结核分枝杆菌复合群核酸检测联合结核分枝杆菌γ干扰素释放试验在肺结核诊断中的应用价值

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作者 朱晓颖 《中国社区医师》 2025年第8期84-86,共3页

目的:探讨结核分枝杆菌复合群(MTBC)核酸检测联合结核分枝杆菌γ干扰素释放试验(TB-IGRA)在肺结核诊断中的应用效果。方法:选取2022年6月—2023年5月惠州市职业病防治院收治的120例疑似肺结核患者进行研究,采集所有研究对象痰液样本及... 目的:探讨结核分枝杆菌复合群(MTBC)核酸检测联合结核分枝杆菌γ干扰素释放试验(TB-IGRA)在肺结核诊断中的应用效果。方法:选取2022年6月—2023年5月惠州市职业病防治院收治的120例疑似肺结核患者进行研究,采集所有研究对象痰液样本及血液样本,实施MTBC检测及TB-IGRA检测。以结核分枝杆菌培养结果为“金标准”,分析MTBC、TB-IGRA单独与联合诊断肺结核的效能(灵敏度、特异度、准确度)。结果:结核分枝杆菌培养结果显示,120例受试者确诊肺结核60例(50.0%)。联合检测诊断肺结核的灵敏度、准确度高于MTBC检测、TB-IGRA检测,差异有统计学意义(P<0.05);MTBC检测、TB-IGRA检测、两者联合检测诊断肺结核的特异度比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:MTBC检测、TB-IGRA检测诊断肺结核的效果较好,可作为辅助诊断肺结核的方法,且联合检测能够提升诊断灵敏度及准确度。 展开更多

关键词 结核分枝杆菌复合群核酸检测 结核分枝杆菌γ干扰素释放试验 肺结核

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分泌蛋白在痰液及培养液中鉴定结核分枝杆菌复合群的应用研究 被引量：9

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作者 张院良 蔡杏珊 谭耀驹 《现代医院》 2011年第2期17-19,共3页

目的评价两种结核菌分泌蛋白试剂分别应用于痰液和培养液中鉴定结核分枝杆菌复合群(MTC)的效果。方法①采用结核分枝杆菌多克隆分泌蛋白试剂对20例健康人呼吸道分泌物以及151例疑为结核病病人痰标本进行检测,同时使用MGIT 960培养仪分... 目的评价两种结核菌分泌蛋白试剂分别应用于痰液和培养液中鉴定结核分枝杆菌复合群(MTC)的效果。方法①采用结核分枝杆菌多克隆分泌蛋白试剂对20例健康人呼吸道分泌物以及151例疑为结核病病人痰标本进行检测,同时使用MGIT 960培养仪分离培养,阳性分离菌株进行传统方法鉴定,并使用结核分枝杆菌单克隆分泌蛋白MPT64鉴定。②23株分枝杆菌标准菌株采用MPT64单克隆试剂鉴定。③找出两种试剂的检出限。稀释H37RV标准菌株找出MPT64单克隆试剂的检出限,分析涂片阳性级别与多克隆分泌蛋白试剂结果关系找出该检出限并作比对。结果 MPT64单克隆试剂与多克隆分泌蛋白试剂的灵敏度、特异性、阳性预测值、阴性预测值分别为98.7%、100.0%、88.9%、98.7%和81.0%、85.9%、83.1%、84.0%、83.6%。MPT64单克隆试剂在3 000 CFU/ml的菌液浓度检出。多克隆分泌蛋白试剂在5 000～10 000 CFU/ml的阳性痰中检出。两者的平均检测时间为12 d和1 d。结论应用MPT64单克隆分泌蛋白试剂检测鉴定培养液中MTC是一种准确、快速、简便而又不需要任何仪器设备的实用型方法,值得临床推广应用;而多克隆分泌蛋白试剂可直接应用于痰液中检测鉴定MTC,尽管在灵敏度、特异性、准确度上未尽人意,但其快速性仍不失为一种让人期待的方法。 展开更多

