异氟烷改善离体鼠肝缺氧-复氧后氧供耗平衡

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作者 李泉 俞卫锋 +4 位作者 李丽 徐学武 宋建刚 周脉涛 刘志强 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期200-202,共3页

目的:研究异氟烷对离体鼠肝在缺氧-复氧状态下肝流量和肝氧耗的作用。方法:建立离体鼠肝灌流模型。将大鼠肝脏取下,置于离体鼠肝灌流仪中,以经95%O2/5%CO2饱和的改良克-林碳酸氢盐缓冲液恒压灌流(有氧状态用1.2 kPa,缺氧状态用0.2 kPa)... 目的:研究异氟烷对离体鼠肝在缺氧-复氧状态下肝流量和肝氧耗的作用。方法:建立离体鼠肝灌流模型。将大鼠肝脏取下,置于离体鼠肝灌流仪中,以经95%O2/5%CO2饱和的改良克-林碳酸氢盐缓冲液恒压灌流(有氧状态用1.2 kPa,缺氧状态用0.2 kPa),另外加入葡萄糖10 mmol/L维持营养,加入1%牛血清白蛋白维持胶体渗透压,控制在生理pH值和温度,实时监测氧分压和肝流量变化。不同浓度异氟烷随混合气带入离体鼠肝灌注的人工肺。结果:(1)异氟烷对基础状态下鼠肝流量无明显影响,但可改善缺氧后复氧状态下鼠肝流量的减少。(2)异氟烷对基础状态下鼠肝氧耗有降低作用,但在复氧状态下却改善了鼠肝氧耗的下降。结论:异氟烷能改善离体鼠肝缺氧-复氧后氧供耗平衡,保护肝脏功能。 展开更多

关键词 异氟烷 缺氧-复氧 氧供耗平衡 离体肝脏

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舒芬太尼通过调节HIF-1α-Kcnq1ot1影响缺氧-复氧导致的心肌细胞损伤 被引量：1

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作者 邓方方 李继勇 +4 位作者 张力 邹高锐 陈治军 辛欢 乐薇 《中国药理学通报》 北大核心 2025年第3期500-507,共8页

目的探讨舒芬太尼(sufentanil,Suf)能否通过调节缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)-KCNQ1重叠转录物1(KCNQ1 opposite strand/antisense transcript 1,Kcnq1ot1)改善缺氧-复氧(hypoxia-reoxygenation,H/R)导致的... 目的探讨舒芬太尼(sufentanil,Suf)能否通过调节缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)-KCNQ1重叠转录物1(KCNQ1 opposite strand/antisense transcript 1,Kcnq1ot1)改善缺氧-复氧(hypoxia-reoxygenation,H/R)导致的心肌细胞损伤。方法生物信息学分析预测HIF-1α与Kcnq1ot1的相互作用。将H9c2细胞分为Ctrl组、H/R组、Suf组;oe-HIF-1α组、oe-HIF-1α+Suf组、sh-HIF-1α组、sh-HIF-1α+Kcnq1ot1组。MTT法检测细胞活性,TUNEL法检测细胞凋亡,ELISA法检测细胞上清液中的CK-MB与HBDH浓度,Western blot分析细胞中HIF-1α蛋白表达,逆转录定量PCR(RT-qPCR)测定Kcnq1ot1的mRNA表达水平。构建心肌缺血/再灌注大鼠模型,评估Suf对体内心肌缺血/再灌注的治疗潜力。结果生物信息学分析发现,HIF-1α与Kcnq1ot1之间存在直接的相互作用。与Ctrl组相比,H/R组的H9c2细胞活性降低,细胞凋亡增加,CK-MB与HBDH浓度上调,HIF-1α与Kcnq1ot1的表达增强(均P<0.05)。转染oe-HIF-1α后,进一步加剧了上述结果(均P<0.05);而Suf干预抑制了以上结果(均P<0.05)。与H/R组相比,sh-HIF-1α组的细胞活性明显改善,凋亡减少,CK-MB与HBDH浓度降低(均P<0.05);转染Kcnq1ot1则部分逆转了这些结果(均P<0.05)。动物实验发现,Suf能够改善大鼠心肌缺血/再灌注损伤。结论Suf通过抑制HIF-1α-Kcnq1ot1改善心肌H/R损伤。 展开更多

关键词 舒芬太尼 缺氧诱导因子-Α KCNQ1重叠转录物1 心肌缺氧-复氧损伤 缺血/再灌注损伤 心肌损伤

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RIP3参与的线粒体DNA-cGAS-STING信号通路在HK-2细胞缺氧-复氧模型中的作用

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作者 孔亚坤 王焕 +4 位作者 尹俊杰 熊承云 吴苏豫 张莹 赵建林 《郑州大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第5期603-608,共6页

