甘蔗细胞质型苹果酸脱氢酶基因的克隆及其表达分析 被引量：3

1

作者 徐景升 阙友雄 +6 位作者 颜克伟 唐唯其 许莉萍 高三基 郭晋隆 董萌 陈如凯 《热带亚热带植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期455-461,共7页

对甘蔗(Saccharum officinarum L.)叶片全长cDNA文库进行测序,获得了1个细胞质型苹果酸脱氢酶(cMDH)基因的全长cDNA序列,命名为Sc-cMDH。生物信息学分析表明,该基因全长1314 bp,开放阅读框为999 bp,编码332个氨基酸。Sc-cMDH与其他植物c... 对甘蔗(Saccharum officinarum L.)叶片全长cDNA文库进行测序,获得了1个细胞质型苹果酸脱氢酶(cMDH)基因的全长cDNA序列,命名为Sc-cMDH。生物信息学分析表明,该基因全长1314 bp,开放阅读框为999 bp,编码332个氨基酸。Sc-cMDH与其他植物cMDH的氨基酸序列同源性高达86.5%～97.0%。Sc-cMDH包含典型的NAD+结合基元T11GAAGQI17和催化基元I184WGNH188,还有相当保守的6个半胱氨酸残基,因此推断该基因为细胞质型NAD-MDH。定量PCR分析结果表明,该基因在甘蔗叶片和根中的表达量高于茎。 展开更多

关键词 甘蔗 细胞质型苹果酸脱氢酶基因 实时定量PCR

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猪心肌细胞质苹果酸脱氢酶的制备 被引量：1

2

作者 张元亮 王云山 《河北大学学报（自然科学版）》 CAS 1995年第1期36-39,共4页

用匀浆提取，９０％硫酸铵沉淀和ＣＭ－纤维素、ＤＥＡＥ－ＳｅｐｈａｂｅｘＡ－５０、ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００柱层析的方法从猪心肌中分离纯化了细胞质苹果酸脱氨酶。酶制品达到了ＩＦＣＣ规定的标准。

关键词 苹果酸脱氢酶 猪 心肌 细胞质 制备

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亚洲牛带绦虫36kDa胞浆型苹果酸脱氢酶基因的表达、纯化及免疫学分析

3

作者 黄江 胡旭初 +4 位作者 徐劲 余新炳 包怀恩 郎书源 廖兴江 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期655-658,共4页

目的对亚洲牛带绦虫胞浆型苹果酸脱氢酶基因(malate dehydrogenase,MDH)进行克隆、表达和免疫学研究。方法将亚洲牛带绦虫成虫MDH克隆到原核表达质粒pET-30a(+)中,在大肠埃希菌BL-21/DE3中用IPTG诱导表达,表达产物通过十二烷基磺酸钠-... 目的对亚洲牛带绦虫胞浆型苹果酸脱氢酶基因(malate dehydrogenase,MDH)进行克隆、表达和免疫学研究。方法将亚洲牛带绦虫成虫MDH克隆到原核表达质粒pET-30a(+)中,在大肠埃希菌BL-21/DE3中用IPTG诱导表达,表达产物通过十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)进行鉴定,用镍离子金属螯合剂亲和层析柱进行纯化,纯化的重组蛋白用蛋白印迹(Western Blotting)进行免疫学分析。结果PCR、双酶切及DNA测序结果均表明pET-30a(+)-TaMDH重组质粒构建成功。SDS-PAGE结果表明目的基因在大肠埃希菌BL-21/DE3中获得高效表达,经亲和层析获得了高纯度蛋白。重组蛋白可被其免疫的SD大鼠血清识别,表明其具有免疫原性;并且能识别感染了亚洲牛带绦虫的猪血清,表明其具有免疫反应性。结论亚洲牛带绦虫苹果酸脱氢酶基因可在原核表达系统中获得具有免疫学活性的高效表达,为进一步研究该蛋白的功能奠定了基础。 展开更多

