经典瞬时受体电位通道蛋白在β淀粉样蛋白诱导的阿尔茨海默病小鼠海马区的表达 被引量：1

1

作者 张改改 张丽艳 +3 位作者 邹丹 沈薇 金戈 张利华 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期1100-1104,共5页

目的探讨经典瞬时受体电位（TRPC）通道蛋白在阿尔茨海默病（AD）小鼠海马区中的表达情况。方法将36只ICR小鼠随机分为AD组和对照组，每组18只。13淀粉样蛋白（Aβ）1-42侧脑室注射制作AD小鼠模型。Morris水迷宫试验测定小鼠学习记忆能... 目的探讨经典瞬时受体电位（TRPC）通道蛋白在阿尔茨海默病（AD）小鼠海马区中的表达情况。方法将36只ICR小鼠随机分为AD组和对照组，每组18只。13淀粉样蛋白（Aβ）1-42侧脑室注射制作AD小鼠模型。Morris水迷宫试验测定小鼠学习记忆能力。逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）检测海马区TRPCI-TRPC7mRNA的表达。分别采用免疫荧光和Western blotting检测海马区的TRPC4蛋白表达。结果AD组小鼠水迷宫测试的逃避潜伏期较对照组明显延长（P〈0．01），在目标象限停留时间明显缩短（P〈0．01），穿越平台次数明显减少（P〈0．01）。RT-PCR结果显示，在AD组及对照组TRPCI～TRPC7 mRNA均有不同程度的表达，其中AD组TRPC4mRNA表达较对照组明显增加（P〈0．01）。免疫荧光显示TRPC4表达在海马区的神经细胞膜上，且与对照组相比AD组TRPC4表达增加。Western blotting结果显示AD组TRPC4蛋白表达较对照组增加（P〈0．05）。结论侧脑室注射Aβ1—42寡聚体后，小鼠海马区TRPC4蛋白表达含量增加，提示TRPC4可能参与到钙稳态失调引起的AD的发病机制中。 展开更多

关键词 经典瞬时受体电位通道 阿尔茨海默病 Β淀粉样蛋白

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经典瞬时受体电位通道蛋白在人非小细胞肺癌组织中的表达 被引量：8

2

作者 张奇 何建行 +4 位作者 卢文菊 殷伟强 杨海虹 徐小明 汪道远 《中国肺癌杂志》 CAS 2010年第6期612-616,共5页

背景与目的经典瞬时受体电位(transient receptor potential canonical,TRPC)通道蛋白是一种非选择性阳离子通道蛋白家族,主要位于细胞膜表面,对钙离子具有通透性。研究认为,TRPC可能构成钙池操纵性钙通道(store-operatedcal cium chann... 背景与目的经典瞬时受体电位(transient receptor potential canonical,TRPC)通道蛋白是一种非选择性阳离子通道蛋白家族,主要位于细胞膜表面,对钙离子具有通透性。研究认为,TRPC可能构成钙池操纵性钙通道(store-operatedcal cium channels,SOCC)并介导钙池操纵性钙内流(store-operated calcium entry,SOCE),从而参与细胞的增殖、迁移、基因转录等生命活动。本研究检测非小细胞肺癌(non-small cell lung can cer,NSCLC)组织中TRPC mRNA及蛋白质的表达情况,初步探讨TRPC与NSCLC的可能关系。方法建立TRPC1-7等7个家族成员的荧光定量PCR检测方法,对24例NSCLC患者的肿瘤组织进行了TRPC mRNA的定量检测,并通过蛋白质免疫印迹法对TRPC在蛋白质水平的表达进行了验证。结果在NSCLC患者癌组织检测到TRPC1、TRPC3、TRPC4和TRPC6 mRNA的表达,未检测到TRPC2、TRPC5和TRPC7 mRNA的表达。肺癌组织中TRPC表达丰度为:TRPC1≈TRPC6>TRPC3>TRPC4。蛋白质免疫印迹证实了非小细胞肺癌组织中TRPC1、TRPC3、TRPC4和TRPC6在蛋白质水平的表达。结论非小细胞肺癌组织在mRNA和蛋白质水平均表达TRPC1、TRPC3、TRPC4和TRPC6,其中主要表达TRPC1和TRPC6,它们在构成肺癌细胞中SOCC、介导产生SOCE中的作用有待进一步研究。 展开更多

关键词 肺肿瘤 经典瞬时受体电位通道蛋白 钙池操纵性钙内流

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经典瞬时受体电位通道在哮喘小鼠肺组织中的表达 被引量：5

3

作者 李建华 周丽芬 +4 位作者 陈志勇 刘筱蔼 黄建荣 彭妙茹 赵珅婷 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期678-681,共4页

