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新疆绵羊种布鲁氏菌OMP25基因的分子克隆及核苷酸序列的测定 被引量:3
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作者 柳建新 陈创夫 田晶华 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2005年第11期6-8,共3页
根据GeneBank库上国际标准菌株绵羊种布鲁氏菌(63/290)的OMP25的基因序列设计引物,用聚合酶链式反应(PCR)技术从新疆绵羊种布鲁氏菌(80/019)基因组DNA中扩增出OMP25基因片段,T4DNA连接酶将其连接于PBS-T克隆载体质粒上,将重组质粒转化... 根据GeneBank库上国际标准菌株绵羊种布鲁氏菌(63/290)的OMP25的基因序列设计引物,用聚合酶链式反应(PCR)技术从新疆绵羊种布鲁氏菌(80/019)基因组DNA中扩增出OMP25基因片段,T4DNA连接酶将其连接于PBS-T克隆载体质粒上,将重组质粒转化到受体菌DH10B中,蓝白斑筛选阳性菌落,结果成功克隆OMP25基因片段,进行核苷酸序列测定,测序结果分析表明:新疆绵羊菌株与国际标准菌株有明显差异。 展开更多
关键词 新疆绵羊种布鲁氏菌 OMP25 克隆 核苷酸序列分析
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绵羊种布鲁氏菌019株侵染绵羊巨噬细胞cDNA文库的构建 被引量:1
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作者 王远志 陈创夫 +5 位作者 盛金良 张辉 曹旭东 任艳 高剑峰 王端明 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期334-337,共4页
目的构建绵羊种布鲁氏菌019株侵染绵羊肺泡巨噬细胞的cDNA文库。培养绵羊肺泡巨噬细胞,用绵羊种布鲁氏菌019株侵染绵羊巨噬细胞,用试剂盒构建侵染后绵羊肺泡巨噬细胞的cDNA文库,并对文库中的部分克隆进行测序。结果表明,构建的绵羊种布... 目的构建绵羊种布鲁氏菌019株侵染绵羊肺泡巨噬细胞的cDNA文库。培养绵羊肺泡巨噬细胞,用绵羊种布鲁氏菌019株侵染绵羊巨噬细胞,用试剂盒构建侵染后绵羊肺泡巨噬细胞的cDNA文库,并对文库中的部分克隆进行测序。结果表明,构建的绵羊种布鲁氏菌019株侵染绵羊巨噬细胞cDNA文库达到建库要求;所测序列与牛的基因组编码序列同源性最高。在绵羊种布鲁氏菌019株侵染绵羊肺泡巨噬细胞过程中,以50∶1(细菌∶细胞)的个数比,侵染3.5h,能有效构建侵染后绵羊肺泡巨噬细胞的cDNA文库。 展开更多
关键词 绵羊种布鲁氏菌019株 绵羊肺泡巨噬细胞 CDNA文库
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绵羊种布鲁氏菌感染变态反应诊断研究
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作者 刘明 刘志文 +2 位作者 张银国 赵兴旺 沈兆银 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2002年第4期124-124,127,共2页
关键词 绵羊种布鲁氏菌感染 变态反应 诊断 布鲁氏菌
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恒河猴人工感染BRUCELLAOVIS后病理学观察及病原回收 被引量:6
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作者 张高轩 张银国 +6 位作者 刘志文 程风清 缪礼维 郭新堂 汪辰生 白春来 蔡清生 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1999年第4期78-80,共3页
选用健康公恒河猴6只分3组每组2只,以Brucelaovis进行人工1亿、0.1亿、0.01亿菌量感染后35天再分别以10亿、5亿和1亿菌感染。结果在180天开始1、2组猴出现明显临床症状第3组则症状轻微。300天扑... 选用健康公恒河猴6只分3组每组2只,以Brucelaovis进行人工1亿、0.1亿、0.01亿菌量感染后35天再分别以10亿、5亿和1亿菌感染。结果在180天开始1、2组猴出现明显临床症状第3组则症状轻微。300天扑杀后可见附睾,睾丸、精索、淋巴结、脾、肝、肾、肺等器官和组织有典型病变;并在病变器官中分离到B.ovis培养物。 展开更多
关键词 人工感染 病理学 绵羊种布鲁氏菌 附睾炎
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传染性附睾炎公羊精液临床病理学研究 被引量:1
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作者 张高轩 张银国 +1 位作者 沈文 王鹏雁 《石河子大学学报(自然科学版)》 CAS 2001年第1期48-50,共3页
对Br.ovis感染的轻病、重病和对照组公羊精液各 10份进行pH测定 ,结果分别为 6 .9± 1.13和 7.77± 0 .30 ,与对照组 6 .2 1± 0 .17相比差异显著 ;畸形精子计数 ,轻、重病羊分别占精子总数的 2 7.72 %和 34.17% ,与对照组 ... 对Br.ovis感染的轻病、重病和对照组公羊精液各 10份进行pH测定 ,结果分别为 6 .9± 1.13和 7.77± 0 .30 ,与对照组 6 .2 1± 0 .17相比差异显著 ;畸形精子计数 ,轻、重病羊分别占精子总数的 2 7.72 %和 34.17% ,与对照组 5 .90 %相比差异极显著 ,而头、颈、尾的畸形率差异不显著 ;炎症细胞检出率的羊数和炎症细胞数 47/ 6和 174/ 10与对照组 6 / 展开更多
关键词 绵羊传统性附睾炎 绵羊种布鲁氏菌 临床病理学 精子畸形 炎症细胞
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利用荧光定量PCR检测B.ovis侵染巨噬细胞RAW264.7的相对数量
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作者 葛阳春 王远志 +1 位作者 陈创夫 杜军伟 《石河子大学学报(自然科学版)》 CAS 2010年第6期703-707,共5页
为了探讨布鲁氏菌胞内寄生的机制,采用荧光定量PCR方法对进入巨噬细胞的布鲁氏菌的数量进行检测,克隆了绵羊种布鲁氏菌019株的16SrRNA基因和小鼠巨噬细胞RAW264.7的GAPDH基因。以16SrRNA基因和巨噬细胞GAPDH做为内参基因,将二者的比值... 为了探讨布鲁氏菌胞内寄生的机制,采用荧光定量PCR方法对进入巨噬细胞的布鲁氏菌的数量进行检测,克隆了绵羊种布鲁氏菌019株的16SrRNA基因和小鼠巨噬细胞RAW264.7的GAPDH基因。以16SrRNA基因和巨噬细胞GAPDH做为内参基因,将二者的比值作为检测布鲁氏菌进入巨噬细胞数量多少的指标,建立绵羊种布鲁氏菌019株侵染巨噬细胞不同阶段的感染模式。结果表明:在绵羊种布鲁氏菌019株侵染巨噬细胞15min~1h,16SrRNA与GAPDH的比值缓慢上升,侵染1~4h中,16SrRNA与GAPDH的比值急剧上升,说明在此阶段,细菌侵入细胞中的数量显著增多。 展开更多
关键词 绵羊种布鲁氏菌019株 巨噬细胞RAW264.7 荧光定量PCR
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