关键词 亚洲牛带绦虫 苹果酸脱氢酶基因 基因克隆 原核表达

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西方蜜蜂六个亚种苹果酸脱氢酶Ⅱ基因的遗传差异 被引量：7

4

作者 刘艳荷 陈盛禄 +1 位作者 童富淡 张传溪 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期188-192,共5页

研究了西方蜜蜂Apismellifera 6亚种———浙农大 1号意蜂 (ZND A .m .ligustica)、东北黑蜂 (A .m .ssp .)、卡尼鄂拉蜂 (A .m .carnica)、喀尔巴阡蜂 (A .m .carpatica)、高加索蜂 (A .m .caucasica)和乌克兰蜂 (A .m .acervorum)苹... 研究了西方蜜蜂Apismellifera 6亚种———浙农大 1号意蜂 (ZND A .m .ligustica)、东北黑蜂 (A .m .ssp .)、卡尼鄂拉蜂 (A .m .carnica)、喀尔巴阡蜂 (A .m .carpatica)、高加索蜂 (A .m .caucasica)和乌克兰蜂 (A .m .acervorum)苹果酸脱氢酶Ⅱ的基因型频率、基因频率和杂合纯合度。浙农大 1号意蜂、喀尔巴阡蜂和高加索蜂的纯合度较高 ,但浙农大 1号意蜂等位基因c频率最高 ,喀尔巴阡蜂等位基因b频率最高 ,高加索蜂等位基因a频率最高 ;东北黑蜂、卡尼鄂拉蜂和乌克兰蜂是高度杂合的亚种 ,但东北黑蜂等位基因a、b、c的频率差异较小 ,卡尼鄂拉蜂和乌克兰蜂主要存在a、c两个等位基因 ,b出现频率很小 ;6亚种的基因型频率、基因频率和杂合纯合度都有极显著差异。这些差异将从遗传和生化角度为西方蜜蜂 6个亚种的鉴别提供依据。 展开更多

关键词 西方密蜂 苹果酸脱氢酶Ⅱ基因 遗传差异 亚种

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大豆苹果酸脱氢酶基因的电子克隆与生物信息学分析 被引量：3

5

作者 李文爽 刘渊 +2 位作者 常文锁 刘梦星 李喜焕 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2012年第3期23-28,共6页

利用电子克隆技术获得大豆中的苹果酸脱氢酶基因cDNA序列,并对基因及其编码蛋白进行生物信息学分析和预测,为进一步克隆该基因、解决植物磷高效基因数量缺乏等问题提供依据。结果表明,大豆中的苹果酸脱氢酶基因(GmMDH1)cDNA序列长度为1 ... 利用电子克隆技术获得大豆中的苹果酸脱氢酶基因cDNA序列,并对基因及其编码蛋白进行生物信息学分析和预测,为进一步克隆该基因、解决植物磷高效基因数量缺乏等问题提供依据。结果表明,大豆中的苹果酸脱氢酶基因(GmMDH1)cDNA序列长度为1 574 bp,开放阅读框1 230 bp,编码409个氨基酸残基;编码蛋白含有NAD bindingsite,Dimerization interface,Substrate binding site,MDH_glyoxysomal_mitochondrial结合位点和保守域,属于LDH_MDH_like Superfamily家族;亚细胞定位分析显示,编码蛋白位于植物细胞的叶绿体中。 展开更多

关键词 磷高效基因 大豆 苹果酸脱氢酶 电子克隆

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猪带绦虫苹果酸脱氢酶基因的克隆表达及免疫学分析 被引量：2

6

作者 江楠 席晓兰 +3 位作者 王杰 戴佳琳 廖兴江 黄江 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期423-426,共4页