目的探讨经典瞬时受体电位(transient receptor potential canonical,TRPC)通道在慢性哮喘小鼠肺组织中的表达。方法随机将BALB/c小鼠分成对照组和哮喘组。应用5%鸡卵白蛋白(OVA)腹腔注射致敏和雾化激化的方法制备小鼠慢性哮喘模型,对... 目的探讨经典瞬时受体电位(transient receptor potential canonical,TRPC)通道在慢性哮喘小鼠肺组织中的表达。方法随机将BALB/c小鼠分成对照组和哮喘组。应用5%鸡卵白蛋白(OVA)腹腔注射致敏和雾化激化的方法制备小鼠慢性哮喘模型,对照组用生理盐水代替OVA。最后一次激发24h后处死小鼠,取肺组织进行RT-PCR和免疫组织化学检测,观察哮喘小鼠肺组织TRPC mRNA和蛋白表达水平的变化。结果 RT-PCR结果显示,正常小鼠肺组织分别表达TRPC1、TRPC2、TRPC3、TRPC6mRNA;与对照组相比,哮喘小鼠肺组织TRPC1、TRPC6mRNA表达显著增高(P<0.05);免疫组织化学检测发现TRPC1、6蛋白在哮喘小鼠肺组织的支气管上皮细胞、血管平滑肌细胞及浸润的炎症细胞表达明显增强。结论 TRPC1、TRPC6可能与哮喘发病机制密切相关。 展开更多

关键词 哮喘 肺组织 经典瞬时受体电位通道蛋白

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瞬时受体电位通道蛋白6在人乳腺癌细胞中的表达及其对乳腺癌细胞侵袭能力的影响 被引量：2

4

作者 史海鸿 林建清 +3 位作者 郭启祥 吴鑫泉 余艺煌 陈祥荣 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期1221-1225,共5页

目的:探讨瞬时受体电位通道蛋白6(TRPC6)在人乳腺癌细胞中的表达,阐明TRPC6与乳腺癌细胞侵袭能力的关联性。方法:常规培养的不同侵袭能力乳腺癌细胞株分为MCF-7(低侵袭组)和MDA-MB-231(高侵袭组),采用Western blotting法和RT-PCR法检测... 目的:探讨瞬时受体电位通道蛋白6(TRPC6)在人乳腺癌细胞中的表达,阐明TRPC6与乳腺癌细胞侵袭能力的关联性。方法:常规培养的不同侵袭能力乳腺癌细胞株分为MCF-7(低侵袭组)和MDA-MB-231(高侵袭组),采用Western blotting法和RT-PCR法检测2组中TRPC6蛋白和mRNA的表达;将MDA-MB-231细胞分为空白对照组和SKF96365组,不同浓度SKF96365(5、25和40μmol·L-1)预处理MDA-MB-231细胞,阻滞TRPC6通道,采用Transwell实验和细胞划痕实验检测细胞侵袭能力。结果:Western blotting和RT-PCR法检测,高侵袭组MDA-MB-231细胞中TRPC6蛋白及mRNA表达水平均高于低侵袭组MCF-7细胞(P<0.05);划痕实验,5、25和40μmol·L-1SKF96365组迁移细胞数(76.24±7.54、45.33±4.50和25.12±1.57)均少于空白对照组(130.48±9.55)(P<0.05);Transwell体外侵袭实验,不同浓度SKF96365(5、25和40μmol·L-1)组迁移细胞数明显低于对照组(P<0.05)。结论:高侵袭乳腺癌细胞MDA-MB-231可通过上调TRPC6表达提高乳腺癌细胞的侵袭能力,提示TRPC6在乳腺癌转移中可能起作用。 展开更多

关键词 瞬时受体电位通道蛋白 6 乳腺肿瘤 肿瘤侵袭 transient RECEPTOR potential channel 6

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瞬时受体电位蛋白通道A1在大鼠炎症性膀胱感觉通路中不同部位的表达变化 被引量：3

5

作者 都书琪 吴伟力 +1 位作者 张骞 孔垂泽 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期769-771,776,共4页

目的瞬时受体电位蛋白通道A1(TRPA1)参与机械性感觉、痛觉的传导以及炎性反应,我们制作大鼠的膀胱炎症模型,检测在膀胱传入通路中不同部位TRPA1的表达情况。方法采用大鼠腹腔内注射环磷酰胺制作膀胱炎症模型,正常大鼠作为对照组。采集... 目的瞬时受体电位蛋白通道A1(TRPA1)参与机械性感觉、痛觉的传导以及炎性反应,我们制作大鼠的膀胱炎症模型,检测在膀胱传入通路中不同部位TRPA1的表达情况。方法采用大鼠腹腔内注射环磷酰胺制作膀胱炎症模型,正常大鼠作为对照组。采集膀胱黏膜层及脊髓后根神经节,利用实时定量PCR检测TRPA1转录水平的变化。结果大鼠腹腔内注射环磷酰胺2 d后,肉眼及病理检查证实膀胱炎性反应。TRPA1在膀胱黏膜层的表达水平没有明显变化,在脊髓后根神经节中,与对照组相比,炎症组的TRPA1的表达水平明显上调(P<0.05)。结论在膀胱炎症状态下,TRPA1在黏膜层的表达没有明显变化,提示它作为黏膜层的机械敏感性受体参与炎症诱发的排尿改变的可能性较小;TRPA1在脊髓后根神经节中表达上调,感觉神经元表达的TRPA1可能参与膀胱炎性反应,并且与膀胱炎时病理性的排尿方式相关。 展开更多

