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羊毛固醇合成酶杂合敲除小鼠全脑转录组学分析
被引量:
2
1
作者
李艳玲
李昱昊
+3 位作者
孙晓梅
张军
张素梅
张胜权
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2022年第9期1389-1393,共5页
目的探讨羊毛固醇合成酶(LSS)基因功能异常及胆固醇水平变化对大脑功能分子水平的影响。方法通过RNA-Seq分析LSS(+/-)小鼠及野生型(WT)C57BL/6小鼠基因的表达,KEGG富集分析差异基因涉及的信号通路。用实时定量PCR以及Western blot法检...
目的探讨羊毛固醇合成酶(LSS)基因功能异常及胆固醇水平变化对大脑功能分子水平的影响。方法通过RNA-Seq分析LSS(+/-)小鼠及野生型(WT)C57BL/6小鼠基因的表达,KEGG富集分析差异基因涉及的信号通路。用实时定量PCR以及Western blot法检测差异基因的表达。结果通过RNA-Seq分析,LSS(+/-)杂合敲除导致小鼠大脑中320个基因表达出现变化,其中上调基因145个,下调175个,KEGG富集分析差异基因涉及神经活化的受体与配体通路、河马信号途径及谷氨酸能突触途径。实时定量PCR分析结果显示CCKBR与Htr5b分别出现上调。Western blot结果显示CCKBR基因在LSS(+/-)小鼠全脑组织总蛋白中明显高表达。结论LSS(+/-)杂合敲除会影响小鼠大脑功能及行为。
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关键词
羊毛固醇合成酶
基因敲除小鼠
RNA-SEQ
富集分析
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职称材料
LSS功能缺失对NAFLD模型小鼠肠道功能的影响
2
作者
白红枚
杨振
+9 位作者
胡韦康
王子涵
周文静
何清雅
钟健
李名聪
刘莉
张朝阳
张素梅
张胜权
《安徽医科大学学报》
北大核心
2025年第9期1653-1660,共8页
目的探究羊毛固醇合成酶(LSS)基因功能缺失后对高脂饮食诱导的非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)模型小鼠肠道功能的影响。方法利用CRISPR/Cas9系统建立LSS全身杂合敲除C57小鼠(LSS+/-)模型,用60%脂肪比的高脂饲料喂养6个月后,通过HE和油红O染...
目的探究羊毛固醇合成酶(LSS)基因功能缺失后对高脂饮食诱导的非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)模型小鼠肠道功能的影响。方法利用CRISPR/Cas9系统建立LSS全身杂合敲除C57小鼠(LSS+/-)模型,用60%脂肪比的高脂饲料喂养6个月后,通过HE和油红O染色检测肝脏组织内脂肪沉积情况;HE染色观察小肠组织的形态变化;试剂盒检测肠道组织中总胆固醇含量的变化;苯酚红糊体检测小鼠的胃肠动力功能;Evans blue染色检测肠道通透性;Western blot检测LSS、紧密连接蛋白(Claudin)-1、Claudin-5、白细胞分化抗原36(CD36)、尼曼-匹克C1型类似蛋白1(NPC1L1)蛋白在小肠组织中的表达情况。结果肝脏HE和油红O染色结果显示在高脂饮食组中LSS基因敲低小鼠的肝脏脂肪沉积低于野生型小鼠,LSS基因杂合敲除小鼠肠道组织中的总胆固醇含量降低(P<0.01),但肠组织HE染色未观察到两组小鼠之间存在形态差异,LSS基因杂合敲除小鼠的胃肠动力功能也未出现显著变化,Evans blue检测肠道通透性结果显示LSS基因杂合敲除在高脂饮食小鼠的肠道通透性降低(P<0.05),Claudin-5蛋白在LSS基因杂合敲除高脂饮食小鼠的肠道组织中表达量升高(P<0.05),而LSS蛋白在LSS杂合敲除小鼠肠道组织中表达量降低(P<0.05)。结论在高脂饮食诱导的NAFLD模型中,LSS基因杂合敲除后通过调节肠道组织内胆固醇的代谢和上调Claudin-5的表达,减轻了高脂饮食诱导的肝脏脂肪沉积并改善了肠道的屏障功能。
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关键词
羊毛固醇合成酶
胆
固醇
代谢
非酒精性脂肪肝病
肠道通透性
紧密连接蛋白
肠道屏障功能
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职称材料
LSS基因功能缺失对雄性小鼠生殖的影响
被引量:
3
3
作者
孙晓梅
李名聪
+8 位作者
李涛
魏翔
葛若木
张军
李昱昊
周青
汪渊
张胜权
张素梅
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2022年第2期208-212,共5页
目的研究羊毛固醇合成酶(LSS)基因功能缺失对小鼠生殖的影响。方法取8周龄的LSS^(+/+)(WT)型和LSS^(+/-)(KO)型鼠雌雄共30只鼠,分别按♂WT×♀WT、♂WT×♀KO、♂KO×♀WT、♂KO×♀KO分组进行1:1合笼,时长4个月,统计...
