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加减驻景方含药血清对缺氧状态下大鼠脉络膜血管内皮细胞增生的抑制作用
被引量：
3
1
作者
刘彦江
亢泽峰
+1 位作者
邢凯
刘健
《中华实验眼科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第12期1065-1071,共7页
背景黄斑区脉络膜新生血管（CNV）是致盲率较高的眼病之一，以往的主要治疗方法是光动力学疗法和玻璃体腔抗血管内皮生长因子（VEGF）药物注射，但均存在一定的不良反应。研究认为，加减驻景方的应用对相关病变有治疗效果。目的探讨加...
背景黄斑区脉络膜新生血管（CNV）是致盲率较高的眼病之一，以往的主要治疗方法是光动力学疗法和玻璃体腔抗血管内皮生长因子（VEGF）药物注射，但均存在一定的不良反应。研究认为，加减驻景方的应用对相关病变有治疗效果。目的探讨加减驻景方含药血清对缺氧状态下大鼠脉络膜血管内皮细胞（RCVECs）增生的影响。方法10只SD大鼠给予0．525g／ml加减驻景方药液20ml／kg灌胃3d，于末次给药后2h无菌条件下采集腹主动脉血，制备加减驻景方含药血清。将培养的RCVECs分为4个组，空白对照组细胞用常规培养液进行培养，氯化钴组在培养液中添加100μmol／L氯化钴100μl以制备细胞缺氧模型，空白血清＋氯化钴组在缺氧细胞培养液中添加体积分数20％空白血清，含药血清＋氯化钻组在缺氧细胞培养液中添加体积分数20％含药血清。细胞培养后24h采用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测各组细胞的增生情况；采用逆转录PCR和Western blot技术检测各组细胞中缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）基因和蛋白的相对表达量。结果培养的RCVECs生长良好，呈梭形。100μmol／L氯化钴作用后成功建立了缺氧细胞模型。MTT法检测显示，空白对照组、氯化钴组、含药血清＋氯化钴组和空白血清＋氯化钴组吸光度（A）值分别为0．659±0．051、0．757±0．553、0．683±0．037和0．731±0．038，其中氯化钴组A值明显高于空白对照组和含药血清＋氯化钴组，差异均有统计学意义（均P〈0．01）。空白对照组、氯化钴组、含药血清＋氯化钴组和空白血清＋氯化钻组细胞中HIF-1α mRNA和VEGF mRNA及其蛋白的相对表达量总体比较，差异均有统计学意义（HIF-1α mRNA：F=3．100，P〈0．05；VEGF mRNA：F=3．420，P〈0．05；HIF-1α蛋白：F=470．600，P=0．000；VEGF蛋白：F=146．700，P=0．000），其中氯化钴组细胞中HIF-1α mRNA、VEGFmRNA及其蛋白的相对表达量均明显高于空白对照组和含药血清＋氯化钴组，差异均有统计学意义（均P〈0．05）。结论加减驻景方含药血清可能通过抑制RCVECs分泌HIF-1α和VEGF的机制而抑制缺氧状态下RCVECs的增生。
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关键词
缺氧/化学诱导
脉络膜血管内皮细胞
中草药
SD大鼠
含药血清
加减驻景方
细胞培养
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职称材料
题名
加减驻景方含药血清对缺氧状态下大鼠脉络膜血管内皮细胞增生的抑制作用
被引量：
3
1
作者
刘彦江
亢泽峰
邢凯
刘健
机构
宜川县人民医院眼科
中国中医科学院眼科医院门诊眼科
北京市昌平区中医医院眼科
出处
《中华实验眼科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第12期1065-1071,共7页
基金
国家自然科学基金项目（81574032）
文摘
背景黄斑区脉络膜新生血管（CNV）是致盲率较高的眼病之一，以往的主要治疗方法是光动力学疗法和玻璃体腔抗血管内皮生长因子（VEGF）药物注射，但均存在一定的不良反应。研究认为，加减驻景方的应用对相关病变有治疗效果。目的探讨加减驻景方含药血清对缺氧状态下大鼠脉络膜血管内皮细胞（RCVECs）增生的影响。方法10只SD大鼠给予0．525g／ml加减驻景方药液20ml／kg灌胃3d，于末次给药后2h无菌条件下采集腹主动脉血，制备加减驻景方含药血清。将培养的RCVECs分为4个组，空白对照组细胞用常规培养液进行培养，氯化钴组在培养液中添加100μmol／L氯化钴100μl以制备细胞缺氧模型，空白血清＋氯化钴组在缺氧细胞培养液中添加体积分数20％空白血清，含药血清＋氯化钻组在缺氧细胞培养液中添加体积分数20％含药血清。细胞培养后24h采用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测各组细胞的增生情况；采用逆转录PCR和Western blot技术检测各组细胞中缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）基因和蛋白的相对表达量。结果培养的RCVECs生长良好，呈梭形。100μmol／L氯化钴作用后成功建立了缺氧细胞模型。MTT法检测显示，空白对照组、氯化钴组、含药血清＋氯化钴组和空白血清＋氯化钴组吸光度（A）值分别为0．659±0．051、0．757±0．553、0．683±0．037和0．731±0．038，其中氯化钴组A值明显高于空白对照组和含药血清＋氯化钴组，差异均有统计学意义（均P〈0．01）。空白对照组、氯化钴组、含药血清＋氯化钴组和空白血清＋氯化钻组细胞中HIF-1α mRNA和VEGF mRNA及其蛋白的相对表达量总体比较，差异均有统计学意义（HIF-1α mRNA：F=3．100，P〈0．05；VEGF mRNA：F=3．420，P〈0．05；HIF-1α蛋白：F=470．600，P=0．000；VEGF蛋白：F=146．700，P=0．000），其中氯化钴组细胞中HIF-1α mRNA、VEGFmRNA及其蛋白的相对表达量均明显高于空白对照组和含药血清＋氯化钴组，差异均有统计学意义（均P〈0．05）。结论加减驻景方含药血清可能通过抑制RCVECs分泌HIF-1α和VEGF的机制而抑制缺氧状态下RCVECs的增生。
关键词
缺氧/化学诱导
脉络膜血管内皮细胞
中草药
SD大鼠
含药血清
加减驻景方
细胞培养
Keywords
Hypoxia/chemistry-induced
Choroidal vascular endothelial cells
Chinese herbal medicine
Rats, Sprague-Dawley
Drug serum
Jiajianzhujing decoction
Cultured, cells
分类号
R285.5 [医药卫生—中药学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
加减驻景方含药血清对缺氧状态下大鼠脉络膜血管内皮细胞增生的抑制作用
刘彦江
亢泽峰
邢凯
刘健
《中华实验眼科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2016
3
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