关键词 MPT64 分泌蛋白 结核分枝杆菌复合群 细菌分型技术

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南疆地区结核分枝杆菌复合群耐药性及同源性分析

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作者 吴会丽 张朝霞 黄艳春 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期144-147,共4页

目的了解新疆南疆地区的结核分枝杆菌复合群耐药情况及各菌株间的同源性。方法用改良罗氏培养基培养分离菌株及初步鉴定菌种;用比例法对分离菌株进行药物敏感实验;随机抽取50株耐药结核分枝杆菌复合群菌株,用DiversiLab系统进行分型及... 目的了解新疆南疆地区的结核分枝杆菌复合群耐药情况及各菌株间的同源性。方法用改良罗氏培养基培养分离菌株及初步鉴定菌种;用比例法对分离菌株进行药物敏感实验;随机抽取50株耐药结核分枝杆菌复合群菌株,用DiversiLab系统进行分型及同源性分析。结果共分离出371株分枝杆菌,结核分枝杆菌314株,牛型结核分枝杆菌55株,非结核分枝杆菌2株。371株中119株(32.1%)有耐药性。根据DiversiLab系统同源性的判断,以相似性95%为分割点,50株耐药结核分枝杆菌复合群分成27个群。其中,初治患者耐药菌同源率为41.2%(7/17),复治患者耐药菌同源率为18.8%(3/16);喀什市的耐药菌同源率为33.3%(5/15),莎车县的耐药菌同源率为41.2%(7/17)。结论南疆地区结核分枝杆菌获得性耐药仍处于较高水平,不同患者群分离的耐药菌均有一定的同源性。 展开更多

关键词 结核分枝杆菌复合群 耐药 DiversiLab分型系统 同源性分析

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基于挥发性代谢产物质谱快速鉴定结核分枝杆菌复合群

4

作者 刘衍伶 胡龙华 +4 位作者 杭亚平 钟桥石 丁慧 胡晓彦 王小中 《临床检验杂志》 CAS CSCD 2016年第8期571-574,共4页

目的研究结核分枝杆菌复合群（MTC）相关挥发性代谢产物（VOCs）标记物用于快速鉴定MTC的应用价值。方法以卡介苗（BCG）为MTC代表菌种,用表面解吸常压化学电离质谱（SDAPCI-MS）对BCG、耻垢分枝杆菌和龟形分枝杆菌培养基上层气体行VOC... 目的研究结核分枝杆菌复合群（MTC）相关挥发性代谢产物（VOCs）标记物用于快速鉴定MTC的应用价值。方法以卡介苗（BCG）为MTC代表菌种,用表面解吸常压化学电离质谱（SDAPCI-MS）对BCG、耻垢分枝杆菌和龟形分枝杆菌培养基上层气体行VOCs检测,同时检测临床常见细菌和真菌的VOCs,以确定MTC相关VOCs标记物及释放时间规律。通过碰撞诱导解离（CID）鉴定特异性谱峰的分子量和分子结构式,并用Matlab对其行主成分分析以判断上述相似菌种VOCs组成成分。结果培养至第9天,肉眼可见菌落之前即可检测到特异性烟酸甲酯（m/z 138）存在于MTC培养基上层气体中,与菌液浓度和培养时间呈正相关,经缓慢增长后在25~30 d时含量迅速增加,而后保持稳定。m/z 140和m/z 152在MTC培养基上层气体中含量也显著高于龟形分枝杆菌（t=9.670,P〈0.01;t=95.610,P〈0.01）和耻垢分枝杆菌（t=9.677,P〈0.01;t=94.802,P〈0.01）。质谱检测所得VOCs指纹图可准确鉴别MTC与2种非结核分枝杆菌,并经主成分分析与其他所测实验菌种可明确区分。结论烟酸甲酯为MTC标记物。SDAPCI-MS通过检测微生物的挥发性代谢产物,能快速、准确地鉴定MTC。 展开更多

关键词 质谱 结核分枝杆菌复合群 结核病 挥发性代谢产物 标记物

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荧光定量PCR方法在结核分枝杆菌复合群检验中的应用价值 被引量：6

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作者 王纯华 郭秋霞 谢汉彬 《中国医药科学》 2021年第21期182-184,188,共4页

