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石麦15细菌人工染色体文库构建与鉴定 被引量:2
1
作者 李孟军 杨煜 +4 位作者 高欣娜 郭晓 何明琦 史占良 郭进考 《麦类作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期164-168,共5页
为给小麦功能基因研究提供参考信息,以冬小麦栽培品种石麦15(Triticum aestivum L.)为试材,从暗培养7~10d的黄化幼苗地上部提取高分子量基因组DNA,使用载体pCC1BAC的HindⅢ位点构建了六倍体小麦细菌人工染色体文库。该文库由1 000 00... 为给小麦功能基因研究提供参考信息,以冬小麦栽培品种石麦15(Triticum aestivum L.)为试材,从暗培养7~10d的黄化幼苗地上部提取高分子量基因组DNA,使用载体pCC1BAC的HindⅢ位点构建了六倍体小麦细菌人工染色体文库。该文库由1 000 000个以上克隆组成,保存在1 020个混合池中,克隆插入片段平均大小为85kb,空载率为2.5%;覆盖小麦基因组5倍以上;挑取7个克隆培养5d后,经HindⅢ完全酶切检测,其指纹图谱稳定一致。石麦15细菌人工染色体文库的构建为小麦基因克隆、调控序列克隆以及比较基因组学研究奠定了基础。 展开更多
关键词 小麦 细菌人工染色体文库 插入片段 稳定性
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盐藻(Dunaliella viridis)细菌人工染色体文库的构建和鉴定 被引量:3
2
作者 孟祥宗 杨晓武 +3 位作者 管祯玮 张男 许政暟 宋任涛 《上海大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期88-93,共6页
盐藻具有极强的耐盐能力,是研究植物耐盐机制的模式系统.为了对其耐盐机制进行深入的研究,以pCC1BAC为载体,构建了盐藻的细菌人工染色体(BAC)文库.该文库共有9 216个转化子,插入片段平均长度为55kb,以单克隆形式保藏在96块96孔板中,并... 盐藻具有极强的耐盐能力,是研究植物耐盐机制的模式系统.为了对其耐盐机制进行深入的研究,以pCC1BAC为载体,构建了盐藻的细菌人工染色体(BAC)文库.该文库共有9 216个转化子,插入片段平均长度为55kb,以单克隆形式保藏在96块96孔板中,并建立了四维PCR基因筛选体系,可以通过4轮PCR快速筛选获得阳性单克隆.根据本实验室分离到的两个盐藻基因的cDNA序列(DvSPT2和DvTPSP)设计引物,通过PCR从该文库中各筛到4个阳性BAC克隆,说明该文库能有效用于分离盐藻基因的基因组序列,据此推测该文库约覆盖4倍盐藻基因组序列. 展开更多
关键词 盐藻 细菌人工染色体文库 四维PCR筛选体系
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家蚕微孢子虫细菌人工染色体文库的构建 被引量:2
3
作者 杨柳 潘国庆 +5 位作者 刘含登 许金山 李田 刘铁 张绍鹏 周泽扬 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期314-319,共6页
细菌人工染色体(BAC)文库是进行生物基因组学研究的一个重要手段。以家蚕微孢子虫(Nosema bomby-cis)重庆分离株为材料,在前期构建的家蚕微孢子虫基因组框架图数据基础上,对构建家蚕微孢子虫BAC文库过程中的关键技术,如脉冲胶块(plug)... 细菌人工染色体(BAC)文库是进行生物基因组学研究的一个重要手段。以家蚕微孢子虫(Nosema bomby-cis)重庆分离株为材料,在前期构建的家蚕微孢子虫基因组框架图数据基础上,对构建家蚕微孢子虫BAC文库过程中的关键技术,如脉冲胶块(plug)的制备与处理、限制性酶的筛选、DNA的部分消化、酶切片段的选择、插入DNA片段与载体的摩尔比值等进行了研究,建立了构建家蚕微孢子虫BAC文库适宜的技术体系。构建的家蚕微孢子虫BAC文库由6 478个克隆构成,克隆片段平均大小约为50 kb,相当于家蚕微孢子虫基因组(15.33 Mb)的20倍,文库空载率较低,有利于深入开展家蚕微孢子虫基因组相关方面的研究。 展开更多
关键词 家蚕微孢子虫 基因组 细菌人工染色体文库
