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人骨保护素基因重组腺病毒的构建及鉴定
被引量:
1
1
作者
王晓军
王爱民
+6 位作者
张忠荣
吴思宇
郭庆山
吴军
贺伟峰
汤守营
张全顺
《中国骨质疏松杂志》
CAS
CSCD
2005年第2期167-170,共4页
目的构建人骨保护素(hOPG)基因的重组腺病毒载体并检测其转染能力。方法采用基因工程技术,将hOPG基因片段插入到腺病毒载体质粒pAdTrack-CMV上,利用PadEasy系统与骨架质粒在大肠杆菌BJ5183胞内进行同源重组,经293细胞包装、扩增,得到携...
目的构建人骨保护素(hOPG)基因的重组腺病毒载体并检测其转染能力。方法采用基因工程技术,将hOPG基因片段插入到腺病毒载体质粒pAdTrack-CMV上,利用PadEasy系统与骨架质粒在大肠杆菌BJ5183胞内进行同源重组,经293细胞包装、扩增,得到携带hOPG基因的重组腺病毒AdEasy-PAdtrack-CMV-hOPG,将重组腺病毒AdhOPG对大鼠骨髓基质细胞(rMSCs) 进行感染。采用PCR方法对重组腺病毒载体进行鉴定,利用绿色荧光报告基因转染结果,以荧光计数法检测重组腺病毒的滴度。结果酶切鉴定及PCR结果证明hOPG基因重组腺病毒载体成功, 病毒滴度可达2.5×108pfu/ml,具有很强感染能力,结论应用细菌内同源重组法,成功构建了含 hOPG重组腺病毒载体。
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关键词
人骨保护素
基因
重组
腺病毒载体
adEasy系统
大鼠骨髓基质细胞
细菌内同源重组法
基因工程技术
293细胞
PCR方
法
载体质粒
基因片段
大肠杆菌
骨架质粒
基因转染
酶切鉴定
病毒滴度
感染能力
G基因
hOP
计数
法
检测
荧光
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职称材料
美国《化学文摘》收录《眼科新进展》2006年论文目录(七)
2
《眼科新进展》
CAS
北大核心
2010年第3期236-236,共1页
131 赵海生,王一.细菌内同源重组法构建LEDGFp52基因腺病毒载体及其体外表达[J].眼科新进展,2006,26(12):900-903. 132 龙华,姜发纲.MMP-2和MMP-9在视网膜母细胞瘤中的表达及意义[J].眼科新进展,2006,26(12):908—910.
关键词
《眼科新进展》
《化学文摘》
细菌内同源重组法
视网膜母细胞瘤
目录
论文
收录
美国
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职称材料
题名
人骨保护素基因重组腺病毒的构建及鉴定
被引量:
1
1
作者
王晓军
王爱民
张忠荣
吴思宇
郭庆山
吴军
贺伟峰
汤守营
张全顺
机构
第三军医大学大坪附属医院野战外科研究所全军战创中心骨创伤科
第三军医大学西南医院烧伤研究所
解放军第
出处
《中国骨质疏松杂志》
CAS
CSCD
2005年第2期167-170,共4页
文摘
目的构建人骨保护素(hOPG)基因的重组腺病毒载体并检测其转染能力。方法采用基因工程技术,将hOPG基因片段插入到腺病毒载体质粒pAdTrack-CMV上,利用PadEasy系统与骨架质粒在大肠杆菌BJ5183胞内进行同源重组,经293细胞包装、扩增,得到携带hOPG基因的重组腺病毒AdEasy-PAdtrack-CMV-hOPG,将重组腺病毒AdhOPG对大鼠骨髓基质细胞(rMSCs) 进行感染。采用PCR方法对重组腺病毒载体进行鉴定,利用绿色荧光报告基因转染结果,以荧光计数法检测重组腺病毒的滴度。结果酶切鉴定及PCR结果证明hOPG基因重组腺病毒载体成功, 病毒滴度可达2.5×108pfu/ml,具有很强感染能力,结论应用细菌内同源重组法,成功构建了含 hOPG重组腺病毒载体。
关键词
人骨保护素
基因
重组
腺病毒载体
adEasy系统
大鼠骨髓基质细胞
细菌内同源重组法
基因工程技术
293细胞
PCR方
法
载体质粒
基因片段
大肠杆菌
骨架质粒
基因转染
酶切鉴定
病毒滴度
感染能力
G基因
hOP
计数
法
检测
荧光
Keywords
Osteoporotegerin
Adenovirus
Homogenous recombination
Gene therapy
分类号
R394 [医药卫生—医学遗传学]
R373 [医药卫生—病原生物学]
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职称材料
题名
美国《化学文摘》收录《眼科新进展》2006年论文目录(七)
2
出处
《眼科新进展》
CAS
北大核心
2010年第3期236-236,共1页
文摘
131 赵海生,王一.细菌内同源重组法构建LEDGFp52基因腺病毒载体及其体外表达[J].眼科新进展,2006,26(12):900-903. 132 龙华,姜发纲.MMP-2和MMP-9在视网膜母细胞瘤中的表达及意义[J].眼科新进展,2006,26(12):908—910.
关键词
《眼科新进展》
《化学文摘》
细菌内同源重组法
视网膜母细胞瘤
目录
论文
收录
美国
分类号
R77-55 [医药卫生—眼科]
R-55 [医药卫生]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人骨保护素基因重组腺病毒的构建及鉴定
王晓军
王爱民
张忠荣
吴思宇
郭庆山
吴军
贺伟峰
汤守营
张全顺
《中国骨质疏松杂志》
CAS
CSCD
2005
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
美国《化学文摘》收录《眼科新进展》2006年论文目录(七)
《眼科新进展》
CAS
北大核心
2010
0
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