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猪流感病毒通用型微滴式数字RT-PCR绝对定量检测方法的建立
被引量：
1
1
作者
兰德松
顾贵波
+2 位作者
孙世宇
杨洺扬
魏澍
《中国动物检疫》
CAS
2024年第4期84-90,共7页
为建立灵敏且可绝对定量检测猪流感病毒(swine influenza virus,SIV)的微滴式数字RT-PCR(ddRT-PCR)方法,以SIV M基因的保守序列为靶基因,设计并合成一套特异性引物和TaqMan探针,建立了可对主要流行的H1N1、H1N2和H3N2亚型SIV绝对定量检...
为建立灵敏且可绝对定量检测猪流感病毒(swine influenza virus,SIV)的微滴式数字RT-PCR(ddRT-PCR)方法,以SIV M基因的保守序列为靶基因,设计并合成一套特异性引物和TaqMan探针,建立了可对主要流行的H1N1、H1N2和H3N2亚型SIV绝对定量检测的通用型ddRT-PCR方法。随后,对该方法的敏感性、特异性和重复性进行评价,并利用临床猪鼻咽拭子样品进行检测验证。结果显示:建立的ddRT-PCR方法检测限达到1.6 copies/µL,灵敏度极高;能特异性检出H1N1、H1N2和H3N2亚型SIV,与猪瘟病毒等其他常见猪病病原均无交叉反应;重复检测结果的批内和批间变异系数(CV)分别为0.75%、3.17%,重复性良好;经临床样品检测验证,建立的ddRT-PCR和荧光RT-qPCR方法分别检出阳性样品72、66份,提示前者在检测低病毒拷贝样品时较荧光RT-qPCR更优。结果表明,本研究建立的SIV通用型ddRT-PCR方法灵敏度高,特异性和重复性均良好,且在检测低病毒含量临床样本时更具优势,可作为一种对SIV感染进行早期诊断和绝对定量检测的有效方法。
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关键词
猪流感病毒
微滴式数字RT-PCR
通用型
绝对定量检测
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职称材料
基于微流控技术的数字PCR的发展及其应用
被引量：
4
2
作者
田昌敏
杨祥良
杨海
《微纳电子技术》
CAS
北大核心
2023年第4期496-507,共12页
作为一种新兴的扩增检测技术,基于微流控的数字聚合酶链式反应(PCR)有着高通量、高灵敏度及高耐受性等优势,因而得到了研究者的广泛关注,其相关技术也在不断的发展中。综述了基于微流控的数字PCR的研究进展,重点讨论了基于微流控的数字...
作为一种新兴的扩增检测技术,基于微流控的数字聚合酶链式反应(PCR)有着高通量、高灵敏度及高耐受性等优势,因而得到了研究者的广泛关注,其相关技术也在不断的发展中。综述了基于微流控的数字PCR的研究进展,重点讨论了基于微流控的数字PCR的液滴打印技术、多层微流控芯片技术、微珠技术、聚二甲基硅氧烷(PDMS)技术等的不同实现方式。介绍了基于微流控的数字PCR在定量检测、精准分子诊断、肿瘤个性化诊断以及食品安全检测中的应用。最后,对基于微流控的数字PCR技术目前存在的不足和问题进行了阐述,并对其未来的研究方向和发展趋势进行了展望。
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关键词
数字聚合酶链式反应(PCR)
微流控技术
绝对定量检测
分子诊断
食品安全
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职称材料
题名
猪流感病毒通用型微滴式数字RT-PCR绝对定量检测方法的建立
被引量：
1
1
作者
兰德松
顾贵波
孙世宇
杨洺扬
魏澍
机构
辽宁省农业发展服务中心
出处
《中国动物检疫》
CAS
2024年第4期84-90,共7页
基金
辽宁省自然基金资助计划项目(2020-MS-348)。
文摘
为建立灵敏且可绝对定量检测猪流感病毒(swine influenza virus,SIV)的微滴式数字RT-PCR(ddRT-PCR)方法,以SIV M基因的保守序列为靶基因,设计并合成一套特异性引物和TaqMan探针,建立了可对主要流行的H1N1、H1N2和H3N2亚型SIV绝对定量检测的通用型ddRT-PCR方法。随后,对该方法的敏感性、特异性和重复性进行评价,并利用临床猪鼻咽拭子样品进行检测验证。结果显示:建立的ddRT-PCR方法检测限达到1.6 copies/µL,灵敏度极高;能特异性检出H1N1、H1N2和H3N2亚型SIV,与猪瘟病毒等其他常见猪病病原均无交叉反应;重复检测结果的批内和批间变异系数(CV)分别为0.75%、3.17%,重复性良好;经临床样品检测验证,建立的ddRT-PCR和荧光RT-qPCR方法分别检出阳性样品72、66份,提示前者在检测低病毒拷贝样品时较荧光RT-qPCR更优。结果表明,本研究建立的SIV通用型ddRT-PCR方法灵敏度高,特异性和重复性均良好,且在检测低病毒含量临床样本时更具优势,可作为一种对SIV感染进行早期诊断和绝对定量检测的有效方法。
关键词
猪流感病毒
微滴式数字RT-PCR
通用型
绝对定量检测
Keywords
SIV
ddRT-PCR
universal
absolute quantitative detection
分类号
S855.3 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
基于微流控技术的数字PCR的发展及其应用
被引量：
4
2
作者
田昌敏
杨祥良
杨海
机构
华中科技大学生命科学与技术学院、国家纳米药物工程技术研究中心
出处
《微纳电子技术》
CAS
北大核心
2023年第4期496-507,共12页
基金
国家自然科学基金面上项目(62275093)。
文摘
作为一种新兴的扩增检测技术,基于微流控的数字聚合酶链式反应(PCR)有着高通量、高灵敏度及高耐受性等优势,因而得到了研究者的广泛关注,其相关技术也在不断的发展中。综述了基于微流控的数字PCR的研究进展,重点讨论了基于微流控的数字PCR的液滴打印技术、多层微流控芯片技术、微珠技术、聚二甲基硅氧烷(PDMS)技术等的不同实现方式。介绍了基于微流控的数字PCR在定量检测、精准分子诊断、肿瘤个性化诊断以及食品安全检测中的应用。最后,对基于微流控的数字PCR技术目前存在的不足和问题进行了阐述,并对其未来的研究方向和发展趋势进行了展望。
关键词
数字聚合酶链式反应(PCR)
微流控技术
绝对定量检测
分子诊断
食品安全
Keywords
digital polymerase chain reaction(PCR)
microfluidic technology
absolute
分类号
Q819 [生物学—生物工程]
R446 [医药卫生—诊断学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
猪流感病毒通用型微滴式数字RT-PCR绝对定量检测方法的建立
兰德松
顾贵波
孙世宇
杨洺扬
魏澍
《中国动物检疫》
CAS
2024
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
基于微流控技术的数字PCR的发展及其应用
田昌敏
杨祥良
杨海
《微纳电子技术》
CAS
北大核心
2023
4
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职称材料
已选择
0
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参考文献
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