目的分析利用荧光定量PCR方法检测结核分枝杆菌复合群。方法选取2019年6月至2020年6月医院接收436例结核可疑患者共计470份临床样本(其中414份为肺内样本,56份为肺外样本),以实验室培养为金标准,分析荧光定量PCR法的检验结果,并观察荧... 目的分析利用荧光定量PCR方法检测结核分枝杆菌复合群。方法选取2019年6月至2020年6月医院接收436例结核可疑患者共计470份临床样本(其中414份为肺内样本,56份为肺外样本),以实验室培养为金标准,分析荧光定量PCR法的检验结果,并观察荧光定量PCR方法检测结核分枝杆菌复合群的灵敏度与特异度。结果在414份肺内样本中,培养阳性共计60份,培养阴性共计354份,荧光定量PCR检测中灵敏度为97.8%,特异度为97.5%;在56份肺外样本中,培养阳性共计12份,培养阴性共计44份,荧光定量PCR检测中灵敏度为100.0%,特异度为94.4%。以本研究总样本的培养结果来看,荧光定量PCR检测中灵敏度为98.2%,特异度为97.2%。结论荧光定量PCR方法在结核分枝杆菌复合群临床检验中具有较高的灵敏度与特异度,值得推广应用。 展开更多

关键词 荧光定量PCR方法 结核分枝杆菌复合群 临床检验 肺结核

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PCR检测结核分枝杆菌复合群IS_(986)DNA重复序列 被引量：1

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作者 朱诗应 杨毓华 邵海枫 《医学研究生学报》 CAS 1994年第3期29-32,共4页

用ＰＣＲ检测ＭＴＢＣ特异的ＩＳ９８６ＤＮＡ重复序列。ＩＳ９８６ＤＮＡ重复序列全长１３５８ｂｐ，特异地存在于ＭＴＢＣ细菌染色体ＤＮＡ中，并且多次重复出现。作者参照文献，在此序列内合成一对引物，扩增出１８８ｂｐ的ＭＴＢＣ... 用ＰＣＲ检测ＭＴＢＣ特异的ＩＳ９８６ＤＮＡ重复序列。ＩＳ９８６ＤＮＡ重复序列全长１３５８ｂｐ，特异地存在于ＭＴＢＣ细菌染色体ＤＮＡ中，并且多次重复出现。作者参照文献，在此序列内合成一对引物，扩增出１８８ｂｐ的ＭＴＢＣ特异的ＤＮＡ片段。实验证明具有高度的特异性和敏感性。与其它的分枝杆菌和人血细胞ＤＮＡ无交叉反应。最小检出极限为１０ｆｇＤＮＡ或１０个菌体／ｍｌ。对ＰＣＲ反应体系中有关实验条件如引物浓度、ＴａｑＤＮＡ聚合酶用量、循环程序等进行了优化选择。在临床标本细菌ＤＮＡ抽提中首次采用了简便的ＴＥ－Ｔｒｉｔｏｎ煮沸法，节省了成本，使整个检测时间缩短至６～８ｈ。 展开更多

关键词 结核分枝杆菌复合群 聚合酶链反应 DNA重复序列

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MALDI-TOF MS技术在非结核分枝杆菌鉴定及分型中的应用价值

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作者 苏琦 《河南医学研究》 CAS 2020年第23期4388-4390,共3页