目的:探究RIP3参与的线粒体DNA(mtDNA)-cGAS-STING信号通路在HK-2缺氧-复氧(H-R)细胞模型中的作用机制。方法:构建H-R细胞模型,取对数生长期HK-2细胞,于无葡萄糖和血清的特殊培养基中缺氧培养3、6和12 h后复氧,同时设置对照组,采用MTT... 目的:探究RIP3参与的线粒体DNA(mtDNA)-cGAS-STING信号通路在HK-2缺氧-复氧(H-R)细胞模型中的作用机制。方法:构建H-R细胞模型,取对数生长期HK-2细胞,于无葡萄糖和血清的特殊培养基中缺氧培养3、6和12 h后复氧,同时设置对照组,采用MTT法检测细胞存活率,Western blot检测RIP3、cGAS、STING、TBK1、IRF3、IFN-α、IFN-β、TNF-α、IL-1β、NF-κB蛋白表达水平,RT-qPCR检测RIP3、cGAS、STING mRNA表达水平。细胞转染及加入RU.521(cGAS抑制剂)、Mito-TEMPO(线粒体ROS特异性清除剂)和溴化乙锭(EtBr)验证cGAS-STING信号通路激活机制,免疫荧光染色法测定mtDNA水平。结果:与对照组相比,H-R 3、6、12组细胞存活率均降低,mtDNA-cGAS-STING信号通路中相关蛋白RIP3、cGAS、STING、TBK1、IRF3、IFN-α、IFN-β、TNF-α、IL-1β、NF-κB及RIP3、STING mRNA表达水平均上升,H-R 6、12组cGAS mRNA表达水平均上升(P<0.05)。与H-R 12+si-NC组相比,H-R 12+si-cGAS组细胞存活率升高,RIP3、cGAS、STING mRNA表达水平均降低;与H-R 12组相比,H-R 12+RU.521组与H-R 12+Mito-TEMPO组RIP3、cGAS、STING、TBK1、IRF3、IFN-β和IL-1β蛋白表达水平均降低(P<0.05)。H-R处理12 h可增加胞质双链DNA且其与线粒体共定位,而EtBr处理可减少胞质mtDNA(P<0.05)。结论:H-R可影响HK-2细胞活力及mtDNA-cGAS-STING信号通路,cGAS在其中起重要作用,且胞质mtDNA对cGAS-STING轴有调节作用。 展开更多

关键词 缺氧-复氧 HK-2细胞 RIP3 线粒体DNA-cGAS-STING信号通路

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异氟醚减少离体鼠肝缺氧-复氧损伤 被引量：5

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作者 李泉 俞卫锋 +3 位作者 徐学武 宋金超 宋建钢 刘志强 《临床麻醉学杂志》 CAS CSCD 2005年第9期618-620,共3页

目的研究不同浓度异氟醚对离体鼠肝缺氧-复氧损伤的影响。方法将大鼠肝脏取下,置于离体鼠肝灌流仪中,以经95%O2/5%CO2饱和的改良克-林氏碳酸氢盐缓冲液恒压灌流(有氧状态用1.2kPa,缺氧状态用0.2kPa),维持生理pH值和温度,实时监测灌流液... 目的研究不同浓度异氟醚对离体鼠肝缺氧-复氧损伤的影响。方法将大鼠肝脏取下,置于离体鼠肝灌流仪中,以经95%O2/5%CO2饱和的改良克-林氏碳酸氢盐缓冲液恒压灌流(有氧状态用1.2kPa,缺氧状态用0.2kPa),维持生理pH值和温度,实时监测灌流液中乳酸脱氢酶(LDH)变化。不同浓度异氟醚随混合气带入人工肺。用细胞色素C还原法测非循环灌流中氧自由基(O2-)产量。结果(1)异氟醚对基础状态下离体肝LDH释放无明显影响,而对缺氧-复氧后离体肝LDH释放呈剂量依赖性抑制作用。(2)2 MAC异氟醚可明显抑制肝复氧后O2-产生。结论异氟醚抑制了复氧后LDH升高与抑制复氧即刻O2-产生密切相关,异氟醚可能通过减少细胞外氧应激,从而保护肝脏免受损伤。 展开更多

关键词 异氟醚 缺氧-复氧损伤 氧自由基 缺氧-复氧损伤 大鼠肝脏 异氟醚 离体鼠 细胞色素C还原法 缺氧-复氧后 不同浓度 缺氧状态 O2^-

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葛根素对缺氧-复氧时乳鼠心肌细胞分泌细胞因子的作用 被引量：18

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作者 朱智彤 姚智 +2 位作者 娄建石 李会强 卢奕 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期296-298,共3页

目的　观察葛根素 (Pue)对缺氧 -复氧诱导的大鼠乳鼠心肌细胞分泌的肿瘤坏死因子 α(TNF α)及白细胞介素 6(IL 6 )的作用。方法　采用生物学方法 ,测定对照组、模型组、及 1g·L-1、0 1g·L-1、0 0 1g·L-1Pue给药组... 目的　观察葛根素 (Pue)对缺氧 -复氧诱导的大鼠乳鼠心肌细胞分泌的肿瘤坏死因子 α(TNF α)及白细胞介素 6(IL 6 )的作用。方法　采用生物学方法 ,测定对照组、模型组、及 1g·L-1、0 1g·L-1、0 0 1g·L-1Pue给药组在各个时间点时细胞培养上清液中TNF α、IL 6活性的变化。结果　受到缺氧、复氧刺激后TNF α、IL 6活性较对照组增加 (P <0 0 1)。各剂量在缺氧时均表现出降低TNF α活性的作用 ,1g·L-1Pue的作用最强 (P <0 0 1) ,而其它两个剂量在复氧时还能增加TNF α活性。Pue能降低IL 6活性的增加。结论　缺氧、复氧刺激能增加心肌细胞分泌TNF α、IL 6 ;Pue能抑制缺氧时TNF α的分泌 ,但在复氧后 ,除 1g·L-1外 ,其它剂量还表现出升高TNF α的作用 ;Pue可抑制IL 6的过度分泌 ,并呈剂量依赖趋势。 展开更多

关键词 缺氧-复氧 心肌细胞 葛根素 肿瘤坏死因子-α 白细胞介素-6

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缺氧-复氧对心室肌细胞的损伤及川芎嗪的保护作用 被引量：9

