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动物结核分枝杆菌复合群间接ELISA诊断方法的建立 被引量:1
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作者 庄勇 向蒙 +6 位作者 冯桂丹 杨显超 夏炉明 肖文轩 张蒙 王建 张鹭 《中国动物传染病学报》 北大核心 2025年第1期125-133,共9页
本研究通过前期已构建好一些优势抗原的表达载体库,以生物信息学工具分析候选抗原的理化性质、二级结构、B细胞抗原表位,选择优势抗原,以纯化后的融合抗原ECX作为包被抗原,将HRP标记的Protein G作为酶标的二抗,成功建立了一种用于多动... 本研究通过前期已构建好一些优势抗原的表达载体库,以生物信息学工具分析候选抗原的理化性质、二级结构、B细胞抗原表位,选择优势抗原,以纯化后的融合抗原ECX作为包被抗原,将HRP标记的Protein G作为酶标的二抗,成功建立了一种用于多动物结核分枝杆菌复合群间接ELISA诊断的方法。该方法适用于实验室样品批量检测,其敏感性为0.912,特异性为0.949。应用本研究建立的动物结核分枝杆菌间接ELISA法和商品化动物结核分枝杆菌夹心ELISA抗体检测试剂盒共检测犬、猫、野生动物、SPF实验动物血清共552份。其中间接ELISA方法共检出6份血清抗体阳性,阳性检出率为1.09%(6/552);商品化夹心法试剂盒共检出8份血清抗体阳性,阳性检出率为1.45%(8/552);两者之间阳性重合数为6份,阳性重合率为85.72%(6/7);阴性重合数为544份,阴性重合率为99.82%(544/545)。结果表明,两种诊断方法的检测结果具有较高的一致性。本方法的建立,与国外商品化试剂盒比较,不但有望实现这类检测产品的国产替代,同时实现了一种方法对不同物种来源血清的快速检测。 展开更多
关键词 抗原 结核分枝杆菌复合群 ECX 间接ELISA
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PCR法鉴定结核分枝杆菌复合群亚种的研究 被引量:2
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作者 汪小黎 崔振玲 +2 位作者 王洁 陆俊梅 胡忠义 《中国防痨杂志》 CAS 2010年第3期159-161,共3页
关键词 结核分枝杆菌复合群 PCR法 菌种鉴定 亚种 临床使用 药物敏感性 生化方法 快速鉴定
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采用gyrB基因扩增快速鉴定结核分枝杆菌复合群的初步研究 被引量:5
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作者 尹小毛 刘志辉 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2010年第23期4262-4264,共3页
目的:初步分析gyrB基因扩增用于结核分枝杆菌复合群(MTC)快速鉴定的可行性。方法:采用特异性引物进行分枝杆菌标准株和临床株的gyrB基因扩增,再通过琼脂糖凝胶电泳观察聚合酶链反应(PCR)结果。结果:15株各种分枝杆菌标准株中,结核分枝杆... 目的:初步分析gyrB基因扩增用于结核分枝杆菌复合群(MTC)快速鉴定的可行性。方法:采用特异性引物进行分枝杆菌标准株和临床株的gyrB基因扩增,再通过琼脂糖凝胶电泳观察聚合酶链反应(PCR)结果。结果:15株各种分枝杆菌标准株中,结核分枝杆菌(MTB)、牛分枝杆菌和非洲分枝杆菌均扩增出1184bp目的片段,而其余分枝杆菌PCR结果为阴性;94株分枝杆菌临床株中,60株MTB和10株牛分枝杆菌扩增阳性,而其他分枝杆菌(包括6株脓肿分枝杆菌、5株偶发分枝杆菌、4株龟分枝杆菌、3株鸟分枝杆菌、3株胞内分枝杆菌、2株耻垢分枝杆菌、1株堪萨斯分枝杆菌)均扩增阴性。结论:采用针对MTC的特异性引物进行gyrB基因扩增能快速、准确地鉴别MTC和非结核分枝杆菌。 展开更多
关键词 分枝杆菌 gyrB基因 结核分枝杆菌复合群 聚合酶链反应
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结核分枝杆菌复合群、副结核分枝杆菌和禽分枝杆菌禽亚种多重TaqMan荧光定量PCR方法的建立及初步应用 被引量:6