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甘蓝基因组细菌人工染色体文库的构建 被引量:1
4
作者 邢苗苗 田多成 +3 位作者 李海龙 姚丽君 冀瑞琴 康俊根 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2014年第5期23-28,共6页
细菌人工染色体(BAC)文库是克隆甘蓝抗病优质重要基因的基础,以抗枯萎病、富含硫代葡萄糖苷的结球甘蓝自交系R4P1为材料,美国Epicentre公司的CopyControlTMpCC1BACTM为载体,构建了甘蓝细菌人工染色体文库。该文库有73 344个克隆,插入片... 细菌人工染色体(BAC)文库是克隆甘蓝抗病优质重要基因的基础,以抗枯萎病、富含硫代葡萄糖苷的结球甘蓝自交系R4P1为材料,美国Epicentre公司的CopyControlTMpCC1BACTM为载体,构建了甘蓝细菌人工染色体文库。该文库有73 344个克隆,插入片段平均大小约97 kb,空载率<3%,覆盖甘蓝基因组约10.9倍,筛选到甘蓝任一基因的概率为99.99%,这些结果表明,构建的文库质量较好,可用于后续分析。构建的甘蓝BAC文库不仅可用于枯萎病基因的克隆,而且为克隆其他重要的功能基因及基因组学等的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 甘蓝 细菌人工染色体文库 枯萎病基因 克隆
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棉花细菌人工染色体文库构建方法探讨
5
作者 高海燕 王省芬 +4 位作者 刘方 彭仁海 张艳 马峙英 王坤波 《棉花学报》 CSCD 北大核心 2013年第1期9-16,共8页
细菌人工染色体(Bacterial artificial chromosome,BAC)文库是开展基因组测序、基因图位克隆、分子标记、物理作图等研究的重要基因组资源。本文在构建了二倍体野生棉阿非利加棉(Gossypium herbaceum var.africanum)BAC文库的基础上,就... 细菌人工染色体(Bacterial artificial chromosome,BAC)文库是开展基因组测序、基因图位克隆、分子标记、物理作图等研究的重要基因组资源。本文在构建了二倍体野生棉阿非利加棉(Gossypium herbaceum var.africanum)BAC文库的基础上,就棉花细菌人工染色体基因组文库构建过程中高分子量基因组DNA的提取、部分酶切片段选择、DNA的回收、连接转化以及BAC文库的保存等过程中一些细节和注意事项进行了比较详细的分析比较,希望能为棉花BAC文库的构建提供一些可供借鉴的经验。 展开更多
关键词 细菌人工染色体文库 野生棉 构建方法
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云南疣粒野生稻细菌人工染色体(BAC)文库的构建与分析 被引量:8
6
作者 阿新祥 程在全 +4 位作者 吴成军 鄢波 陈善娜 杨明挚 黄兴奇 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期815-817,共3页
关键词 云南 疣粒野生稻 细菌人工染色体文库 核基因组
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东乡野生稻双元细菌人工染色体(BIBAC)文库的构建 被引量:4
7
作者 成志伟 曹筑荣 +1 位作者 陈良碧 曹孟良 《生物技术通报》 CAS CSCD 2006年第C00期272-275,282,共5页
双元细菌人工染色体(binarybacterialartificialchromosome,BIBAC)是能直接将大片段DNA转入植物的载体,是植物基因图位克隆和构建植物基因嵌入突变体库的重要工具。该研究以东乡野生稻为材料,构建其BIBAC文库。该文库由14592个克隆组成... 双元细菌人工染色体(binarybacterialartificialchromosome,BIBAC)是能直接将大片段DNA转入植物的载体,是植物基因图位克隆和构建植物基因嵌入突变体库的重要工具。该研究以东乡野生稻为材料,构建其BIBAC文库。该文库由14592个克隆组成,平均插入片段大小为65kb,覆盖率为2倍基因组。稳定性检测结果表明,东乡野生稻基因组DNA能够在BIBAC载体中稳定存在。 展开更多
