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细菌内同源重组制备重组腺病毒及其初步应用: 1; 作者刘英鹏田蕾 +4 位作者王国鹏王建亭李泽文罗凌惠龚树生《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期548-550,共3页; 目的通过细菌内同源重组方法构建重组腺病毒。方法质粒pAdTrack酶切线性化后,通过电转化方法转化AdEasier细菌,线性化的腺病毒重组质粒转染293包装细胞后获得重组腺病毒,观察腺病毒感染喉癌细胞Hep-2后的报告基因表达情况及病毒对培养... 展开更多; 关键词腺病毒载体细菌内同源重组基因转移; 在线阅读下载PDF 职称材料

应用改进的AdEasy系统制备重组腺病毒被引量：14: 2; 作者汤福祥郑权 +2 位作者黄宗海张庆国车小燕《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2003年第5期501-503,共3页; 目的改进AdEasy系统,使之更简便、高效、快捷。方法pAdtrack经酶切线性化后,转化经氯化钙处理的感受态AdEasier-1细菌,获得重组腺病毒质粒。最后将线性化的重组腺病毒质粒转染293细胞包装获得重组腺病毒。荧光显微镜下细胞中重组腺病毒... 展开更多; 关键词 AdEasy系统腺病毒细菌内同源重组; 在线阅读下载PDF 职称材料

人骨保护素基因重组腺病毒的构建及鉴定被引量：1: 3; 作者王晓军王爱民 +6 位作者张忠荣吴思宇郭庆山吴军贺伟峰汤守营张全顺《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2005年第2期167-170,共4页; 目的构建人骨保护素(hOPG)基因的重组腺病毒载体并检测其转染能力。方法采用基因工程技术,将hOPG基因片段插入到腺病毒载体质粒pAdTrack-CMV上,利用PadEasy系统与骨架质粒在大肠杆菌BJ5183胞内进行同源重组,经293细胞包装、扩增,得到携... 展开更多; 关键词人骨保护素基因重组腺病毒载体 adEasy系统大鼠骨髓基质细胞细菌内同源重组法基因工程技术 293细胞 PCR方法载体质粒基因片段大肠杆菌骨架质粒基因转染酶切鉴定病毒滴度感染能力 G基因 hOP 计数法检测荧光; 在线阅读下载PDF 职称材料

