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题名毕赤酵母发酵耦合多糖酶解一步法制备结冷胶寡糖
被引量：1
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作者
李宏雨
施旭
詹晓北
朱莉
蒋芸
高敏杰
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机构
江南大学生物工程学院
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出处
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第17期16-22,共7页
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基金
国家重点研发计划“绿色生物制造”重点专项“重要氨基酸工业菌种系统改造与产业示范”项目(2021YFC2100900)。
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文摘
化学法与酶法是多糖降解制备低聚糖的常用手段,化学法制备的产物往往组分复杂难以获得单一聚合度的低聚糖,而酶法因其特异性高,能得到均一性高的目标产物,从而成为近年来研究热点。该研究首先优化了酸解生产结冷胶寡糖的工艺条件,优化得到的酸水解条件为底物质量浓度5.0 g/L、HCl浓度0.5 mol/L、水解3 h;进一步提出了发酵耦合酶解一步法制备结冷胶寡糖策略,结果表明,发酵初始酵母粉添加量20 g/L、甲醇添加量1%、发酵初始pH 6.0为结冷胶裂解酶的最佳发酵条件;发酵初始添加2.0 g/L结冷胶,发酵水解96 h为最佳酶解条件。最后通过傅里叶变换红外光谱与基质辅助激光解析电离飞行时间质谱技术对2种降解方式的产物进行了对比分析。酸水解后得到了聚合度为5、8、12的结冷胶寡糖,酶解后得到了聚合度为4的单一结冷胶寡糖,酶解产物中出现了CC结构,酸解产物结构没有变化,该文为结冷胶寡糖制备及探究其功能活性提供了一个可行的途径。
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关键词
结冷胶
酶降解
酸水解
结冷胶寡糖
聚合度
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Keywords
gellan gum
enzymatic degradation
acid hydrolysis
gellan oligosaccharides
degree of polymerization
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分类号
TQ929.2
[轻工技术与工程—发酵工程]
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题名结冷胶裂解酶在毕赤酵母中的异源表达及其性质和应用
被引量：2
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作者
段飞扬
王力
詹晓北
蒋芸
李志涛
高敏杰
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机构
江南大学生物工程学院
江苏艾津作物科技集团有限公司
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出处
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第9期1-7,共7页
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基金
国家重点研发计划“绿色生物制造”重点专项(2021YFC2101100)。
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文摘
结冷胶寡糖由结冷胶降解所得,具有益生活性、植物诱导抗病性等多种生物学功能,其制备意义重大。该研究通过构建重组毕赤酵母以实现结冷胶裂解酶异源表达,并应用于裂解结冷胶制备结冷胶寡糖。重组菌株经筛选鉴定,首先于摇瓶水平诱导表达结冷胶裂解酶,获得酶活力最高为266.4 U/L的菌株;随后在7 L发酵罐中进行高密度发酵,酶活力达954.6 U/L。对重组结冷胶裂解酶进行分离纯化并研究其酶学性质,结果表明,酶促降解反应最适催化温度和pH分别为45℃和7.5,在45~50℃和pH 7.0~9.0下稳定,Zn^(2+)对酶活性略有促进作用,Al^(3+)对酶促反应具有较强的抑制作用。通过薄层色谱法联用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱分析降解产物,该结冷胶寡糖聚合度为4。该研究首次在毕赤酵母中成功表达Bacillus sp.GL1来源结冷胶裂解酶,特异性降解结冷胶制备寡糖,具有一定的工业应用潜力和指导意义。
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关键词
结冷胶裂解酶
毕赤酵母
异源表达
酶学性质
结冷胶寡糖
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Keywords
gellan lyase
Pichia pastoris
heterologous expression
enzymatic property
gellan oligosaccharide
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分类号
TQ920.1
[轻工技术与工程—发酵工程]
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