目的对猪带绦虫苹果酸脱氢酶基因(malate dehydrogenase,MDH)进行克隆,表达及免疫学特性的初步研究。方法将猪带绦虫MDH基因克隆到原核表达质粒pET-28a(+)中,在大肠埃希菌BL21/DE3中用异丙基--βD-半乳糖苷(IPTG)诱导表达,表达产物通过... 目的对猪带绦虫苹果酸脱氢酶基因(malate dehydrogenase,MDH)进行克隆,表达及免疫学特性的初步研究。方法将猪带绦虫MDH基因克隆到原核表达质粒pET-28a(+)中,在大肠埃希菌BL21/DE3中用异丙基--βD-半乳糖苷(IPTG)诱导表达,表达产物通过十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)进行鉴定,用镍离子金属螯合剂亲和层析柱进行纯化,纯化的重组蛋白用蛋白印迹(Western Blot)进行免疫学分析。结果成功构建pET-28a(+)-MDH重组质粒,并获得高纯度蛋白,该重组蛋白可被其免疫SD大鼠血清识别,同时也能被感染猪带绦虫的病人及猪、感染牛带绦虫病人及感染亚带绦虫病人血清所识别。结论猪带绦虫苹果酸脱氢酶基因可在原核表达系统中获得具有免疫学活性的高效表达,为进一步研究该蛋白的功能奠定了基础。 展开更多

关键词 猪带绦虫 苹果酸脱氢酶基因 基因克隆 原核表达

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意蜂苹果酸脱氢酶同工酶的电泳表型和基因型 被引量：11

7

作者 李举怀 李绍文 《北京大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 1990年第2期237-242,共6页

用聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳测定了意蜂不同级别和不同发育阶段的苹果酸脱氢酶(MDH)同工酶。意蜂的MDH有3个区带,其中MDHⅡ由3个等位基因编码,雌性峰是双倍体,有6种电泳表型,纯合子和杂合子各3种。雄性蜂是单倍体,有3种电泳表型。雌... 用聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳测定了意蜂不同级别和不同发育阶段的苹果酸脱氢酶(MDH)同工酶。意蜂的MDH有3个区带,其中MDHⅡ由3个等位基因编码,雌性峰是双倍体,有6种电泳表型,纯合子和杂合子各3种。雄性蜂是单倍体,有3种电泳表型。雌蜂和雄雌的幼虫与其成虫的酶谱相同。蛹期有1～2条附加带,卵期测不出MDHⅡ的活性。 展开更多

关键词 意蜂 苹果酸脱氢酶 同功酶 基因型

全文增补中

殊异韦荣菌苹果酸脱氢酶的基因克隆及其重组蛋白的表达和活性测定

8

作者 刘晓红 何钟勤 +3 位作者 孙晓宇 高心 薛莹 李倪娜 《口腔医学研究》 CAS CSCD 2013年第11期1008-1011,1015,共5页

目的:对殊异韦荣菌(V·dispar)苹果酸脱氢酶(malate dehydrogenase,MDH)基因进行克隆和重组表达,并对其重组蛋白进行纯化和活性测定。方法:提取殊异韦荣菌基因组DNA,PCR扩增MDH同源区序列片段,克隆入pET-28a载体并转化至大肠杆菌DH5... 目的:对殊异韦荣菌(V·dispar)苹果酸脱氢酶(malate dehydrogenase,MDH)基因进行克隆和重组表达,并对其重组蛋白进行纯化和活性测定。方法:提取殊异韦荣菌基因组DNA,PCR扩增MDH同源区序列片段,克隆入pET-28a载体并转化至大肠杆菌DH5α,酶切及PCR鉴定,测序。将重组质粒转入BL21(DE3)中,选择最佳表达条件,提纯及测定活性。结果:PCR扩增产物特异,全长1139bp。测序结果包含MDH基因,并与GenBank中所报道的大肠杆菌MDH基因序列进行对比分析,其同源性为99%。MDH纯化后的蛋白活性值为0.4403U/mL。结论:成功克隆殊异韦荣菌MDH基因,并通过基因序列和氨基酸分析证明其具有完整的阅读框架。还获得了重组表达MDH蛋白的最适表达条件,并测出韦荣菌苹果酸脱氢酶的活性。 展开更多