关键词 膀胱炎症 瞬时受体电位蛋白通道A1

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蛋白质酪氨酸磷酸化和氯通道参与瞬时受体电位蛋白介导钙池耗竭引起的钙内流 被引量：2

6

作者 丘钦英 杨晓茹 +3 位作者 贺华 李劲梁 王雪融 关永源 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期172-178,共7页

目的　探讨蛋白质酪氨酸磷酸化与Cl-通道对瞬时受体电位 (TRP)蛋白参与的Ca2 + 池耗竭引起的Ca2 + 内流(SOC)的调控作用。方法　采用脂质体转染和Fura 2 /AM荧光光度法 ,测定胞浆游离Ca2 +浓度 ( [Ca2 + ]i) ,比较转染人源性TRP1 (hTRP... 目的　探讨蛋白质酪氨酸磷酸化与Cl-通道对瞬时受体电位 (TRP)蛋白参与的Ca2 + 池耗竭引起的Ca2 + 内流(SOC)的调控作用。方法　采用脂质体转染和Fura 2 /AM荧光光度法 ,测定胞浆游离Ca2 +浓度 ( [Ca2 + ]i) ,比较转染人源性TRP1 (hTRP1 )和人源性TRP3 (hTRP3 )cDNA对毒胡罗卜素 (TG)引起的Ca2 + 内流的作用 ,并观察酪氨酸激酶抑制剂染料木黄酮、Cl-通道阻断剂呋塞米和 4,4 二异硫氰基芪 2 ,2 二磺酸 (DIDS)对其的影响。结果　HEK2 93细胞转染hTRP1cDNA后 ,TG引起的Ca2 + 内流显著增加 ;转染hTRP3cDNA则无明显影响。 5～ 3 0 μmol·L-1染料木黄酮、1～ 8μmol·L-1呋塞米、0 .5～ 1μmol·L-1DIDS对转染hTRP1cDNA细胞的TG诱发的Ca2 + 内流均有抑制作用。结论　hTRP1蛋白可能是HEK2 93细胞SOC的物质基础 ;酪氨酸激酶和Cl-通道均参与HEK2 93细胞SOC的调控 。 展开更多

关键词 钙通道 钙池耗竭引起的钙内流 瞬时受体电位蛋白 蛋白质酪氨酸激酶 氯通道 染料木黄酮 呋塞米 4 4-二异硫氰基芪-2 2-二磺酸

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瞬时受体电位通道锚蛋白1与疼痛关系研究进展 被引量：4

7

作者 李斐 陈悦涵 朱曼 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 北大核心 2018年第11期1227-1229,共3页

当前,疼痛发病率在世界范围内呈上升趋势,严重影响患者的生活质量.临床上镇痛药种类较多,常用的有阿片类、大麻素类、非甾体抗炎药、局麻药、抗癫痫药、抗抑郁药以及N-甲基-D-天冬氨酸受体阻滞剂等,但单一用药往往不能达到令人满意的效... 当前,疼痛发病率在世界范围内呈上升趋势,严重影响患者的生活质量.临床上镇痛药种类较多,常用的有阿片类、大麻素类、非甾体抗炎药、局麻药、抗癫痫药、抗抑郁药以及N-甲基-D-天冬氨酸受体阻滞剂等,但单一用药往往不能达到令人满意的效果,如最常用的阿片类只在30%患者中有效[1].镇痛药的副作用也较常见,如阿片类成瘾性和非甾体抗炎药肝肾毒性等.所以,对于复杂的慢性炎症性疼痛和神经病理性疼痛,具有不同作用机制的镇痛药联合应用逐渐成为临床医师的共识[2].因此寻找具有新颖药理机制且副作用小的镇痛药物有望完善疼痛的药物治疗方案,是众多学者和制药企业的研究热点.瞬时受体电位通道锚蛋白1(transient receptor potential ankyrin 1,TRPA1)是瞬时受体电位(transient receptor potential,TRP)通道家族的一员,在初级感觉神经元末梢高表达,疼痛信号最上游介导伤害感受,临床前和临床研究中发现,阻断TRPA1能够有效缓解或终止慢性炎症性疼痛和神经病理性疼痛,且耐受性良好[3-4].近年TRPA1小分子抑制剂开发非常迅速,TRPA1阻滞剂有望成为从起点处阻断疼痛信号的新型镇痛药. 展开更多

