浙江省绵羊衣原体病的流行调查

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作者 吴雪军 张璐 +2 位作者 周丰超 陈伟良 张传亮 《浙江畜牧兽医》 2025年第1期31-33,共3页

绵羊衣原体病是由细胞内寄生的流产嗜性衣原体引发的以妊娠母羊流产、产弱羔或死羔为主要临床症状的自然疫源性传染病,也称绵羊地方性流产,绵羊怀孕后期衣原体流产在世界许多地区造成严重的经济损失。为了解浙江省羊群绵羊衣原体感染状... 绵羊衣原体病是由细胞内寄生的流产嗜性衣原体引发的以妊娠母羊流产、产弱羔或死羔为主要临床症状的自然疫源性传染病,也称绵羊地方性流产,绵羊怀孕后期衣原体流产在世界许多地区造成严重的经济损失。为了解浙江省羊群绵羊衣原体感染状况,利用酶联免疫吸附试验(ELISA)对采集的羊血清样品进行了绵羊衣原体抗体检测,并利用SPSS 27.0软件对检测数据进行了分析,以期为后期开展系统的绵羊衣原体病流行情况调查提供数据支撑。 展开更多

关键词 羊衣原体病 流行调查 绵羊地方性流产 母羊流产 衣原体感染 血清样品 流产嗜性衣原体 流行情况调查

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羊流产嗜性衣原体蛋白-蛋白相互作用网络的构建

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作者 刘威 袁芳艳 +7 位作者 周丹娜 刘泽文 高婷 郭锐 杨克礼 段正赢 梁婉 田永祥 《湖北农业科学》 2021年第22期124-128,共5页

病原菌的相互作用组学研究是揭示潜在信号转导通路和新型药物靶标的有力工具。通过同源蛋白映射的方法构建了羊流产嗜性衣原体(Chlamydia abortus)的蛋白-蛋白相互作用网络。结果表明,所构建的互作网络包含220个蛋白和1276个相互作用关... 病原菌的相互作用组学研究是揭示潜在信号转导通路和新型药物靶标的有力工具。通过同源蛋白映射的方法构建了羊流产嗜性衣原体(Chlamydia abortus)的蛋白-蛋白相互作用网络。结果表明,所构建的互作网络包含220个蛋白和1276个相互作用关系。通过分析蛋白的互作频率,确定了在羊流产嗜性衣原体中互作频率最高的20个蛋白,主要与转录、翻译、分子伴侣等功能相关。进一步分析发现,伴侣蛋白DnaK、GroEL、DnaJ发生互作的频率较高,能与核糖体蛋白、代谢相关蛋白等多种功能蛋白发生相互作用。若DnaK、GroEL、DnaJ的功能受到抑制,将会对羊流产嗜性衣原体的正常生命活动造成较大的影响。 展开更多

关键词 羊流产嗜性衣原体(chlamydia abortus) 蛋白相互作用 互作网络

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羊流产嗜性衣原体MOMP基因的克隆及序列分析

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作者 姚菊霞 王光华 +2 位作者 陆艳 李秀萍 王戈平 《青海畜牧兽医杂志》 2015年第2期1-4,共4页

为探讨羊流产嗜性衣原体MOMP蛋白的生物学功能、揭示其在流产衣原体病诊断和防治中的作用。本试验根据Gen Bank公布的流产嗜性衣原体主要外膜蛋白(MOMP)基因序列,设计并合成4条特异性引物,以羊流产嗜性衣原体青海分离株感染的鸡胚卵黄... 为探讨羊流产嗜性衣原体MOMP蛋白的生物学功能、揭示其在流产衣原体病诊断和防治中的作用。本试验根据Gen Bank公布的流产嗜性衣原体主要外膜蛋白(MOMP)基因序列,设计并合成4条特异性引物,以羊流产嗜性衣原体青海分离株感染的鸡胚卵黄囊中提取的衣原体基因组为模板,应用套式PCR扩增到MOMP全基因序列。通过生物信息学软件对该基因的结构及其推导的氨基酸序列进行了预测分析,同时分析了与其他流产嗜性衣原体的同源性。结果显示,该基因全长1 170 bp,可编码389个氨基酸,蛋白分子量理论值为41.8 ku,理论等电点7.54,编码蛋白理化性质较稳定。其第1位到第19位氨基酸残基为信号肽序列,具有3处N-糖基化位点。含有多个能被其他酶修饰的位点,以无规则卷曲为主,含5个跨膜区,3个亲水性较强的抗原表位。同源性分析表明与其他流产嗜性衣原体分离株的一致性高在93%以上,系统进化分析表明与OCLH196株(序列号为AJ440239)位于同一进化分支。 展开更多