关键词 韦荣菌 苹果酸脱氢酶 基因克隆 重组表达 活性测定

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胶质瘤异柠檬酸脱氢酶基因型与影像学研究进展 被引量：7

9

作者 蒋健 张学凌 周俊林 《磁共振成像》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期103-106,共4页

异柠檬酸脱氢酶(isocitrate dehydrogenase,IDH)是胶质瘤基因诊断的重要内容之一,也是影响胶质瘤患者治疗及预后的关键因素之一。MR成像、多模态成像及影像组学的多种影像征象及组学特征与IDH基因表型相关。作者就胶质瘤IDH基因型与影... 异柠檬酸脱氢酶(isocitrate dehydrogenase,IDH)是胶质瘤基因诊断的重要内容之一,也是影响胶质瘤患者治疗及预后的关键因素之一。MR成像、多模态成像及影像组学的多种影像征象及组学特征与IDH基因表型相关。作者就胶质瘤IDH基因型与影像学研究进展予以综述。 展开更多

关键词 异柠檬酸脱氢酶基因型 胶质瘤 功能磁共振成像 多模态成像 影像组学

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白菜型油菜八氢番茄红素脱氢酶基因PDS3的克隆与序列分析 被引量：3

10

作者 薛蕾 闫贵欣 +3 位作者 伍晓明 高桂珍 陈碧云 许鲲 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期622-627,共6页

利用电子克隆技术,从数据库中找到与拟南芥高度同源的油菜EST序列,继而通过RT-PCR和RACE等方法,成功克隆了白菜型油菜八氢番茄红素脱氢酶(类胡萝卜素合成途径中的一个关键限速酶)基因PDS3的cDNA,命名为BrPDS3(GenBank登记号GQ200741)。c... 利用电子克隆技术,从数据库中找到与拟南芥高度同源的油菜EST序列,继而通过RT-PCR和RACE等方法,成功克隆了白菜型油菜八氢番茄红素脱氢酶(类胡萝卜素合成途径中的一个关键限速酶)基因PDS3的cDNA,命名为BrPDS3(GenBank登记号GQ200741)。cDNA序列全长1 940bp,其中包含114bp的5'前导序列和134bp的3'不翻译序列,编码区长度为1 692bp,编码63kD的蛋白。序列分析表明,BrPDS3蛋白与其他植物的PDS蛋白具有较高相似性;在系统进化树中,BrPDS3与甘蓝亲缘关系最近。根据全长cDNA序列设计引物,从白菜型油菜青油13号DNA中克隆得到BrPDS3基因的全长DNA,长度为3 911bp,ORF(开放阅读框)1 692bp,含有15个外显子和14个内含子。 展开更多

关键词 白菜型油菜 类胡萝卜素 八氢番茄红素脱氢酶基因BrPDS3

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11β-羟化类固醇脱氢酶1型基因微卫星多态性与肥胖的相关性研究 被引量：3