关键词 瞬时受体电位通道 锚蛋白类 疼痛 镇痛药

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瞬时受体电位阳离子通道蛋白6与肾脏疾病 被引量：2

8

作者 张瑶 于力 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期594-597,共4页

瞬时受体电位阳离子通道蛋白6(transient receptor potential cation channel 6,TRPC6)是一个非选择性阳离子通道,定位于足细胞膜,为6次跨膜蛋白。TRPC6与裂孔隔膜分子nephrin以及podocin间存在相互作用,其共同组成裂孔隔膜复合体,突变T... 瞬时受体电位阳离子通道蛋白6(transient receptor potential cation channel 6,TRPC6)是一个非选择性阳离子通道,定位于足细胞膜,为6次跨膜蛋白。TRPC6与裂孔隔膜分子nephrin以及podocin间存在相互作用,其共同组成裂孔隔膜复合体,突变TRPC6干扰了该复合体的功能,导致足细胞不能维持正常的生物学功能。研究发现TRPC6基因突变与遗传性和非遗传性肾脏疾病发病密切相关,突变的TRPC6可能通过使足细胞动力学发生改变以及足细胞数量减少而引起肾脏疾病。阻断TRPC6通道可能是一种治疗蛋白尿性肾脏疾病的有效方法 ,将给肾病患者带来长期的临床效应。 展开更多

关键词 瞬时受体电位阳离子通道蛋白6 肾脏疾病 蛋白尿

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瞬时受体电位阳离子通道蛋白6在缺血-再灌注损伤中的作用研究进展 被引量：2

9

作者 郭文文 袁圆 +3 位作者 魏华锋 罗豪 李灵玉 吕兴华 《器官移植》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期659-665,共7页

缺血-再灌注损伤(IRI)是指缺血组织或器官血液供应恢复导致的再灌注损伤,在器官移植等外科手术过程中较为常见,可引起一系列严重的临床问题,如移植物功能延迟恢复、急性肾损伤、心肌梗死、缺血性脑卒中、循环骤停等,发生率和病死率较高... 缺血-再灌注损伤(IRI)是指缺血组织或器官血液供应恢复导致的再灌注损伤,在器官移植等外科手术过程中较为常见,可引起一系列严重的临床问题,如移植物功能延迟恢复、急性肾损伤、心肌梗死、缺血性脑卒中、循环骤停等,发生率和病死率较高,目前尚无有效的解决办法。瞬时受体电位阳离子通道蛋白6(TRPC6)是Ca^(2+)通道家族中的一员,在多种细胞中高表达,可通过调节细胞内Ca浓度参与多项生理功能的调控,已成为研发治疗多种疾病药物的重要靶点。本文就TRPC6的概述及功能、TRPC6与IRI及TRPC6靶向药物在IRI中治疗前景的研究进展作一综述,以期为器官移植过程中IRI的防治提供新的思路。 展开更多

关键词 瞬时受体电位阳离子通道蛋白6(TRPC6) 缺血-再灌注损伤 Ca^(2+)超载 氧化应激 金丝桃素 白藜芦醇 曲美他嗪 沃替西汀 阿魏酸哌嗪

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经典瞬时受体电位通道与神经系统疾病

10

作者 李婧静 张淑坤 吴世政 《中国神经精神疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期761-764,共4页

瞬时受体电位通道（transient receptor potential channel，TRP）是细胞膜上重要的主要透Ca2＋的阳离子通道，最早发现于黑腹果蝇视觉传导系统。现已发现30多种哺乳动物TRP。经典瞬时受体电位通道（transient receptor potential canon... 瞬时受体电位通道（transient receptor potential channel，TRP）是细胞膜上重要的主要透Ca2＋的阳离子通道，最早发现于黑腹果蝇视觉传导系统。现已发现30多种哺乳动物TRP。经典瞬时受体电位通道（transient receptor potential canonical，TRPC）是与黑腹果蝇TRP同源性最高的TRP亚家族。神经元Ca2＋浓度的变化在许多基本生命活动中有重要作用，且研究发现TRPC广泛表达于神经系统，已证实一些神经系统疾病的发生发展与细胞内钙稳态的失衡有关，因此，TRPC可视为许多神经系统疾病的潜在治疗目标。 展开更多

关键词 经典瞬时受体电位通道 癫痫 帕金森病 阿尔茨海默病

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瞬时受体电位通道A1在压力负荷致心肌肥厚小鼠的表达及意义 被引量：4

11

作者 王震 刘剑芳 +5 位作者 王梦龙 叶晶 徐瑶 姜慧敏 叶迪 万军 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 北大核心 2018年第8期858-861,共4页