关键词 羊流产嗜性衣原体 MOMP基因 克隆 序列

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基于重组外膜蛋白的猪流产嗜性衣原体病抗体ELISA检测方法的建立 被引量：3

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作者 周丹娜 杨克礼 +7 位作者 闫少侠 刘泽文 段正赢 郭锐 袁芳艳 刘威 孟丽 田永祥 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期703-706,共4页

为建立检测流产嗜性衣原体(C.abortus)抗体的快速检测方法,本研究以纯化的重组表达C.abortus主要外膜蛋白(MOMP)为包被抗原,采用方阵法确定包被抗原和待检血清的最佳工作浓度,对反应条件进行优化,建立了C.abortus抗体的间接ELISA检测方... 为建立检测流产嗜性衣原体(C.abortus)抗体的快速检测方法,本研究以纯化的重组表达C.abortus主要外膜蛋白(MOMP)为包被抗原,采用方阵法确定包被抗原和待检血清的最佳工作浓度,对反应条件进行优化,建立了C.abortus抗体的间接ELISA检测方法。该方法与猪流行性乙型脑炎病毒、猪瘟病毒、猪伪狂犬病毒、猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒阳性血清均无交叉反应;该方法检测稀释800倍的C.abortus阳性血清仍呈阳性;批内和批间变异系数均小于10%。采用所建立的ELISA方法与间接血凝(IHA)方法分别对62份临床血清样品进行检测,阳性率分别为83.87%(52/62)和70.97%(44/62),符合率为87.09%(54/62)。由此表明,本实验建立的间接ELISA方法具有较高的敏感性和特异性,适于C.abortus流行病学调查。 展开更多

关键词 猪流产嗜性衣原体 主要外膜蛋白 ELISA 抗体检测

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羊流产嗜衣原体ompA基因克隆及生物信息学分析 被引量：2

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作者 龙冲冲 江楠 +4 位作者 彭中友 龙胜基 罗意 周碧君 文明 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期113-118,共6页

分析羊流产嗜衣原体ompA基因结构并预测其编码蛋白的结构和功能。采用DNA Star、DNA MAN、vector NTI suite11.5序列分析软件和在线网站ExPASy分析该基因的结构和预测其编码蛋白的理化性质、亚细胞定位、一级结构修饰位点、二级结构特... 分析羊流产嗜衣原体ompA基因结构并预测其编码蛋白的结构和功能。采用DNA Star、DNA MAN、vector NTI suite11.5序列分析软件和在线网站ExPASy分析该基因的结构和预测其编码蛋白的理化性质、亚细胞定位、一级结构修饰位点、二级结构特征及三维空间构象、潜在抗原表位等。结果显示,该基因全长1 170 bp,可编码389个氨基酸,编码蛋白理化性质较稳定,无各种亚细胞定位序列,含有多个能被其他酶修饰的位点,该蛋白以无规则卷曲为主,大部分氨基酸残基包埋在分子内部,含5个跨膜区,3个亲水性较强的抗原表位。ompA基因生物信息学分析结果为ompA蛋白功能的深入研究和新型多价疫苗的开发提供了基础数据。 展开更多

关键词 羊流产嗜衣原体 ompA基因 生物信息学分析

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人工感染羊嗜流产衣原体豚鼠流产模型的建立

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作者 凌勇 曾光旭 +2 位作者 杨君敬 袁吉磊 何诚 《中国比较医学杂志》 CAS 2008年第9期35-38,I0006,共5页

