《辐射研究与辐射工艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期270-274,共5页

用60 Coγ射线照射人支气管上皮细胞 (BEP2D)。细胞内过氧化氢 (H2 O2 )和超氧阴离子(O2 · - )分别用分子探针 2’ ,7’ -二氯荧光黄双乙酸盐 (DCFH -DA)和氢化乙锭 (HE)进行标记 ,并通过流式细胞仪测定荧光产物 2’ ,7’ -二氯荧... 用60 Coγ射线照射人支气管上皮细胞 (BEP2D)。细胞内过氧化氢 (H2 O2 )和超氧阴离子(O2 · - )分别用分子探针 2’ ,7’ -二氯荧光黄双乙酸盐 (DCFH -DA)和氢化乙锭 (HE)进行标记 ,并通过流式细胞仪测定荧光产物 2’ ,7’ -二氯荧光黄 (DCF)和溴乙锭 (EB)荧光强度进行相对定量分析。DNA氧化损伤产物 8-羟基脱氧鸟嘌呤 (OH8dG)含量用高压液相色谱结合电化学方法 (HPLC-ECD)测定。结果表明 ,60Coγ射线诱发BEP2D细胞内活性氧 (ROS)水平和OH8dG含量均显著增高 ,并有良好的剂量效应关系。进一步分析显示 ,60 Coγ射线照射诱发BEP2D细胞内ROS增高与DNA氧化损伤产物OH8dG含量呈明显正相关 。 展开更多

关键词 ^60COΓ射线照射 人支气管上皮细胞 活性氧 dna氧化损伤 8-羟基脱氧鸟嘌呤 肿瘤 病因学

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原发性肝癌患者DNA损伤修复酶基因多态性分析 被引量：3

7

作者 唐耘天 李辛平 +3 位作者 刘天奇 杨建荣 罗建强 梁中骁 《山东医药》 CAS 北大核心 2011年第42期19-20,共2页

目的探讨DNA损伤修复酶基因多态性与原发性肝癌发生发展的关系。方法 PCR-RFLP法检测150例肝癌患者(肝癌组)和150例健康体检者(对照组)DNA损伤修复酶基因的表型,并进行比较。结果肝癌组XRCC1 Arg399Gln位点野生型的比率明显低于对照组(P... 目的探讨DNA损伤修复酶基因多态性与原发性肝癌发生发展的关系。方法 PCR-RFLP法检测150例肝癌患者(肝癌组)和150例健康体检者(对照组)DNA损伤修复酶基因的表型,并进行比较。结果肝癌组XRCC1 Arg399Gln位点野生型的比率明显低于对照组(P<0.05);XRCC1(Arg194Trp、Arg280His)、hOGG1Ser326Cys位点多态性型别在两组中出现的频率相近(P>0.05);各基因位点不同表型者的尿8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)水平相比,P均>0.05。结论 DNA修复酶基因多态性与肝癌的发生发展无明确的相关关系。 展开更多

关键词 肝肿瘤 dna修复基因 基因多态性 dna氧化损伤 8-羟基脱氧鸟苷 X线修复交叉互补组1基因 人8-羟基鸟嘌呤修复酶基因

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DNA修复基因OGG1融合蛋白表达及多克隆抗体的制备

8

作者 武彦宁 绳波 +2 位作者 刘宁 计云霞 陈德喜 《生物医学工程与临床》 CAS 2011年第4期377-379,共3页

目的表达及纯化8羟基脱氧鸟苷DNA糖苷酶-1（OGG1）融合蛋白制备多克隆抗体。方法在大肠杆菌BL21中诱导表达OGG1融合蛋白，应用Ni—NTA亲和树脂进行纯化。纯化后的OGG1融合蛋白多次免疫大耳白兔．应用Westernblotting的方法检测抗体活性... 目的表达及纯化8羟基脱氧鸟苷DNA糖苷酶-1（OGG1）融合蛋白制备多克隆抗体。方法在大肠杆菌BL21中诱导表达OGG1融合蛋白，应用Ni—NTA亲和树脂进行纯化。纯化后的OGG1融合蛋白多次免疫大耳白兔．应用Westernblotting的方法检测抗体活性，间接酶联免疫吸附分析（ELISA）法检测抗体效价。结果通过大肠杆菌转染和表达。成功获得了纯化的OGG1融合蛋白。3次加强免疫后，间接ELISA法检测血清效价达到1：100000；Western blotting显示，OGG1多克隆抗体能够与OGG1融合蛋白特异结合。结论成功制备了高效价的OGG1多克隆抗体。 展开更多

