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Mfn2减轻内质网应激抑制绵羊卵泡颗粒细胞凋亡的分子机制
1
作者
古丽米热·阿布都热依木
陈莹
+5 位作者
唐淑红
董红
汪立芹
吴阳升
黄俊成
林嘉鹏
《遗传》
北大核心
2025年第3期342-350,共9页
卵泡发育是哺乳动物生殖过程中至关重要的环节。线粒体融合蛋白2(mitofusin 2,Mfn2)是一种参与调节线粒体融合的GTP酶,是维持线粒体网络完整性和功能的关键因素,其在卵泡发育过程中调控线粒体功能与内质网应激的具体作用尚不明确。基于...
卵泡发育是哺乳动物生殖过程中至关重要的环节。线粒体融合蛋白2(mitofusin 2,Mfn2)是一种参与调节线粒体融合的GTP酶,是维持线粒体网络完整性和功能的关键因素,其在卵泡发育过程中调控线粒体功能与内质网应激的具体作用尚不明确。基于此,本研究探讨了Mfn2在成年绵羊卵泡发育过程中的作用。通过收集大、中、小卵泡并分离大卵泡的颗粒细胞(granulosacells,GCs),利用qRT-PCR和Westernblot检测Mfn2在不同卵泡中的表达水平,并通过免疫荧光技术确定Mfn2在卵泡中的定位。同时,检测了线粒体自噬相关蛋白Pink1、内质网应激蛋白(Grp78、Perk、Chop)和凋亡相关蛋白(Bcl2和BAX)的表达。进一步通过在GCs中转染siRNAs敲降Mfn2,评估细胞内Ca2+积累及线粒体膜电位的变化,并检测上述蛋白的表达水平。结果表明,Mfn2在大卵泡中的表达显著高于小卵泡,且主要表达于GCs。与小卵泡相比,大卵泡中Pink1、Grp78、Perk、Chop和BAX的表达显著降低,而Bcl2的表达显著增加(P<0.01)。Mfn2敲降后,细胞内Ca2+水平及线粒体膜电位显著降低,Pink1、Grp78、Perk、Chop和BAX的表达显著升高,而Bcl2的表达显著降低(P<0.01)。Mfn2可能通过调控线粒体功能及内质网应激,影响绵羊卵泡发育过程中的细胞凋亡。
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关键词
绵羊卵泡
颗粒细胞
MFN2
内质网应激
细胞凋亡
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职称材料
绵羊卵泡液和次黄嘌呤对卵母细胞体外减数分裂的影响
2
作者
布赫
王建国
旭日干
《中国实验动物学报》
CAS
CSCD
2002年第4期219-222,共4页
目的 利用在培养液中添加绵羊卵泡液和次黄嘌呤 ,抑制卵母细胞GVBD发生 ,延长转录活性 ,从而使卵母细胞真正成熟 ,提高胚胎质量及生产效率。方法 利用体外成熟技术对有屠宰采集的绵羊卵母细胞进行培养 ,培养液中添加卵泡液及次黄嘌呤 ...
目的 利用在培养液中添加绵羊卵泡液和次黄嘌呤 ,抑制卵母细胞GVBD发生 ,延长转录活性 ,从而使卵母细胞真正成熟 ,提高胚胎质量及生产效率。方法 利用体外成熟技术对有屠宰采集的绵羊卵母细胞进行培养 ,培养液中添加卵泡液及次黄嘌呤 ,检查成熟效果。结果 将卵母细胞培养在 5 0 %和 10 0 %的卵泡液中 ,2 4h后处于GV期的卵母细胞分别为 19% (8 4 2 )和 33 3% (13 39)。在含有 4mmol L次黄嘌呤的培养液中 ,2 4h后有2 1 6 % (16 74 )的卵母细胞处GV期 ,而对照组中只有 6 % (3 5 0 ) ,经过次黄嘌呤处理的卵母细胞多数都停滞于PⅠ期(44 6 % ,33 74 )。在 4mmol L次黄嘌呤培养液中添加FSH并未使受到抑制的卵母细胞诱导成熟。结论 卵泡液和次黄嘌呤只能在有限的程度上抑制减数分裂的重新启动 ,并对减数分裂的全过程都有影响 ,这种影响程度与抑制因子的浓度相关 ,存在明显的剂量效应。
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关键词
绵羊卵泡
液
次黄嘌呤
卵母细胞
体外减数分裂
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职称材料
RT-PCR技术检测绵羊卵巢内Ghrelin的表达
3
作者
斯琴高娃
杜晨光
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2009年第6期79-81,共3页
为了明确Ghrelin在绵羊卵巢有腔卵泡上是否存在表达,本研究利用实时定量RT-PCR技术检测了绵羊卵巢有腔卵泡内的卵母细胞、卵丘细胞和壁层颗粒细胞的Ghrelin蛋白的表达量情况。结果揭示绵羊卵巢有腔卵泡内各类型细胞Gh-relin mRNA的相对...