关键词 东乡野生稻 双元细菌人工染色体文库 基因组 DNA
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双元细菌人工染色体基因组文库研究进展
8
作者 朱丹 张杰伟 +2 位作者 陈亚娟 张少斌 魏建华 《现代农业科技》 2013年第2期29-30,36,共3页
酵母人工染色体(YAC)、细菌人工染色体(BAC)是伴随着人类基因组计划的实施而产生的,这些大片段基因克隆载体的应用推动了分子生物学、遗传学等学科的快速发展。以农杆菌介导的直接转化植物为代表的双元细菌人工染色体(BIBAC)载体的发展... 酵母人工染色体(YAC)、细菌人工染色体(BAC)是伴随着人类基因组计划的实施而产生的,这些大片段基因克隆载体的应用推动了分子生物学、遗传学等学科的快速发展。以农杆菌介导的直接转化植物为代表的双元细菌人工染色体(BIBAC)载体的发展,加速植物基因组的研究,成为植物基因组分析、基因功能鉴定、染色体结构与功能关系研究的重要工具。介绍了人工染色体文库的发展史,根据建库经验,着重阐述了BIBAC文库的构建、鉴定与应用。 展开更多
关键词 人工染色体 双元细菌人工染色体文库 基因组文库
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细菌人工染色体(BAC)文库及其在小麦中的应用 被引量:1
9
作者 刘越 孔秀英 +2 位作者 吴佳洁 肖建会 刘旭 《麦类作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期159-163,共5页
细菌人工染色体(BAC)具有容量大、遗传稳定、易于操作等优点,在基因组研究和基因功能分析等方面得到了广泛应用。对BAC文库克隆载体的类型、小麦BAC文库的构建及其应用进行了综述,并对其前景进行了展望。细菌人工染色体载体是由大肠杆菌... 细菌人工染色体(BAC)具有容量大、遗传稳定、易于操作等优点,在基因组研究和基因功能分析等方面得到了广泛应用。对BAC文库克隆载体的类型、小麦BAC文库的构建及其应用进行了综述,并对其前景进行了展望。细菌人工染色体载体是由大肠杆菌的F-因子发展而来,第一代BAC克隆载体pBAC108l能容纳300kb的片段,但它只具有转化选择标记,没有重组选择标记。第二代载体是将LacZ基因插入到多克隆位点中形成具有重组选择标记类型的载体如pBeloBAC11,在该载体的基础上经过改造和改进又发展了一些特殊用途的载体,如富集基因类型和遗传转化类型的载体。近年来利用这些载体构建了小麦二倍体、四倍体、六倍体基因组BAC文库以及小麦特定染色体BAC文库,并以单克隆或混合池的形式保存。这些小麦BAC文库对于小麦基因克隆、基因组及基因区物理图谱的构建以及比较基因组学等方面的研究具有重要的意义。 展开更多
关键词 小麦 细菌人工染色体文库 基因组学 选择标记
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Cupriavidus necator JMP134细菌人工染色体基因组文库的构建与鉴定 被引量:1
10
作者 张俊亚 宋任涛 +1 位作者 许政暟 朱晨光 《上海大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期675-680,共6页
Cupriavidus necator JMP134(C.necator JMP134)可以降解60多种芳香族化合物,在环境污染治理方面具有良好的应用前景.该菌株基因组含有两个苯酚降解基因簇,克隆并研究其功能具有重要的理论和应用价值.以pIndigo-BAC 5为载体,构建了C.nec... Cupriavidus necator JMP134(C.necator JMP134)可以降解60多种芳香族化合物,在环境污染治理方面具有良好的应用前景.该菌株基因组含有两个苯酚降解基因簇,克隆并研究其功能具有重要的理论和应用价值.以pIndigo-BAC 5为载体,构建了C.necator JMP134的细菌人工染色体(bacterial artificial chromosome,BAC)基因组文库.该文库约有9 600个克隆,插入频率为99%,平均插入片段大小达到65 kb,由此推测该BAC文库覆盖该菌株基因组约860倍.通过PCR筛选该文库的800个单克隆,得到11个含有C.necator JMP134菌株的苯酚羟化酶大亚基基因phlN2的阳性克隆.研究结果表明,该文库是一个高质量、高覆盖率的BAC文库,能有效用于目的基因簇的分离. 展开更多