目的通过人工感染怀孕豚鼠建立嗜流产衣原体发病模型,观察流产病理学变化的差异,确定豚鼠是否可以作为嗜流产衣原体的动物模型。方法35只清洁级怀孕40 d的豚鼠随机分为7组,每组5只。将羊嗜流产衣原体分离株B10011、CG1株分别以三个剂量... 目的通过人工感染怀孕豚鼠建立嗜流产衣原体发病模型,观察流产病理学变化的差异,确定豚鼠是否可以作为嗜流产衣原体的动物模型。方法35只清洁级怀孕40 d的豚鼠随机分为7组,每组5只。将羊嗜流产衣原体分离株B10011、CG1株分别以三个剂量组(10-1,10-2,10-3)腹腔攻毒1次,每只0.5 mL,以灭菌生理盐水为阴性对照。攻毒后观察豚鼠的临床体征、流产和死亡数量。攻毒后20 d安乐死处理剩余的大小豚鼠,无菌摘取组织,分成2份。一份-20℃冷冻保存,PCR检测病原在组织中的分布;另外一份固定于10%中性甲醛溶液,组织切片和免疫组化观察。结果(1)羊嗜流产衣原体分离株B10011和CG1均可造成怀孕豚鼠流产、产弱胎、畸形胎或死胎。2种分离株感染不同剂量造成豚鼠平均流产时间、流产数量、豚鼠死亡数量均有显著差异,且CG1株敏感性高于B10011株。(2)2个分离株均可造成肾脏、肝脏肿大,肺脏呈局灶性出血,卵巢出血坏死,胎盘子宫阜水肿;病理组织学显示肾小管上皮细胞变性、坏死,单核细胞大量增生;肝细胞颗粒样病变。脾髓质弥漫性出血,皮质区淋巴小结生发中心萎缩。(3)免疫组化结果显示衣原体包涵体主要分布于肾脏近曲小管、远曲小管,以及脾脏的髓质区。(4)PCR检测显示分离株感染后,肾脏、脾脏、肺脏、肝脏中均呈阳性。在卵巢组织中,高剂量组呈阳性。结论以B10011和CG1分离株人工感染怀孕豚鼠均可导致豚鼠出现流产,且CG1分离株敏感性较高,呈剂量-效应关系;感染豚鼠病理学变化与临床羊流产相似。因此,人工感染豚鼠流产模型可以用于反刍动物嗜流产衣原体病的研究。 展开更多

关键词 嗜流产衣原体 模型 动物 羊 豚鼠

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猪流产嗜性衣原体MOMP基因的克隆及原核表达 被引量：3

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作者 李西玉 许信刚 +4 位作者 周继章 邱昌庆 曹小安 宫晓炜 王光华 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2010年第7期33-38,43,共7页

【目的】克隆猪流产嗜性衣原体青海株主要外膜蛋白(Major outer membrane protein,MOMP)基因,并进行序列分析及原核表达。【方法】根据GenBank公布的猪流产嗜性衣原体MOMP基因的核苷酸序列,设计并合成4条特异性引物,用套式PCR方法扩增... 【目的】克隆猪流产嗜性衣原体青海株主要外膜蛋白(Major outer membrane protein,MOMP)基因,并进行序列分析及原核表达。【方法】根据GenBank公布的猪流产嗜性衣原体MOMP基因的核苷酸序列,设计并合成4条特异性引物,用套式PCR方法扩增猪流产嗜性衣原体青海株MOMP基因,将其克隆入pMD18-T载体中,进行测序及序列分析。然后将MOMP基因亚克隆入原核表达载体pGEX4T-1中,在大肠杆菌BL21(DE3)中用IPTG诱导表达,对表达产物进行SDS-PAGE和Western blot检测。【结果】扩增到猪流产嗜性衣原体青海株1170bp的MOMP全长基因。序列分析结果表明,该基因与已发表的猪流产嗜性衣原体B11001株和CP/12株核苷酸同源性均为99.7%。SDS-PAGE电泳可检测到分子质量约为66ku的融合蛋白,主要以包涵体形式存在。Western-blot分析表明,重组蛋白可被猪流产嗜性衣原体抗体识别。【结论】成功克隆了猪流产嗜性衣原体青海株MOMP基因,并进行了原核表达,表达的蛋白具有抗原活性。 展开更多

关键词 猪 流产嗜性衣原体 MOMP蛋白 原核表达

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猪流产嗜性衣原体POMP90蛋白的原核表达及反应原性分析 被引量：1

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作者 梅仕林 孟宪荣 +5 位作者 栗绍文 何诚 杨琪 喻翠翠 张望 毕丁仁 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期491-494,共4页

设计特异性引物进行PCR扩增,获得猪流产嗜性衣原体CP/12株的pomp90基因,将其定向克隆到原核表达载体pGEX-KG中。阳性重组质粒转化原核表达宿主菌E.coliBL21,用IPTG进行诱导表达,获得高效表达的融合蛋白。采用Western-blot和间接ELISA检... 设计特异性引物进行PCR扩增,获得猪流产嗜性衣原体CP/12株的pomp90基因,将其定向克隆到原核表达载体pGEX-KG中。阳性重组质粒转化原核表达宿主菌E.coliBL21,用IPTG进行诱导表达,获得高效表达的融合蛋白。采用Western-blot和间接ELISA检测表明纯化的重组蛋白具有良好的反应原性,初步选择其最佳包被浓度为1μg/mL。 展开更多

关键词 猪 流产嗜性衣原体 POMP90蛋白 原核表达 反应原性

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猪流产嗜性衣原体病诊断方法研究进展 被引量：1

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作者 张文通 魏凤 +2 位作者 李峰 苗立中 沈志强 《中国猪业》 2014年第7期30-32,共3页

