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小鼠细胞间隙连接蛋白基因的克隆和序列分析
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作者 胡根林 吴瑞英 +1 位作者 姜槐 郭汉身 《中国实验动物学杂志》 2000年第1期1-4,共4页
通过提取小鼠细胞总RNA ,采用RT -PCR的方法 ,扩增了连接蛋白Cx4 3的cDNA整个氨基酸编码区域 ,并将其克隆到了pGEM质粒中的EcoR .I位点。对序列的分析显示其有 114 6bp ,编码 382个氨基酸。与已有大鼠、牛及人相应序列比较 ,存在部分差... 通过提取小鼠细胞总RNA ,采用RT -PCR的方法 ,扩增了连接蛋白Cx4 3的cDNA整个氨基酸编码区域 ,并将其克隆到了pGEM质粒中的EcoR .I位点。对序列的分析显示其有 114 6bp ,编码 382个氨基酸。与已有大鼠、牛及人相应序列比较 ,存在部分差异。该重组质粒工作的完成 ,为其表达、调控等方面的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 小鼠 细胞间隙连接蛋白 编码区域 连接蛋白CX43 克隆 基因 大鼠 序列分析 总RNA DNA
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细胞间隙连接蛋白43基因在斑马鱼牙齿早期发育中的表达 被引量:3
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作者 徐智云 刘鑫 +1 位作者 黄兴 杨德琴 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期347-351,共5页
目的探讨细胞间隙连接蛋白43(cx43)基因在斑马鱼早期胚胎中的表达模式,为进一步研究其在牙齿发育过程中的功能奠定基础。方法提取受精后72 h的斑马鱼胚胎总RNA,逆转录合成c DNA,特异性扩增cx43基因片段,连接到PGEMT载体并判断连接方向,... 目的探讨细胞间隙连接蛋白43(cx43)基因在斑马鱼早期胚胎中的表达模式,为进一步研究其在牙齿发育过程中的功能奠定基础。方法提取受精后72 h的斑马鱼胚胎总RNA,逆转录合成c DNA,特异性扩增cx43基因片段,连接到PGEMT载体并判断连接方向,选择相应的RNA聚合酶体外转录,合成地高辛标记的cx43基因反义m RNA探针。运用全时相胚胎原位杂交技术检测斑马鱼胚胎发育早期cx43基因在牙齿发育部位的表达分布,茜素红染色法比较cx43原位杂交表达区域与咽齿解剖部位的关系。结果获得了cx43基因的反义m RNA探针。cx43基因在斑马鱼受精后各个时期咽弓牙齿相应部位均可见到强棕褐色阳性信号。受精后9 d时cx43原位杂交表达部位与咽齿解剖部位基本重叠一致。结论 cx43基因参与牙胚发育和矿化过程,且主要在矿化晚期发挥关键调控作用。 展开更多
关键词 细胞间隙连接蛋白43基因 原位杂交 斑马鱼
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全反式维甲酸对Rb细胞的生长及Cx43蛋白分子表达的影响 被引量:3
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作者 李立 唐罗生 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2007年第5期332-335,共4页
目的研究全反式维甲酸(ATRA)对视网膜母细胞瘤(Rb)细胞的生长及细胞间隙连接蛋白(Cx)43分子表达的影响,探讨其作用机制。方法设立3种浓度(10-5mol/L、10-6mol/L和10-7mol/L)ATRA分别作用于Rb细胞,采用四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl t... 目的研究全反式维甲酸(ATRA)对视网膜母细胞瘤(Rb)细胞的生长及细胞间隙连接蛋白(Cx)43分子表达的影响,探讨其作用机制。方法设立3种浓度(10-5mol/L、10-6mol/L和10-7mol/L)ATRA分别作用于Rb细胞,采用四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)比色法检测细胞生长抑制率,流式细胞术检测细胞周期改变及凋亡率,免疫组织化学方法检测细胞Cx43蛋白的表达。结果经ATRA作用后,Rb细胞增生率下降,G0/G1期细胞比例增高而S期比例相对下降,细胞凋亡率升高,Cx43蛋白表达上调。上述效应均呈药物浓度及作用时间依赖性。结论ATRA通过将Rb细胞生长周期阻滞于G0/G1期并促进凋亡而抑制其生长,同时可诱导细胞Cx43分子表达上调。 展开更多
关键词 全反式维甲酸 视网膜母细胞 细胞间隙连接蛋白43
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CX43在应激性溃疡发生发展过程中的表达与细胞凋亡、增殖的关系 被引量:8
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作者 刘婧 李兆申 +1 位作者 宛新建 王雯 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期252-254,T001,共4页