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作者 陈江斌 江洪 +4 位作者 孙小梅 李庚山 黄从新 许家俐 唐其柱 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2000年第1期18-20,共3页

目的观察缺氧_复氧对大鼠心室肌细胞的损伤及川芎嗪的保护作用。方法在缺氧_复氧条件下 ,测量对照组和不同浓度川芎嗪组对杆形心肌细胞百分比、心肌细胞内K +/Na+浓度比及Ca2 +浓度的影响。结果缺氧_复氧对大鼠心室肌细胞有损伤作用 ,... 目的观察缺氧_复氧对大鼠心室肌细胞的损伤及川芎嗪的保护作用。方法在缺氧_复氧条件下 ,测量对照组和不同浓度川芎嗪组对杆形心肌细胞百分比、心肌细胞内K +/Na+浓度比及Ca2 +浓度的影响。结果缺氧_复氧对大鼠心室肌细胞有损伤作用 ,浓度为4μmol·L -1 的川芎嗪对缺氧_复氧损伤细胞有保护作用 ,它能抑制损伤细胞挛缩 ,提高损伤细胞生存率 ,抑制心肌细胞内K +/Na +浓度比的降低、增加细胞内Ca2 +浓度 ,且剂量越大 ,保护作用越好 ,即川芎嗪对缺氧_复氧损伤细胞的保护呈剂量依赖性。结论川芎嗪对缺氧_复氧损伤的大鼠心肌细胞具有保护作用 。 展开更多

关键词 川芎嗪 心肌细胞 缺氧-复氧损伤

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参麦注射液对急性缺氧-复氧心肌细胞凋亡的影响 被引量：12

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作者 郝然 陈彦静 黄启福 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期1524-1527,共4页

目的:观察参麦注射液对急性缺氧-复氧后心肌细胞凋亡的影响,并探讨其可能机制。方法:采用原代培养的大鼠心肌细胞,通过化学缺氧法使细胞缺氧5min,再恢复氧供应15min,复制心肌细胞缺氧-复氧(anoxi-a-reoxygenation,A/R)模型。Annexin V-F... 目的:观察参麦注射液对急性缺氧-复氧后心肌细胞凋亡的影响,并探讨其可能机制。方法:采用原代培养的大鼠心肌细胞,通过化学缺氧法使细胞缺氧5min,再恢复氧供应15min,复制心肌细胞缺氧-复氧(anoxi-a-reoxygenation,A/R)模型。Annexin V-FITC/PI双染色流式细胞仪检测细胞凋亡百分率;Fluo-3负载激光扫描共聚焦显微镜观察细胞内钙离子水平。结果:A/R组心肌细胞凋亡百分率明显高于正常组,细胞内平均钙离子荧光强度也显著强于正常组(P<0·01)。参麦注射液组细胞凋亡率显著小于A/R组,同时细胞内钙超载也明显轻于A/R组(P<0·01)。结论:参麦注射液能有效抑制缺氧-复氧心肌细胞的凋亡,这种保护作用的机制之一可能是通过减轻细胞内Ca2+超负荷实现的。 展开更多

关键词 参麦注射液 心肌细胞 缺氧-复氧 细胞凋亡 钙超载

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缺氧-复氧对培养的大鼠心肌细胞损伤与细胞凋亡的影响 被引量：2

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作者 姚震 冯建章 +3 位作者 符史干 符永恒 孔月琼 顾申红 《海南医学院学报》 CAS 2005年第6期483-487,共5页

目的:探讨体外培养的大鼠心肌细胞在缺氧(缺血)和缺氧-复氧(再灌注)状态下心肌细胞损伤和细胞凋亡情况。方法:常规方式培养SD大鼠心肌细胞。给予模拟缺血(缺氧)溶液、模拟复氧(再灌注)液以及终浓度为200U/mL的超氧化无歧化酶(SOD)干预处... 目的:探讨体外培养的大鼠心肌细胞在缺氧(缺血)和缺氧-复氧(再灌注)状态下心肌细胞损伤和细胞凋亡情况。方法:常规方式培养SD大鼠心肌细胞。给予模拟缺血(缺氧)溶液、模拟复氧(再灌注)液以及终浓度为200U/mL的超氧化无歧化酶(SOD)干预处理,制备缺氧-复氧损伤组(H/R组)、SOD+缺氧-复氧损伤组(SOD+H/R组)和缺氧预处理组(HP组)模型,未经处理的为正常对照组(control组)。结果:屹H/R组的细胞存活率较对照组明显降低(P<0.01);H/R+SOD组和HP组的细胞存活率虽然较正常对照组明显降低(P<0.05),但比H/R组为高(P<0.05);亿H/R组培养液中培养液中心肌酶活性显著高于HP组和H/R+SOD组(P<0.01)。役H/R组心肌细胞内的脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量也明显增高,与HP组和H/R+SOD组的心肌细胞内MDA含量比较有显著性差异(P<0.05);而HP组、H/R组与对照组间比较,无明显差异(P>0.05);均提示了缺氧-复氧过程中心肌细胞损伤严重,也说明了缺氧(血)预处理或SOD均有细胞保护作用。臆H/R组心肌细胞内游离钙含量增加,显著高于HP组和H/R+SOD组(P<0.01);逸流式细胞仪测定出H/R组心肌细胞凋亡率也明显高于HP组和H/R+SOD组(P<0.01)。心肌细胞凋亡的数量与细胞内钙的增加呈正相关(P<0.01)。肄电镜下所见H/R组的许多细胞表现为胞浆减少,核深染、固缩状态,异染色质不均匀,部分线粒体呈空泡变性,或是肌浆网囊泡变等凋亡期或凋亡前期样改变,少数呈凋亡向坏死方面改变;而其他组则少见此些变化。结论:体外培养的心肌细胞在缺氧-复氧情况下同样可加重心肌细胞损伤,可能是通过降低细胞内钙离子浓度而起作用的。 展开更多