目的探讨瞬时受体电位通道A1(TRPA1)在压力负荷致心肌肥厚小鼠心肌组织中的表达及意义。方法选择SPF级雄性小鼠32只,随机分为假手术组和模型组,每组各16只。2组于第4周行超声检测,包括左心室收缩末期内径(LVESD)、左心室舒张末期内径(LV... 目的探讨瞬时受体电位通道A1(TRPA1)在压力负荷致心肌肥厚小鼠心肌组织中的表达及意义。方法选择SPF级雄性小鼠32只,随机分为假手术组和模型组,每组各16只。2组于第4周行超声检测,包括左心室收缩末期内径(LVESD)、左心室舒张末期内径(LVEDD)、LVEF以及左心室短轴缩短率(LVFS)。处死小鼠测量心脏质量和体质量,常规心肌组织苏木精伊红染色和麦胚凝集素染色。RT-PCR检测小鼠心肌组织心房钠尿肽(ANP)、心肌肌球蛋白重链β(β-MHC)和TRPA1mRNA表达,Western blot检测小鼠心肌组织磷酸化钙调蛋白依赖性的蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)、总CaMKⅡ和TRPA1蛋白表达。结果模型组小鼠心脏质量、LVESD和LVEDD明显高于假手术组,LVEF和LVFS明显低于假手术组(P<0.05)。模型组小鼠心肌细胞横截面积明显高于假手术组[(389.4±46.3)μm2 vs(213.1±27.5)μm2,P<0.05]。与假手术组比较,模型组小鼠心肌组织ANP、β-MHC和TRPA1mRNA表达明显上调(P<0.01);模型组小鼠心肌组织磷酸化CaMKⅡ/总CaMKⅡ和TRPA1蛋白表达明显升高(P<0.01)。结论 TRPA1参与致心肌肥厚的过程,其机制可能与Ca2+相关信号相关。 展开更多

关键词 瞬时受体电位通道 心肌病 肥厚性 心钠素 肌球蛋白重链

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瞬时受体电位通道6在大鼠大脑冲击伤后铁代谢中的作用 被引量：2

12

作者 张礼均 胡荣 +5 位作者 李飞 孟辉 林江凯 朱刚 王宪荣 冯华 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第23期2353-2356,共4页

目的探讨瞬时受体电位通道6(transient receptor potential channels 6,TRPC6)在大鼠大脑冲击伤后铁代谢中的作用。方法健康成年雄性SD大鼠39只,分为假手术组、致伤组和DFO治疗组(n=13)。参照Feeney法致伤,假手术组只开颅,不打击,致伤组... 目的探讨瞬时受体电位通道6(transient receptor potential channels 6,TRPC6)在大鼠大脑冲击伤后铁代谢中的作用。方法健康成年雄性SD大鼠39只,分为假手术组、致伤组和DFO治疗组(n=13)。参照Feeney法致伤,假手术组只开颅,不打击,致伤组和DFO治疗组开颅后,打击部位和打击量完全一致,2 h后予以生理盐水及去铁胺100 mg/kg,间隔12 h给药,持续28 d。于28 d取致伤灶周围脑组织进行脑铁含量检测,采用免疫荧光和Western blot检测方法,分别定性、定量检测瞬时受体电位通道6(TRPC6)在致伤灶周围的表达情况,并采用荧光双标检测TRPC6在神经元上的定位分布情况。结果与假手术组比较,致伤组脑组织铁离子显著增加(P<0.05),但DFO治疗组并未显著降低其含量(P>0.05);免疫荧光检测结果显示致伤组TRPC6显著上调,DFO治疗组显著下调其表达;Western blot检测结果显示,与假手术组比较,致伤组TRPC6显著上调(P<0.05),DFO治疗组显著下调其表达(P<0.05);免疫荧光双标检测TRPC6与NeuN共表达情况,结果显示假手术组仅少量细胞表达TRPC6,且密度低,NeuN染色阳性的细胞胞体形态呈椭圆形,仅部分细胞共表达;致伤组致伤灶周围TRPC6表达明显增强,但却未见NeuN染色阳性的细胞;DFO治疗组可见NeuN染色阳性的细胞数量多,形态欠规则,与TRPC6共表达细胞数量增多。结论大鼠TBI后铁离子具有神经毒性作用,能增加致伤灶周围神经元的损伤,而TRPC6可能在铁离子的神经毒性作用中扮演重要角色。 展开更多

关键词 大脑冲击伤 非血红蛋白铁离子 瞬时受体电位通道6

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鞘内注射瞬时受体电位通道A1 shRNA对部分坐骨神经结扎小鼠神经病理性疼痛的作用及其机制 被引量：1

13

作者 赵峰 樊少卿 +3 位作者 程晓燕 李小娜 李长生 马浩杰 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期1485-1494,共10页

