细胞间隙连接蛋白43基因在斑马鱼牙齿早期发育中的表达 被引量：3

1

作者 徐智云 刘鑫 +1 位作者 黄兴 杨德琴 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期347-351,共5页

目的探讨细胞间隙连接蛋白43(cx43)基因在斑马鱼早期胚胎中的表达模式,为进一步研究其在牙齿发育过程中的功能奠定基础。方法提取受精后72 h的斑马鱼胚胎总RNA,逆转录合成c DNA,特异性扩增cx43基因片段,连接到PGEMT载体并判断连接方向,... 目的探讨细胞间隙连接蛋白43(cx43)基因在斑马鱼早期胚胎中的表达模式,为进一步研究其在牙齿发育过程中的功能奠定基础。方法提取受精后72 h的斑马鱼胚胎总RNA,逆转录合成c DNA,特异性扩增cx43基因片段,连接到PGEMT载体并判断连接方向,选择相应的RNA聚合酶体外转录,合成地高辛标记的cx43基因反义m RNA探针。运用全时相胚胎原位杂交技术检测斑马鱼胚胎发育早期cx43基因在牙齿发育部位的表达分布,茜素红染色法比较cx43原位杂交表达区域与咽齿解剖部位的关系。结果获得了cx43基因的反义m RNA探针。cx43基因在斑马鱼受精后各个时期咽弓牙齿相应部位均可见到强棕褐色阳性信号。受精后9 d时cx43原位杂交表达部位与咽齿解剖部位基本重叠一致。结论 cx43基因参与牙胚发育和矿化过程,且主要在矿化晚期发挥关键调控作用。 展开更多

关键词 细胞间隙连接蛋白43基因 原位杂交 斑马鱼

在线阅读 下载PDF 职称材料

间隙连接蛋白connexin43基因在真核细胞中的表达 被引量：2

2

作者 王驹 丁学华 +3 位作者 高春芳 王浩 蔡如珏 卢亦成 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第8期738-740,共3页

目的 :构建携带间隙连接蛋白 connexin4 3 c DNA的真核表达载体 ,建立 connexin4 3蛋白高表达细胞株。 方法 :connexin4 3 c DNA在大肠杆菌中扩增后连入真核表达载体 p ED4 ,转染中国仓鼠卵巢 ( CHO)细胞 ,用甲氨蝶呤 ( MTX)筛选得到 co... 目的 :构建携带间隙连接蛋白 connexin4 3 c DNA的真核表达载体 ,建立 connexin4 3蛋白高表达细胞株。 方法 :connexin4 3 c DNA在大肠杆菌中扩增后连入真核表达载体 p ED4 ,转染中国仓鼠卵巢 ( CHO)细胞 ,用甲氨蝶呤 ( MTX)筛选得到 connexin4 3基因高表达细胞。结果 :酶切电泳结果显示载体 p ED4 -Cx4 3按设计构建。经 MTX筛选得到不同抗性的 CHO细胞 ,免疫组织化学方法显示有 connexin4 3蛋白的表达 ,但表达量有限。细胞间染料传递实验证实不同 MTX抗性的 CHO细胞间传递小相对分子质量物质的能力有差异。 结论 :利用载体 p ED4可以使 connexin4 3基因在真核细胞内表达。 展开更多

关键词 间隙连接蛋白43 基因表达 基因转染 CONNEXIN43 真核细胞 载体

在线阅读 下载PDF 职称材料

细胞角蛋白19和间隙连接蛋白43在4-亚基硝氧喹啉诱发大鼠舌黏膜癌变过程中表达的研究 被引量：3

3

作者 冯燕 康晓洁 +1 位作者 黎春晖 聂敏海 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期237-241,共5页

目的研究4-亚基硝氧喹啉(4NQO)诱发大鼠口腔黏膜癌变过程中细胞角蛋白19(CK19)和间隙连接蛋白43(Cx43)的表达,探讨口腔黏膜癌变过程中CK19与Cx43的相关性。方法利用4NQO诱导SD大鼠的口腔黏膜癌变,运用免疫组织化学的方法检测CK19、Cx43... 目的研究4-亚基硝氧喹啉(4NQO)诱发大鼠口腔黏膜癌变过程中细胞角蛋白19(CK19)和间隙连接蛋白43(Cx43)的表达,探讨口腔黏膜癌变过程中CK19与Cx43的相关性。方法利用4NQO诱导SD大鼠的口腔黏膜癌变,运用免疫组织化学的方法检测CK19、Cx43在口腔黏膜癌变过程中各阶段的动态变化。结果在大鼠正常舌黏膜组织中,CK19阳性染色的细胞散在分布于黏膜基底层;随着大鼠舌黏膜上皮异常增生程度的增加,CK19表达于黏膜基底上层;在口腔鳞状细胞癌(OSCC)组织中,CK19阳性染色细胞分布在黏膜各层。CK19在正常舌黏膜、轻度上皮异常增生、中度上皮异常增生、重度上皮异常增生、OSCC组织中阳性表达率分别为30.00%、50.00%、58.33%、80.00%、91.67%,差异有统计学意义(P<0.05)。在正常舌黏膜中Cx43蛋白主要表达于大鼠舌黏膜上皮细胞的细胞膜上,上皮的基底层、棘层和颗粒层呈阳性染色。随着大鼠舌黏膜上皮异常增生程度的增加,Cx43的表达明显下降。Cx43在正常舌黏膜、轻度上皮异常增生、中度上皮异常增生、重度上皮异常增生、OSCC组织中阳性表达率分别为100.00%、85.71%、66.67%、40.00%、33.33%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论在大鼠舌黏膜癌变过程中,CK19蛋白表达水平随病变程度加重显著升高,提示CK19与口腔上皮细胞的癌变有关;Cx43蛋白表达水平随病变程度加重显著下降,Cx43表达下降是口腔黏膜癌变的早期事件。CK19与Cx43蛋白表达呈负相关,CK19和Cx43的联合检测对OSCC的早期诊断有重要的作用,有利于提高OSCC早期诊断的灵敏度和特异性。 展开更多

