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大肠癌鸟氨酸脱羧酶基因表达及临床意义研究
被引量：
7
1
作者
孙爱华
刘贤锡
+5 位作者
何庆泗
刘传华
胡海燕
王伟
张岩
张冰
《中国现代普通外科进展》
CAS
2004年第3期150-152,共3页
目的 :研究鸟氨酸脱羧酶 (ODC)基因在结直肠癌中的表达 ,探讨其在大肠癌形成中的作用。方法 :建立测定ODC基因mRNA表达的逆转录多聚酶链反应 (RT PCR)最适条件 ,在半定量水平测定 31例结直肠癌的癌旁正常组织和癌组织中的ODCmRNA表达的...
目的 :研究鸟氨酸脱羧酶 (ODC)基因在结直肠癌中的表达 ,探讨其在大肠癌形成中的作用。方法 :建立测定ODC基因mRNA表达的逆转录多聚酶链反应 (RT PCR)最适条件 ,在半定量水平测定 31例结直肠癌的癌旁正常组织和癌组织中的ODCmRNA表达的相对水平 ,观察其与临床病理学指标的关系。结果 :31例结直肠癌中ODC基因表达较癌旁正常组织高 ,差异显著 (P <0 .0 1) ,ODC基因表达在性别、病理类型之间差异无显著意义 (P >0 .0 5 ) ,在Dukes分期之间差异有显著意义 (P =0 .0 12 )。结论 :ODC在大肠癌组织中表达增高并与恶性程度呈正相关 ,提示ODC表达增加与大肠癌发生、浸润及转移有关 ,为大肠癌病因及诊断和治疗方法研究提供了实验依据。
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关键词
结直肠肿籀·鸟氨酸脱羧酶·基因表达
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职称材料
人ODC重组蛋白及其多抗的制备和临床应用
被引量：
3
2
作者
胡海燕
刘贤锡
+7 位作者
姜春英
张岩
王晓明
刘师莲
耿昭
卢翌
张冰
孙爱华
《中国现代普通外科进展》
CAS
2004年第1期26-30,共5页
目的 :构建鸟氨酸脱羧酶 (ODC)表达载体 ,表达ODC重组蛋白 ,制备其多克隆抗体并观察其在大肠癌诊断中的意义。方法 :从大肠癌组织中提取总RNA ,反转录PCR法扩增全长ODCcDNA ,将扩增的基因插入表达载体 pQE 30的BamHI和SalI酶切位点之间 ...
目的 :构建鸟氨酸脱羧酶 (ODC)表达载体 ,表达ODC重组蛋白 ,制备其多克隆抗体并观察其在大肠癌诊断中的意义。方法 :从大肠癌组织中提取总RNA ,反转录PCR法扩增全长ODCcDNA ,将扩增的基因插入表达载体 pQE 30的BamHI和SalI酶切位点之间 ,DNA测序验证插入片段。将重组载体转化入宿主菌M 15中进行诱导表达 ,产生含 6 His tag的融合蛋白。WesternBlotting法检测表达蛋白。亲和层析法纯化融合蛋白 ,以该蛋白免疫小鼠制备多抗 ,免疫组化检测大肠癌组织中ODC的表达水平。结果 :酶切鉴定和DNA测序显示ODC重组表达载体中含有人ODCcDNA全长序列 ,与NIH基因库的人ODCcDNA比较有 99%的同源性。将该重组载体转化入大肠杆菌M 15中表达所得蛋白经WesternBlotting验证为目的蛋白。纯化融合蛋白 ,免疫小鼠获得多抗效价较高。免疫组化检测大肠癌组织中ODC的表达显示该抗体检测效果较好 ,大肠癌组织中ODC的表达水平明显高于正常组织 (P <0 .0 5 )。结论 :成功地构建了ODC表达载体、表达出ODC重组蛋白、制备出ODC多克隆抗体 ,为进一步研究结直肠癌的发病机理及其诊断和治疗方法打下了良好基础。
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关键词
鸟氨酸
脱羧酶
结
直肠
肿
瘤
基因
表达
多克隆抗体
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职称材料
题名
大肠癌鸟氨酸脱羧酶基因表达及临床意义研究
被引量：
7
1
作者
孙爱华
刘贤锡
何庆泗
刘传华
胡海燕
王伟
张岩
张冰
机构