关键词 培养心肌细胞 缺氧-复氧 缺氧预处理 SOD 细胞损伤与凋亡

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缺氧-复氧诱导人肥大心肌细胞凋亡信号的变化 被引量：3

9

作者 张华 刘惠亮 +4 位作者 杨胜利 何作云 冯兵 王慧春 肖颖彬 《医学研究生学报》 CAS 2009年第1期12-15,共4页

目的:研究缺氧-复氧诱导人肥大心肌细胞凋亡信号的变化。方法:通过胶原酶/胰酶联合消化法获取成人肥大心肌细胞,采用缺氧-复氧诱导细胞凋亡,改良TUNEL法检测细胞凋亡率,并用免疫细胞化学法检测bcl-2、bax、caspase3、细胞色素C和磷酸酪... 目的:研究缺氧-复氧诱导人肥大心肌细胞凋亡信号的变化。方法:通过胶原酶/胰酶联合消化法获取成人肥大心肌细胞,采用缺氧-复氧诱导细胞凋亡,改良TUNEL法检测细胞凋亡率,并用免疫细胞化学法检测bcl-2、bax、caspase3、细胞色素C和磷酸酪氨酸蛋白的变化,用原位杂交法检测bcl-2 mRNA、caspase3 mRNA和Akt1 mRNA表达的变化。结果:缺氧24 h-复氧4 h后细胞凋亡率为(17.50±0.67)%,对照组为(2.88±0.27)%;凋亡信号的平均吸光度(A)值:bcl-2为0.189±0.006,对照组为0.238±0.004;bax为0.240±0.002,对照组为0.218±0.004;caspase-3为0.230±0.002,对照组为0.202±0.004;细胞色素C为0.225±0.003,对照组为0.191±0.009;磷酸酪氨酸蛋白为0.186±0.005,对照组为0.154±0.003;bcl-2 mRNA为0.300±0.003,对照组为0.360±0.001;caspase 3 mRNA为0.307±0.004,对照组为0.271±0.002;Akt1 mRNA为0.274±0.007,对照组为0.301±0.008,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论:缺氧-复氧可造成人肥大心肌细胞凋亡,bcl-2蛋白及Bcl-2 mRNA和Akt1 mRNA表达降低,bax、caspase3、细胞色素C和磷酸酪氨酸蛋白及caspase3 mRNA表达增加。 展开更多

关键词 细胞凋亡 缺氧-复氧 心肌细胞

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异氟烷预处理激活Nrf2-ARE通路保护H9c2心肌细胞缺氧-复氧损伤 被引量：2

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作者 梁冰 方洁 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第14期1615-1621,共7页

目的研究异氟烷预处理对大鼠胚胎心肌细胞(H9c2)缺氧-复氧损伤及Nrf2-ARE信号通路的影响。方法用大鼠H9c2细胞低氧模拟缺血性损伤,并将细胞分为空白对照组、缺氧-复氧组、异氟烷预处理组、转染Nrf2 siRNA组、转染非特异性siRNA组(Scram... 目的研究异氟烷预处理对大鼠胚胎心肌细胞(H9c2)缺氧-复氧损伤及Nrf2-ARE信号通路的影响。方法用大鼠H9c2细胞低氧模拟缺血性损伤,并将细胞分为空白对照组、缺氧-复氧组、异氟烷预处理组、转染Nrf2 siRNA组、转染非特异性siRNA组(Scramble组)、异氟烷预处理的Scramble组和异氟烷预处理的siRNA组。采用MTT法检测H9c2细胞存活率,TUNEL染色检测细胞凋亡,分别使用硫代巴比妥酸法(TBA)和分光光度法测定MDA和GSH水平,qRT-PCR及Western blot检测Nrf2、HO-1和NQO1基因的表达。结果与空白对照组比较,缺氧-复氧组细胞活力降低,凋亡细胞数上升,MDA水平升高,GSH水平降低,同时H9c2细胞中Nrf2、HO-1和NQO1的mRNA和蛋白表达降低,差异均具有统计学意义(P<0.01)。与缺氧-复氧组比较,异氟烷可提高H9c2细胞活力,降低凋亡细胞数,并降低MDA水平,升高GSH水平,上调Nrf2、HO-1和NQO1的表达(P<0.05)。siRNA转染组Nrf2的mRNA和蛋白表达与缺氧-复氧组和Scramble组相比均降低(P<0.05),2%异氟烷对siRNA转染组Nrf2 mRNA和蛋白表达均无影响(P>0.05);经2%异氟烷处理的siRNA转染组H9c2细胞存活率与空白对照组、2%异氟烷处理组和2%异氟烷处理的Scramble组相比降低,凋亡细胞数增多,MDA水平升高,GSH水平降低(P<0.05)。结论异氟烷预处理对H9c2细胞缺氧-复氧损伤具有保护作用,这种保护作用与激活Nrf2-ARE信号通路有关。 展开更多