关键词 口腔鳞状细胞癌 细胞角蛋白19 间隙连接蛋白43 免疫组织化学

在线阅读 下载PDF 职称材料

间隙连接蛋白Cx43在去卵巢雌鼠腺垂体滤泡星形细胞中的表达 被引量：1

4

作者 马兴 李起鸿 +2 位作者 王全平 吕荣 张胜利 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2000年第2期6-9,共4页

目的　探讨间隙连接蛋白 Cx4 3在骨质疏松 (OP)雌鼠腺垂体滤泡星形细胞 (FS细胞 )中的表达规律及其生物学意义。方法　采用 10月龄未孕产 SD雌性大鼠 4 0只 ,随机分为去卵巢组和对照组 ,于术后 6周处死两组大鼠。处死前测量大鼠全身骨... 目的　探讨间隙连接蛋白 Cx4 3在骨质疏松 (OP)雌鼠腺垂体滤泡星形细胞 (FS细胞 )中的表达规律及其生物学意义。方法　采用 10月龄未孕产 SD雌性大鼠 4 0只 ,随机分为去卵巢组和对照组 ,于术后 6周处死两组大鼠。处死前测量大鼠全身骨密度。取大鼠垂体 ,应用 SP免疫组化方法检测大鼠腺垂体 FS细胞中间隙连接蛋白 Cx4 3的表达。结果　术后 6周末去卵巢组大鼠全身骨密度明显低于对照组大鼠骨密度 (P<0 .0 1)。腺垂体中 Cx4 3阳性表达主要定位于相邻的 FS— FS、FS—内分泌细胞中 ,上述细胞的胞浆和 /或胞膜呈棕黄色。去卵巢组大鼠腺垂体 Cx4 3的表达阳性率和阳性信号的表达强度均明显降低 (P<0 .0 1)。结论　SD雌性大鼠去卵巢 6周建立 OP模型。OP模型腺垂体中 Cx4 3蛋白在上述细胞中表达下降可能是大鼠 OP发生的一个环节。 展开更多

关键词 骨质疏松 间隙连接蛋白CX43 腺垂体滤泡星形细胞

在线阅读 下载PDF 职称材料

全反式维甲酸对大肠癌细胞间隙连接蛋白Cx32与Cx43表达及增殖和迁移能力的影响

5

作者 孟令俊 卢振霞 +3 位作者 孙步彤 白鹭鹭 石张镇 代恩勇 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期994-997,共4页

目的:检测全反式维甲酸(ATRA)对大肠癌细胞Caco-2及SW480增殖、迁移及间隙连接蛋白Cx32与Cx43胞膜表达的影响,分析其对大肠癌效应作用机制。方法:取对数生长期大肠癌细胞分为ATRA处理组及阴性对照组,以1×10-8、1×10-7、1×... 目的:检测全反式维甲酸(ATRA)对大肠癌细胞Caco-2及SW480增殖、迁移及间隙连接蛋白Cx32与Cx43胞膜表达的影响,分析其对大肠癌效应作用机制。方法:取对数生长期大肠癌细胞分为ATRA处理组及阴性对照组,以1×10-8、1×10-7、1×10-6、1×10-5及1×10-4 mol·L-1 ATRA处理Caco-2及SW480细胞,应用MTT法测定其生长抑制率;以1×10-5及1×10-4 mol·L-1 ATRA处理SW480细胞,应用划痕法测定其迁移率,流式细胞术测定Cx32及Cx43胞膜阳性率。结果:与阴性对照组比较,ATRA处理组Caco-2及SW480细胞经1×10-4 mol·L-1 ATRA作用24、48及72h后,生长抑制率明显提高(P<0.01);ATRA处理组SW480细胞经1×10-5 mol·L-1 ATRA作用24和48h后,平均迁移率明显低于阴性对照组(P<0.05)。ATRA处理组SW480细胞经1×10-5及1×10-4 mol·L-1 ATRA作用24和48h后,胞膜Cx32及Cx43表达阳性率明显高于阴性对照组(P<0.05)。结论:ATRA可增加大肠癌细胞Cx43及Cx32膜表达,并抑制其增殖及迁移能力,其效应机制可能涉及间隙连接蛋白的胞内蛋白相互作用及细胞间通讯联系功能改变。 展开更多

