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缬氨酸转氨酶固定化细胞的制备 被引量:2
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作者 张飞 刘寅 +2 位作者 魏涛 杨雪鹏 钟桂芳 《中国调味品》 CAS 北大核心 2014年第8期9-11,15,共4页
考察了海藻酸钠法制备缬氨酸转氨酶固定化细胞的制备条件,以及该固定化细胞的操作稳定性。正交试验结果显示:固定化细胞制备条件为海藻酸钠浓度30g/L、交联剂戊二醛浓度1.5%(V/V)、菌体负载量40g/L、固定化时间4h。该固定化细胞连续使... 考察了海藻酸钠法制备缬氨酸转氨酶固定化细胞的制备条件,以及该固定化细胞的操作稳定性。正交试验结果显示:固定化细胞制备条件为海藻酸钠浓度30g/L、交联剂戊二醛浓度1.5%(V/V)、菌体负载量40g/L、固定化时间4h。该固定化细胞连续使用10次,底物平均转化率为15.48%,显示了较好的稳定性。 展开更多
关键词 缬氨酸转氨酶 海藻酸钠 固定化细胞
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缬氨酸转氨酶基因原核表达载体构建及表达 被引量:1
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作者 张飞 魏涛 +1 位作者 刘寅 何培新 《郑州轻工业学院学报(自然科学版)》 CAS 2013年第1期7-10,共4页
构建了具有缬氨酸转氨酶基因的大肠杆菌工程菌,对该酶表达条件进行了优化.PCR结果表明,扩增出一特异DNA条带且长度与avtA基因长度1 254 bp符合.通过纸层析检测,筛选到了阳性克隆,但是酶活偏低.SDS-PAGE凝胶电泳显示目的蛋白表达量较低.... 构建了具有缬氨酸转氨酶基因的大肠杆菌工程菌,对该酶表达条件进行了优化.PCR结果表明,扩增出一特异DNA条带且长度与avtA基因长度1 254 bp符合.通过纸层析检测,筛选到了阳性克隆,但是酶活偏低.SDS-PAGE凝胶电泳显示目的蛋白表达量较低.酶表达优化结果显示:蛋白胨浓度12 g/L,IPTG浓度0.4 mmol/L,经过8 h诱导,酶活达到最大值. 展开更多
关键词 缬氨酸转氨酶 大肠杆菌 基因克隆 蛋白表达
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缬氨酸转氨酶工程菌的构建及表达条件的优化
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作者 纪铁鹏 王海峰 《安徽农业科学》 CAS 2012年第1期24-26,共3页
[目的]构建缬氨酸转氨酶基因(avtA)的大肠杆菌工程菌,并优化其表达条件。[方法]将avtA基因插入到载体pET32a中,构建表达质粒pET32a-avtA,通过纸层析检测酶活性,SDS-PAGE凝胶电泳检测目的蛋白,并通过考察培养基中蛋白胨浓度、IPTG诱导浓... [目的]构建缬氨酸转氨酶基因(avtA)的大肠杆菌工程菌,并优化其表达条件。[方法]将avtA基因插入到载体pET32a中,构建表达质粒pET32a-avtA,通过纸层析检测酶活性,SDS-PAGE凝胶电泳检测目的蛋白,并通过考察培养基中蛋白胨浓度、IPTG诱导浓度和诱导时间来优化其表达条件。[结果]成功构建了缬氨酸转氨酶基因的大肠杆菌工程菌,其最佳表达条件为:培养基中蛋白胨浓度为12g/L,IPTG浓度为0.4 mmol/L,诱导时间为8 h。[结论]缬氨酸转氨酶工程菌具有良好的应用前景。 展开更多
关键词 缬氨酸转氨酶 酶活性 表达
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