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红细胞裂解法及不同培养条件对兔骨髓间充质干细胞体外增殖的影响 被引量:5
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作者 吕婧玉 和小娥 +3 位作者 张志平 许晓婷 冯建昆 王新庄 《江西农业学报》 CAS 2012年第11期132-135,共4页
研究采用红细胞裂解液法从兔骨髓中分离BMSCs,相差显微镜观察其形态,四甲基偶氮唑盐法(MTT法)筛选基础培养液和血清浓度,绘制生长曲线,用流式细胞仪检测细胞周期,免疫细胞化学鉴定表面抗原。分离的细胞在形态学观察与生长动力学上均符合... 研究采用红细胞裂解液法从兔骨髓中分离BMSCs,相差显微镜观察其形态,四甲基偶氮唑盐法(MTT法)筛选基础培养液和血清浓度,绘制生长曲线,用流式细胞仪检测细胞周期,免疫细胞化学鉴定表面抗原。分离的细胞在形态学观察与生长动力学上均符合BMSCs特征;在实验范围内DMEM/F12+20%FBS是体外培养兔BMSCs的最佳体系;细胞周期结果显示,BMSCs平均82%处于G0/G1期,18%处于S+G2期;免疫细胞化学结果显示所分离的BMSCsCD90、CD44阳性表达,CD34阴性表达。本研究结果表明,通过红细胞裂解液法分离的兔BMSCs,其具有体外增殖和多向分化的潜能,可以作为组织工程的种子细胞。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 分离培养 细胞裂解法
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细胞裂解法对植入前诊断中聚合酶链反应扩增效率的影响 被引量:1
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作者 李崎 马燕琳 +3 位作者 潘乾 夏家辉 戴和平 夏昆 《湖南医科大学学报》 CSCD 北大核心 2002年第3期201-203,共3页
目的 :探讨优化细胞裂解条件 ,提高植入前诊断中聚合酶链反应的扩增效率。方法 :吸取单个淋巴细胞或人胚胎单卵裂球 ,用碱裂解液、蛋白酶K裂解液和改良的蛋白酶K裂解液进行处理 ,随后以巢式 -聚合酶链反应扩增人肾上腺脑白质营养不良基... 目的 :探讨优化细胞裂解条件 ,提高植入前诊断中聚合酶链反应的扩增效率。方法 :吸取单个淋巴细胞或人胚胎单卵裂球 ,用碱裂解液、蛋白酶K裂解液和改良的蛋白酶K裂解液进行处理 ,随后以巢式 -聚合酶链反应扩增人肾上腺脑白质营养不良基因 (ALD基因 )的 3号外显子 ,比较其扩增效率。结果 :三种裂解液组对人淋巴细胞的扩增效率分别为 90 % ,74 % ,87% ,对人单卵裂球的扩增效率分别为 98% ,77% ,96 %。结论 :在植入前诊断中 。 展开更多
关键词 细胞裂解法 植入前诊断 聚合酶链反应 扩增效率 影响
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一种适用于流式细胞术的简便红细胞裂解法 被引量:1
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作者 汪志文 王华 周学武 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第12期1211-1213,共3页
目的 探讨一种简便、快捷的红细胞列解法 ,以适宜应用流式细胞仪对白细胞亚群进行检测和分选。方法 采用常规试剂配置不同浓度应用液 ,按步骤完成红细胞裂解过程 ,上机检测。同时采用密度梯度离心法提取单核细胞和粒细胞 ,比较两者上... 目的 探讨一种简便、快捷的红细胞列解法 ,以适宜应用流式细胞仪对白细胞亚群进行检测和分选。方法 采用常规试剂配置不同浓度应用液 ,按步骤完成红细胞裂解过程 ,上机检测。同时采用密度梯度离心法提取单核细胞和粒细胞 ,比较两者上机检测的结果。结果 在流式细胞仪检测的细胞点图上 ,可见采用红细胞裂解法处理的标本白细胞成簇分布 ,淋巴细胞、单核细胞、粒细胞群清晰可辩 ,通过测定各群细胞上标记的特异性荧光 ,可进一步分离出淋巴、单核和粒细胞的亚群 ,细胞纯化程度高。采用密度梯度离心法纯化的粒细胞或单核细胞 ,在细胞点图上可见细胞散在分布 ,不成群 ,纯化程度低。其原因可能是该方法中长时间离心、改变血液渗透压、反复离心洗涤等步骤影响了白细胞的形态结构有关。结论 本实验介绍的红细胞裂解法满足了白细胞流式细胞仪检测分选要求 ,价格低廉 ,是一种简便快捷。 展开更多
关键词 细胞裂解法 流式细胞 细胞亚群
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细胞裂解法和磁珠法在法医DNA检验中的对比 被引量:2
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作者 施嘉骏 吴丹 +4 位作者 刘铁柱 郝思静 孟必成 李士林 刘亚楠 《法医学杂志》 CAS CSCD 2023年第1期45-49,共5页
目的比较细胞裂解法和磁珠法在法医DNA检验中的效果,探讨两种方法在法医学检验中的运用。方法使用细胞裂解法和磁珠法获取不同数量的THP-1细胞的基因组DNA并使用实时定量PCR检测DNA含量。使用细胞裂解法和磁珠法对不同稀释倍数的人血进... 目的比较细胞裂解法和磁珠法在法医DNA检验中的效果,探讨两种方法在法医学检验中的运用。方法使用细胞裂解法和磁珠法获取不同数量的THP-1细胞的基因组DNA并使用实时定量PCR检测DNA含量。使用细胞裂解法和磁珠法对不同稀释倍数的人血进行STR分型检测。结果当THP-1细胞数量为100、400和800个时,使用细胞裂解法提取的DNA含量分别为(1.219±0.334)、(5.081±0.335)、(9.332±0.318)ng;使用磁珠法提取的DNA含量分别为(1.020±0.281)、(3.634±0.482)、(7.896±0.759)ng,在THP-1细胞数量为400和800个时,细胞裂解法提取的DNA含量高于磁珠法(P<0.05)。使用细胞裂解法和磁珠法检测不同稀释倍数人血的STR分型时灵敏度相近,在血样稀释100、300和500倍时均能获取完整的STR分型,血样稀释700倍时,均无法检出完整STR分型。使用细胞裂解法无法检出未稀释人血的STR分型。结论细胞裂解法操作方便,能最大程度保留模板DNA,有望适用于微量血痕检验。 展开更多
关键词 法医遗传学 细胞裂解法 磁珠法 短串联重复序列 THP-1细胞
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