关键词 大肠癌细胞 全反式维甲酸 间隙连接蛋白Cx32 间隙连接蛋白CX43

在线阅读 下载PDF 职称材料

间隙连接蛋白Cx43在非小细胞肺癌的表达及其临床意义

6

作者 陈清勇 钱斌 +1 位作者 杨凌 江中勇 《中国肺癌杂志》 CAS 2003年第4期272-274,共3页

目的　探讨间隙连接蛋白Cx43在非小细胞肺癌中的表达特征及其临床意义。方法　应用免疫组织化学ABC法检测Cx43在 65例非小细胞肺癌组织中的表达 ,并分析该蛋白表达与肺癌临床病理特征的关系。结果　 65例肺癌标本中Cx43的阳性表达率为 3... 目的　探讨间隙连接蛋白Cx43在非小细胞肺癌中的表达特征及其临床意义。方法　应用免疫组织化学ABC法检测Cx43在 65例非小细胞肺癌组织中的表达 ,并分析该蛋白表达与肺癌临床病理特征的关系。结果　 65例肺癌标本中Cx43的阳性表达率为 3 6.92 % ,2 0例癌旁组织均见Cx43阳性表达。Ⅰ～Ⅱ期和Ⅲ～Ⅳ期组间Cx43阳性表达率差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ,中～高分化的肺癌其Cx43阳性表达率明显高于低分化者 (P <0 .0 1)。Cx43表达与淋巴结转移有密切关系 (P <0 .0 1) ,但与组织学类型无明显关系(P >0 .0 5 )。结论　Cx43异常表达在肺癌发生、发展及转移过程中起着重要作用 。 展开更多

关键词 间隙连接蛋白CX43 非小细胞肺癌 病理特征 免疫组织化学 检测

在线阅读 下载PDF 职称材料

小鼠细胞间隙连接蛋白基因的克隆和序列分析

7

作者 胡根林 吴瑞英 +1 位作者 姜槐 郭汉身 《中国实验动物学杂志》 2000年第1期1-4,共4页

通过提取小鼠细胞总RNA ,采用RT -PCR的方法 ,扩增了连接蛋白Cx4 3的cDNA整个氨基酸编码区域 ,并将其克隆到了pGEM质粒中的EcoR .I位点。对序列的分析显示其有 114 6bp ,编码 382个氨基酸。与已有大鼠、牛及人相应序列比较 ,存在部分差... 通过提取小鼠细胞总RNA ,采用RT -PCR的方法 ,扩增了连接蛋白Cx4 3的cDNA整个氨基酸编码区域 ,并将其克隆到了pGEM质粒中的EcoR .I位点。对序列的分析显示其有 114 6bp ,编码 382个氨基酸。与已有大鼠、牛及人相应序列比较 ,存在部分差异。该重组质粒工作的完成 ,为其表达、调控等方面的研究奠定了基础。 展开更多

关键词 小鼠 细胞间隙连接蛋白 编码区域 连接蛋白CX43 克隆 基因 大鼠 序列分析 总RNA DNA

在线阅读 下载PDF 职称材料

高糖及胰岛素对肾小管上皮细胞间隙连接蛋白43表达的影响

8

作者 杨黎 甘华 +2 位作者 杜晓刚 哈伟杰 郑开元 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第17期1672-1675,共4页

目的观察高糖及胰岛素对肾小管上皮细胞间隙连接蛋白43(connexin43)表达的影响。方法用高糖及胰岛素刺激肾小管上皮细胞,检测不同分组中connexin43蛋白的表达。用免疫荧光分析connexin43蛋白的表达;用RT-PCR检测connexin43 mRNA的表达... 目的观察高糖及胰岛素对肾小管上皮细胞间隙连接蛋白43(connexin43)表达的影响。方法用高糖及胰岛素刺激肾小管上皮细胞,检测不同分组中connexin43蛋白的表达。用免疫荧光分析connexin43蛋白的表达;用RT-PCR检测connexin43 mRNA的表达。结果高糖及胰岛素各自单独作用可以使肾小管上皮细胞connexin43的表达有所减少,而高糖刺激肾小管上皮细胞后,加入一定剂量胰岛素干预,connexin43的表达较单纯高糖组有所增加。结论高糖及一定剂量胰岛素均对肾小管上皮细胞connexin43蛋白的表达具有影响,一定剂量胰岛素对高糖刺激的肾小管上皮细胞间隙连接的损伤具有积极作用。 展开更多

关键词 高糖 胰岛素 间隙连接蛋白43 上皮细胞 肾小管

在线阅读 下载PDF 职称材料

黑龙江鲤肌肉发育中miRNA对间隙连接蛋白基因(Cx43)的调控

9

作者 艾显辉 赵金艳 +3 位作者 于钊 闫学春 田丽红 梁洋 《水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期759-766,共8页