目的:探讨瞬时受体电位通道A1(TRPA1)在部分坐骨神经结扎(pSNL)小鼠神经病理性疼痛模型中的作用,阐明其作用机制。方法:30只SPF级雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组(n=6)、假手术组(n=6)和pSNL组(n=18)。pSNL组小鼠鞘内置管成功后随机分为p... 目的:探讨瞬时受体电位通道A1(TRPA1)在部分坐骨神经结扎(pSNL)小鼠神经病理性疼痛模型中的作用,阐明其作用机制。方法:30只SPF级雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组(n=6)、假手术组(n=6)和pSNL组(n=18)。pSNL组小鼠鞘内置管成功后随机分为pSNL组、pSNL+NC shRNA组(于术后第7天鞘内注射NC shRNA)和pSNL+TRPA1 shRNA组(于术后第7天鞘内注射TRPA1 shRNA)。检测注射前和注射后l、7、12和24 h各组小鼠后肢机械缩足反射阈值(MWT)和热阈值(TWL)。最后一次检测后2 h处死小鼠,采用Western blotting法检测各组小鼠术侧背根神经节(DRG)中TRPA1蛋白激酶Cε型(Prkce)和星形胶质细胞激活标记物胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达,ELISA法检测各组小鼠细胞上清和血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)水平。分离培养pSNL模型小鼠的原代星形胶质细胞,过表达或敲低TRPA1,检测星形胶质细胞中TRPA1、Prkce和GFAP蛋白表达水平以及细胞上清中TNF-α和MCP-1水平。采用STRING数据库和免疫共沉淀(Co-IP)法预测并验证TRPA1和Prkce相互作用。检测过表达或敲低TRPA1后空质粒组、Ad-TRPA1、sh-NC组和sh-TRPA1组星形胶质细胞中Prkce和GFAP蛋白表达水平以及细胞上清中TNF-α和MCP-1水平。将TRPA1 shRNA单独转染或与AdPrkce共转染星形胶质细胞,分为sh-TRPA1+empty vector组(转染空载体)、sh-TRPA1+Ad-Prkce组(转染TRPA1过表达载体)和sh-TRPA1+Ad-Prkce组(转染Prkce过表达载体)。采用Western blotting法检测各组细胞中TRPA1、Prkce和GFAP蛋白表达水平,ELISA法检测细胞上清中TNF-α和MCP-1水平。结果:与对照组比较,pSNL组小鼠MWT和TWL降低(P<0.01);与pSNL+NC中shRNA组比较,pSNL+TRPA1 shRNA组小鼠MWT和TWL升高(P<0.01)。与假手术组比较,术后第7天pSNL组小鼠DRG中TRPA1和GFAP蛋白表达水平升高(P<0.05),血清中TNF-α和MCP-1水平升高(P<0.05)。与pSNL+NC shRNA组比较,pSNL+TRPA1 shRNA组小鼠DRG中TRPA1和GFAP蛋白表达水平及血清中TNF-α和MCP-1水平降低(P<0.05)。与空质粒组比较,Ad-TRPA1组细胞中GFAP蛋白表达水平明显升高(P<0.01),细胞上清中TNF-α和MCP-1水平明显升高(P<0.05);与sh-NC组比较,sh-TRPA1组细胞中GFAP蛋白表达水平明显降低(P<0.05),细胞上清中TNF-α和MCP-1水平明显降低(P<0.05)。与sh-TRPA1+empty vector组比较,sh-TRPA1+Ad-Prkce组细胞中TRPA1、Prkce和GFAP蛋白表达水平升高(P<0.01),细胞上清中TNF-α和MCP-1水平明显升高(P<0.05)。结论:TRPA1通过与Prkce相互作用参与pSNL模型小鼠星形胶质细胞的激活以及神经病理性疼痛发生发展过程。 展开更多

关键词 瞬时受体电位通道A1 蛋白激酶Cε型 部分坐骨神经结扎 神经性疼痛 星形胶质细胞

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瞬时受体电位通道C与阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征大鼠心脏和肾脏损害的关系 被引量：5

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作者 温雯 姚巧玲 +6 位作者 陈玉岚 李志强 孙晓靖 李瑜 张俊仕 珠勒皮亚·司马义 徐新娟 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期439-446,共8页

目的:探究经典瞬时受体电位通道C(TRPC)相关蛋白在阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)大鼠心脏和肾脏损害中的作用。方法:18只SD雄性大鼠随机分为实验组和对照组,每组9只。实验组大鼠在间歇性低氧舱中,每天暴露于间歇性低氧环境8 h... 目的:探究经典瞬时受体电位通道C(TRPC)相关蛋白在阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)大鼠心脏和肾脏损害中的作用。方法:18只SD雄性大鼠随机分为实验组和对照组,每组9只。实验组大鼠在间歇性低氧舱中,每天暴露于间歇性低氧环境8 h(10∶00—18∶00)。此后通过实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法分别检测大鼠心脏和肾脏组织中TRPC mRNA和相关蛋白的表达。结果:实验组心脏组织中TRPC3、TRPC4、TRPC5的mRNA表达较对照组升高(均P<0.05),而肾脏组织TRPC1、TRPC3、TRPC4、TRPC5、TRPC6、TRPC7的mRNA表达在两组之间差异无统计学意义(均P>0.05);实验组肾脏组织中TRPC4、TRPC5、TRPC6的mRNA表达低于心脏组织(均P<0.05),对照组肾脏组织TRPC7的mRNA表达高于心脏组织(P<0.05)。实验组心脏组织中的TRPC5蛋白表达较对照组升高(P<0.05),而肾脏组织TRPC5、TRPC6、TRPC7相关蛋白的表达在两组之间差异无统计学意义(均P>0.05)。结论:TRPC5可能参与OSAHS心脏损害的病理生理过程,有望成为治疗OSAHS所致心脏损害的药物新靶点。 展开更多

关键词 瞬时受体电位通道/代谢 蛋白质类 睡眠呼吸暂停综合征/病理生理学 低氧/病理学 心脏/代谢 肾/代谢 疾病模型 动物 病例对照研究

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H9N2病毒感染影响小鼠肠道维生素D受体和钙离子通道蛋白mRNA的表达 被引量：1