目的研究羊毛固醇合成酶(LSS)基因功能缺失对小鼠生殖的影响。方法取8周龄的LSS^(+/+)(WT)型和LSS^(+/-)(KO)型鼠雌雄共30只鼠,分别按♂WT×♀WT、♂WT×♀KO、♂KO×♀WT、♂KO×♀KO分组进行1:1合笼,时长4个月,统计每胎生仔个数及平均产仔周期;取WT型和KO型小鼠的血清,进行性激素检测;用TUNEL染色观察睾丸中生精细胞的凋亡情况;用Western blot检测睾丸组织中Tubulin、LSS和凋亡相关蛋白(GPX4/Bax/Bcl-2)的表达。结果配繁结果显示♂WT×♀WT与♂KO×♀KO相比,每胎平均生仔个数差异有统计学意义,其余组别均无差异,产仔周期4组的差异均无统计学意义;WT型和KO型小鼠性激素检测结果相比,差异也无统计学意义;TUNEL染色结果可以观察到,基因敲除鼠的睾丸组织中生精细胞凋亡增多;Western blot结果中,与WT型相比,KO型小鼠的凋亡相关蛋白(GPX4/Bax/Bcl-2)表达量均无差异。结论LSS基因功能缺失会导致小鼠生精细胞凋亡增加,其可能影响小鼠的生育能力。
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关键词
羊毛固醇合成酶
基因敲除小鼠
凋亡
性激素
生殖
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职称材料
题名
羊毛固醇合成酶杂合敲除小鼠全脑转录组学分析
被引量:
2
1
作者
李艳玲
李昱昊
孙晓梅
张军
张素梅
张胜权
机构
安徽医科大学基础医学院生化教研室
出处
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2022年第9期1389-1393,共5页
基金
安徽省自然科学基金(编号:2108085MH266、KJ2020A0143、KJ2020A0197)。
文摘
目的探讨羊毛固醇合成酶(LSS)基因功能异常及胆固醇水平变化对大脑功能分子水平的影响。方法通过RNA-Seq分析LSS(+/-)小鼠及野生型(WT)C57BL/6小鼠基因的表达,KEGG富集分析差异基因涉及的信号通路。用实时定量PCR以及Western blot法检测差异基因的表达。结果通过RNA-Seq分析,LSS(+/-)杂合敲除导致小鼠大脑中320个基因表达出现变化,其中上调基因145个,下调175个,KEGG富集分析差异基因涉及神经活化的受体与配体通路、河马信号途径及谷氨酸能突触途径。实时定量PCR分析结果显示CCKBR与Htr5b分别出现上调。Western blot结果显示CCKBR基因在LSS(+/-)小鼠全脑组织总蛋白中明显高表达。结论LSS(+/-)杂合敲除会影响小鼠大脑功能及行为。
关键词
羊毛固醇合成酶
基因敲除小鼠
RNA-SEQ
富集分析
Keywords
lanosterol synthase
gene knockout mice
RNA-Seq
enrichment analysis
分类号
R34 [医药卫生—基础医学]
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职称材料
题名
LSS功能缺失对NAFLD模型小鼠肠道功能的影响
2
作者
白红枚
杨振
胡韦康
王子涵
周文静
何清雅
钟健
李名聪
刘莉
张朝阳
张素梅
张胜权
机构
安徽医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室
安徽医科大学附属合肥医院(合肥市第二人民医院)病理科
安徽医科大学科研实验中心
出处
《安徽医科大学学报》
北大核心
2025年第9期1653-1660,共8页
基金
安徽省高校科研项目(编号:2022AH050651)
安徽医科大学校科研基金项目(编号:2022xkj107)
蚌埠医学院科技项目自然科学重点项目(编号:2022byzd196)。
文摘
目的探究羊毛固醇合成酶(LSS)基因功能缺失后对高脂饮食诱导的非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)模型小鼠肠道功能的影响。方法利用CRISPR/Cas9系统建立LSS全身杂合敲除C57小鼠(LSS+/-)模型,用60%脂肪比的高脂饲料喂养6个月后,通过HE和油红O染色检测肝脏组织内脂肪沉积情况;HE染色观察小肠组织的形态变化;试剂盒检测肠道组织中总胆固醇含量的变化;苯酚红糊体检测小鼠的胃肠动力功能;Evans blue染色检测肠道通透性;Western blot检测LSS、紧密连接蛋白(Claudin)-1、Claudin-5、白细胞分化抗原36(CD36)、尼曼-匹克C1型类似蛋白1(NPC1L1)蛋白在小肠组织中的表达情况。