鲤鱼是世界上养殖最广泛的淡水鱼类之一,其肌肉具有高蛋白、低脂肪等特点,具有重要的经济价值。前期对鲤鱼肌肉特异的微小RNA(miRNA)文库分析发现,miR-1和miR-206在鲤鱼肌肉中均高水平存在,但其对鲤鱼肌肉发育的调节作用尚不完全清楚。... 鲤鱼是世界上养殖最广泛的淡水鱼类之一,其肌肉具有高蛋白、低脂肪等特点,具有重要的经济价值。前期对鲤鱼肌肉特异的微小RNA(miRNA)文库分析发现,miR-1和miR-206在鲤鱼肌肉中均高水平存在,但其对鲤鱼肌肉发育的调节作用尚不完全清楚。以黑龙江鲤为试验材料,通过生物信息学预测肌肉生长相关的间隙连接蛋白基因(Cx43)可能是miR-1和miR-206的靶基因。因此利用荧光素酶报告系统以及原位杂交等方法探究miR-1和miR-206对其的调控机制。试验结果表明,miR-1和miR-206均能下调Cx43启动子报告基因,其中miR-206作用更明显。整体原位杂交检测Cx43基因在鲤鱼胚胎期表达情况显示,鲤鱼受精6 h后Cx43基因开始表达,表达量随胚胎发育呈上升趋势,受精后24 h体节表达最高,此后逐渐降低,暗示Cx43基因在鲤鱼肌肉发育早期发挥重要作用。该研究为从分子生物学水平进行鲤鱼的遗传育种,优化黑龙江鲤品质,提高生产性能奠定基础。 展开更多

关键词 微小RNA-206/微小RNA-1 间隙连接蛋白基因Cx43 肌肉发育 靶基因分析

在线阅读 下载PDF 职称材料

肝癌细胞中connexin32、connexin43的表达及其与间隙连接通讯功能的相关性 被引量：5

10

作者 马向东 马兴 +1 位作者 隋延仿 王文亮 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 2002年第2期189-192,共4页

目的 :研究肝细胞肝癌和正常肝细胞间隙连接蛋白connexin 32 (Cx32 )、connexin 4 3(Cx4 3)的表达 ,及其对间隙连接通讯功能 (GJIC)的影响。方法 :应用细胞培养及流式细胞分析技术 (FCM) ,研究肝癌细胞系HHCC、SMMC 772 1和正常肝细胞系... 目的 :研究肝细胞肝癌和正常肝细胞间隙连接蛋白connexin 32 (Cx32 )、connexin 4 3(Cx4 3)的表达 ,及其对间隙连接通讯功能 (GJIC)的影响。方法 :应用细胞培养及流式细胞分析技术 (FCM) ,研究肝癌细胞系HHCC、SMMC 772 1和正常肝细胞系QZG细胞中Cx32和Cx4 3的表达。结合LuciferYellow划痕标记荧光传输技术 (SLDT) ,检测上述细胞的间隙连接通讯功能。结果 :流式细胞仪分析证实 ,Cx32蛋白在肝癌细胞系HHCC、SMMC 772 1和正常肝细胞系QZG细胞中表达的阳性率分别为 1 9%、0 7%和 99.0 % ;Cx4 3蛋白在HHCC、SMMC 772 1和QZG细胞中表达的阳性率分别为 7 3%、2 6 5 %和 99 1%。SLDT检测发现肝癌细胞HHCC ,SMMC - 772 1的间隙连接通讯功能较正常肝细胞QZG明显减弱。结论 :Cx32、Cx4 3蛋白在正常肝细胞中具有较高水平的表达 ,在肝癌细胞中表达水平显著降低 ;肝癌细胞的间隙连接通讯功能较正常肝细胞亦明显减弱。Cx32、Cx4 3表达调控异常引起的间隙连接通讯障碍可能与肝癌的发生密切相关。 展开更多

关键词 肝癌 CONNEXIN32 CONNEXIN43 间隙连接通讯功能 相关性 连接蛋白类 流式细胞术

在线阅读 下载PDF 职称材料

p27基因对血管平滑肌细胞中连接蛋白43表达的影响 被引量：1

11

作者 冉擘力 何国祥 +2 位作者 王耿 宋治远 舒茂琴 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期424-426,共3页

目的研究连接蛋白43(Cx43)在p27基因抑制血管平滑肌细胞(VSMC)增殖中的作用。方法以携带大鼠p27基因表达序列的复制缺陷型5型腺病毒载体(AdCMV-p27)转染VSMC后,应用免疫细胞化学染色检测p27和Cx43表达的变化;应用3H标记的胸腺嘧啶核苷(3... 目的研究连接蛋白43(Cx43)在p27基因抑制血管平滑肌细胞(VSMC)增殖中的作用。方法以携带大鼠p27基因表达序列的复制缺陷型5型腺病毒载体(AdCMV-p27)转染VSMC后,应用免疫细胞化学染色检测p27和Cx43表达的变化;应用3H标记的胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)掺入试验观察p27基因表达增强对VSMC增殖的影响。结果(1)Ad-CMV-p27转染前,血小板衍化生长因子BB(platelet-derived growth factor,PDGF-BB)下调P27蛋白的表达,AdCMV-p27转染后,无论有无PDGF-BB刺激,VSMC中P27蛋白的表达均比转染前显著增高。(2)AdCMV-p27转染使VSMC中Cx43蛋白的表达基本恢复至有丝分裂原刺激前状态。(3)AdCMV-p27转染使VSMC的3H-TdR掺入量均较未转染组显著降低。结论p27基因对Cx43表达的调控,使细胞间连接通讯得到维护,是其抑制VSMC增殖的重要机制之一。 展开更多