11

作者 游娜 王继荣 +2 位作者 张鹏 鲁一兵 缪珩 《医学研究生学报》 CAS 2007年第10期1047-1050,I0005,共5页

目的:探讨中国南京汉族人群中11β-羟化类固醇脱氢酶1型基因多态性与肥胖是否存在相关性。方法:选择11β-羟化类固醇脱氢酶1型基因附近高杂合度微卫星DNA多态标记,应用聚合酶链反应及变性聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,探查这一微卫星多态在... 目的:探讨中国南京汉族人群中11β-羟化类固醇脱氢酶1型基因多态性与肥胖是否存在相关性。方法:选择11β-羟化类固醇脱氢酶1型基因附近高杂合度微卫星DNA多态标记,应用聚合酶链反应及变性聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,探查这一微卫星多态在中国南京汉族人群156例(对照组)与128例肥胖症患者(肥胖组)中的基因频率分布差异。结果:该多态位点存在8种等位基因,CA重复序列分别重复13、14、15、16、17、18、19和20次,病例-对照群体分析结果表明,两组间等位基因频率总体分布差异无统计学意义(χ2=7.583,P=0.361)。但CA18等位基因肥胖组频率高于对照组,差异有统计学意义(χ2=5.371,P=0.020),可初步认为CA18等位基因与肥胖发生有关。结论:南京地区汉族人群中11β-羟化类固醇脱氢酶1型基因多态性可能与肥胖有一定关系。 展开更多

关键词 肥胖 11β-羟化类固醇脱氢酶1型基因 微卫星DNA多态性

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11β-类固醇脱氢酶Ⅰ型基因微卫星多态性与2型糖尿病的相关性研究 被引量：2

12

作者 王继荣 李慧敏 +3 位作者 张鹏 鲁一兵 蒋秀琴 缪珩 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第11期1038-1042,共5页

目的:探讨南京地区汉族人群中11β-类固醇脱氢酶Ⅰ型基因多态性与2型糖尿病的相关性。方法:选择11β-类固醇脱氢酶Ⅰ型基因内含子4内高杂合度微卫星DNA多态标记,应用聚合酶链反应及变性聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,探讨这一微卫星多态在中... 目的:探讨南京地区汉族人群中11β-类固醇脱氢酶Ⅰ型基因多态性与2型糖尿病的相关性。方法:选择11β-类固醇脱氢酶Ⅰ型基因内含子4内高杂合度微卫星DNA多态标记,应用聚合酶链反应及变性聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,探讨这一微卫星多态在中国南京汉族人群121例正常健康者和150例2型糖尿病患者之间等位基因频率分布差异。结果:该多态位点存在8种等位基因,CA重复序列分别重复13、14、15、16、17、18、19和20次,病例-对照群体分析结果表明,两组间等位基因频率总体分布差异无显著性(χ2=8.9944,Ρ=0.253)。但(CA)15等位基因糖尿病组频率高于正常组,有统计学意义(χ2=4.990,P=0.025),可以初步认为(CA)15等位基因可能是糖尿病发生的危险因素。结论:南京地区汉族人群中11β-类固醇脱氢酶Ⅰ型基因多态性可能与2型糖尿病有一定关系。 展开更多

关键词 2型糖尿病 11β-类固醇脱氢酶Ⅰ型基因 微卫星DNA多态性

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莫桑比克罗非鱼(三种基因型)血清中乳酸脱氢酶、酯酶同工酶和血清蛋白的电泳分析 被引量：4

13

作者 齐彩霞 万松良 魏于生 《淡水渔业》 1987年第5期15-17,共3页

本文报道了莫桑比克罗非鱼的xy型雄鱼,xx型雌鱼和yy型超雄鱼血清中乳酸脱氢酶,酯酶同工酶和血清蛋白等生化指标的异同情况。

关键词 罗非鱼 酯酶同工酶 电泳分析 基因型 雌鱼 雄鱼 莫桑比克 乳酸脱氢酶 血清蛋白 生化指标

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桃Ⅱ型NADH脱氢酶家族基因鉴定和表达分析

14

作者 张春华 沈志军 +4 位作者 马瑞娟 张圆圆 郭绍雷 蔡志翔 俞明亮 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2022年第4期1049-1061,共13页