关键词 异氟烷 缺氧-复氧 Nrf2-ARE信号通路 H9C2细胞

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心肌Na^+-Ca^(2+)交换和缺氧复氧

11

作者 王宪沛 马季骅 张培华 《武汉科技大学学报》 CAS 2004年第2期207-210,共4页

心肌细胞Na+ Ca2+交换在缺氧 复氧条件下通过Na+ H+交换、持续性钠电流等途径使胞内Na+升高,进而在去极的静息膜电位、氧自由基共同作用下促进反向的Na+ Ca2+交换,导致胞内Ca2+超载。Ca2+超载引起心肌再灌注损伤、心律失常的发生和细胞... 心肌细胞Na+ Ca2+交换在缺氧 复氧条件下通过Na+ H+交换、持续性钠电流等途径使胞内Na+升高,进而在去极的静息膜电位、氧自由基共同作用下促进反向的Na+ Ca2+交换,导致胞内Ca2+超载。Ca2+超载引起心肌再灌注损伤、心律失常的发生和细胞高度挛缩甚至死亡。深入研究和探讨缺氧 复氧时Na+ Ca2+交换导致心肌损伤的机理,对于研发临床用于心肌保护的药物有重大意义和广阔前景。 展开更多

关键词 缺氧-复氧 Na^+-Ca^2+交换 CA^2+超载

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硫化氢后处理对大鼠缺氧-复氧心肌细胞的保护作用 被引量：1

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作者 付丽 喻田 +1 位作者 秦榜勇 程翅 《临床麻醉学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期896-900,共5页

目的探讨硫化氢(H2S)后处理对缺氧-复氧损伤成年大鼠心肌细胞的影响,评价其心肌保护作用及其可能的机制。方法分离成年SD大鼠心肌细胞,随机均分为四组:正常组(N组)、缺氧-复氧组(HR组)、缺氧后处理组(IPTC组)和H2S后处理组(S组),在激光... 目的探讨硫化氢(H2S)后处理对缺氧-复氧损伤成年大鼠心肌细胞的影响,评价其心肌保护作用及其可能的机制。方法分离成年SD大鼠心肌细胞,随机均分为四组:正常组(N组)、缺氧-复氧组(HR组)、缺氧后处理组(IPTC组)和H2S后处理组(S组),在激光扫描共聚焦显微镜下检测F-肌动蛋白/G-肌动蛋白荧光强度及Western blot技术检测各组心肌细胞p38MAPK磷酸化(p-p38MAPK)水平;再将上述四组又分为加或不加细胞松弛素D(CyD)两个亚组,激光扫描共聚焦显微镜下检测细胞内Ca2+、pH值荧光强度。结果 HR组、IPTC组和S组F/G-肌动蛋白明显高于N组(P<0.05);IPTC组和S组F/G-肌动蛋白明显高于HR组(P<0.05),且S组明显高于IPTC组(P<0.05)。与无CyD处理比较,CyD处理时四组Ca2+荧光强度明显升高(P<0.05);N组与HR组pH荧光强度升高,IPTC组与S组pH荧光强度降低。无CyD处理时N组、IPTC组和S组Ca2+荧光强度明显低于、pH值荧光强度明显高于HR组(P<0.05);CyD处理后HR组、IPTC组和S组Ca2+荧光强度明显高于,IPTC组和S组pH值荧光强度明显低于N组(P<0.05)。心肌细胞内HR组p-p38MAPK水平明显高于N组、IPTC组和S组(P<0.05)。结论硫化氢后处理可以促进F-肌动蛋白的重塑,稳定缺血缺氧成年大鼠心肌细胞内环境;硫化氢后处理可降低缺血缺氧成年大鼠心肌细胞p38MAPK磷酸化水平。 展开更多

关键词 硫化氢 缺氧-复氧 肌动蛋白 钙超载 P38MAPK 磷酸化

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内质网应激在高糖培养加重神经细胞缺氧-复氧损伤中的作用 被引量：1

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作者 林慕雅 陈立建 +3 位作者 凌军 耿兴强 谢秀秀 都建 《临床麻醉学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期583-586,共4页

目的研究内质网应激在高糖培养加重神经细胞缺氧-复氧损伤中的作用。方法在含10%胎牛血清的DMEM/F12培养基中培养小鼠神经瘤母细胞N2a,按照接种密度每毫升105个将细胞接种于培养板中。采用随机数字分组法将细胞分为四组:正常糖对照组(NC... 目的研究内质网应激在高糖培养加重神经细胞缺氧-复氧损伤中的作用。方法在含10%胎牛血清的DMEM/F12培养基中培养小鼠神经瘤母细胞N2a,按照接种密度每毫升105个将细胞接种于培养板中。采用随机数字分组法将细胞分为四组:正常糖对照组(NC组)、正常糖缺氧-复氧组(NH组)、高糖对照组(HC组)、高糖缺氧-复氧组(HH组)。待细胞贴壁后,将DMEM/F12培养基更换为高糖培养基,孵育48h,造高糖孵育模型。在缺氧小室中缺氧3h后,再转入正常氧孵育箱中复氧2h,造缺氧-复氧损伤模型。NC组未作处理;NH组行缺氧-复氧处理;HC组行高糖孵育处理;HH组先行高糖孵育48h后,再作缺氧-复氧处理。采用CCK-8法检测细胞活力,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Western blot法检测细胞GRP78、CHOP蛋白含量。结果与NC组和HC组比较,NH组和HH组细胞活力明显减弱,凋亡率明显升高,GRP78、CHOP蛋白含量明显增多(P<0.01);与NH组比较,HH组细胞活力明显减弱,凋亡率明显升高,GRP78、CHOP蛋白含量明显增多(P<0.05)。结论高糖培养加重神经细胞缺氧-复氧损伤,可能与内质网应激标志性蛋白GRP78蛋白含量增多和促凋亡转录因子CHOP介导的细胞凋亡相关。 展开更多