关键词 P27基因 血管平滑肌细胞 细胞增殖 连接蛋白43

在线阅读 下载PDF 职称材料

抑制小鼠HL-1心肌细胞桥粒斑蛋白基因表达对缝隙连接蛋白43结构和功能的影响 被引量：1

12

作者 张黔桓 邓春玉 +5 位作者 饶芳 刘晓颖 麦丽萍 朱杰宁 谭虹虹 吴书林 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期982-987,共6页

目的:采用基因沉默技术抑制小鼠HL-1心肌细胞桥粒斑蛋白(DSP)基因表达以明确DSP与缝隙连接蛋白43(Cx43)的结构和功能关系。方法:用基因沉默技术抑制DSP基因的表达,Western blotting和流式细胞术检测HL-1细胞DSP和Cx43蛋白的表达,用双免... 目的:采用基因沉默技术抑制小鼠HL-1心肌细胞桥粒斑蛋白(DSP)基因表达以明确DSP与缝隙连接蛋白43(Cx43)的结构和功能关系。方法:用基因沉默技术抑制DSP基因的表达,Western blotting和流式细胞术检测HL-1细胞DSP和Cx43蛋白的表达,用双免疫荧光方法检测DSP与Cx43蛋白的表达与定位情况,并用划痕标记染料示踪技术检测细胞缝隙连接通讯状况。结果:与空白组和对照组相比,siRNA-DSP组的DSP和Cx43蛋白表达量降低(P<0.05)。免疫荧光检测发现空白组和对照组DSP与Cx43蛋白存在共定位情况,而siRNA-DSP组DSP和Cx43蛋白共定位遭到破坏,Cx43蛋白出现再分布,在细胞内检测到Cx43蛋白,并且划痕标记染料示踪技术检测发现siRNA-DSP组Lucifer yellow通过HL-1细胞缝隙连接的传输功能降低。结论:DSP表达抑制不仅使Cx43出现再分布,而且影响缝隙连接传导功能。 展开更多

关键词 缝隙连接蛋白43 桥粒斑蛋白 基因沉默 HL-1细胞

在线阅读 下载PDF 职称材料

不同恶化程度胃癌细胞系的细胞间隙连接通讯功能及Cx43表达的差异 被引量：5

13

作者 田志华 丁慧荣 +2 位作者 张宏 张伟 李振甫 《北京师范大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期63-68,0+2,共6页

以人正常胃黏膜上皮细胞系GES-1和不同恶化程度的人胃癌细胞系(低恶化AGS细胞系、中恶化SGC-7901细胞系、高恶化BGC-823细胞系)为研究对象,采用激光共聚焦显微镜的荧光漂白恢复技术及划痕标记荧光染料示踪技术研究不同恶化程度的胃癌细... 以人正常胃黏膜上皮细胞系GES-1和不同恶化程度的人胃癌细胞系(低恶化AGS细胞系、中恶化SGC-7901细胞系、高恶化BGC-823细胞系)为研究对象,采用激光共聚焦显微镜的荧光漂白恢复技术及划痕标记荧光染料示踪技术研究不同恶化程度的胃癌细胞系细胞间隙连接通讯(Gap junctional intercellular communication,GJIC)功能的差异;采用荧光定量PCR技术和间接免疫荧光技术检测间隙连接蛋白(Connexin43,Cx43)基因在mRNA和蛋白水平的表达差异,探求其与胃癌恶性程度的相关性.结果表明,在正常胃细胞系和低、中及高恶化胃腺癌细胞系中,细胞间的GJIC功能随着恶性程度的升高而减弱(AGS、SGC-7901)或消失(BGC-823),且Cx43蛋白及mRNA的表达量随着恶性程度的升高而下调(AGS、SGC-7901)或缺失(BGC-823).这提示胃癌恶性程度与胃癌细胞的GJIC功能显著相关(P<0.05),GJIC在胃癌发生中起重要作用. 展开更多

