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烫伤诱导大鼠心肌细胞缺氧诱导因子-1α定位表达的研究 被引量:2
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作者 党永明 黄跃生 陈丽峰 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第18期1602-1605,共4页
目的 探讨 40 %Ⅲ度烫伤大鼠早期心肌组织中缺氧诱导因子 1α(HIF 1α)的蛋白表达的变化规律及其定位分布意义。方法 采用 40 %TBSAⅢ度烫伤大鼠模型 ,蛋白免疫印迹法 (Western blot)测定HIF 1α蛋白水平表达 ,免疫组化法定位显示HI... 目的 探讨 40 %Ⅲ度烫伤大鼠早期心肌组织中缺氧诱导因子 1α(HIF 1α)的蛋白表达的变化规律及其定位分布意义。方法 采用 40 %TBSAⅢ度烫伤大鼠模型 ,蛋白免疫印迹法 (Western blot)测定HIF 1α蛋白水平表达 ,免疫组化法定位显示HIF 1α表达。结果 烫伤后大鼠心肌组织内HIF 1α蛋白表达量明显升高。左、右心室HIF 1α蛋白表达不同 ,HIF 1α蛋白表达增加主要定位于细胞核。结论 严重烧伤可以诱导心肌组织HIF 1α蛋白表达增加。左心室对照组HIF 1蛋白含量明显高于右心室。HIF 1α蛋白表达增加主要分布于心肌细胞核内 ,诱导下游因子表达。 展开更多
关键词 烧伤 心肌缺血 缺氧诱导因子—1α 免疫印迹 免疫组化
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人HIF1α基因重组逆转录病毒载体构建及鉴定 被引量:4
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作者 段小军 杨柳 +3 位作者 董世武 周跃 唐康来 胡鸢 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第18期1639-1642,共4页
目的 构建人缺氧诱导因子 1α(HIF 1α)基因重组逆转录病毒载体 ,并观察其对NIH3T3细胞感染效率。方法 采用基因工程技术 ,经过 2次亚克隆将HIF 1α基因片段克隆至含IRES EGFP逆转录病毒载体上 ,鉴定后用脂质体法转染PT67细胞进行包... 目的 构建人缺氧诱导因子 1α(HIF 1α)基因重组逆转录病毒载体 ,并观察其对NIH3T3细胞感染效率。方法 采用基因工程技术 ,经过 2次亚克隆将HIF 1α基因片段克隆至含IRES EGFP逆转录病毒载体上 ,鉴定后用脂质体法转染PT67细胞进行包装、扩增 ,最后用重组逆转录病毒感染NIH3T3细胞。其中采用PCR方法对重组载体进行鉴定 ,利用绿色荧光蛋白作为报告基因 ,对病毒滴度和感染效率进行检测。结果 酶切鉴定及PCR结果与HIF 1α基因重组逆转录病毒载体的预期结果一致 ,病毒滴度达 ( 1 4× 10 6pfu/ml) ,并对NIH3T3细胞有强感染能力。结论 应用基因工程技术 ,成功构建了含人HIF 1α基因重组逆转录病毒载体 。 展开更多
关键词 逆转录病毒 缺氧诱导因子—1 基因克隆
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