关键词 高糖 缺氧-复氧损伤 内质网应激 凋亡

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七氟醚处理后的低温缺氧-复氧心脏成纤维细胞培养液对心肌细胞的影响 被引量：9

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作者 牛振瑛 王贵龙 +4 位作者 高鸿 冯玉蓉 刘艳秋 何幼芹 曹莹 《临床麻醉学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期78-81,共4页

目的观察七氟醚对低温缺氧-复氧心脏成纤维细胞(CFs)培养液中心肌细胞搏动及缝隙连接蛋白43(Cx43)表达的影响。方法培养4 d的正常原代CFs随机分为三组:对照组(C组)、缺氧-复氧损伤组(IR组)和七氟醚组(Sev组),每组约5×10^5个细胞。C... 目的观察七氟醚对低温缺氧-复氧心脏成纤维细胞(CFs)培养液中心肌细胞搏动及缝隙连接蛋白43(Cx43)表达的影响。方法培养4 d的正常原代CFs随机分为三组:对照组(C组)、缺氧-复氧损伤组(IR组)和七氟醚组(Sev组),每组约5×10^5个细胞。C组CFs持续培养5 h;IR组和Sev组CFs低温缺氧1 h(4℃,95%N 2+5%CO2),复氧(37℃,5%CO2+95%空气)4 h,Sev组复氧过程中加入含2.5%七氟醚的培养液培养。培养结束时分别收集各组培养液,加入正常心肌细胞培养16 h。免疫细胞化学SP染色法鉴定CFs与心肌细胞;HE染色观察CFs与心肌细胞形态;磁带式录像机观察并记录心肌细胞搏动频率;台盼蓝染色法测心肌细胞死亡率;Western blot法测定Cx43蛋白及p-Cx43蛋白相对含量。结果与C组比较,IR组心肌细胞搏动频率明显减慢,IR组和Sev组心肌细胞死亡率明显升高,Cx43蛋白和p-Cx43蛋白相对含量明显降低(P<0.05)。与IR组比较,Sev组心肌细胞搏动频率明显加快,心肌细胞死亡率明显降低,Cx43蛋白和p-Cx43蛋白相对含量明显升高(P<0.05)。结论七氟醚可加快低温缺氧-复氧CFs培养液中心肌细胞搏动频率,上调Cx43和p-Cx43蛋白表达,降低心肌细胞死亡率,增强心肌细胞活性。 展开更多

关键词 七氟醚 缺氧-复氧损伤 成纤维细胞 心肌细胞 缝隙连接蛋白43

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参麦注射液通过下调miR-106a保护肾小管上皮细胞NRK-52E缺氧-复氧损伤的分子机制 被引量：4

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作者 黄真珍 王培琦 +1 位作者 李冰 李晓媛 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2021年第5期476-481,共6页

目的参麦注射液已被证实对心肌细胞缺血再灌注(I/R)损伤具有保护作用,但其对肾I/R损伤的保护作用并不明确。文章旨在探讨参麦注射液对肾小管上皮细胞NRK-52E缺氧-复氧损伤的的影响和可能分子机制。方法构建NRK-52E细胞缺氧复氧模型模拟... 目的参麦注射液已被证实对心肌细胞缺血再灌注(I/R)损伤具有保护作用,但其对肾I/R损伤的保护作用并不明确。文章旨在探讨参麦注射液对肾小管上皮细胞NRK-52E缺氧-复氧损伤的的影响和可能分子机制。方法构建NRK-52E细胞缺氧复氧模型模拟肾I/R损伤过程。根据干预方法不同,将NRK-52E细胞分为正常对照组、I/R组(缺氧6 h-复氧24 h)、参麦+I/R组(参麦注射液处理30 min,缺氧6 h-复氧24 h)、miR-NC+I/R组(转染miR-NC,缺氧6 h-复氧24 h)、miR-106a+I/R组(转染miR-106a模拟物,缺氧6 h-复氧24 h)、anti-miR-NC+I/R组(转染anti-miR-NC,缺氧6 h-复氧24 h)、anti-miR-106a+I/R组(转染anti-miR-106a,缺氧6 h-复氧24 h)、参麦+miR-NC+I/R组(转染miR-NC,参麦注射液处理30 min,缺氧6 h-复氧24 h)、参麦+miR-106a+I/R组(转染miR-106a模拟物,参麦注射液处理30 min,缺氧6 h-复氧24 h)。细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-106a的表达水平,Western blot法检测磷脂酰肌醇-3-羟激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)蛋白表达。结果与正常对照组Ki67蛋白(0.76±0.07)、细胞活性(0.83±0.05)比较,I/R组(0.33±0.02、0.35±0.02)显著降低(P<0.05),与正常对照组Cleaved-caspase-3蛋白表达(0.42±0.04)、凋亡率[(5.06±0.32)%]比较,I/R组[(0.86±0.07、(16.11±1.01)%]显著升高(P<0.05);与I/R组Ki67蛋白、细胞活性比较,参麦+I/R组(0.70±0.07、0.77±0.06)明显升高,与I/R组Cleaved-caspase-3蛋白表达、凋亡率比较,参麦+I/R组(0.54±0.04、7.24±0.53)明显降低(P<0.05)。I/R组NRK-52E细胞miR-106a的表达水平(3.27±0.25)较正常对照组(1.00±0.08)和参麦+I/R组(1.53±0.08)显著升高(P<0.05)。与miR-NC+I/R组比较,miR-106a+I/R组NRK-52E细胞miR-106a的表达水平显著升高,细胞活性、Ki67蛋白表达显著降低,细胞凋亡率、Cleaved-caspase-3蛋白表达显著升高(P<0.05);与anti-miR-NC+I/R组比较,anti-miR-106a+I/R组NRK-52E细胞miR-106a的表达水平显著降低,细胞活性、Ki67蛋白表达显著升高,细胞凋亡率、Cleaved-caspase-3蛋白表达显著降低(P<0.05)。与参麦+miR-NC+I/R组比较,参麦+miR-106a+I/R组NRK-52E细胞miR-106a表达显著升高,细胞活性、Ki67蛋白表达显著降低,细胞凋亡率、Cleaved-caspase-3蛋白表达显著升高(P<0.05)。与正常对照组比较,I/R组NRK-52E细胞p-PI3K、p-AKT蛋白表达水平显著降低(P<0.05);与I/R组比较,参麦+I/R组NRK-52E细胞p-PI3K、p-AKT蛋白表达水平显著升高(P<0.05);与参麦+miR-NC+I/R组比较,参麦+miR-106a+I/R组NRK-52E细胞p-PI3K、p-AKT蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。结论参麦注射液可促进细胞增殖,抑制细胞凋亡,保护肾小管上皮细胞NRK-52E缺氧-复氧损伤,其机制可能与抑制miR-106a表达进而激活PI3K/AKT信号通路有关。 展开更多