关键词 胃癌细胞系 细胞间隙连接通讯(GJIC) 间隙连接蛋白(Cx43) 荧光漂白恢复技术 划痕标记荧光染料示踪技术 荧光定量PCR技术

在线阅读 下载PDF 职称材料

间隙连接蛋白43突变与皮肤疾病相关性研究 被引量：1

14

作者 何茜 王大华 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期1095-1101,共7页

间隙连接蛋白(Cx)在保证细胞间物质信息传递及维持皮肤屏障稳态方面发挥着重要作用,其基因突变,甚至表达水平异常均会引起多种疾病,严重影响患者生活质量。在编码人类Cx家族的21个基因中,与Cx基因突变相关的临床伴随疾病至少有14种。其... 间隙连接蛋白(Cx)在保证细胞间物质信息传递及维持皮肤屏障稳态方面发挥着重要作用,其基因突变,甚至表达水平异常均会引起多种疾病,严重影响患者生活质量。在编码人类Cx家族的21个基因中,与Cx基因突变相关的临床伴随疾病至少有14种。其中,Cx43分布最广,不仅在大多数器官组织中均有报道,也是伤口愈合、皮肤角质化,以及皮肤肿瘤发展等重要生理病理过程中的关键调控节点。本文总结了近年来Cx43基因(GJA1)在皮肤屏障中的作用、GJA1基因突变相关皮肤疾病及其潜在致病机制这几个快速发展领域中的研究成果,以期为Cx43临床伴发疾病防治及相关研究提供参考。 展开更多

关键词 间隙连接蛋白43 基因突变 皮肤疾病 半通道活性 致病机制

在线阅读 下载PDF 职称材料

热疗上调细胞间隙连接通讯对胶质瘤侵袭性的影响及其机制 被引量：2

15

作者 秦丽娟 张志勇 +5 位作者 王银环 朱丽艳 杨秀红 张田 孙娜 宋鸿艳 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期1692-1695,共4页

目的探讨热疗降低胶质瘤侵袭性的作用与细胞间隙连接通讯(gap junctional intercellular communication,GJIC)的关系。方法热疗处理C6胶质瘤细胞后,免疫组织化学法和Western blot法动态检测HSP70和Cx43的表达水平;划痕标记染料示踪技术... 目的探讨热疗降低胶质瘤侵袭性的作用与细胞间隙连接通讯(gap junctional intercellular communication,GJIC)的关系。方法热疗处理C6胶质瘤细胞后,免疫组织化学法和Western blot法动态检测HSP70和Cx43的表达水平;划痕标记染料示踪技术检测胶质瘤GJIC功能变化;结晶紫染色法检测胶质瘤侵袭性的改变。结果 C6细胞经热疗后,HSP70表达增加,于30 min时含量最多。C6细胞内Cx43的表达水平也在热疗后明显增加,并于热疗后的120 min达高峰,后逐渐减少。热疗后GJIC功能的恢复与C6细胞内Cx43的表达相一致,且GJIC功能越强,胶质瘤侵袭性越低。结论胶质瘤细胞经热疗后HSP70表达增加,增加的HSP70可能是通过其分子伴侣作用提高Cx43的表达水平,进而上调GJIC功能而引起胶质瘤侵袭性的下降。 展开更多

关键词 热疗 胶质瘤 肿瘤侵袭性 细胞间隙连接通讯 热休克蛋白70 连接蛋白CX43

在线阅读 下载PDF 职称材料

连接蛋白43偶合对多发性骨髓瘤细胞生物学行为的影响 被引量：2

16

作者 孙谕 张阳敏 +3 位作者 徐燕霞 何苑宁 张立莹 傅晋翔 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期1812-1818,共7页

目的:观察由连接蛋白43(Cx43)组成的细胞间隙连接通讯(GJIC)及其介导的信号对多发性骨髓瘤(MM)细胞生物学行为的影响,并探讨其可能机制。方法:分离、培养MM患者、正常人骨髓间充质干细胞(MSC);采用RTPCR及蛋白印迹检测不同来源MSC中Cx4... 目的:观察由连接蛋白43(Cx43)组成的细胞间隙连接通讯(GJIC)及其介导的信号对多发性骨髓瘤(MM)细胞生物学行为的影响,并探讨其可能机制。方法:分离、培养MM患者、正常人骨髓间充质干细胞(MSC);采用RTPCR及蛋白印迹检测不同来源MSC中Cx43的表达,流式细胞术分选MM侧群细胞(SP),直接共培养后观察不同来源MSC对SP细胞周期、Cx43表达、体外集落形成、干细胞相关基因表达、细胞因子分泌和耐药的变化以及加入GJIC抑制剂18α甘草次酸(18α-GA)的影响。结果:MM患者及正常人骨髓所获的MSC形态及表型无明显区别,蛋白印迹证实,这两种MSC均表达较高水平的Cx43,与SP细胞共培养后可上调其Cx43表达,18α-GA可部分抑制该作用,对来源于MM患者的MSC作用更为显著(P<0.001);SP细胞具较强的体外集落形成能力,MM-MSCs具促进作用,加入18α-GA后SP细胞体外集落形成能力下降;RT-PCR检测证实RPMI 8266细胞存在少量c-myc、Klf-4、Sox-2和Oct-4基因表达,但SP细胞亚群中该类基因明显上调(P<0.001),MM-MSC可显著上调SP细胞c-myc、Klf-4和Sox-2基因的表达(P<0.001),而下调Oct-4基因表达,加入GJ阻断剂后,上调的基因均有不同程度下调,但无明显差异(P>0.05);CBA分析结果显示,MM-MSC分泌的高水平白介素(IL),与SP细胞共培养后,其上清中IL-6、IL-10及转化生长因子-β(TGF-β)表达上调(P<0.05),尤其是IL-6和IL-10较单独培养时显著上调(P<0.01),碱性成纤维细胞生长因子和IL-17共培养前后则无明显变化,加入18α-GA后,上清中IL-6、IL-10和TGF-β水平均明显降低(P<0.05);PI/Annexin V检测证实,MM细胞对硼替佐米诱导的凋亡敏感,但SP细胞敏感性较差,凋亡率分别为75.2%±0.77%和8.12%±0.86%(P<0.001),MM-MSC可显著减少硼替佐米介导的细胞凋亡(P<0.05),加入18α-GA可部分恢复MM细胞对硼替佐米的敏感性。结论:MM患者来源的MSC通过上调MM细胞Cx43表达,强化GJIC维持其"干"性,同时通过分泌多种细胞因子促进细胞增殖和耐药,是最终导致MM复发的原因之一。 展开更多