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作者 连朋敬 吴韦洒 +5 位作者 白江松 白玉 牛小飞 李静云 张子卉 乔健 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2021年第5期1-4,9,共5页

H9N2禽流感病毒在家禽中广泛传播,并且具有感染人和哺乳动物的能力。钙离子与生命的多种生理活动息息相关,而H9N2病毒感染是否会影响肠道钙离子的吸收仍不清楚。本试验采用绝对实时荧光定量PCR方法检测H9N2禽流感病毒感染后第3、7、14... H9N2禽流感病毒在家禽中广泛传播,并且具有感染人和哺乳动物的能力。钙离子与生命的多种生理活动息息相关,而H9N2病毒感染是否会影响肠道钙离子的吸收仍不清楚。本试验采用绝对实时荧光定量PCR方法检测H9N2禽流感病毒感染后第3、7、14、21天和第28天小鼠十二指肠内与钙吸收密切相关的维生素D受体(VDR)和钙转运通道(TRPV6)基因mRNA表达情况。结果显示,H9N2病毒感染后会显著抑制小鼠十二指肠VDR和TRPV 6 mRNA表达。mRNA表达下降有可能导致蛋白表达降低,进而可能会影响十二指肠钙离子的吸收。 展开更多

关键词 H9N2 维生素D受体 瞬时受体电位通道蛋白6 绝对实时荧光定量PCR

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瞬时感受器电位离子通道蛋白V4在肝脏疾病中的作用机制 被引量：1

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作者 张腊英 陈明锴 《临床肝胆病杂志》 CAS 北大核心 2022年第1期224-227,共4页

瞬时感受器电位离子通道蛋白V4(TRPV4)属于瞬时感受器电位离子通道家族中的一员,是一种非选择性阳离子通道,其广泛分布在多种组织及器官中。近年来越来越多的研究介绍了TRPV4通道蛋白与肝纤维化、肝癌、多囊性肝病等肝脏疾病的密切关系... 瞬时感受器电位离子通道蛋白V4(TRPV4)属于瞬时感受器电位离子通道家族中的一员,是一种非选择性阳离子通道,其广泛分布在多种组织及器官中。近年来越来越多的研究介绍了TRPV4通道蛋白与肝纤维化、肝癌、多囊性肝病等肝脏疾病的密切关系。本文主要对TRPV4与肝脏疾病的有关文献进行分析,归纳总结TRPV4与肝脏疾病之间确切的信号通路及可能的潜在机制,以期临床应用及进一步研究。 展开更多

关键词 肝疾病 瞬变感受器电位离子通道蛋白V4 瞬时受体电位通道

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瞬时受体电位离子通道与玫瑰痤疮 被引量：4

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作者 范莉莉 尹锐 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期119-122,共4页

玫瑰痤疮发病机制尚未完全明确,神经源性炎症和神经血管功能失调均参与其中。瞬时受体电位(TRP)离子通道蛋白在初级感觉神经元和非神经细胞中广泛表达,近年研究表明TRP家族中瞬时受体电位香草酸亚型(TRPV)1~4、瞬时受体电位锚蛋白(TRPA)... 玫瑰痤疮发病机制尚未完全明确,神经源性炎症和神经血管功能失调均参与其中。瞬时受体电位(TRP)离子通道蛋白在初级感觉神经元和非神经细胞中广泛表达,近年研究表明TRP家族中瞬时受体电位香草酸亚型(TRPV)1~4、瞬时受体电位锚蛋白(TRPA)1和M型瞬时受体电位(TRPM)8可能与玫瑰痤疮发病相关。该文主要对上述离子通道与玫瑰痤疮病理生理过程的关系作一综述。 展开更多

关键词 玫瑰痤疮 瞬时受体电位离子通道蛋白家族 发病机制 神经肽 神经免疫

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瞬时受体电位M8离子通道功能及其翻译后修饰调节机制 被引量：3

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作者 赵纬纬 黄渊 唐景峰 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第11期1458-1466,共9页

瞬时受体电位M8(transient receptor potential melastatin 8,TRPM8)又称冷及薄荷醇感受器,位于细胞膜或细胞器膜上,是瞬时受体电位(transient receptor potential,TRP)通道超家族中的一员。TRPM8通道分布广泛,是一个非选择性阳离子通道... 瞬时受体电位M8(transient receptor potential melastatin 8,TRPM8)又称冷及薄荷醇感受器,位于细胞膜或细胞器膜上,是瞬时受体电位(transient receptor potential,TRP)通道超家族中的一员。TRPM8通道分布广泛,是一个非选择性阳离子通道,可作为冷热传感器和冷痛传感器进行信号传导,参与众多生物过程的调节,在维持细胞内外稳态、控制离子进出细胞方面具有重要作用。研究发现,蛋白质翻译后修饰(post-translational modification,PTM)通过调控TRPM8通道的功能,进而影响多种疾病的发生和发展。因此,探究TRPM8的翻译后修饰的过程,对深入了解TRPM8的功能及调控机制是十分必要的。目前,已报道的TRPM8翻译后修饰包括磷酸化、泛素化和糖基化等,它们能够调控蛋白质的相互作用和改变TRPM8离子通道的活性,从而调控细胞增殖、迁移和凋亡。值得注意的是,TRPM8的表达与前列腺癌、膀胱癌和乳腺癌等多种癌症密切相关。本文将从TRPM8离子通道的结构出发,系统地阐述TRPM8蛋白翻译后修饰和激动剂、拮抗剂以及一些蛋白质对TRPM8通道活性的调节,同时总结TRPM8在前列腺癌、膀胱癌和乳腺癌中的新进展,为癌症治疗提供新方向和新思路。 展开更多