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作者 蔡珠明 党光辉 +6 位作者 臧鑫鑫 邵明珠 唐阳阳 鹿萍 崔莹莹 崔子寅 刘思国 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期51-59,共9页
结核分枝杆菌复合群(MTBC)、包括结核分枝杆菌(MTB)、牛分枝杆菌(MB)、非洲分枝杆菌、田鼠分枝杆菌等;非结核分枝杆菌(NTM)中禽分枝杆菌(MA)是自然界常见的动物致病菌,包含4个亚种,分别为禽分枝杆菌禽亚种(MAA)、禽分枝杆菌人/猪亚种(M... 结核分枝杆菌复合群(MTBC)、包括结核分枝杆菌(MTB)、牛分枝杆菌(MB)、非洲分枝杆菌、田鼠分枝杆菌等;非结核分枝杆菌(NTM)中禽分枝杆菌(MA)是自然界常见的动物致病菌,包含4个亚种,分别为禽分枝杆菌禽亚种(MAA)、禽分枝杆菌人/猪亚种(MAH)、禽分枝杆菌副结核亚种/副结核分枝杆菌(MAP)和禽分枝杆菌森林土壤亚种(MAS)。为建立MTBC、MAP和MAA的多重荧光定量PCR检测方法,本研究基于MTBC、MAP和MAA的特异性基因devR、F57和IS901分别设计引物及探针,通过优化各反应条件,建立了一种可同时检测3种分枝杆菌的多重Taq Man荧光定量PCR方法。特异性试验结果显示,该方法对MTB、MB、MAP、MAA和MAS检测为阳性,对其他畜禽病原菌,包括MAH、13种NTM和7种非分枝杆菌检测结果均为阴性,特异性较强。敏感性试验结果显示,该方法对MB、MAP和MAA重组质粒标准品的检测限均为1.0拷贝/μL,敏感性较高;重复性试验结果显示,批内与批间重复性试验变异系数均小于2.5%,重复性较好。利用该方法检测体外模拟污染(MB、MAP和MAA菌液浓度分别为1.0×10^(3)cfu/mL~1.0×10^(0)cfu/mL)的27份牛抗凝血和12份牛淋巴结组织样品,确定该方法对3种菌的检测限,结果显示该方法对3种菌的检测限均为1.0 cfu/mL~10.0 cfu/mL。将浓度为1.0×10^(6)cfu/mL的MB、MAP和MAA菌液分别单一、两两混合、三种菌混合感染BALB/c小鼠,5 d后,剖杀各组小鼠并取各组织及血液样品,同时采用该方法、常规单一PCR及细菌分离培养方法检测,比较三者的检测结果。结果显示,多重荧光定量PCR方法对不同感染组小鼠的各组织样品检出率为98.1%(212/216),常规单一PCR方法的检出率为81.5%(176/216),细菌分离培养的检出率为52.8%(114/216),多重荧光定量PCR与常规单一PCR的阳性符合率均为100.0%(176/176),与细菌分离培养鉴定结果的阳性符合率均为100.0%(114/114)。本研究首次建立了能够同时检测MTBC、MAP和MAA的Taq Man多重荧光定量PCR方法,其特异性强、敏感性高、重复性及稳定性好,检测性能强,可以用于临床各种样品的检测,为这3种病原的快速检测和流行病学调查提供了技术手段。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌复合群 结核分枝杆菌 分枝杆菌禽亚种 多重Taq Man荧光定量PCR
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应用PCR技术快速鉴定结核分枝杆菌复合群菌种 被引量:3
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作者 庄燕 白云 +7 位作者 吴雪琼 张俊仙 梁建琴 阳幼荣 梁艳 吕翠环 张广宇 李洪敏 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第18期1846-1849,共4页