关键词 8-羟基脱氧鸟苷dna糖苷酶-1 融合蛋白 多克隆抗体

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香烟烟雾提取物致大鼠膈肌细胞氧化损伤 被引量：1

9

作者 杨士芳 高兴林 吴健 《中华老年多器官疾病杂志》 2013年第10期774-777,共4页

目的研究经香烟烟雾提取物（CSE）刺激后大鼠膈肌细胞8一羟基脱氧鸟苷（8-OHdG）含量的变化以及细胞内活性氧（ROS）水平和8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶1（OGGl）表达对8．OHdG含量变化的影响。方法用不同浓度CSE分别刺激大鼠膈肌细胞24、48和... 目的研究经香烟烟雾提取物（CSE）刺激后大鼠膈肌细胞8一羟基脱氧鸟苷（8-OHdG）含量的变化以及细胞内活性氧（ROS）水平和8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶1（OGGl）表达对8．OHdG含量变化的影响。方法用不同浓度CSE分别刺激大鼠膈肌细胞24、48和72h后，采用高效液相色谱．电化学法（HPLC—ECD）检测大鼠膈肌细胞8．OHdG的含量，流式细胞术检测大鼠膈肌细胞ROS水平，采用实时定量PCR检~IJOGG!mRNA水平，用Western印迹法检测OGGl蛋白水平。结果经相同CSE浓度分别刺激大鼠膈肌细胞24、48和72h后，大鼠膈肌细胞中8-OHdG含量、ROS水平及OGGlmRNA和蛋白水平均无明显差异。但经不同浓度CSE刺激相同时间后，10．00％CSE和20．00％CSE刺激组大鼠膈肌细胞8-OHdG含量明显高于对照组和5．00％CSE刺激组（P〈0．05）；大鼠膈肌细胞内ROS水平、OGGlmRNA和蛋白水平较对照组均明显升高（P〈0．05）；大鼠膈肌细胞8-OHdG含量与其ROS水平呈明显正相关（r=0．826，P：0．000）；经CSE刺激后，大鼠膈肌细胞OGGlmRNA和蛋白水平均高于对照组（P〈O．05），但大鼠膈肌细胞8．OHdG含量与其OGGlmRNA和蛋白水平无明显相关（r=0．373，P=0．254；r=0．329，P=0．296）。结论CSE刺激可引起大鼠膈肌细胞8-OHdG升高，8-OHdG含量与ROS水平有关，但与其修复酶OGGl表达水平无明显相关。 展开更多

关键词 肺疾病 慢性阻塞性 膈肌细胞 8-羟基脱氧鸟苷 8-羟基鸟嘌呤dna糖苷酶1

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碱基切除修复基因OGG1对紫外线诱导晶状体上皮细胞损伤的保护作用 被引量：2

10

作者 李鹏飞 罗家伟 +5 位作者 康丽华 张国伟 茅馨木 吴安然 张文怡 管怀进 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2022年第4期267-272,共6页