为了明确Ghrelin在绵羊卵巢有腔卵泡上是否存在表达,本研究利用实时定量RT-PCR技术检测了绵羊卵巢有腔卵泡内的卵母细胞、卵丘细胞和壁层颗粒细胞的Ghrelin蛋白的表达量情况。结果揭示绵羊卵巢有腔卵泡内各类型细胞Gh-relin mRNA的相对表达量大致相同。绵羊卵巢有腔卵泡内各类型细胞Ghrelin蛋白的表达及Ghrelin mRNA的表达模式,尤其是卵母细胞中的表达,揭示这一新型分子在绵羊卵巢上具有潜在的调控作用。
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关键词
GHRELIN
绵羊
有腔
卵泡
实时定量RT-PCR
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职称材料
题名
Mfn2减轻内质网应激抑制绵羊卵泡颗粒细胞凋亡的分子机制
1
作者
古丽米热·阿布都热依木
陈莹
唐淑红
董红
汪立芹
吴阳升
黄俊成
林嘉鹏
机构
农业农村部草食家畜遗传育种与繁殖重点实验室
阿克苏地区畜牧技术推广中心
新疆畜牧科学院畜牧研究所
出处
《遗传》
北大核心
2025年第3期342-350,共9页
基金
新疆维吾尔自治区重大专项(编号:2023A02011-2)
新疆维吾尔自治区羊产业技术体系项目(编号:XJARS-09-08)
+1 种基金
新疆维吾尔自治区三农骨干人才培养项目(编号:2023SNGGNT031)
“天池英才”引进计划项目资助。
文摘
卵泡发育是哺乳动物生殖过程中至关重要的环节。线粒体融合蛋白2(mitofusin 2,Mfn2)是一种参与调节线粒体融合的GTP酶,是维持线粒体网络完整性和功能的关键因素,其在卵泡发育过程中调控线粒体功能与内质网应激的具体作用尚不明确。基于此,本研究探讨了Mfn2在成年绵羊卵泡发育过程中的作用。通过收集大、中、小卵泡并分离大卵泡的颗粒细胞(granulosacells,GCs),利用qRT-PCR和Westernblot检测Mfn2在不同卵泡中的表达水平,并通过免疫荧光技术确定Mfn2在卵泡中的定位。同时,检测了线粒体自噬相关蛋白Pink1、内质网应激蛋白(Grp78、Perk、Chop)和凋亡相关蛋白(Bcl2和BAX)的表达。进一步通过在GCs中转染siRNAs敲降Mfn2,评估细胞内Ca2+积累及线粒体膜电位的变化,并检测上述蛋白的表达水平。结果表明,Mfn2在大卵泡中的表达显著高于小卵泡,且主要表达于GCs。与小卵泡相比,大卵泡中Pink1、Grp78、Perk、Chop和BAX的表达显著降低,而Bcl2的表达显著增加(P<0.01)。Mfn2敲降后,细胞内Ca2+水平及线粒体膜电位显著降低,Pink1、Grp78、Perk、Chop和BAX的表达显著升高,而Bcl2的表达显著降低(P<0.01)。Mfn2可能通过调控线粒体功能及内质网应激,影响绵羊卵泡发育过程中的细胞凋亡。
关键词
绵羊卵泡
颗粒细胞
MFN2
内质网应激
细胞凋亡
Keywords
sheep follicles
granulosa cells
Mfn2
endoplasmic reticulum stress
cell apoptosis
分类号
S826 [农业科学—畜牧学]
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职称材料
题名
绵羊卵泡液和次黄嘌呤对卵母细胞体外减数分裂的影响
2
作者
布赫
王建国
旭日干
机构
内蒙古大学哺乳动物生殖生物学教育部重点实验室
出处
《中国实验动物学报》
CAS
CSCD
2002年第4期219-222,共4页
基金
国家自然科学基金 :项目号 3 9860 0 5 6
文摘