关键词 Cupriavidus necator JMP134 苯酚降解 细菌人工染色体文库
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细菌人工染色体(BAC)文库在畜禽遗传资源保存中的应用
11
作者 何丽 刘丑生 韩旭 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第10期188-192,共5页
作者介绍了国际畜禽遗传资源保存的研究现状与趋势,分析了细菌人工染色体(bacterial artificial chromosome,BAC)文库的发展和应用状况,阐述了BAC文库应用于畜禽遗传资源保存的特有优势,提出了建立BAC文库将成为畜禽遗传资源保存的一种... 作者介绍了国际畜禽遗传资源保存的研究现状与趋势,分析了细菌人工染色体(bacterial artificial chromosome,BAC)文库的发展和应用状况,阐述了BAC文库应用于畜禽遗传资源保存的特有优势,提出了建立BAC文库将成为畜禽遗传资源保存的一种重要补充形式,有利于提升畜禽遗传资源保存的安全性和长久性,也为今后进一步研究畜禽品种的特定性状提供了无可替代的材料,对实现全方位保存畜禽遗传资源具有重要的实用价值和推动作用。 展开更多
关键词 细菌人工染色体(BAC)文库 畜禽遗传资源保存 应用
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环境细菌宏基因组研究及海洋细菌生物活性物质BAC文库筛选 被引量:10
12
作者 杨官品 茅云翔 《青岛海洋大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2001年第5期718-722,共5页
宏基因组是特定环境全部生物遗传物质总和 ,决定生物群体生命现象。特定生物种基因组研究使人们的认识单元实现了从单一基因到基因集合的转变 ,宏基因组研究将使人们摆脱物种界限 ,揭示更高更复杂层次上的生命运动规律。在目前的基因结... 宏基因组是特定环境全部生物遗传物质总和 ,决定生物群体生命现象。特定生物种基因组研究使人们的认识单元实现了从单一基因到基因集合的转变 ,宏基因组研究将使人们摆脱物种界限 ,揭示更高更复杂层次上的生命运动规律。在目前的基因结构功能认识和基因操作技术背景下 ,环境细菌宏基因组成为研究和开发的主要对象。环境细菌宏基因组细菌人工染色体文库筛选和基因系统学分析使研究者能更有效地开发细菌基因资源 。 展开更多
关键词 细菌 宏基因组 细菌人工染色体文库 生物活性物质 微生物 基因工程
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高纤维强力棉花种质系苏远7235 BAC文库的构建 被引量:10
13
作者 王省芬 马骏 +2 位作者 马峙英 张桂寅 郑拥民 《棉花学报》 CSCD 北大核心 2006年第4期200-203,共4页
苏远7235是我国利用异常棉等多个野生种创造的高纤维强力棉花种质系,是开展棉花纤维品质研究的重要材料。本研究以pIndigoBAC-5(HindIII-cloning ready)为载体,构建了苏远7235的细菌人工染色体(Bacterial Artificial Chromosome,BAC)文... 苏远7235是我国利用异常棉等多个野生种创造的高纤维强力棉花种质系,是开展棉花纤维品质研究的重要材料。本研究以pIndigoBAC-5(HindIII-cloning ready)为载体,构建了苏远7235的细菌人工染色体(Bacterial Artificial Chromosome,BAC)文库,该文库包含30336个BAC克隆。分析结果表明,重组克隆苏远7235 DNA插入片段为50-140 kb,平均120 kb,空载率2.1%,89.6%的克隆插入片段大于100 kb。 展开更多
关键词 棉花 纤维品质 细菌人工染色体文库
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陆地棉雄性不育恢复系18R的BAC文库构建 被引量:2
14
作者 周焘 郭红媛 +3 位作者 张锐 梁成真 石雅丽 郭三堆 《棉花学报》 CSCD 北大核心 2009年第3期252-254,共3页
