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小鼠OX40稳定表达细胞株的构建及其对B细胞促分化作用的研究
被引量：
2
1
作者
原江水
冯永堂
+4 位作者
王菲
宫伟雁
邸大琳
任杰
苗乃法
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第6期767-770,共4页
目的:构建稳定表达小鼠OX40的细胞株HUVEC,并探讨其对B细胞的促增殖作用。方法:从ConA活化的小鼠胸腺淋巴细胞中提取总RNA,应用RT-PCR法扩增小鼠OX40的cDNA,并将其克隆到pUCm-T载体中,经PCR、酶切和测序分析,进而构建pIRES2-EGFP-OX40...
目的:构建稳定表达小鼠OX40的细胞株HUVEC,并探讨其对B细胞的促增殖作用。方法:从ConA活化的小鼠胸腺淋巴细胞中提取总RNA,应用RT-PCR法扩增小鼠OX40的cDNA,并将其克隆到pUCm-T载体中,经PCR、酶切和测序分析,进而构建pIRES2-EGFP-OX40重组真核表达载体。以脂质体法转染HUVEC,经G418筛选后,用流式细胞术检测OX40分子的表达。采用3H-TdR掺入法,研究OX40信号对体外培养的B细胞的促分化作用。结果:构建了OX40基因的真核表达载体。经PCR、酶切和测序证实,插入的目的片段与GenBank登录的小鼠OX40cDNA序列完全一致。用G418筛选后,获得能稳定表达小鼠OX40蛋白的HUVEC细胞。3H-TdR掺入法结果显示,小鼠OX40稳定表达的细胞HUVEC对体外培养的B细胞具有促增殖、分化的作用。OX40/OX40L信号与CD40/CD40L信号具有协同作用。结论:成功地构建小鼠OX40稳定表达地细胞,OX40对B细胞具有促增殖、分化作用。
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关键词
OX40
绿荧光蛋白表达载体
稳定
表达
增殖
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职称材料
题名
小鼠OX40稳定表达细胞株的构建及其对B细胞促分化作用的研究
被引量：
2
1
作者
原江水
冯永堂
王菲
宫伟雁
邸大琳
任杰
苗乃法
机构
潍坊医学院分子免疫学实验室
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第6期767-770,共4页
文摘
目的:构建稳定表达小鼠OX40的细胞株HUVEC,并探讨其对B细胞的促增殖作用。方法:从ConA活化的小鼠胸腺淋巴细胞中提取总RNA,应用RT-PCR法扩增小鼠OX40的cDNA,并将其克隆到pUCm-T载体中,经PCR、酶切和测序分析,进而构建pIRES2-EGFP-OX40重组真核表达载体。以脂质体法转染HUVEC,经G418筛选后,用流式细胞术检测OX40分子的表达。采用3H-TdR掺入法,研究OX40信号对体外培养的B细胞的促分化作用。结果:构建了OX40基因的真核表达载体。经PCR、酶切和测序证实,插入的目的片段与GenBank登录的小鼠OX40cDNA序列完全一致。用G418筛选后,获得能稳定表达小鼠OX40蛋白的HUVEC细胞。3H-TdR掺入法结果显示,小鼠OX40稳定表达的细胞HUVEC对体外培养的B细胞具有促增殖、分化的作用。OX40/OX40L信号与CD40/CD40L信号具有协同作用。结论:成功地构建小鼠OX40稳定表达地细胞,OX40对B细胞具有促增殖、分化作用。
关键词
OX40
绿荧光蛋白表达载体
稳定
表达
增殖
Keywords
OX40
pIRES2-EGFP vector
expression
proliferation
分类号
R392.11 [医药卫生—免疫学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
小鼠OX40稳定表达细胞株的构建及其对B细胞促分化作用的研究
原江水
冯永堂
王菲
宫伟雁
邸大琳
任杰
苗乃法
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2005
2
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