探讨细胞间隙连接蛋白 43 (CX43 )在胃粘膜遭受应激损伤时的变化及与细胞凋亡、增殖发生的关系。制作大鼠水浸 束缚应激(WRS)模型。采用原位末端标记 (TUNEL)法检测WRS结束前后不同时间点细胞凋亡的发生 ;免疫组化ABC法原位检测增殖细... 探讨细胞间隙连接蛋白 43 (CX43 )在胃粘膜遭受应激损伤时的变化及与细胞凋亡、增殖发生的关系。制作大鼠水浸 束缚应激(WRS)模型。采用原位末端标记 (TUNEL)法检测WRS结束前后不同时间点细胞凋亡的发生 ;免疫组化ABC法原位检测增殖细胞核抗原 (PCNA)蛋白的表达 ;原位杂交法检测CX43mRNA表达变化。结果发现 ,正常大鼠胃粘膜上皮散在TUNEL 细胞 ,PCNA蛋白主要在胃腺颈部近胃小凹处呈中等阳性表达 ,CX43mRNA在胃腺区呈中等阳性表达。WRS 2h~WRS后 5hTUNEL 细胞较对照组明显增多 ,并逐渐达高峰 ,PCNA蛋白和CX43mRNA的表达明显低于对照组 ;WRS后 8~ 12hTUNEL 细胞逐渐减少 ,而PCNA表达达高峰 ,CX43mRNA表达恢复并明显增加 ;WRS后 2 4hTUNEL 细胞仍高于正常水平 ;PCNA及CX43表达基本恢复至正常水平。相关分析 :CX43mRNA表达与PCNA蛋白表达呈显著正相关。结果提示 ,CX43mRNA的表达可能与胃粘膜腺细胞区结构稳定、增殖和分化有关 。 展开更多
关键词 细胞间隙连接蛋白 溃疡 应激 细胞凋亡 细胞增殖
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奥美拉唑、铝碳酸镁和米索前列醇对大鼠急性胃粘膜损伤保护作用及机制 被引量:5
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作者 刘婧 李兆申 许国铭 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2006年第9期1056-1059,共4页
目的:比较奥美拉唑(omeprazole,Ome)、铝碳酸镁(Talcid,Tal)和米索前列醇(misoprostol,Mis)对急性胃粘膜损伤的保护作用及机制。方法:复制大鼠水浸-束缚应激(WRS)性溃疡模型,计算粘膜损伤指数(UI);TUNEL法检测细胞凋亡、免疫组化法检测... 目的:比较奥美拉唑(omeprazole,Ome)、铝碳酸镁(Talcid,Tal)和米索前列醇(misoprostol,Mis)对急性胃粘膜损伤的保护作用及机制。方法:复制大鼠水浸-束缚应激(WRS)性溃疡模型,计算粘膜损伤指数(UI);TUNEL法检测细胞凋亡、免疫组化法检测诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达,原位杂交法检测细胞间隙连接蛋白43(CX43)表达。结果:大鼠分别灌服Ome、Mis和Tal后,均能明显减轻胃粘膜损伤,降低胃粘膜细胞凋亡发生率,抑制iNOS表达,增加CX43表达(P<0.01),其中Ome、Mis降低胃粘膜细胞凋亡发生优于Tal,而Mis和Tal增加CX43表达强于Ome。结论:三种药物作用于急性胃粘膜损伤发生的不同环节,明显抑制细胞凋亡发生,抑制iNOS表达,促进CX43表达,对应激性溃疡(SU)有明显的防治作用。 展开更多
关键词 应激 胃粘膜损伤 细胞凋亡 诱导型一氧化氮合酶 细胞间隙连接蛋白43 奥美拉唑 铝碳酸镁米索前列醇
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先天性心脏圆锥动脉干畸形患者Cx43基因突变的初步研究 被引量:2
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作者 张陈 黄国英 杨毅 《复旦学报(医学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2003年第6期523-526,共4页
目的 探讨先天性心脏圆锥动脉干畸形(CTD)患者细胞间隙连接蛋白43(Cx43)基因突变的发生情况。方法 采用聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)分析结合DNA测序,对37例CTD、26例非CTD先心病、10例正常小儿进行了Cx43编码序列检测。结果... 目的 探讨先天性心脏圆锥动脉干畸形(CTD)患者细胞间隙连接蛋白43(Cx43)基因突变的发生情况。方法 采用聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)分析结合DNA测序,对37例CTD、26例非CTD先心病、10例正常小儿进行了Cx43编码序列检测。结果 正常对照SSCP均表现为相同的带型。37例CTD中,仅1例法洛四联症(TOF)合并房间隔缺损(ASD)的患者出现了不同于正常对照的SSCP带型,经测序证实发生了717G→A碱基替换,但由于不引起所编码氨基酸的改变,考虑为沉默多态位点。其他CTD患者及26例非CTD先心病患者均未检测到Cx43编码序列的突变。结论 Cx43基因突变在CTD等先心病患者中可能并不常见。717G→A可能是一种新的单核苷酸多态位点。 展开更多
关键词 先天性心脏圆锥动脉干畸形 CX43基因 基因突变 细胞间隙连接蛋白43 小儿
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