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猪种、牛种、羊种、绵羊种布鲁菌多重PCR检测方法的建立及应用 被引量:4
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作者 何亚鹏 许信刚 +1 位作者 付明哲 张琪 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期1135-1140,共6页
为建立在临床样本能够同时检测猪种、牛种、羊种、绵羊种布鲁菌的多重PCR方法,根据NCBI已收录的布鲁菌全基因,设计并合成4对特异性引物,通过优化多重PCR的反应条件,建立能够同时检测4种布鲁菌的多重PCR诊断方法。特异性试验结果表明,可... 为建立在临床样本能够同时检测猪种、牛种、羊种、绵羊种布鲁菌的多重PCR方法,根据NCBI已收录的布鲁菌全基因,设计并合成4对特异性引物,通过优化多重PCR的反应条件,建立能够同时检测4种布鲁菌的多重PCR诊断方法。特异性试验结果表明,可以从4种布鲁菌以及4种细菌混合物中扩增出大小分别为276、494、733和976bp的特异性条带,对照组的检测结果为阴性;敏感性试验结果表明,对4种病原菌基因组DNA的检出量为猪种32.2pg、牛种21.3pg、羊种27.5pg、绵羊种43.2pg;人工模拟感染样本检测结果表明,能从混合感染的病料中特异地检测出4种病原菌。应用该方法对200份临床奶山羊乳样进行检测,结果检出4份阳性。建立的多重PCR方法具有特异性强、敏感度高、稳定性好的特点,可以有效地检测4种布鲁菌的感染。 展开更多
关键词 猪种布 牛种布 羊种布鲁菌 羊种布鲁菌 多重PCR
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感染性心内膜炎患者血液中分离到羊种布鲁菌 被引量:6
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作者 陈海 李春辉 +2 位作者 朱兰兰 杨小敏 黎海文 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期289-291,共3页
目的从患者血液中分离出的病原菌进行生物学性状研究和种及型的临床鉴定;探讨布鲁菌病在热带海岛海南的流行特点。方法按布鲁菌标准鉴定方法进行细菌学实验(包括形态学、培养特性、生化特征、血清学试验和噬菌体试验等),并对患者的流行... 目的从患者血液中分离出的病原菌进行生物学性状研究和种及型的临床鉴定;探讨布鲁菌病在热带海岛海南的流行特点。方法按布鲁菌标准鉴定方法进行细菌学实验(包括形态学、培养特性、生化特征、血清学试验和噬菌体试验等),并对患者的流行病学、临床资料、实验室资料进行系统分析。结果患者血液中病原微生物的形态学、培养特性、生化特征、血清学诊断和噬菌体诊断结果均符合羊种布鲁菌生物2型;与我国近几年分离到的羊种布鲁菌生物1型和3型相比明显不同;羊种布鲁菌尿素酶试验为不定(V),也没有强阳性的报告,而海南分离株为强阳性。结论海南省首次发现人布鲁菌病,由羊种布鲁菌2型引起。该病在海南省存在分散的点状流行,应引起医务人员及有关部门的重视。 展开更多
关键词 感染性心内膜炎 血培养 羊种布鲁菌
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牛、羊布鲁菌多重PCR方法的建立与应用 被引量:1
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作者 杜涛峰 韩文瑜 +4 位作者 雷连成 孙长江 李扬 顾敬敏 许会会 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第11期80-84,共5页
根据布鲁菌属特异性基因BCSP31和布鲁菌种间特异性标志IS711插入序列,设计合成了3对引物,以牛种布鲁菌544A、104M和羊种布鲁菌16M基因组DNA为模板,通过优化反应条件,建立了可同时检测布鲁菌属、牛种布鲁菌和羊种布鲁菌的多重PCR方法。... 根据布鲁菌属特异性基因BCSP31和布鲁菌种间特异性标志IS711插入序列,设计合成了3对引物,以牛种布鲁菌544A、104M和羊种布鲁菌16M基因组DNA为模板,通过优化反应条件,建立了可同时检测布鲁菌属、牛种布鲁菌和羊种布鲁菌的多重PCR方法。牛种布鲁菌可扩增出301和114bp 2条带,羊种布鲁菌可扩增出301和253bp 2条带,该方法对牛种布鲁菌544A和羊种布鲁菌16M混合DNA模板的最小检出量为100pg,对大肠杆菌O157∶H7、小肠结肠炎耶尔森菌等15种参照菌的核酸扩增结果均为阴性。应用该方法对吉林省某牛场的106份粪便进行检测,虎红平板凝集试验作对照,结果PCR检测9份为阳性,且全为牛种布鲁菌阳性,对应的虎红平板凝集试验也为阳性。结果表明,建立的多重PCR方法具有良好的敏感性和特异性,为布鲁菌病的鉴别诊断提供了一种分子检测工具。 展开更多
关键词 牛种布 羊种布鲁菌 BCSP31基因 IS711基因 多重PCR
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布鲁菌OMP25基因重组山羊痘病毒的构建 被引量:3
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作者 魏凤 郭志儒 +1 位作者 陈创夫 乔军 《动物医学进展》 CSCD 2008年第4期6-9,共4页
将羊种布鲁菌外膜蛋白25(OMP25)基因插入到山羊痘病毒转移载体PGM-TK-I1L-GPT1启动子I1L的下游,构建重组山羊痘病毒转移载体。用脂质体转染法将重组转移载体与山羊痘病毒疫苗株G14-STV44-55共转染绵羊成纤维细胞,在细胞内同源重组。通... 将羊种布鲁菌外膜蛋白25(OMP25)基因插入到山羊痘病毒转移载体PGM-TK-I1L-GPT1启动子I1L的下游,构建重组山羊痘病毒转移载体。用脂质体转染法将重组转移载体与山羊痘病毒疫苗株G14-STV44-55共转染绵羊成纤维细胞,在细胞内同源重组。通过霉酚酸药物筛选、纯化,经PCR鉴定获得了重组山羊痘病毒。 展开更多
关键词 羊种布鲁菌 外膜蛋白25基因 重组山羊痘病毒
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呼和浩特地区牛羊布鲁菌流行株种及生物型鉴定 被引量:1
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作者 赵林立 唐泰山 +3 位作者 赵治国 王海艳 敖威华 刘虹 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2011年第9期34-36,共3页
应用常规细菌学方法,对呼和浩特部分地区疑似布鲁菌病的牛、羊流产胎儿病料进行了布鲁菌分离,共分离到4株布鲁菌。进一步根据细菌形态、培养特性、生化特性以及平板凝集试验等对分离到的细菌进行种型鉴定。结果表明,其中3株为羊种布鲁... 应用常规细菌学方法,对呼和浩特部分地区疑似布鲁菌病的牛、羊流产胎儿病料进行了布鲁菌分离,共分离到4株布鲁菌。进一步根据细菌形态、培养特性、生化特性以及平板凝集试验等对分离到的细菌进行种型鉴定。结果表明,其中3株为羊种布鲁菌生物3型,1株为牛种布鲁菌生物3型。本研究结果为内蒙古地区布鲁菌病的防控奠定了病原学基础。 展开更多
关键词 分离 鉴定 羊种布鲁菌生物3型 牛种布生物3型
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