目的建立快速鉴定结核分枝杆菌复合群菌种的方法。方法将7对结核分枝杆菌复合群各菌种特异性引物(M tbc1-7)进行聚合酶链反应(PCR)扩增,通过对扩增产物的不同系带型进行分析,对已知标准株和96株临床分离株进行菌种鉴定。结果用3株结核... 目的建立快速鉴定结核分枝杆菌复合群菌种的方法。方法将7对结核分枝杆菌复合群各菌种特异性引物(M tbc1-7)进行聚合酶链反应(PCR)扩增,通过对扩增产物的不同系带型进行分析,对已知标准株和96株临床分离株进行菌种鉴定。结果用3株结核分枝杆菌复合群(MTBC)标准株,9株非分枝杆菌标准株以及27株非结核分枝杆菌的分枝杆菌(MOTT)对7对结核分枝杆菌复合群各菌种特异性引物进行特异性鉴定,结果证明引物M tbc1能鉴定出分枝杆菌和非分枝杆菌;引物M tbc2能鉴定出MOTT和MTBC;引物M tbc3能鉴定出田鼠分枝杆菌;引物M tbc4能从MTBC中识别出牛分枝杆菌和卡介苗;引物M tbc5能鉴定出非洲分枝杆菌Ⅱ型和结核分枝杆菌;引物M tbc6和引物M tbc4结合能鉴定出卡介苗;引物M tbc7和引物M tbc5联合能鉴定出canettii分枝杆菌。96株临床分离株经7对引物扩增,扩增结果显示MOTT 20株,牛分枝杆菌1株,卡介苗1株,canettii分枝杆菌3株,田鼠分枝杆菌3株,非洲分枝杆菌Ⅰ型3株,caprae分枝杆菌1株,结核分枝杆菌或非洲分枝杆菌Ⅱ型64株。结论应用PCR技术鉴定结核分枝杆菌复合群菌种结果准确可靠,且具有简便和快速等优点,有较大的分子流行病学应用价值。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌复合群 聚合酶链反应 菌种鉴定
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结核分枝杆菌复合群耐药性研究进展
6
作者 亓菲 樊晓旭 +3 位作者 刘蒙达 孙淑芳 范伟兴 温建新 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2022年第4期70-74,共5页
结核分枝杆菌复合群(Mycobacterium tuberculosis complex,MTBC)的成员包括结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)、牛分枝杆菌(Mycobacterium bovis,bTB)、非洲分枝杆菌(Mycobacterium africanum)、田鼠分枝杆菌(Mycobacterium... 结核分枝杆菌复合群(Mycobacterium tuberculosis complex,MTBC)的成员包括结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)、牛分枝杆菌(Mycobacterium bovis,bTB)、非洲分枝杆菌(Mycobacterium africanum)、田鼠分枝杆菌(Mycobacterium microti)和山羊分枝杆菌(Mycobacterium caprae)等。其中结核分枝杆菌和牛分枝杆菌分别是人结核病、牛结核病的主要病原菌。至今,结核病仍是威胁人类社会及畜牧业发展的重要人兽共患传染病。世界卫生组织(WHO)估计,2019年全球有1000万(890万~1100万)人感染了结核病,近年来这一数字相对稳定。在所有结核病病例中,8.6%是艾滋病病毒感染者。从地理分布上看,2019年结核病病例大多分布在东南亚(44%)、非洲(25%)和西太平洋(18%)。从全球分布看,印度(26.0%)、印度尼西亚(8.5%)和中国(8.4%)所占比例较高[1]。近年来,由于抗生素过度和不当使用,出现了多种耐药结核菌,包括对一线结核药物异烟肼(Isoniazid,INH)和利福平(Rifampicin,RIF)具有耐药性的耐多药结核菌株(MDR)及在MDR基础上对氟喹诺酮类药物以及二线抗结核注射剂(卷曲霉素、卡那霉素、丁胺卡那)中的至少1种耐药的广泛耐药结核菌株(XDR)。抗生素耐药性(AMR)已成为全球结核病防控的难点。据WHO统计,2019年3.3%的新结核病例和17.7%的先前治疗的病例是耐多药结核病。2019年,新发利福平耐药结核病病例约50万例(其中78%为耐多药结核病)。全球结核病负担最大的3个国家分别是印度(27%)、中国(14%)和俄罗斯联邦(8%)。联合国报告预计,如果对抗生素耐药不加控制,到2050年每年可能导致多达1000万人因患结核病而死亡。鉴于此,本文综述了常见抗结核药物及其耐药研究进展,总结了结核耐药监测与检测方法,为结核病耐药性研究提供参考。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌复合群 耐药性研究 耐多药结核 卷曲霉素 人兽共患传染病 耐药结核 抗生素耐药性 tuberculosis