关键词 参麦注射液 肾小管上皮细胞 miR-106a 缺氧-复氧损伤

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瘦素对缺氧复氧L02肝细胞凋亡及Fas／FasL表达的影响 被引量：4

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作者 周少丽 魏涧琦 +2 位作者 李晓芸 黑子清 陈规划 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期1147-1150,共4页

目的:观察瘦素(leptin)对缺氧复氧人正常肝细胞(L02)凋亡的影响。方法:将L02细胞分别分为正常对照组、单纯缺氧12 h复氧组(IR组)和缺氧12 h复氧加不同浓度的瘦素(分别为100μg/L、200μg/L、400μg/L、800μg/L和1 600μg/L)干预组,以... 目的:观察瘦素(leptin)对缺氧复氧人正常肝细胞(L02)凋亡的影响。方法:将L02细胞分别分为正常对照组、单纯缺氧12 h复氧组(IR组)和缺氧12 h复氧加不同浓度的瘦素(分别为100μg/L、200μg/L、400μg/L、800μg/L和1 600μg/L)干预组,以流式细胞仪分析、DNA缺口末端标记(TUNEL)试验、荧光定量PCR等方法观察leptin对L02肝细胞凋亡、Fas/FasLmRNA表达的影响。结果:(1)与正常对照组相比,IR组细胞凋亡率和TUNEL细胞阳性率增加(P<0.01),加用不同浓度瘦素干预组的细胞凋亡率和TUNEL细胞阳性率与IR组相比明显下降(P<0.05);(2)与正常对照组相比,IR组L02细胞中Fas/FasLmRNA表达明显上调(P<0.01);加用不同浓度瘦素干预组与IR组相比,Fas/FasLmRNA表达下降,以400μg/L瘦素作用明显,结果有显著差异(P<0.05)。结论:瘦素能减轻缺氧复氧培养L02肝细胞的凋亡,其机制可能与其下调细胞中Fas/FasLmRNA的表达有关。 展开更多

关键词 细胞凋亡 肝 缺氧-复氧 L02细胞 瘦素 FAS/FASL

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LO2细胞不同缺氧复氧时间细胞存活率检测及瘦素的影响 被引量：2

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作者 周少丽 池信锦 +2 位作者 关键强 黑子清 郭娜 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第S2期18-19,40,共3页

【目的】复制肝细胞缺血缺氧模型和瘦素对它的影响。【方法】将LO2细胞分别缺氧2h、4h、8h和12h和正常组,后用CCK-8检测各组细胞的A490值,与正常组比较算出细胞的存活率。并用不同浓度的瘦素(分别为100μg/L、200μg/L、400μg/L、800μ... 【目的】复制肝细胞缺血缺氧模型和瘦素对它的影响。【方法】将LO2细胞分别缺氧2h、4h、8h和12h和正常组,后用CCK-8检测各组细胞的A490值,与正常组比较算出细胞的存活率。并用不同浓度的瘦素(分别为100μg/L、200μg/L、400μg/L、800μg/L和1600μg/L)加入缺氧12h的LO2细胞,观察瘦素对其细胞存活率的影响。【结果】LO2细胞经厌氧培养后,缺氧2h、4h、8h和12h细胞CCK-8A490值显著低于缺氧正常组平均值(P<0.01),随着缺氧时间的延长,A490值、细胞存活率逐渐下降;经厌氧培养后的LO2细胞与正常组相比,细胞CCK-8A490值显著低于对照组(P<0.01),不同浓度的LEP能减轻厌氧培养的LO2细胞损伤,A490值、细胞存活增高。【结论】采用厌氧气体培养LO2细胞复制肝脏缺血模型是可行的;瘦素对经厌氧培养后的LO2细胞有保护作用。 展开更多

关键词 缺氧-复氧 LO2细胞 存活率 瘦素

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银杏叶提取物对体外培养大鼠皮层神经干细胞缺糖缺氧/复糖复氧损伤的保护作用 被引量：2

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作者 高洪泉 王英 张爱清 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期491-497,共7页