猪流产嗜性衣原体病是引起母猪流产,产弱胎、死胎的重要传染病之一,严重危害养猪业的健康发展。正确诊断对防制该病极为关键。本文就该病的病原学诊断、血清学诊断、分子生物学诊断方法进行了综述。

关键词 猪流产嗜性衣原体 诊断方法 进展

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流产嗜性衣原体MIP蛋白单克隆抗体的制备及特性鉴定

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作者 蔺俊丽 李兆才 +2 位作者 曹小安 赵荣 周继章 《中国兽药杂志》 北大核心 2015年第3期21-25,共5页

为制备抗流产嗜性衣原体MIP蛋白单克隆抗体,以纯化的重组MIP蛋白为抗原,免疫Balb/c小鼠后经细胞融合,间接ELISA法筛选阳性细胞克隆并进行有限稀释克隆化,建立了两株分泌抗MIP蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,将其分别命名为M1,M2。间接EL... 为制备抗流产嗜性衣原体MIP蛋白单克隆抗体,以纯化的重组MIP蛋白为抗原,免疫Balb/c小鼠后经细胞融合,间接ELISA法筛选阳性细胞克隆并进行有限稀释克隆化,建立了两株分泌抗MIP蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,将其分别命名为M1,M2。间接ELISA测杂交瘤细胞上清抗体效价为1∶1600、相对亲和力为10μg/m L;Western blot鉴定两株单克隆抗体能特异识别MIP重组蛋白;细胞核型实验鉴定单抗符合杂交瘤细胞的特性;单克隆抗体亚类检测试剂盒鉴定两株单抗免疫球蛋白类型均为Ig G1,轻链为κ链;体外中和试验表明,两株单抗均能有效阻断感染。抗MIP单克隆抗体的成功制备将为建立诊断、治疗方法及MIP蛋白的进一步研究奠定基础。 展开更多

关键词 流产嗜性衣原体 MIP蛋白 单克隆抗体 鉴定

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猪源嗜性衣原体HB1043株主要外膜蛋白(MOMP)基因的分析及重组表达 被引量：2

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作者 闫少侠 田永祥 +7 位作者 刘泽文 袁芳艳 郭锐 段正赢 杨克礼 孟丽 周丹娜 栗绍文 《湖北农业科学》 北大核心 2013年第4期949-952,共4页

根据GenBank中衣原体主要外膜蛋白(MOMP)全基因序列设计特异性引物,以临床分离的衣原体病原中提取的衣原体全基因组为模板,利用特异性引物PCR扩增得到MOMP全基因序列。通过BLAST比对,结果显示其与已提交的猪流产衣原体CG1株的MOMP序列(E... 根据GenBank中衣原体主要外膜蛋白(MOMP)全基因序列设计特异性引物,以临床分离的衣原体病原中提取的衣原体全基因组为模板,利用特异性引物PCR扩增得到MOMP全基因序列。通过BLAST比对,结果显示其与已提交的猪流产衣原体CG1株的MOMP序列(EU531729)有1个碱基不同。根据对测序结果进行信号肽序列预测及内切酶位点分析,选用BamHⅠ和SalⅠ双酶切将目的蛋白序列克隆到表达载体pET-28a上,得到重组质粒pET-28a-MOMP。将重组质粒转化入E.coli BL21进行表达,表达产物使用镍离子亲和层析柱进行纯化得到目的蛋白rMOMP。目的蛋白经Western-blot检测,证明其具有免疫学活性。 展开更多

关键词 猪流产嗜性衣原体 主要外膜蛋白(MOMP) 重组表达

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山羊流产原因及防治 被引量：1

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作者 李莉 《四川畜牧兽医》 2011年第8期59-59,共1页

1导致山羊流产的原因1.1羊流产衣原体病（即羊地方性流产病）造成流产怀孕羊感染衣原体后,衣原体在胎衣,特别是绒毛叶生长繁殖,引起患部发炎,导致胎羔早期产出。绝大多数患病母羊在产前1个月左右发生流产。本病每年2～4月份多发,2岁左... 1导致山羊流产的原因1.1羊流产衣原体病（即羊地方性流产病）造成流产怀孕羊感染衣原体后,衣原体在胎衣,特别是绒毛叶生长繁殖,引起患部发炎,导致胎羔早期产出。绝大多数患病母羊在产前1个月左右发生流产。本病每年2～4月份多发,2岁左右的母羊发病率较高。 展开更多

关键词 流产原因 山羊流产 防治 衣原体病 生长繁殖 怀孕羊 流产病 地方性

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