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PCR检测结核分枝杆菌复合群IS_(986)DNA重复序列 被引量:1
7
作者 朱诗应 杨毓华 邵海枫 《医学研究生学报》 CAS 1994年第3期29-32,共4页
用PCR检测MTBC特异的IS986DNA重复序列。IS986DNA重复序列全长1358bp,特异地存在于MTBC细菌染色体DNA中,并且多次重复出现。作者参照文献,在此序列内合成一对引物,扩增出188bp的MTBC... 用PCR检测MTBC特异的IS986DNA重复序列。IS986DNA重复序列全长1358bp,特异地存在于MTBC细菌染色体DNA中,并且多次重复出现。作者参照文献,在此序列内合成一对引物,扩增出188bp的MTBC特异的DNA片段。实验证明具有高度的特异性和敏感性。与其它的分枝杆菌和人血细胞DNA无交叉反应。最小检出极限为10fgDNA或10个菌体/ml。对PCR反应体系中有关实验条件如引物浓度、TaqDNA聚合酶用量、循环程序等进行了优化选择。在临床标本细菌DNA抽提中首次采用了简便的TE-Triton煮沸法,节省了成本,使整个检测时间缩短至6~8h。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌复合群 聚合酶链反应 DNA重复序列
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非结核分枝杆菌病的流行趋势、诊断及治疗 被引量:20
8
作者 吴琪茵 黎友伦 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期491-494,共4页
关键词 结核分枝杆菌 获得性免疫缺陷综合征(acquired IMMUNODEFICIENCY 流行趋势 结核分枝杆菌复合群 结核分支杆菌 治疗 诊断
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2011-2013年南京市胸科医院非结核分枝杆菌感染状况及耐药分析 被引量:4
9
作者 胡春梅 王相栋 +3 位作者 葛海波 张侠 解卫平 王虹 《中国防痨杂志》 CAS 2014年第11期986-988,共3页
非结核分枝杆菌(non-tuberculous mycobacteria,NTM)是指除结核分枝杆菌、牛分枝杆菌、非洲分枝杆菌和田鼠分枝杆菌等结核分枝杆菌复合群及麻风分枝杆菌以外的分枝杆菌总称.NTM属于机会致病菌,在自然界广泛存在,仅少部分NTM对人体致病... 非结核分枝杆菌(non-tuberculous mycobacteria,NTM)是指除结核分枝杆菌、牛分枝杆菌、非洲分枝杆菌和田鼠分枝杆菌等结核分枝杆菌复合群及麻风分枝杆菌以外的分枝杆菌总称.NTM属于机会致病菌,在自然界广泛存在,仅少部分NTM对人体致病,可侵犯肺脏、淋巴结、骨骼、关节、皮肤和软组织等组织和器官,并可引起全身播散性疾病[1-2]. 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 耐药分析 感染状况 胸科医院 南京市 结核分枝杆菌复合群 机会致病菌 麻风分枝杆菌
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荧光定量PCR在手部非结核分枝杆菌感染中的应用进展 被引量:1
10
作者 胡正祥 陈世玖 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第3期341-343,共3页
非结核分枝杆菌(NTM)是指除结核分枝杆菌复合群(MTC)及麻风分枝杆菌以外的其他分枝杆菌。NTM通常属于机会致病菌,目前已发现的NTM有154种。在一些国家和地区.NTM的发病率和患病率呈逐年升高趋势,甚至可能超过结核病。NTM引起人... 非结核分枝杆菌(NTM)是指除结核分枝杆菌复合群(MTC)及麻风分枝杆菌以外的其他分枝杆菌。NTM通常属于机会致病菌,目前已发现的NTM有154种。在一些国家和地区.NTM的发病率和患病率呈逐年升高趋势,甚至可能超过结核病。NTM引起人类疾病通常为继发性的.在AIDS和免疫受损患者中,NTM病常表现为播散性。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌感染 荧光定量PCR 结核分枝杆菌复合群 NTM病 应用 手部 麻风分枝杆菌 机会致病菌