Ⅱ型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶(TypeⅡNADH dehydrogenase)在所有已全基因组测序的植物中均存在,具有多种功能,尤其在大多数植物呼吸链中起重要作用。本研究对桃Ⅱ型NADH脱氢酶家族基因进行了鉴定,确定了桃Ⅱ型NADH脱氢酶基因家族成... Ⅱ型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶(TypeⅡNADH dehydrogenase)在所有已全基因组测序的植物中均存在,具有多种功能,尤其在大多数植物呼吸链中起重要作用。本研究对桃Ⅱ型NADH脱氢酶家族基因进行了鉴定,确定了桃Ⅱ型NADH脱氢酶基因家族成员数目、亚家族分类,并分别进行了克隆,同时分析了它的进化关系、在基因组骨架上分布、启动子区域、基因结构、不同组织表达水平及其编码的蛋白质结构。结果显示,桃Ⅱ型NADH脱氢酶基因家族共有6个成员,分布在3~6号染色体上,被分为3个亚家族:NDA、NDB、NDC。桃Ⅱ型NADH脱氢酶家族成员,脂肪族氨基酸指数范围是80.63~95.75,等电点预测结果表明Prupe.3G231400.1和Prupe.5G076700.1是酸性蛋白质,其余4个是碱性蛋白质;NDA和NDC亚家族成员二级结构均以无规则卷曲为主要构成元件,NDB亚家族成员二级结构均以α-螺旋为主要构成元件。Ⅱ型NADH脱氢酶家族基因在桃不同组织中的表达水平差异较大,5个基因在老叶中表达量相对较高,在成熟果肉中表达量低。这些结果为下一步进行Ⅱ型NADH脱氢酶基因功能验证奠定了重要基础。 展开更多

关键词 桃 Ⅱ型NADH脱氢酶 基因家族 基因表达

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山梨醇脱氢酶基因多态性与2型糖尿病视网膜病变相关性的研究

15

作者 郭海科 刘清洋 +2 位作者 孟倩丽 张良 方梦圆 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期418-421,共4页

背景国外研究表明，多元醇通路在2型糖尿病血管并发症中具有重要的作用，山梨醇脱氢酶（SDH）基因作为该通路的限速酶之一参与糖尿病视网膜病变（DR）的发生，但国内尚未见相关的研究。目的探讨SDHG-888C基因多态性同2型DR的关系。方法... 背景国外研究表明，多元醇通路在2型糖尿病血管并发症中具有重要的作用，山梨醇脱氢酶（SDH）基因作为该通路的限速酶之一参与糖尿病视网膜病变（DR）的发生，但国内尚未见相关的研究。目的探讨SDHG-888C基因多态性同2型DR的关系。方法运用聚合酶链反应一限制性片段长度多态性技术检测187例2型糖尿病患者的基因型，其中DR患者118例，无明显DR组69例、健康对照组123例，比较各组的基因型和等位基因的频率。结果DR组与无DR组间的临床特征比较显示，DR组糖尿病病程明显长于无DR组，差异有统计学意义（t=2．070，P=0．042），2组间其他基线特征的差异无统计学意义（P〉0．05）。DR组、无DR组和对照组GG基因型频率分别为24．6％、8．7％和8．1％，G等位基因频率分别为42．4％、25．4％和29．7％，DR组GG基因型和G等位基因频率显著高于无DR组和对照组，差异均有统计学意义（GG：P=0．007，P=0．001；G：P=0．001，P=0．004），无DR组与对照组的各基因型和等位基因频率比较差异均无统计学意义（P〉0．05）；增生型DR与无DR组间各基因型和等位基因频率比较差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论SDHG-888C基因多态性可能与中国南方人群2型DR的发生具有一定的相关性。 展开更多