目的探讨基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术对非结核分枝杆菌(NTM)的鉴定及分型价值。方法回顾性分析2017年1月至2019年4月焦作市疾病预防控制中心结核分枝杆菌培养与抗酸染色阳性的菌株资料,排除重复菌株(取自相同... 目的探讨基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术对非结核分枝杆菌(NTM)的鉴定及分型价值。方法回顾性分析2017年1月至2019年4月焦作市疾病预防控制中心结核分枝杆菌培养与抗酸染色阳性的菌株资料,排除重复菌株(取自相同时间、相同患者)后,以剩余的98株菌株作为研究对象。所有菌株均接受双重引物聚合酶链反应(Duplex-PCR)与MALDI-TOF MS检测,以Duplex-PCR为金标准,分析MALDI-TOF MS鉴定NTM的效能;以基因测序为金标准,分析MALDI-TOF MS鉴定NTM分型的效能。结果MALDI-TOF MS鉴定NTM的准确度为94.90%,灵敏度为90.00%,特异度为96.15%,阳性预测值为85.71%,阴性预测值为97.40%,鉴定结果与金标准的一致性Kappa值为0.846;20例NTM中,Duplex-PCR鉴定出脓肿分枝杆菌14例,隐藏分枝杆菌、福西亚分枝杆菌、马赛分枝杆菌各2例;1例马赛分枝杆菌未能被MALDI-TOF MS鉴定出,其余鉴定结果均与金标准相符合,符合率为95.00%。结论MALDI-TOF MS技术能准确鉴定NTM及NTM分型,在NTM的实验室诊断中具有较高应用价值。 展开更多

关键词 非结核分枝杆菌 结核分枝杆菌复合群 基质辅助激光解析电离飞行时间质谱 双重引物聚合酶链反应

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MPB64免疫胶体金检测法快速分枝杆菌鉴定的应用 被引量：1

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作者 玉海玲 闭德武 +2 位作者 覃慧芳 磨立达 罗晓璐 《浙江临床医学》 2020年第6期884-886,共3页

目的探讨结核分枝杆菌培养物滤液蛋白(MPB64)抗原免疫胶体金法检测在分枝杆菌快速鉴定中的应用价值。方法收集2018年7月至11月南宁市第四人民医院294例疑似结核病患者的分枝杆菌临床分离株,分别采用PNB生长试验和MPB64抗原免疫胶体金检... 目的探讨结核分枝杆菌培养物滤液蛋白(MPB64)抗原免疫胶体金法检测在分枝杆菌快速鉴定中的应用价值。方法收集2018年7月至11月南宁市第四人民医院294例疑似结核病患者的分枝杆菌临床分离株,分别采用PNB生长试验和MPB64抗原免疫胶体金检测法进行菌种初步鉴定,以基因芯片法的菌株鉴定结果为比对标准。结果PNB生长试验和MPB64抗原免疫胶体金检测两种方法的符合率99.32%(292/294);PNB法的灵敏度99.63%(270/271),特异度95.83%(23/24);MPB64抗原胶体金检测法的灵敏度99.63%(269/270),特异度100%(24/24);两种分枝杆菌鉴定方法的检测结果无显著性差异(χ^2=0.091,P=0.763)。结论MPB64抗原免疫胶体金检测法操作更简便,特异度更高,能在培养阳性结果报告发出的当天即可做分枝杆菌鉴定并发出鉴定结果,较传统PNB培养法提前了28d。具有较高的临床应用价值。 展开更多

关键词 结核分枝杆菌复合群 非结核分枝杆菌 MPB64特异性蛋白 免疫胶体金检测

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多重PCR-变性高效液相色谱法快速检测结核致病菌群并同步鉴别致病菌种 被引量：3

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作者 陈茹 高小博 +3 位作者 郭爱珍 刘志玲 吴晓薇 朱道中 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期1504-1510,共7页

本研究旨在运用多重PCR联合变性高效液相色谱(DHPLC)技术原理,建立快速检测人兽结核致病菌群并鉴别主要致病菌种的新方法。建立了四重PCR-DHPLC方法,可同时检测结核分枝杆菌复合群(MTC)特异的IS6110和IS1081插入序列、结核分枝杆菌特异... 本研究旨在运用多重PCR联合变性高效液相色谱(DHPLC)技术原理,建立快速检测人兽结核致病菌群并鉴别主要致病菌种的新方法。建立了四重PCR-DHPLC方法,可同时检测结核分枝杆菌复合群(MTC)特异的IS6110和IS1081插入序列、结核分枝杆菌特异结构基因和牛分枝杆菌特异结构基因共4个目标基因。采用13种分枝杆菌标准菌株和分离株以及23种常见微生物样品进行特异性试验,采用纯化标准菌株DNA以及克隆了扩增序列的重组质粒DNA进行检测灵敏度试验,采用从临床疑似发病牛群采集的牛组织样品进行临床检测试验,并与细菌分离培养方法进行比对。结果表明:所建立的多重PCR-DHPLC方法能特异检测MTC并准确鉴别结核分枝杆菌和牛分枝杆菌,而对其它11种分枝杆菌以及23种常见微生物样品均呈典型阴性检测结果;检测灵敏度达到每个反应102～103基因拷贝或3.6～6.8fg DNA模板浓度。采用该法从39份临床疑似样品中检出33份MTC阳性并检出其中28份为牛分枝杆菌阳性,而培养法检出21份阳性样品。采用该法临床检测全程可缩短至1d之内,其中对纯化DNA样品的检测分析可在2h内完成。本研究为人兽结核致病菌(群)的快速检测鉴别提供了新型分子生物学方法。 展开更多

