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绵羊种布鲁氏菌019株侵染绵羊巨噬细胞cDNA文库的构建
被引量：
1
1
作者
王远志
陈创夫
+5 位作者
盛金良
张辉
曹旭东
任艳
高剑峰
王端明
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第4期334-337,共4页
目的构建绵羊种布鲁氏菌019株侵染绵羊肺泡巨噬细胞的cDNA文库。培养绵羊肺泡巨噬细胞,用绵羊种布鲁氏菌019株侵染绵羊巨噬细胞,用试剂盒构建侵染后绵羊肺泡巨噬细胞的cDNA文库,并对文库中的部分克隆进行测序。结果表明,构建的绵羊种布...
目的构建绵羊种布鲁氏菌019株侵染绵羊肺泡巨噬细胞的cDNA文库。培养绵羊肺泡巨噬细胞,用绵羊种布鲁氏菌019株侵染绵羊巨噬细胞,用试剂盒构建侵染后绵羊肺泡巨噬细胞的cDNA文库,并对文库中的部分克隆进行测序。结果表明,构建的绵羊种布鲁氏菌019株侵染绵羊巨噬细胞cDNA文库达到建库要求;所测序列与牛的基因组编码序列同源性最高。在绵羊种布鲁氏菌019株侵染绵羊肺泡巨噬细胞过程中,以50∶1(细菌∶细胞)的个数比,侵染3.5h,能有效构建侵染后绵羊肺泡巨噬细胞的cDNA文库。
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关键词
绵羊种布鲁氏菌019株
绵羊
肺泡巨噬细胞
CDNA文库
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职称材料
利用荧光定量PCR检测B.ovis侵染巨噬细胞RAW264.7的相对数量
2
作者
葛阳春
王远志
+1 位作者
陈创夫
杜军伟
《石河子大学学报（自然科学版）》
CAS
2010年第6期703-707,共5页
为了探讨布鲁氏菌胞内寄生的机制,采用荧光定量PCR方法对进入巨噬细胞的布鲁氏菌的数量进行检测,克隆了绵羊种布鲁氏菌019株的16SrRNA基因和小鼠巨噬细胞RAW264.7的GAPDH基因。以16SrRNA基因和巨噬细胞GAPDH做为内参基因,将二者的比值...
为了探讨布鲁氏菌胞内寄生的机制,采用荧光定量PCR方法对进入巨噬细胞的布鲁氏菌的数量进行检测,克隆了绵羊种布鲁氏菌019株的16SrRNA基因和小鼠巨噬细胞RAW264.7的GAPDH基因。以16SrRNA基因和巨噬细胞GAPDH做为内参基因,将二者的比值作为检测布鲁氏菌进入巨噬细胞数量多少的指标,建立绵羊种布鲁氏菌019株侵染巨噬细胞不同阶段的感染模式。结果表明:在绵羊种布鲁氏菌019株侵染巨噬细胞15min～1h,16SrRNA与GAPDH的比值缓慢上升,侵染1～4h中,16SrRNA与GAPDH的比值急剧上升,说明在此阶段,细菌侵入细胞中的数量显著增多。
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关键词
绵羊种布鲁氏菌019株
巨噬细胞RAW264.7
荧光定量PCR
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职称材料
题名
绵羊种布鲁氏菌019株侵染绵羊巨噬细胞cDNA文库的构建
被引量：
1
1
作者
王远志
陈创夫
盛金良
张辉
曹旭东
任艳
高剑峰
王端明
机构
石河子大学医学院/新疆地方与民族高发病省部共建教育部重点实验室
出处
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第4期334-337,共4页
基金
国际科技合作项目(No.2006DFA33740)
国家自然科学基金项目(No.30760187)
973计划前期研究专项项目(No.2007CB116309)
文摘
目的构建绵羊种布鲁氏菌019株侵染绵羊肺泡巨噬细胞的cDNA文库。培养绵羊肺泡巨噬细胞,用绵羊种布鲁氏菌019株侵染绵羊巨噬细胞,用试剂盒构建侵染后绵羊肺泡巨噬细胞的cDNA文库,并对文库中的部分克隆进行测序。结果表明,构建的绵羊种布鲁氏菌019株侵染绵羊巨噬细胞cDNA文库达到建库要求;所测序列与牛的基因组编码序列同源性最高。在绵羊种布鲁氏菌019株侵染绵羊肺泡巨噬细胞过程中,以50∶1(细菌∶细胞)的个数比,侵染3.5h,能有效构建侵染后绵羊肺泡巨噬细胞的cDNA文库。
关键词
绵羊种布鲁氏菌019株
绵羊
肺泡巨噬细胞
CDNA文库
Keywords
Brucella ovis
019
strain
sheep alveolar macrophages
cDNA library
分类号
R378.5 [医药卫生—病原生物学]
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职称材料
题名
利用荧光定量PCR检测B.ovis侵染巨噬细胞RAW264.7的相对数量
2
作者
葛阳春
王远志
陈创夫
杜军伟
机构
石河子大学动物科技学院
新疆民族与地方高发病教育部重点实验室
出处
《石河子大学学报（自然科学版）》
CAS
2010年第6期703-707,共5页
基金
国家重点基础研究发展计划(973)项目(2010CB530200)
国家自然科学基金项目(30800813)
新疆兵团博士基金(2009JC15)
文摘
为了探讨布鲁氏菌胞内寄生的机制,采用荧光定量PCR方法对进入巨噬细胞的布鲁氏菌的数量进行检测,克隆了绵羊种布鲁氏菌019株的16SrRNA基因和小鼠巨噬细胞RAW264.7的GAPDH基因。以16SrRNA基因和巨噬细胞GAPDH做为内参基因,将二者的比值作为检测布鲁氏菌进入巨噬细胞数量多少的指标,建立绵羊种布鲁氏菌019株侵染巨噬细胞不同阶段的感染模式。结果表明:在绵羊种布鲁氏菌019株侵染巨噬细胞15min～1h,16SrRNA与GAPDH的比值缓慢上升,侵染1～4h中,16SrRNA与GAPDH的比值急剧上升,说明在此阶段,细菌侵入细胞中的数量显著增多。
关键词
绵羊种布鲁氏菌019株
巨噬细胞RAW264.7
荧光定量PCR
Keywords
Brucella ovis
019
strain
RAW264.7 macrophage
real-time PCR
分类号
S852.65 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
绵羊种布鲁氏菌019株侵染绵羊巨噬细胞cDNA文库的构建
王远志
陈创夫
盛金良
张辉
曹旭东
任艳
高剑峰
王端明
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
利用荧光定量PCR检测B.ovis侵染巨噬细胞RAW264.7的相对数量
葛阳春
王远志
陈创夫
杜军伟
《石河子大学学报（自然科学版）》
CAS
2010
0
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已选择
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