关键词 山梨醇脱氢酶基因 基因多态性 2型糖尿病 视网膜病变

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上海地区葡萄糖-6-磷酸脱氢酶基因突变分析 被引量：1

16

作者 张德太 樊绮诗 杨伟宗 《医学研究生学报》 CAS 2002年第4期298-300,共3页

目的 :了解上海地区葡萄糖 6 磷酸脱氢酶 (G6PD)缺乏的基因突变型及其主要临床表现。　方法 :观察 45例上海地区G6PD缺乏患者的主要临床表现 ,测定红细胞G6PD活性并用PCR 限制性内切酶酶解分析法进行G6PD基因突变分析。　结果 :共发... 目的 :了解上海地区葡萄糖 6 磷酸脱氢酶 (G6PD)缺乏的基因突变型及其主要临床表现。　方法 :观察 45例上海地区G6PD缺乏患者的主要临床表现 ,测定红细胞G6PD活性并用PCR 限制性内切酶酶解分析法进行G6PD基因突变分析。　结果 :共发现了五种基因突变型 ,分别是cDNA1376G→T(31.2 % )、cDNA1388G→A(2 8.9% )、cD NA95A→G (2 0 .0 % )、cDNA10 2 4C→T(4 .4% )和cDNA493A→G(6 .6 % )。　结论 :上海地区常见的三种G6PD基因型 (cDNA1376G→T ,cDNA1388G→A和cDNA95A→G)占 80 .1% ,酶活性均低于正常人的 10 % ,临床表现以蚕豆病。 展开更多

关键词 上海 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏 基因突变型 聚合酶链反应 临床表现

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黏类小麦细胞质雄性不育相关基因cMDH的克隆与表达分析 被引量：19

17

作者 张龙雨 李红霞 +5 位作者 张改生 王俊生 韩艳芬 袁正杰 牛娜 马守才 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期1620-1627,共8页

为深入研究黏类小麦雄性不育的分子遗传机制,利用抑制差减杂交技术构建了黏类小麦育性相关基因的二核期SSH文库。经文库筛选后,得到一个在可育文库中表达的与胞质苹果酸脱氢酶基因同源的EST序列。以该EST序列为信息探针,经电子克隆、RT-... 为深入研究黏类小麦雄性不育的分子遗传机制,利用抑制差减杂交技术构建了黏类小麦育性相关基因的二核期SSH文库。经文库筛选后,得到一个在可育文库中表达的与胞质苹果酸脱氢酶基因同源的EST序列。以该EST序列为信息探针,经电子克隆、RT-PCR、PCR克隆与序列分析,获得了小麦胞质苹果酸脱氢酶(cytosolic malate de-hydrogenases,cMDH)基因的cDNA与DNA序列,利用荧光定量PCR技术对该基因在不育株和可育株花药中的表达进行了分析,并比较了MDH在小麦不育株和可育株中的活性变化。结果表明,该基因的cDNA序列长1213bp,编码333个氨基酸;DNA序列长2908bp,含有7个外显子和6个内含子;该基因在不育株和可育株花药发育3个时期(单核、二核和三核)的表达均表现为先升后降的模式,而且该基因在不育株花药发育的二核期和三核期的表达相对于可育株被明显抑制;MDH在小麦不育株和可育株中的活性变化趋势与定量结果一致。推测该基因在花粉发育早期表达,它的下调表达可能影响了小麦雄蕊发育过程中的能量供应而导致雄性不育。 展开更多

关键词 小麦 胞质苹果酸脱氢酶基因 克隆 荧光定量PCR

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辣椒细胞质雄性不育系的3种同工酶分析 被引量：6

18

作者 戴亮芳 罗向东 +1 位作者 王述彬 陈劲枫 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期1772-1776,共5页

以辣椒细胞质雄性不育系21A及其同核异质保持系21B为试验材料,比较分析两系雄配子发育过程中酯酶(EST)、谷氨酸脱氢酶(GDH)和苹果酸脱氢酶(MDH)同工酶的表达特征.结果表明:幼叶和花蕾的EST同工酶酶谱在谱带数目和酶带强弱上存在时空表... 以辣椒细胞质雄性不育系21A及其同核异质保持系21B为试验材料,比较分析两系雄配子发育过程中酯酶(EST)、谷氨酸脱氢酶(GDH)和苹果酸脱氢酶(MDH)同工酶的表达特征.结果表明:幼叶和花蕾的EST同工酶酶谱在谱带数目和酶带强弱上存在时空表达差异,并且随着雄配子发育的进行,保持系21B从中花蕾至特大花蕾比不育系21A多1条清晰的谱带(EST3e),其差异表达发生在细胞学上观察到的败育时期之前;在GDH同工酶中,保持系21B从大花蕾至特大花蕾比不育系多6条谱带(GDH1和GDH1/2),酶谱差异表达时期与细胞学上观察到的败育时期一致;而在MDH同工酶中,不育系21A和保持系21B的幼叶和各级花蕾的酶谱在谱带数目和谱带强弱上均没有明显差异. 展开更多