美国《化学文摘》收录《眼科新进展》2006年论文目录(七): 4; 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2010年第3期236-236,共1页; 131 赵海生，王一．细菌内同源重组法构建LEDGFp52基因腺病毒载体及其体外表达[J]．眼科新进展，2006，26（12）：900-903． 132 龙华，姜发纲．MMP-2和MMP-9在视网膜母细胞瘤中的表达及意义[J]．眼科新进展，2006，26（12）：908—910．; 关键词《眼科新进展》《化学文摘》细菌内同源重组法视网膜母细胞瘤目录论文收录美国; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名细菌内同源重组制备重组腺病毒及其初步应用: 1; 作者刘英鹏田蕾王国鹏王建亭李泽文罗凌惠龚树生; 机构华中科技大学同济医学院附属协和医院耳鼻咽喉科华中科技大学同济医学院附属协和医院血液科; 出处《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期548-550,共3页; 文摘目的通过细菌内同源重组方法构建重组腺病毒。方法质粒pAdTrack酶切线性化后,通过电转化方法转化AdEasier细菌,线性化的腺病毒重组质粒转染293包装细胞后获得重组腺病毒,观察腺病毒感染喉癌细胞Hep-2后的报告基因表达情况及病毒对培养细胞生长的影响。结果构建的重组腺病毒经酶切电泳鉴定正确;扩增的腺病毒转染培养的Hep-2细胞8 h后即开始表达报告基因,48 h后全部细胞均有报告基因表达;该重组的腺病毒对培养Hep-2细胞生长无明显影响。结论通过细菌内同源重组方法构建重组腺病毒,方法简单、成功率高、实验周期短。; 关键词腺病毒载体细菌内同源重组基因转移; Keywords adenovirus vector homologous recombination in bacteria gene transfer; 分类号 R373.1 [医药卫生—病原生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名应用改进的AdEasy系统制备重组腺病毒被引量：14: 2; 作者汤福祥郑权黄宗海张庆国车小燕; 机构第一军医大学珠江医院普外科第一军医大学珠江医院麻醉科第一军医大学珠江医院中心实验室; 出处《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2003年第5期501-503,共3页; 基金广东省自然科学基金资助项目(013072) 国家863计划项目(2001AA217171)~~; 文摘目的改进AdEasy系统,使之更简便、高效、快捷。方法pAdtrack经酶切线性化后,转化经氯化钙处理的感受态AdEasier-1细菌,获得重组腺病毒质粒。最后将线性化的重组腺病毒质粒转染293细胞包装获得重组腺病毒。荧光显微镜下细胞中重组腺病毒观察绿色荧光蛋白的表达。结果应用氯化钙法由pAdtrack转化AdEasier-1细菌,可获得极高比例的(20/20)阳性重组腺病毒克隆。结论应用改进后的AdEasy系统构建腺病毒相比于传统AdEasy系统,方法更简便、成功率更高、实验周期更短、对实验室的条件要求低。; 关键词 AdEasy系统腺病毒细菌内同源重组; Keywords AdEasy system adenovirus homologous recombination i n bacteria; 分类号 R346 [医药卫生—基础医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人骨保护素基因重组腺病毒的构建及鉴定被引量：1: 3; 作者王晓军王爱民张忠荣吴思宇郭庆山吴军贺伟峰汤守营张全顺; 机构第三军医大学大坪附属医院野战外科研究所全军战创中心骨创伤科第三军医大学西南医院烧伤研究所解放军第; 出处《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2005年第2期167-170,共4页; 文摘目的构建人骨保护素(hOPG)基因的重组腺病毒载体并检测其转染能力。方法采用基因工程技术,将hOPG基因片段插入到腺病毒载体质粒pAdTrack-CMV上,利用PadEasy系统与骨架质粒在大肠杆菌BJ5183胞内进行同源重组,经293细胞包装、扩增,得到携带hOPG基因的重组腺病毒AdEasy-PAdtrack-CMV-hOPG,将重组腺病毒AdhOPG对大鼠骨髓基质细胞(rMSCs) 进行感染。采用PCR方法对重组腺病毒载体进行鉴定,利用绿色荧光报告基因转染结果,以荧光计数法检测重组腺病毒的滴度。结果酶切鉴定及PCR结果证明hOPG基因重组腺病毒载体成功, 病毒滴度可达2．5×108pfu／ml,具有很强感染能力,结论应用细菌内同源重组法,成功构建了含 hOPG重组腺病毒载体。; 关键词人骨保护素基因重组腺病毒载体 adEasy系统大鼠骨髓基质细胞细菌内同源重组法基因工程技术 293细胞 PCR方法载体质粒基因片段大肠杆菌骨架质粒基因转染酶切鉴定病毒滴度感染能力 G基因 hOP 计数法检测荧光; Keywords Osteoporotegerin Adenovirus Homogenous recombination Gene therapy; 分类号 R394 [医药卫生—医学遗传学] R373 [医药卫生—病原生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名美国《化学文摘》收录《眼科新进展》2006年论文目录(七): 4; 出处《眼科新进展》 CAS 北大核心 2010年第3期236-236,共1页; 文摘 131 赵海生，王一．细菌内同源重组法构建LEDGFp52基因腺病毒载体及其体外表达[J]．眼科新进展，2006，26（12）：900-903． 132 龙华，姜发纲．MMP-2和MMP-9在视网膜母细胞瘤中的表达及意义[J]．眼科新进展，2006，26（12）：908—910．; 关键词《眼科新进展》《化学文摘》细菌内同源重组法视网膜母细胞瘤目录论文收录美国; 分类号 R77-55 [医药卫生—眼科] R-55 [医药卫生]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	细菌内同源重组制备重组腺病毒及其初步应用	刘英鹏田蕾王国鹏王建亭李泽文罗凌惠龚树生	《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心	2007	0	在线阅读下载PDF 职称材料
2	应用改进的AdEasy系统制备重组腺病毒	汤福祥郑权黄宗海张庆国车小燕	《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心	2003	14	在线阅读下载PDF 职称材料
3	人骨保护素基因重组腺病毒的构建及鉴定	王晓军王爱民张忠荣吴思宇郭庆山吴军贺伟峰汤守营张全顺	《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD	2005	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	美国《化学文摘》收录《眼科新进展》2006年论文目录(七)		《眼科新进展》 CAS 北大核心	2010	0	在线阅读下载PDF 职称材料