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耐高温的结核分枝杆菌二株
11
作者 吴龙章 蔡杏珊 +4 位作者 谭耀驹 杨建良 刘燕文 钟炳棠 陈剑锋 《中国防痨杂志》 CAS 2012年第11期746-747,共2页
分枝杆菌菌型鉴定在结核病流行病学调研和临床用药指导方面起到了至关重要的作用[1],因由Mtb或非结核分枝杆菌(non-tuberculosisMycobacteria,NTM)引致的肺部疾病,其临床症状和X线影像表现没有任何的区别,但临床治疗有很大的差异... 分枝杆菌菌型鉴定在结核病流行病学调研和临床用药指导方面起到了至关重要的作用[1],因由Mtb或非结核分枝杆菌(non-tuberculosisMycobacteria,NTM)引致的肺部疾病,其临床症状和X线影像表现没有任何的区别,但临床治疗有很大的差异甚至完全不同心],因此结核分枝杆菌复合群(MTC)与NTM正确的区分尤为重要。故中国防痨协会基础专业委员会在1995年制定并于2006年再版修订了《结核病诊断实验室检验规程》(简称“规程”)[3],其中分枝杆菌的鉴定程序为结核病流行病学调研和指导临床用药方面提供了可靠的业务保障。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 耐高温 结核分枝杆菌复合群 流行病学调研 结核病诊断 临床症状 中国防痨协会 检验规程
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非结核分枝杆菌胸膜炎三例 被引量:6
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作者 解雪飞 杨新婷 +1 位作者 车南颖 段鸿飞 《中国防痨杂志》 CAS CSCD 2020年第11期1254-1257,共4页
非结核分枝杆菌(nontuberculous mycobacteria,NTM)是除结核分枝杆菌复合群和麻风分枝杆菌以外的分枝杆菌。NTM主要侵犯肺脏,此外还可引起淋巴结、骨骼、关节、皮肤和软组织等肺外病变。近年来,全球NTM肺病呈增多趋势,已成为威胁人类健... 非结核分枝杆菌(nontuberculous mycobacteria,NTM)是除结核分枝杆菌复合群和麻风分枝杆菌以外的分枝杆菌。NTM主要侵犯肺脏,此外还可引起淋巴结、骨骼、关节、皮肤和软组织等肺外病变。近年来,全球NTM肺病呈增多趋势,已成为威胁人类健康的重要公共卫生问题,但由NTM引起的胸膜炎相对少见[1-2]。有文献报道,NTM感染的患者中胸腔积液的发生率为3.4%~6%[3-4]。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 结核分枝杆菌复合群 麻风分枝杆菌 胸膜炎 胸腔积液 公共卫生问题 文献报道 NTM
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分子生物学技术诊断手部非结核分枝杆菌感染的研究进展 被引量:3
13
作者 武迪 陈世玖 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第21期3483-3485,共3页
非结核分枝杆菌(nontuberculous mycobacteria.NTM)是指除结核分枝杆菌复合群(mycobacterium tuberculous complex.MTC)及麻风分枝杆菌以外的其他分枝杆菌。NTM广泛存在于自然环境中.迄今为止.已发现的NTM有169种。通常属于机... 非结核分枝杆菌(nontuberculous mycobacteria.NTM)是指除结核分枝杆菌复合群(mycobacterium tuberculous complex.MTC)及麻风分枝杆菌以外的其他分枝杆菌。NTM广泛存在于自然环境中.迄今为止.已发现的NTM有169种。通常属于机会致病菌,极少数为致病菌。NTM引起人类的疾病通常为继发性疾病.在艾滋病和免疫受损患者中,NTM病常表现为播散性。当前研究显示手部NTM感染率正在逐年激增,其感染菌主要为:海、鸟、堪萨斯、偶发、龟、脓肿、溃疡分枝杆菌等共18种。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌感染 分子生物学 技术诊断 手部 结核分枝杆菌复合群 NTM病 继发性疾病 麻风分枝杆菌