关键词 辣椒细胞质雄性不育 酯酶(EST) 谷氨酸脱氢酶(GDH) 苹果酸脱氢酶(MDH)

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Cu,Zn和Cd对5种单细胞藻的酶基因表达调控的研究 被引量：3

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作者 苏秀榕 费志清 +1 位作者 裴鲁青 PaulK.Chien 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期50-54,共5页

报道了在Cu2 +、Cd2 +和Zn2 +的毒害作用下 ,三角褐指藻 (PhaeodactylumtricornutumBohlin) ,湛江叉鞭藻 (IsochrysiszhanjiangensisHu &Lui) ,绿色巴夫藻 (PaviovaviridisTsengChenetZhang) ,青岛大扁藻 (Platymonashelgolandicava... 报道了在Cu2 +、Cd2 +和Zn2 +的毒害作用下 ,三角褐指藻 (PhaeodactylumtricornutumBohlin) ,湛江叉鞭藻 (IsochrysiszhanjiangensisHu &Lui) ,绿色巴夫藻 (PaviovaviridisTsengChenetZhang) ,青岛大扁藻 (Platymonashelgolandicavar.TsingtaoensisTsengetT.J.Chang) ,小球藻(Chlorellasp.)等单细胞藻的苹果酸脱氢酶发生了明显的变化。其中 ,不同种类重金属离子对该酶的基因表达作用不同 ,即使是同种离子但浓度不同 ,这种作用也不同。一般情况下高离子浓度抑制了酶基因的表达。低离子浓度促进了表达。但也有例外 ,如Cd2 +(24.53μg/ml)、Zn2 +(24.31,16.21μg/ml)促进三角褐指藻MDH 1座位等位基因的表达量 ;Cd2 +(24.53,12.26μg/ml)促进小球藻MDH 1座位等位基因的表达量。由此可推出 ,重金属离子可以干扰等位基因的表达 。 展开更多

关键词 无机离子 单细胞藻类 苹果酸脱氢酶 基因表达 调控

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中国两性生殖卤虫种群MDH同工酶基因的表达 被引量：3

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作者 侯林 邹向阳 蔡含筠 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 1998年第3期19-22,共4页

采用聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳法对中国两性生殖卤虫１２个品系的苹果酸脱氢酶（ＭＤＨ）同工酶基因的表达进行了研究。实验结果表明：（１）由于一些ＭＤＨ同工酶基因所编码产生的亚基相互结合的频率较低，故没有得到理论上应得到的基... 采用聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳法对中国两性生殖卤虫１２个品系的苹果酸脱氢酶（ＭＤＨ）同工酶基因的表达进行了研究。实验结果表明：（１）由于一些ＭＤＨ同工酶基因所编码产生的亚基相互结合的频率较低，故没有得到理论上应得到的基因型数；（２）存在品系内和品系间的多态现象；（３）Ａ．ｓｉｎｉｃａ与Ａ．ｐａｒｔｈｅｎｏｇｅｎｅｔｉｃａ之间存在高度的遗传变异和分化，另外，二者间具有相同的基因型和较高的遗传相似系数值也说明二者间存在一定的亲缘关系。 展开更多

关键词 中国 两性生殖 卤虫品系 苹果酸脱氢酶 基因表达

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