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绿脓杆菌PA-SD-1株外毒素AⅢ区基因的克隆及序列分析
被引量:
3
1
作者
李雅林
牛钟相
+1 位作者
姜世金
常维山
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第5期338-340,共3页
利用PCR技术 ,以绿脓杆菌羊分离株 (暂命名为PA_SD_1株 )的染色体DNA为模板 ,成功扩增出了该菌的主要致病基因 (绿脓杆菌外毒素A)Ⅲ区基因。将该PCR扩增片段与pGEMR_TEasy载体连接 ,获得了含有目的片段的重组质粒 (命名为PA_SD_ETA)。...
利用PCR技术 ,以绿脓杆菌羊分离株 (暂命名为PA_SD_1株 )的染色体DNA为模板 ,成功扩增出了该菌的主要致病基因 (绿脓杆菌外毒素A)Ⅲ区基因。将该PCR扩增片段与pGEMR_TEasy载体连接 ,获得了含有目的片段的重组质粒 (命名为PA_SD_ETA)。序列测定结果表明。该菌株与其他已报道的绿脓杆菌菌株有较高的同源性 ,而局部出现单个碱基的点突变。
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关键词
羊
绿脓杆菌
PA-SD-1株
外毒素
AⅢ
区
基因
克隆
序列分析
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职称材料
F3-PE40基因的克隆、表达及纯化
被引量:
1
2
作者
朱海兵
黄轶
曾昭淳
《生物学杂志》
CAS
CSCD
2010年第4期49-52,共4页
通过质粒提取、PCR扩增构建F3-PE40表达载体转化大肠杆菌,然后进行表达纯化。以pEKH-F3质粒为模板,PCR扩增F3片段,将F3插入克隆质粒PQE80L,转化大肠杆菌,筛选获得含有F3的PQE80L重组载体。提取绿脓杆菌菌株染色体DNA为模板,PCR扩增绿脓...
通过质粒提取、PCR扩增构建F3-PE40表达载体转化大肠杆菌,然后进行表达纯化。以pEKH-F3质粒为模板,PCR扩增F3片段,将F3插入克隆质粒PQE80L,转化大肠杆菌,筛选获得含有F3的PQE80L重组载体。提取绿脓杆菌菌株染色体DNA为模板,PCR扩增绿脓杆菌外毒素A催化区(PE40)。然后将PQE80-F3和PE40重组,得到表达PQE80L-F3-PE40载体。转化至大肠杆菌DH5a,BL21,表达融合蛋白F3-PE40。大肠杆菌表达了融合蛋白F3-PE40,表达的融合蛋白量占菌体总体蛋白量的20%。成功地表达了融合蛋白F3-PE40,为进一步大规模表达、纯化F3-PE40功能奠定了基础。
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关键词
融合基因
克隆
表达
绿脓杆菌外毒素a催化区
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职称材料
题名
绿脓杆菌PA-SD-1株外毒素AⅢ区基因的克隆及序列分析
被引量:
3
1
作者
李雅林
牛钟相
姜世金
常维山
机构
山东农业大学动科院
出处
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第5期338-340,共3页
文摘
利用PCR技术 ,以绿脓杆菌羊分离株 (暂命名为PA_SD_1株 )的染色体DNA为模板 ,成功扩增出了该菌的主要致病基因 (绿脓杆菌外毒素A)Ⅲ区基因。将该PCR扩增片段与pGEMR_TEasy载体连接 ,获得了含有目的片段的重组质粒 (命名为PA_SD_ETA)。序列测定结果表明。该菌株与其他已报道的绿脓杆菌菌株有较高的同源性 ,而局部出现单个碱基的点突变。
关键词
羊
绿脓杆菌
PA-SD-1株
外毒素
AⅢ
区
基因
克隆
序列分析
Keywords
Pseudomonas aeruginosa Exotoxin A
Polymerase chain reaction
DomainⅢ gene
分类号
S858.26 [农业科学—临床兽医学]
Q785 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
F3-PE40基因的克隆、表达及纯化
被引量:
1
2
作者
朱海兵
黄轶
曾昭淳
机构
重庆医科大学生物化学及分子生物学教研室
出处
《生物学杂志》
CAS
CSCD
2010年第4期49-52,共4页
文摘
通过质粒提取、PCR扩增构建F3-PE40表达载体转化大肠杆菌,然后进行表达纯化。以pEKH-F3质粒为模板,PCR扩增F3片段,将F3插入克隆质粒PQE80L,转化大肠杆菌,筛选获得含有F3的PQE80L重组载体。提取绿脓杆菌菌株染色体DNA为模板,PCR扩增绿脓杆菌外毒素A催化区(PE40)。然后将PQE80-F3和PE40重组,得到表达PQE80L-F3-PE40载体。转化至大肠杆菌DH5a,BL21,表达融合蛋白F3-PE40。大肠杆菌表达了融合蛋白F3-PE40,表达的融合蛋白量占菌体总体蛋白量的20%。成功地表达了融合蛋白F3-PE40,为进一步大规模表达、纯化F3-PE40功能奠定了基础。
关键词
融合基因
克隆
表达
绿脓杆菌外毒素a催化区
Keywords
fusion gene
clone
expression
PE40
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
R73 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
绿脓杆菌PA-SD-1株外毒素AⅢ区基因的克隆及序列分析
李雅林
牛钟相
姜世金
常维山
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2002
3
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职称材料
2
F3-PE40基因的克隆、表达及纯化
朱海兵
黄轶
曾昭淳
《生物学杂志》
CAS
CSCD
2010
1
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职称材料
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