18R雄性不育恢复系农艺性状优良,恢复性状稳定,对不育系能够100%恢复,是研究棉花三系互作的重要材料。本研究以pCC1BAC(BamHI)为载体,构建了18R的细菌人工染色体(BAC)文库。建立的文库包含139,200个BAC克隆。分析结果表明,BAC文库DNA插... 18R雄性不育恢复系农艺性状优良,恢复性状稳定,对不育系能够100%恢复,是研究棉花三系互作的重要材料。本研究以pCC1BAC(BamHI)为载体,构建了18R的细菌人工染色体(BAC)文库。建立的文库包含139,200个BAC克隆。分析结果表明,BAC文库DNA插入片段为50~200 kb,91%的克隆插入片段为80~150 kb,平均102 kb,空载率<2%,覆盖6.3倍基因组。 展开更多
关键词 棉花 18R 雄性不育恢复系 细菌人工染色体文库
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药用野生稻BIBAC文库构建过程中质粒提取方法改进 被引量:1
15
作者 侯思名 刘凌云 +3 位作者 殷旭东 岑晓江 王波 程在全 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2014年第1期1-5,共5页
水稻的生产一直受到生物和非生物逆境等因素的影响,容易造成遗传基础单一,迫切需要拓宽现有栽培稻品种的遗传基础,引进不同来源的抗性和耐性基因。而野生稻是一个重要的有利基因库,充分利用野生稻的有利基因可拓宽现有栽培稻品种的遗传... 水稻的生产一直受到生物和非生物逆境等因素的影响,容易造成遗传基础单一,迫切需要拓宽现有栽培稻品种的遗传基础,引进不同来源的抗性和耐性基因。而野生稻是一个重要的有利基因库,充分利用野生稻的有利基因可拓宽现有栽培稻品种的遗传基础,有利于选育优良品种应用于生产或创造出特殊中间材料。但对于野生稻的利用目前仍存在许多困难,通过常规杂交途径一般难以实现。为了拓宽栽培稻的遗传基础,利用云南药用野生稻有利基因,通过构建BIBAC文库的策略挖掘云南药用野生稻有利基因用于栽培稻的改良。而高质量的载体制备在文库的构建中起非常重要的作用,是文库构建的一个关键因素。本研究对高质量BIBAC载体制备中的关键技术如提取、纯化等进行了探讨。 展开更多
关键词 药用野生稻 双元细菌人工染色体文库 质粒 方法改进
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抗稻瘟病水稻BAC文库的构建与鉴定 被引量:2
16
作者 陈琪 邓一文 +5 位作者 黄彬彬 孙晓明 张文文 王刚 许政暟 宋任涛 《上海大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期325-330,共6页
水稻是一种重要的粮食作物,同时也是一种重要的单子叶植物模式.稻瘟病是水稻生长中的一种严重病害,因此分离和克隆新的稻瘟病抗病基因具有重要的应用价值.以一个抗稻瘟病农家种水稻为材料,以plndigoBAC5为载体,构建了细菌人工染色体(BAC... 水稻是一种重要的粮食作物,同时也是一种重要的单子叶植物模式.稻瘟病是水稻生长中的一种严重病害,因此分离和克隆新的稻瘟病抗病基因具有重要的应用价值.以一个抗稻瘟病农家种水稻为材料,以plndigoBAC5为载体,构建了细菌人工染色体(BAC)文库.该文库共有90 000个转化子,插入频率99%,插入片段平均长度为105kb,由此推测这个文库覆盖水稻基因组约20倍.利用其中的45 000个转化子建立了4维PCR筛选体系,并且通过4维PCR筛选体系,筛选获得了7个含水稻分蘖基因(MOC1)的阳性克隆.因此该文库是一个高质量、高覆盖率的水稻BAC文库,能有效用于目的基因的分离. 展开更多
关键词 水稻 稻瘟病 细菌人工染色体文库 4维PCR筛选体系
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Cupriavidus metallidurans CH34中2个苯酚降解基因簇的筛选与功能鉴定 被引量:2
17
作者 李莉 张俊亚 +2 位作者 唐远平 宋任涛 朱晨光 《上海大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期435-440,共6页