关键词 变性高效液相色谱 结核分枝杆菌复合群 结核分枝杆菌 牛分枝杆菌

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牛结核病荧光定量PCR引物探针的组合筛选比较

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作者 毛迎雪 亓菲 +9 位作者 张皓博 曲瑶 南文龙 刘蒙达 苏华彬 姜志强 刘建柱 孙淑芳 胡莉萍 樊晓旭 《中国动物检疫》 CAS 2024年第8期105-111,共7页

为比较牛结核病荧光定量PCR(qPCR)不同引物探针组合的特异性和敏感性,验证其临床检测效果,选取国际、国家、行业、地方标准及文献报道的11组qPCR鉴定引物探针组合,采用牛分枝杆菌基因组DNA国家二级标准物质、参考菌株核酸和临床奶样对... 为比较牛结核病荧光定量PCR(qPCR)不同引物探针组合的特异性和敏感性,验证其临床检测效果,选取国际、国家、行业、地方标准及文献报道的11组qPCR鉴定引物探针组合,采用牛分枝杆菌基因组DNA国家二级标准物质、参考菌株核酸和临床奶样对其进行比较、验证。结果显示:11组引物探针均无非特异性扩增,表现出良好的特异性;国标IS1081引物检测灵敏度最高,最低检测限可达1.4×10^(-1);除国标Mtb(结核分枝杆菌)引物外,其他引物探针组合重复性良好(CV<10%);30份临床样品中国标IS1081引物阳性样品检出率明显高于其他引物。结果表明,国标IS1081引物探针组合特异、灵敏、临床检测效果更优,推荐用于实验室qPCR检测牛结核病。 展开更多

关键词 牛结核病 结核分枝杆菌复合群 牛分枝杆菌 荧光定量PCR 引物探针

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结核病诊断生物标志物研究进展

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作者 姜治强 刘蒙达 +7 位作者 孙翔翔 亓菲 南文龙 邵卫星 常璐 孙淑芳 张皓博 樊晓旭 《中国动物检疫》 CAS 2024年第10期53-62,共10页

结核病由结核分枝杆菌复合群(Mycobacterium tuberculosis complex,MTBC)引起,对全球人类和动物健康造成了较大威胁。MTBC成员基因组序列相似性较高,鉴别难度较大。而现有诊断生物标志物在结核病早期诊断、潜伏性结核分枝杆菌感染与活... 结核病由结核分枝杆菌复合群(Mycobacterium tuberculosis complex,MTBC)引起,对全球人类和动物健康造成了较大威胁。MTBC成员基因组序列相似性较高,鉴别难度较大。而现有诊断生物标志物在结核病早期诊断、潜伏性结核分枝杆菌感染与活动性结核病状态鉴别、治疗效果评估等方面还存在不足。随着分子生物学技术的发展和临床研究的不断深入,更多新的结核病诊断生物标志物不断被发掘。本文从结核病病原和宿主两个方面,系统归纳了DNA、RNA、脂阿拉伯糖甘露聚糖(LAM)、蛋白质、细胞因子、代谢产物等结核病诊断相关生物标志物的研究进展及应用现状,以期为结核病诊断生物标志物的应用及相关诊断技术和产品的研发提供依据和方向。 展开更多

关键词 结核分枝杆菌复合群 结核病 诊断生物标志物

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