关键词 多发性骨髓瘤 细胞间隙连接通讯 连接蛋白43 肿瘤微环境 增殖

在线阅读 下载PDF 职称材料

人肺上皮细胞、成纤维细胞、肺癌细胞间的异源间隙连接通讯

17

作者 张志谦 胡颖 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期306-309,共4页

目的:探讨人肺成纤维细胞、上皮细胞间以及与人肺癌细胞的细胞间隙连接通讯(gapjunctionalintercel lularcommunication, GJIC)特性,以进一步了解GJIC在人肺癌发生、发展中的作用。方法:利用预标记荧光染料传输技术研究了人胚肺上皮类... 目的:探讨人肺成纤维细胞、上皮细胞间以及与人肺癌细胞的细胞间隙连接通讯(gapjunctionalintercel lularcommunication, GJIC)特性,以进一步了解GJIC在人肺癌发生、发展中的作用。方法:利用预标记荧光染料传输技术研究了人胚肺上皮类型细胞(HLEC)与人肺成纤维细胞HLF、肺癌PG细胞及其Cx43转染子PG/C4间的异源通讯,Cx43免疫荧光染色和Northern杂交分别检测Cx43蛋白和mRNA的表达。结果:尽管这些细胞除PG外都表达Cx43和具有强的同源通讯功能,但人肺上皮细胞HLEC与成纤维细胞间不能建立GJIC,上皮来源的人肺癌PG细胞与正常上皮细胞HLEC通讯功能缺陷; 具有强的同源通讯功能的Cx43转染子PG/C4并未建立与上皮细胞间的通讯功能。结论:人肺不同类型细胞间的GJIC存在选择性,细胞癌变后丧失了与其来源一致的上皮细胞间的通讯, Cx43基因表达并不足以建立二种细胞间的GJIC。 展开更多

关键词 人肺上皮细胞 Northern杂交 人肺成纤维细胞 细胞间隙连接通讯 GJIC CX43蛋白 免疫荧光染色 PG细胞 HLEC 人肺癌细胞 荧光染料 mRNA 功能缺陷 细胞癌变 基因表达 癌发生 HLF 人胚肺 同类型 CA 转染 同源

在线阅读 下载PDF 职称材料

全反式维甲酸对Rb细胞的生长及Cx43蛋白分子表达的影响 被引量：3

18

作者 李立 唐罗生 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2007年第5期332-335,共4页

目的研究全反式维甲酸(ATRA)对视网膜母细胞瘤(Rb)细胞的生长及细胞间隙连接蛋白(Cx)43分子表达的影响,探讨其作用机制。方法设立3种浓度(10-5mol/L、10-6mol/L和10-7mol/L)ATRA分别作用于Rb细胞,采用四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl t... 目的研究全反式维甲酸(ATRA)对视网膜母细胞瘤(Rb)细胞的生长及细胞间隙连接蛋白(Cx)43分子表达的影响,探讨其作用机制。方法设立3种浓度(10-5mol/L、10-6mol/L和10-7mol/L)ATRA分别作用于Rb细胞,采用四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)比色法检测细胞生长抑制率,流式细胞术检测细胞周期改变及凋亡率,免疫组织化学方法检测细胞Cx43蛋白的表达。结果经ATRA作用后,Rb细胞增生率下降,G0/G1期细胞比例增高而S期比例相对下降,细胞凋亡率升高,Cx43蛋白表达上调。上述效应均呈药物浓度及作用时间依赖性。结论ATRA通过将Rb细胞生长周期阻滞于G0/G1期并促进凋亡而抑制其生长,同时可诱导细胞Cx43分子表达上调。 展开更多