结果肝脏HE和油红O染色结果显示在高脂饮食组中LSS基因敲低小鼠的肝脏脂肪沉积低于野生型小鼠,LSS基因杂合敲除小鼠肠道组织中的总胆固醇含量降低(P<0.01),但肠组织HE染色未观察到两组小鼠之间存在形态差异,LSS基因杂合敲除小鼠的胃肠动力功能也未出现显著变化,Evans blue检测肠道通透性结果显示LSS基因杂合敲除在高脂饮食小鼠的肠道通透性降低(P<0.05),Claudin-5蛋白在LSS基因杂合敲除高脂饮食小鼠的肠道组织中表达量升高(P<0.05),而LSS蛋白在LSS杂合敲除小鼠肠道组织中表达量降低(P<0.05)。结论在高脂饮食诱导的NAFLD模型中,LSS基因杂合敲除后通过调节肠道组织内胆固醇的代谢和上调Claudin-5的表达,减轻了高脂饮食诱导的肝脏脂肪沉积并改善了肠道的屏障功能。
关键词
羊毛固醇合成酶
胆
固醇
代谢
非酒精性脂肪肝病
肠道通透性
紧密连接蛋白
肠道屏障功能
Keywords
lanosterol synthase
cholesterol metabolism
non-alcoholic fatty liver disease
intestinal permeability
tight junction protein
intestinal barrier function
分类号
R575.5 [医药卫生—消化系统]
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职称材料
题名
LSS基因功能缺失对雄性小鼠生殖的影响
被引量:
3
3
作者
孙晓梅
李名聪
李涛
魏翔
葛若木
张军
李昱昊
周青
汪渊
张胜权
张素梅
机构
安徽医科大学分子生物学实验室
合肥市第二人民医院病理科
安徽医科大学第一附属医院检验科
合肥市第二人民医院高压氧科
出处
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2022年第2期208-212,共5页
基金
安徽省高校自然科学研究项目(编号:KJ2020A0143)。
文摘
目的研究羊毛固醇合成酶(LSS)基因功能缺失对小鼠生殖的影响。方法取8周龄的LSS^(+/+)(WT)型和LSS^(+/-)(KO)型鼠雌雄共30只鼠,分别按♂WT×♀WT、♂WT×♀KO、♂KO×♀WT、♂KO×♀KO分组进行1:1合笼,时长4个月,统计每胎生仔个数及平均产仔周期;取WT型和KO型小鼠的血清,进行性激素检测;用TUNEL染色观察睾丸中生精细胞的凋亡情况;用Western blot检测睾丸组织中Tubulin、LSS和凋亡相关蛋白(GPX4/Bax/Bcl-2)的表达。结果配繁结果显示♂WT×♀WT与♂KO×♀KO相比,每胎平均生仔个数差异有统计学意义,其余组别均无差异,产仔周期4组的差异均无统计学意义;WT型和KO型小鼠性激素检测结果相比,差异也无统计学意义;TUNEL染色结果可以观察到,基因敲除鼠的睾丸组织中生精细胞凋亡增多;Western blot结果中,与WT型相比,KO型小鼠的凋亡相关蛋白(GPX4/Bax/Bcl-2)表达量均无差异。结论LSS基因功能缺失会导致小鼠生精细胞凋亡增加,其可能影响小鼠的生育能力。
关键词
羊毛固醇合成酶
基因敲除小鼠
凋亡
性激素
生殖
Keywords
lansterol synthase
knockout mice
apoptosis
sex hormones
reproduction
分类号
R339.2 [医药卫生—人体生理学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
羊毛固醇合成酶杂合敲除小鼠全脑转录组学分析
李艳玲
李昱昊
孙晓梅
张军
张素梅
张胜权
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2022
2
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职称材料
2
LSS功能缺失对NAFLD模型小鼠肠道功能的影响
白红枚
杨振
胡韦康
王子涵
周文静
何清雅
钟健
李名聪
刘莉
张朝阳
张素梅
张胜权
《安徽医科大学学报》
北大核心
2025
0
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下载PDF
职称材料
3
LSS基因功能缺失对雄性小鼠生殖的影响
孙晓梅
李名聪
李涛
魏翔
葛若木
张军
李昱昊
周青
汪渊
张胜权
张素梅
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2022
3
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