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外科治疗儿童非结核分枝杆菌性颈淋巴结炎二例 被引量:1
14
作者 李会 李欣 +3 位作者 Susan Penelope Cadzow 范齐文 路光中 滕国良 《临床小儿外科杂志》 CAS CSCD 2021年第10期998-1000,共3页
非结核分枝杆菌(nontuberculous mycobacteria,NTM)是指除了结核分枝杆菌复合群和麻风分枝杆菌以外的分枝杆菌,广泛存在于土壤、河流、工矿等自然环境以及人类生活环境之中。根据NTM侵犯部位的不同,分为NTM肺病、NTM淋巴结病、NTM皮肤... 非结核分枝杆菌(nontuberculous mycobacteria,NTM)是指除了结核分枝杆菌复合群和麻风分枝杆菌以外的分枝杆菌,广泛存在于土壤、河流、工矿等自然环境以及人类生活环境之中。根据NTM侵犯部位的不同,分为NTM肺病、NTM淋巴结病、NTM皮肤病及播散性NTM病。国外有文献报道,儿童NTM颈部淋巴结炎占头颈部分枝杆菌性淋巴结炎的95%以上,但在我国报道较少^([1])。现回顾性分析上海嘉会国际医院2020年4月至2020年6月收治的2例儿童NTM颈部淋巴结炎患者的临床资料,总结该病诊治经验。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 结核分枝杆菌复合群 麻风分枝杆菌 颈部淋巴结炎 淋巴结病 侵犯部位 颈淋巴结炎 播散性
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分枝杆菌分子鉴定中常用的靶基因序列的研究进展 被引量:5
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作者 王洪秀 乐军 《中国防痨杂志》 CAS 2009年第8期491-494,共4页
关键词 结核分枝杆菌复合群 靶基因序列 结核分枝杆菌感染 分子鉴定 麻风分枝杆菌 分枝杆菌 分枝杆菌 调查资料
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偶发分枝杆菌引起的血流感染一例
16
作者 王会玉 陈映 《中国防痨杂志》 CAS CSCD 2021年第3期299-301,共3页
非结核分枝杆菌(non-tuberculous mycobacteria,NTM)是除了结核分枝杆菌复合群与麻风分枝杆菌外的一类抗酸染色阳性的分枝杆菌的统称。根据其生长速度,可划分为快速生长分枝杆菌(rapidly growing mycobacteria,RGM)和缓慢生长分枝杆菌(s... 非结核分枝杆菌(non-tuberculous mycobacteria,NTM)是除了结核分枝杆菌复合群与麻风分枝杆菌外的一类抗酸染色阳性的分枝杆菌的统称。根据其生长速度,可划分为快速生长分枝杆菌(rapidly growing mycobacteria,RGM)和缓慢生长分枝杆菌(slowly growing mycobacteria,SGM)两种类型。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 结核分枝杆菌复合群 麻风分枝杆菌 抗酸染色 偶发分枝杆菌 血流感染 快速生长分枝杆菌 生长速度
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多重PCR-变性高效液相色谱法快速检测结核致病菌群并同步鉴别致病菌种 被引量:3
17
作者 陈茹 高小博 +3 位作者 郭爱珍 刘志玲 吴晓薇 朱道中 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期1504-1510,共7页