关键词 全反式维甲酸 视网膜母细胞瘤 细胞间隙连接蛋白43

在线阅读 下载PDF 职称材料

人脑胶质瘤Cx43基因表达及其与肿瘤细胞增殖关系的研究 被引量：1

19

作者 宋国智 李利敏 +5 位作者 焦保华 马文群 赵运果 张新国 陈延平 夏远舰 《中国现代神经疾病杂志》 CAS 2009年第5期489-493,共5页

目的探讨缝隙连接蛋白43(Cx43)基因表达与胶质瘤细胞增殖之间的关系,及其在胶质瘤发生发展中的作用,拟为手术后治疗及疗效观察提供客观依据。方法采用原位杂交和免疫组织化学染色方法检测胶质瘤细胞cx43 mRNA、Cx43蛋白和增殖细胞核抗... 目的探讨缝隙连接蛋白43(Cx43)基因表达与胶质瘤细胞增殖之间的关系,及其在胶质瘤发生发展中的作用,拟为手术后治疗及疗效观察提供客观依据。方法采用原位杂交和免疫组织化学染色方法检测胶质瘤细胞cx43 mRNA、Cx43蛋白和增殖细胞核抗原的表达水平。结果对照脑组织和胶质瘤细胞Cx43 mRNA阳性表达率分别为100%(10/10)和61.70%(29/47),差异具有统计学意义(z=-5.407,p=0.000);低度恶性(WHO Ⅰ～Ⅱ级)胶质瘤细胞Cx43 mRNA阳性表达率为100%(7/7)和93.75%(15/16),高度恶性(WHOⅢ～Ⅳ级)为33.33%(6/18)和16.67%(1/6);Cx43 mRNA阳性表达率与胶质瘤组织病理学分级呈负相关(r=-0.794,P=0.000)。对照脑组织和胶质瘤细胞Cx43蛋白表达水平与Cx43 mRNA基本一致。对照脑组织增殖细胞核抗原表达阴性;不同级别胶质瘤细胞增殖细胞核抗原阳性表达率依次为WHOⅣ级100%(6/6)、WHOⅢ级94.44%(17/18)、WHOⅡ级62.50%(10/16)和WHO 1级42.86%(3/7);增殖细胞核抗原阳性表达率与胶质瘤组织病理学分级呈正相关(r=0.589,P=0.000);WHO Ⅲ～Ⅳ级与WHO Ⅰ～Ⅱ级之间差异具有统计学意义(H=13.239,P=0.000)。Cx43 mRNA与Cx43蛋白表达水平呈正相关(r=0.963,P=0.000),Cx43 mRNA及其蛋白质与增殖细胞核抗原表达水平呈负相关(r=-0.621,p=0.000;r=-0.913,P=0.000)。结论胶质瘤细胞Cx43 mRNA及其蛋白质与增殖细胞核抗原表达水平和肿瘤组织病理学分级呈负相关。提示,Cx43基因表达与肿瘤细胞增殖活性和胶质瘤恶性进展密切相关。 展开更多

关键词 脑肿瘤 神经胶质瘤 连接蛋白43 基因表达 细胞间通讯 细胞分裂 免疫组织化学 原位杂交

在线阅读 下载PDF 职称材料

Cx43在基质刚度调控骨髓间充质干细胞分化中的作用机制研究

20

作者 张译文 续惠云 《医用生物力学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第S01期403-404,共2页

目的骨髓间充质干细胞(BMSCs)具有力学敏感性,对周围力学微环境高度敏感。连接蛋白43(connexin 43,Cx43)作为骨组织细胞中组成半通道和间隙连接的主要蛋白,在力学信号传导中发挥重要作用。然而关于Cx43是否参与基质刚度对BMSCs分化的调... 目的骨髓间充质干细胞(BMSCs)具有力学敏感性,对周围力学微环境高度敏感。连接蛋白43(connexin 43,Cx43)作为骨组织细胞中组成半通道和间隙连接的主要蛋白,在力学信号传导中发挥重要作用。然而关于Cx43是否参与基质刚度对BMSCs分化的调节仍有待研究。方法本实验制备了模拟骨髓力学微环境不同位置处基质刚度(1、10、34 k Pa)的聚丙烯酰胺水凝胶培养基底;培养间充质干细胞细胞系C3H10T1/2,利用18α-GA抑制C3H10T1/2中Cx43功能;提取BMSCs条件性敲除(c KO)Cx43小鼠(Prx1-Cre;Cx43 flox/flox)和同窝对照flox小鼠(Cx43 flox/flox)原代BMSCs进一步验证。结果抑制Cx43均会导致BMSCs在10、34 k Pa基质刚度上的成脂能力显著下降,而对1 k Pa上BMSCs成脂能力无影响。相比于1 k Pa和34 k Pa,在10 k Pa基质刚度上抑制Cx43导致了BMSCs成骨能力显著下降。在不同基质刚度上抑制BMSCs上Cx43均会导致糖酵解和线粒体融合裂变相关基因表达显著变化,以及成脂和成骨分化过程中ATP的生成。结论BMSCs响应骨髓力学微环境,较软的基质刚度可能对成脂能力有一定程度的恢复作用,而Cx43可能通过代谢途径参与了基质刚度对BMSCs分化的调节。 展开更多

关键词 CX43 连接蛋白43 聚丙烯酰胺水凝胶 骨髓间充质干细胞 间隙连接 成骨分化 糖酵解 成骨能力

在线阅读 下载PDF 职称材料