关键词 瞬时受体电位M8 通道结构 蛋白质修饰 激活剂 拮抗剂

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人源瞬时受体电位M2型通道Nudix水解酶9同源结构域的提取和纯化

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作者 叶培武 余夏飞 +1 位作者 马骋 杨巍 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期5-11,共7页

目的:摸索人源瞬时受体电位M2型通道(TRPM2)羧基端Nudix水解酶9(NUDT9)同源结构域(NUDT9-H)的蛋白提取和纯化方法。方法:异丙基硫代半乳糖苷诱导表达的Rosetta(DE3)大肠埃希菌菌株经超声破碎和离心后,将收集到的上清液与GST磁珠结合并... 目的:摸索人源瞬时受体电位M2型通道(TRPM2)羧基端Nudix水解酶9(NUDT9)同源结构域(NUDT9-H)的蛋白提取和纯化方法。方法:异丙基硫代半乳糖苷诱导表达的Rosetta(DE3)大肠埃希菌菌株经超声破碎和离心后,将收集到的上清液与GST磁珠结合并用还原型谷胱甘肽洗脱以抽提GST-NUDT9-H融合蛋白,浓缩离心后再经分子排阻色谱层析纯化,最后经凝血酶酶切并与GST磁珠结合即得NUDT9-H蛋白。结果:含有0.5%的十二烷基-β-D-麦芽糖苷(DDM)裂解溶液体系和0.025%的DDM分子排阻层析色谱溶液体系能够提高GST-NUDT9-H融合蛋白的稳定性,再按每2 mg融合蛋白加入1 U凝血酶切割24 h,即获得高纯度NUDT9-H蛋白。结论:NUDT9-H蛋白稳定性较差,提取和纯化体系中需添加DDM以稳定其构象从而提高目的蛋白的产量和纯度。 展开更多

关键词 瞬时受体电位通道 焦磷酸酶类/药理学 重组融合蛋白质类/分离和提纯 谷胱甘肽转移酶

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果蝇TRP离子通道C端一个新钙调蛋白结合位点的鉴定和分析 被引量：2

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作者 郑云华 刘伟 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期790-797,共8页

瞬时受体电位（TRP）通道是一类钙离子透过性的阳离子通道蛋白家族,参与了视觉、味觉、温度感受等重要的生物学过程。之前的研究表明,钙离子既能够正反馈也能够负反馈地调节瞬时受体电位通道的活性,而这种调节可能是通过钙调蛋白（calmo... 瞬时受体电位（TRP）通道是一类钙离子透过性的阳离子通道蛋白家族,参与了视觉、味觉、温度感受等重要的生物学过程。之前的研究表明,钙离子既能够正反馈也能够负反馈地调节瞬时受体电位通道的活性,而这种调节可能是通过钙调蛋白（calmodulin,CaM）与TRP通道的相互作用来进行的。为了阐明这一调控机制,我们首先需要对钙调蛋白与瞬时受体电位通道之间的相互作用进行详细的生化研究。在此项研究中,通过大肠杆菌表达系统,表达和纯化了果蝇瞬时受体电位通道羧基末端不同长短的蛋白片段,并发现了一个新的钙调蛋白结合位点。通过快速蛋白液相色谱、静态光散射以及等温量热滴定技术,鉴定了这一钙调蛋白结合位点与果蝇瞬时受体电位通道之间的相互作用,发现它们在钙离子依赖的条件下,可以形成亲和力非常强的稳定的蛋白复合物（解离常数在0.1~1微摩尔范围）。此外,通过合成多肽的方法,鉴定了果蝇瞬时受体电位通道913~939片段为该钙调蛋白结合位点的核心区域。最后,通过突变实验,进一步明确了果蝇瞬时受体电位通道922位的酪氨酸以及923位的缬氨酸为其钙调蛋白结合位点的关键氨基酸。总而言之,本研究发现和鉴定了果蝇瞬时受体电位通道上一个新的钙依赖的钙调蛋白结合位点,这一发现将为研究瞬时受体电位通道的体内功能提供生化基础,为阐明钙离子通过钙调蛋白调节瞬时受体电位通道的分子机制做出贡献。 展开更多

关键词 瞬时受体电位通道 钙调蛋白结合位点 钙调蛋白

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