Cupriavidus metallidurans(C.metallidurans)CH34是一种重金属耐受性细菌,能在以苯酚、甲苯酚、苯甲酸、苯胺等芳香族化合物为唯一碳源和能源的培养基中生长,其基因组中含有2个苯酚降解基因簇.以载体pIndigo-BAC 5构建C.metallidurans ... Cupriavidus metallidurans(C.metallidurans)CH34是一种重金属耐受性细菌,能在以苯酚、甲苯酚、苯甲酸、苯胺等芳香族化合物为唯一碳源和能源的培养基中生长,其基因组中含有2个苯酚降解基因簇.以载体pIndigo-BAC 5构建C.metallidurans CH34的细菌人工染色体(bacterial artificial chromosome,BAC)文库,获得约3万个克隆,平均插入片段大小为30 kb,插入频率为98%,推测该文库覆盖CH34基因组约1 240倍.用PCR筛选文库中的3 000个单克隆,共获得9个阳性克隆,其中5个克隆含有长基因簇,4个含有短基因簇,并从中得到含有全长苯酚降解基因簇的克隆.利用以苯酚为唯一碳源的无机盐培养基,研究2个基因簇在大肠杆菌中的表达情况.结果显示,两个基因簇均表现出了苯酚降解能力,短簇的降酚能力要优于长簇. 展开更多
关键词 Cupriavidus metallidurans CH34 基因组 细菌人工染色体文库 苯酚 基因簇
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链霉菌GEMSM4(6)中聚酮合酶和非核糖体多肽合成酶基因的筛选及克隆 被引量:4
18
作者 李娜 黄胜 何璟 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期73-79,共7页
链霉菌GEMSM 4(6)的发酵产物具有抗革兰氏阳性菌和阴性菌的活性,同时还对酵母及丝状真菌尤其是植物病原菌,具有较强的抑制作用。本研究利用简并性引物对该链霉菌基因组中可能存在的聚酮合酶(PKS)和非核糖体多肽合成酶(NRPS)基因进... 链霉菌GEMSM 4(6)的发酵产物具有抗革兰氏阳性菌和阴性菌的活性,同时还对酵母及丝状真菌尤其是植物病原菌,具有较强的抑制作用。本研究利用简并性引物对该链霉菌基因组中可能存在的聚酮合酶(PKS)和非核糖体多肽合成酶(NRPS)基因进行PCR扩增及序列分析,找到了3个NRPS及15个PKS基因的片段,其中PKS基因与Streptomyces violaceusniger Tu 4113的PKS基因序列同源性最高,达到91%~99%;而NRPS基因与数据库中已知的NRPS基因序列同源性仅为60%~62%。为克隆NRPS生物合成基因簇,构建了链霉菌GEMSM 4(6)的基因组细菌人工染色体(BAC)文库,通过PCR筛选得到包含有这3个NRPS基因的克隆子,为后期的异源表达及基因组发掘分析提供基础。 展开更多
关键词 链霉菌 聚酮合酶 非核糖体多肽合成酶 简并性引物 细菌人工染色体文库
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苏云金芽胞杆菌质粒p26复制功能区的克隆 被引量:1
19
作者 季思思 朱义广 +2 位作者 彭东海 阮丽芳 孙明 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期558-562,共5页
利用特异引物从基因组BAC文库筛选到1个35kb的片段,对该片段测序比对分析发现可能含有p26的复制区。为了验证该片段中是否含有p26的复制区,首先,将大肠杆菌和苏云金芽胞杆菌穿梭载体pHT304用EcoRⅠ酶切切掉苏云金芽胞杆菌复制子后自连,... 利用特异引物从基因组BAC文库筛选到1个35kb的片段,对该片段测序比对分析发现可能含有p26的复制区。为了验证该片段中是否含有p26的复制区,首先,将大肠杆菌和苏云金芽胞杆菌穿梭载体pHT304用EcoRⅠ酶切切掉苏云金芽胞杆菌复制子后自连,获得复制子克隆载体pHT304E;随后,将12kbEcoRⅠ片段亚克隆到载体pHT304E上电转化无晶体突变株BMB171,获得具有抗性的转化子,证明该片段具有复制功能。缺失实验证明最小复制功能区包含2个必需的ORF。经过40代无抗培养,最小复制区复制稳定性达到90%以上。 展开更多
关键词 苏云金芽胞杆菌 质粒 特异引物 细菌人工染色体文库 克隆 复制子 缺失突变
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