本研究旨在运用多重PCR联合变性高效液相色谱(DHPLC)技术原理,建立快速检测人兽结核致病菌群并鉴别主要致病菌种的新方法。建立了四重PCR-DHPLC方法,可同时检测结核分枝杆菌复合群(MTC)特异的IS6110和IS1081插入序列、结核分枝杆菌特异... 本研究旨在运用多重PCR联合变性高效液相色谱(DHPLC)技术原理,建立快速检测人兽结核致病菌群并鉴别主要致病菌种的新方法。建立了四重PCR-DHPLC方法,可同时检测结核分枝杆菌复合群(MTC)特异的IS6110和IS1081插入序列、结核分枝杆菌特异结构基因和牛分枝杆菌特异结构基因共4个目标基因。采用13种分枝杆菌标准菌株和分离株以及23种常见微生物样品进行特异性试验,采用纯化标准菌株DNA以及克隆了扩增序列的重组质粒DNA进行检测灵敏度试验,采用从临床疑似发病牛群采集的牛组织样品进行临床检测试验,并与细菌分离培养方法进行比对。结果表明:所建立的多重PCR-DHPLC方法能特异检测MTC并准确鉴别结核分枝杆菌和牛分枝杆菌,而对其它11种分枝杆菌以及23种常见微生物样品均呈典型阴性检测结果;检测灵敏度达到每个反应102~103基因拷贝或3.6~6.8fg DNA模板浓度。采用该法从39份临床疑似样品中检出33份MTC阳性并检出其中28份为牛分枝杆菌阳性,而培养法检出21份阳性样品。采用该法临床检测全程可缩短至1d之内,其中对纯化DNA样品的检测分析可在2h内完成。本研究为人兽结核致病菌(群)的快速检测鉴别提供了新型分子生物学方法。 展开更多
关键词 变性高效液相色谱 结核分枝杆菌复合群 结核分枝杆菌 分枝杆菌
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牛结核病荧光定量PCR引物探针的组合筛选比较 被引量:1
18
作者 毛迎雪 亓菲 +9 位作者 张皓博 曲瑶 南文龙 刘蒙达 苏华彬 姜志强 刘建柱 孙淑芳 胡莉萍 樊晓旭 《中国动物检疫》 CAS 2024年第8期105-111,共7页
为比较牛结核病荧光定量PCR(qPCR)不同引物探针组合的特异性和敏感性,验证其临床检测效果,选取国际、国家、行业、地方标准及文献报道的11组qPCR鉴定引物探针组合,采用牛分枝杆菌基因组DNA国家二级标准物质、参考菌株核酸和临床奶样对... 为比较牛结核病荧光定量PCR(qPCR)不同引物探针组合的特异性和敏感性,验证其临床检测效果,选取国际、国家、行业、地方标准及文献报道的11组qPCR鉴定引物探针组合,采用牛分枝杆菌基因组DNA国家二级标准物质、参考菌株核酸和临床奶样对其进行比较、验证。结果显示:11组引物探针均无非特异性扩增,表现出良好的特异性;国标IS1081引物检测灵敏度最高,最低检测限可达1.4×10^(-1);除国标Mtb(结核分枝杆菌)引物外,其他引物探针组合重复性良好(CV<10%);30份临床样品中国标IS1081引物阳性样品检出率明显高于其他引物。结果表明,国标IS1081引物探针组合特异、灵敏、临床检测效果更优,推荐用于实验室qPCR检测牛结核病。 展开更多
关键词 结核 结核分枝杆菌复合群 分枝杆菌 荧光定量PCR 引物探针
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结核病诊断生物标志物研究进展
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作者 姜治强 刘蒙达 +7 位作者 孙翔翔 亓菲 南文龙 邵卫星 常璐 孙淑芳 张皓博 樊晓旭 《中国动物检疫》 CAS 2024年第10期53-62,共10页
结核病由结核分枝杆菌复合群(Mycobacterium tuberculosis complex,MTBC)引起,对全球人类和动物健康造成了较大威胁。MTBC成员基因组序列相似性较高,鉴别难度较大。而现有诊断生物标志物在结核病早期诊断、潜伏性结核分枝杆菌感染与活... 结核病由结核分枝杆菌复合群(Mycobacterium tuberculosis complex,MTBC)引起,对全球人类和动物健康造成了较大威胁。MTBC成员基因组序列相似性较高,鉴别难度较大。而现有诊断生物标志物在结核病早期诊断、潜伏性结核分枝杆菌感染与活动性结核病状态鉴别、治疗效果评估等方面还存在不足。随着分子生物学技术的发展和临床研究的不断深入,更多新的结核病诊断生物标志物不断被发掘。本文从结核病病原和宿主两个方面,系统归纳了DNA、RNA、脂阿拉伯糖甘露聚糖(LAM)、蛋白质、细胞因子、代谢产物等结核病诊断相关生物标志物的研究进展及应用现状,以期为结核病诊断生物标志物的应用及相关诊断技术和产品的研发提供依据和方向。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌复合群 结核 诊断生物标志物
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