山东大学医学院生物化学与分子生物学研究所
山东大学齐鲁医院普外科
出处
《中国现代普通外科进展》
CAS
2004年第3期150-152,共3页
基金
卫生部科研基金资助项目 (98 1 173 )
文摘
目的 :研究鸟氨酸脱羧酶 (ODC)基因在结直肠癌中的表达 ,探讨其在大肠癌形成中的作用。方法 :建立测定ODC基因mRNA表达的逆转录多聚酶链反应 (RT PCR)最适条件 ,在半定量水平测定 31例结直肠癌的癌旁正常组织和癌组织中的ODCmRNA表达的相对水平 ,观察其与临床病理学指标的关系。结果 :31例结直肠癌中ODC基因表达较癌旁正常组织高 ,差异显著 (P <0 .0 1) ,ODC基因表达在性别、病理类型之间差异无显著意义 (P >0 .0 5 ) ,在Dukes分期之间差异有显著意义 (P =0 .0 12 )。结论 :ODC在大肠癌组织中表达增高并与恶性程度呈正相关 ,提示ODC表达增加与大肠癌发生、浸润及转移有关 ,为大肠癌病因及诊断和治疗方法研究提供了实验依据。
关键词
结直肠肿籀·鸟氨酸脱羧酶·基因表达
Keywords
Colorectal neoplasms·Ornithine decarboxylase·Gene expression
分类号
R735.34 [医药卫生—肿瘤]
Q786 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
人ODC重组蛋白及其多抗的制备和临床应用
被引量：
3
2
作者
胡海燕
刘贤锡
姜春英
张岩
王晓明
刘师莲
耿昭
卢翌
张冰
孙爱华
机构
山东大学医学院医学分子生物学实验中心
山东中医药大学附属医院肛肠科
出处
《中国现代普通外科进展》
CAS
2004年第1期26-30,共5页
基金
卫生部科研基金资助项目 (98 1 173 )
文摘
目的 :构建鸟氨酸脱羧酶 (ODC)表达载体 ,表达ODC重组蛋白 ,制备其多克隆抗体并观察其在大肠癌诊断中的意义。方法 :从大肠癌组织中提取总RNA ,反转录PCR法扩增全长ODCcDNA ,将扩增的基因插入表达载体 pQE 30的BamHI和SalI酶切位点之间 ,DNA测序验证插入片段。将重组载体转化入宿主菌M 15中进行诱导表达 ,产生含 6 His tag的融合蛋白。WesternBlotting法检测表达蛋白。亲和层析法纯化融合蛋白 ,以该蛋白免疫小鼠制备多抗 ,免疫组化检测大肠癌组织中ODC的表达水平。结果 :酶切鉴定和DNA测序显示ODC重组表达载体中含有人ODCcDNA全长序列 ,与NIH基因库的人ODCcDNA比较有 99%的同源性。将该重组载体转化入大肠杆菌M 15中表达所得蛋白经WesternBlotting验证为目的蛋白。纯化融合蛋白 ,免疫小鼠获得多抗效价较高。免疫组化检测大肠癌组织中ODC的表达显示该抗体检测效果较好 ,大肠癌组织中ODC的表达水平明显高于正常组织 (P <0 .0 5 )。结论 :成功地构建了ODC表达载体、表达出ODC重组蛋白、制备出ODC多克隆抗体 ,为进一步研究结直肠癌的发病机理及其诊断和治疗方法打下了良好基础。
关键词
鸟氨酸
脱羧酶
结
直肠
肿
瘤
基因
表达
多克隆抗体
Keywords
Ornithine decarboxylase·Colorectal neoplasms,Gene expression·Antibody
分类号
R735.34 [医药卫生—肿瘤]
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
大肠癌鸟氨酸脱羧酶基因表达及临床意义研究
孙爱华
刘贤锡
何庆泗
刘传华
胡海燕
王伟
张岩
张冰
《中国现代普通外科进展》
CAS
2004
7
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职称材料
2
人ODC重组蛋白及其多抗的制备和临床应用
胡海燕
刘贤锡
姜春英
张岩
王晓明
刘师莲
耿昭
卢翌
张冰
孙爱华
《中国现代普通外科进展》
CAS
2004
3
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