目的探讨碱基切除修复基因8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶1(OGG1)对紫外线(UVB)诱导晶状体上皮细胞损伤(LEC)的保护作用。方法通过UVB照射人LEC(SRA01/04细胞株)诱导细胞氧化损伤模型,利用siRNA敲降技术针对靶基因OGG1设计3个siRNA(分别为siOGG... 目的探讨碱基切除修复基因8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶1(OGG1)对紫外线(UVB)诱导晶状体上皮细胞损伤(LEC)的保护作用。方法通过UVB照射人LEC(SRA01/04细胞株)诱导细胞氧化损伤模型,利用siRNA敲降技术针对靶基因OGG1设计3个siRNA(分别为siOGG1#1、siOGG1#2和siOGG1#3)。同时,为了验证出敲降效率最高的siOGG1,依据转染情况将细胞分为siOGG1#1组、siOGG1#2组、siOGG1#3组、siNC组和空白对照组(不转染)。后续为了验证OGG1的表达下调对氧化损伤环境下细胞的作用,将细胞分为空白对照组、UVB组、UVB+siNC组和UVB+siOGG1#2组,观察各组细胞凋亡相关蛋白的表达变化。采用实时荧光定量-PCR检测各组细胞目的基因mRNA的表达,免疫印迹实验检测各组细胞相关蛋白的表达。免疫荧光法检测UVB+siNC组和UVB+siOGG1#2组中受损DNA的标记物15A3的荧光强度变化。采用免疫荧光法检测细胞DNA氧化损伤情况,CCK8实验检测细胞活力。结果实时荧光定量-PCR检测结果显示UVB照射时间为10 min时,OGG1的相对表达量最高;免疫印迹实验检测结果显示随着UVB照射时间的延长,细胞内OGG1蛋白相对表达量呈时间依赖性下降。因此,细胞氧化损伤模型采用UVB照射10 min处理细胞。实时荧光定量-PCR检测结果显示与siNC组相比,靶向设计的转染siOGG1组的三个亚组中细胞OGG1 mRNA相对表达量均显著降低(均为P<0.001),siOGG1#2组降低最为明显。免疫荧光染色结果显示与UVB+siNC组相比,UVB+siOGG1#2组15A3(染色反应底物是8-oxoG,它是OGG1的修复作用靶点)染色阳性细胞明显增多。CCK8实验结果显示与UVB+siNC组和空白对照组相比,UVB+siOGG1#2组细胞活力均明显降低,差异均有统计学意义(均为P<0.01)。免疫印迹实验检测结果显示与UVB+siNC组相比,转染后UVB+siOGG1#2组细胞促进凋亡的蛋白BAX表达明显增加,而抑制凋亡的蛋白BCL-2表达则明显下降(均为P<0.001)。结论OGG1基因在UVB诱导的LEC氧化损伤模型中通过BER通路参与受损DNA的修复过程,调控LEC内受损DNA的修复和细胞凋亡过程。 展开更多

关键词 年龄相关性白内障 氧化损伤 紫外线 碱基切除修复基因 8-羟基鸟嘌呤dna糖苷酶1

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豫北地区人群hOGG1基因型与食管癌易感性的相关研究 被引量：2

11

作者 胡红军 吴静 +2 位作者 靳钰 张立国 高国伟 《山东医药》 CAS 北大核心 2010年第32期49-50,共2页

目的研究食管癌高发区豫北地区人群8-羟基鸟嘌呤糖苷酶1（hOGG1）基因Ser326Cys多态性及其与食管癌易感性的关系,以便有效地开展该地区食管癌的检测和预防工作。方法运用PCR-限制片段多态（RFLP）技术,分析了228例正常对照和235例食管... 目的研究食管癌高发区豫北地区人群8-羟基鸟嘌呤糖苷酶1（hOGG1）基因Ser326Cys多态性及其与食管癌易感性的关系,以便有效地开展该地区食管癌的检测和预防工作。方法运用PCR-限制片段多态（RFLP）技术,分析了228例正常对照和235例食管癌患者hOGG1基因第326位点Ser/Cys多态性。并比较不同基因型与食管癌发病风险的关系。结果食管癌组和对照组人群中的Cys等位基因频率分别占42.7%和38.6%,无显著性差异,而食管癌组的Cys/Cys基因型频率为23.0%,明显高于对照组的12.3%（2χ=11.67,P=0.003）;与携带Ser/Ser或Ser/Cys基因型者比较,携带Cys/Cys基因型个体患食管癌的风险增加,OR为2.13（95%CI 1.29~3.51）。结论食管癌的发生与hOGG1基因多态性密切相关,检测hOGG1基因型有助于食管癌的预警和预防。 展开更多

关键词 8-羟基鸟嘌呤糖苷酶1 食管肿瘤 单核苷酸多态 遗传易感性

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