目的 利用在培养液中添加绵羊卵泡液和次黄嘌呤 ,抑制卵母细胞GVBD发生 ,延长转录活性 ,从而使卵母细胞真正成熟 ,提高胚胎质量及生产效率。方法 利用体外成熟技术对有屠宰采集的绵羊卵母细胞进行培养 ,培养液中添加卵泡液及次黄嘌呤 ,检查成熟效果。结果 将卵母细胞培养在 5 0 %和 10 0 %的卵泡液中 ,2 4h后处于GV期的卵母细胞分别为 19% (8 4 2 )和 33 3% (13 39)。在含有 4mmol L次黄嘌呤的培养液中 ,2 4h后有2 1 6 % (16 74 )的卵母细胞处GV期 ,而对照组中只有 6 % (3 5 0 ) ,经过次黄嘌呤处理的卵母细胞多数都停滞于PⅠ期(44 6 % ,33 74 )。在 4mmol L次黄嘌呤培养液中添加FSH并未使受到抑制的卵母细胞诱导成熟。结论 卵泡液和次黄嘌呤只能在有限的程度上抑制减数分裂的重新启动 ,并对减数分裂的全过程都有影响 ,这种影响程度与抑制因子的浓度相关 ,存在明显的剂量效应。
关键词
绵羊卵泡
液
次黄嘌呤
卵母细胞
体外减数分裂
Keywords
Oocyte, Sheep
Meiosis arrest
Follicular fluid (oFF)
Hypoxanthine
分类号
Q954.432 [生物学—动物学]
S81 [农业科学—畜牧学]
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职称材料
题名
RT-PCR技术检测绵羊卵巢内Ghrelin的表达
3
作者
斯琴高娃
杜晨光
机构
内蒙古农业大学职业技术学院
出处
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2009年第6期79-81,共3页
基金
内蒙古农业大学职业技术学应用发展基金
内蒙古自然科学基金(200711020506)共同资助
文摘
为了明确Ghrelin在绵羊卵巢有腔卵泡上是否存在表达,本研究利用实时定量RT-PCR技术检测了绵羊卵巢有腔卵泡内的卵母细胞、卵丘细胞和壁层颗粒细胞的Ghrelin蛋白的表达量情况。结果揭示绵羊卵巢有腔卵泡内各类型细胞Gh-relin mRNA的相对表达量大致相同。绵羊卵巢有腔卵泡内各类型细胞Ghrelin蛋白的表达及Ghrelin mRNA的表达模式,尤其是卵母细胞中的表达,揭示这一新型分子在绵羊卵巢上具有潜在的调控作用。
关键词
GHRELIN
绵羊
有腔
卵泡
实时定量RT-PCR
Keywords
Ghrelin
sheep antral follicles
real time RT-PCR
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
Mfn2减轻内质网应激抑制绵羊卵泡颗粒细胞凋亡的分子机制
古丽米热·阿布都热依木
陈莹
唐淑红
董红
汪立芹
吴阳升
黄俊成
林嘉鹏
《遗传》
北大核心
2025
0
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职称材料
2
绵羊卵泡液和次黄嘌呤对卵母细胞体外减数分裂的影响
布赫
王建国
旭日干
《中国实验动物学报》
CAS
CSCD
2002
0
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下载PDF
职称材料
3
RT-PCR技术检测绵羊卵巢内Ghrelin的表达
斯琴高娃
杜晨光
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2009
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