目的:探讨银杏叶提取物(ginkgo biloba extract,GBE)对缺糖缺氧-复糖复氧损伤新生大鼠皮层神经干细胞(neural stem cells,NSCs)的保护作用及其机制。方法:采用无血清法培养新生大鼠皮层NSCs,对NSCs进行缺糖-缺氧结合复糖-复氧处理。实... 目的:探讨银杏叶提取物(ginkgo biloba extract,GBE)对缺糖缺氧-复糖复氧损伤新生大鼠皮层神经干细胞(neural stem cells,NSCs)的保护作用及其机制。方法:采用无血清法培养新生大鼠皮层NSCs,对NSCs进行缺糖-缺氧结合复糖-复氧处理。实验分为对照组、缺糖-缺氧结合复糖-复氧组和GBE组,MTT法检测细胞活性,DAPI染色检测原代培养细胞的凋亡,比色法测定乳酸脱氢酶(LDH)漏出率,流式细胞仪检测传代细胞的凋亡率,免疫荧光染色观察细胞的增殖分化的能力。结果:与缺糖缺氧-复糖复氧组相比,GBE明显提高了细胞的活性、存活率(P<0.05),同时降低了LDH漏出率和凋亡率(P<0.01)。DAPI染色显示:GBE可明显逆转缺糖缺氧导致的细胞凋亡。免疫荧光双标显示:与对照组相比,缺糖缺氧-复糖复氧组明显抑制了细胞Nestin/BrdU和Nestin/Tuj-1的表达;而与缺糖缺氧-复糖复氧组相比,GBE可显著促进细胞Nestin/BrdU和Nestin/Tuj-1的表达。结论:GBE能够增强皮层NSCs活性,减少细胞凋亡,促进细胞增殖、分化。提示GBE能够通过有效调节NSCs凋亡相关基因和促进细胞增殖与分化,进而对缺糖缺氧-复糖复氧损伤皮层NSCs起到保护作用。 展开更多

关键词 神经干细胞 皮层 银杏叶提取物 缺糖缺氧-复糖复氧 大鼠

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地氟醚、七氟醚和异氟醚预处理对缺氧复氧心肌细胞内游离Ca^(2+)的影响 被引量：1

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作者 彭章龙 杭燕南 孙大金 《临床麻醉学杂志》 CAS CSCD 2002年第12期650-652,共3页

目的　观察地氟醚、七氟醚和异氟醚预处理对缺氧 复氧心肌细胞内Ca2 + 的影响。方法　将原代培养乳鼠心肌细胞随机分为对照、缺氧 复氧及 1 5MAC地氟醚、七氟醚和异氟醚预处理后缺氧 复氧五组。用Fra 2标记细胞内Ca2 + ,荧光光度计进... 目的　观察地氟醚、七氟醚和异氟醚预处理对缺氧 复氧心肌细胞内Ca2 + 的影响。方法　将原代培养乳鼠心肌细胞随机分为对照、缺氧 复氧及 1 5MAC地氟醚、七氟醚和异氟醚预处理后缺氧 复氧五组。用Fra 2标记细胞内Ca2 + ,荧光光度计进行测定。结果　与对照组比 ,复氧 2 0分钟时 ,其余四组细胞内Ca2 + 均显著升高 ;而地氟醚、七氟醚和异氟醚预处理组的升高幅度明显低于缺氧 复氧组 ;三个吸入麻醉药组间无差异。复氧 6 0分钟 ,缺氧 复氧组虽有明显下降 ,但仍显著高于对照组 ,地氟醚、七氟醚和异氟醚预处理组则降至对照组水平。结论　地氟醚、七氟醚和异氟醚预处理 ,可明显减轻缺氧 复氧心肌引起的细胞内游离Ca2 + 展开更多

关键词 地氟醚 七氟醚 异氟醚 挥发性麻醉药 预处理 缺氧-复氧 心肌细胞 Ca^2+ 钙离子 心肌保护 吸入麻醉药

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瘦素对缺氧复氧培养L02肝细胞功能和氧化产物的影响

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作者 周少丽 郭娜 +2 位作者 葛缅 黑子清 陈规划 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期527-531,共5页

【目的】观察瘦素对缺氧复氧人肝脏细胞(L02)的肝功能保护和丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)的影响。【方法】将L02细胞分别分为正常对照组、单纯缺氧12h复氧组和缺氧12h复氧加不同浓度的瘦素(分别为100、200、400、800和1600μg/L)... 【目的】观察瘦素对缺氧复氧人肝脏细胞(L02)的肝功能保护和丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)的影响。【方法】将L02细胞分别分为正常对照组、单纯缺氧12h复氧组和缺氧12h复氧加不同浓度的瘦素(分别为100、200、400、800和1600μg/L)干预组,取细胞上清液检测谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、MDA的浓度和SOD活性;电镜检测细胞凋亡的形态学改变。【结果】①与正常对照组相比,L02细胞经缺氧12h复氧培养后,ALT和AST浓度明显升高(P<0.01),加用不同浓度瘦素干预组ALT和AST浓度较单纯缺氧12h复氧组下降(P<0.01);②与正常对照组相比,L02细胞经缺氧12h复氧培养后,MDA浓度明显升高(P<0.05),SOD活性下降(P<0.05),加用不同浓度瘦素干预组MDA浓度较单纯缺氧12h复氧组下降(P<0.05);SOD活性上升(P<0.05);③电镜检测单纯缺氧复氧后细胞呈现明显凋亡形态学改变,加用瘦素100μg/L处理细胞组细胞仅轻度改变。【结论】瘦素对缺氧复氧培养导致L02肝细胞的细胞损伤有一定的保护作用;可能与瘦素抑制氧自由基生成,减少脂质过氧化有关。 展开更多

关键词 缺氧-复氧 L02细胞 肝功能 瘦素 超氧化物歧化酶 丙二醛

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