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弥漫大B细胞淋巴瘤中存在巨噬细胞表型的肿瘤细胞并具有临床意义
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作者 李慧卉 张亮 +2 位作者 许周毅 王伟 王哲 《临床与实验病理学杂志》 北大核心 2025年第2期162-170,共9页
目的探究弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B-cell lymphoma,DLBCL)组织中具有巨噬细胞表型肿瘤细胞的存在、比例、临床意义和来源,探究能否在体外DLBCL细胞系中诱导CD68^(+)阳性肿瘤细胞。方法首先通过多重免疫荧光染色定性技术检测DL... 目的探究弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B-cell lymphoma,DLBCL)组织中具有巨噬细胞表型肿瘤细胞的存在、比例、临床意义和来源,探究能否在体外DLBCL细胞系中诱导CD68^(+)阳性肿瘤细胞。方法首先通过多重免疫荧光染色定性技术检测DLBCL样本中CD68^(+)CD163^(+)CD20^(+)PAX5^(-)细胞的存在,并检测CD79a^(+)B淋巴细胞、CD68^(+)巨噬细胞以及CD68^(+)CD79a^(+)双阳性细胞的比例。根据双阳性细胞的比例进行分组,探究CD68^(+)B淋巴细胞比例对DLBCL患者预后以及临床病理特征的影响。对具有BCL6基因断裂阳性的病例,使用免疫荧光与免疫原位杂交联合技术进行CD68与BCL6基因断裂共定位,判断具有巨噬细胞表型的B淋巴细胞的肿瘤性质。使用佛波酯(phorbol myristate acetate,PMA)处理DLBCL细胞系(OCI-LY3、SU-DHL2)诱导CD68^(+)肿瘤细胞,通过流式细胞术检测CD68、PAX5蛋白水平变化。采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)技术检测B细胞分化发育的重要转录因子PAX5及巨噬细胞相关基因(CD68、ARG1、CD163、CD206、Dectin-1、PU.1、C/EBPα、C/EBPβ)mRNA水平变化。此外,将PMA处理后的DLBCL细胞系(OCI-LY3、SU-DHL2)与pH敏感性荧光染料pHrodo共同孵育,以检测PMA处理后DLBCL细胞的吞噬能力。结果50例DLBCL中CD68^(+)B淋巴细胞比例为0~9.3%,总生存期0.0082~4.2年,CD68^(+)B淋巴细胞低表达组患者的总生存期显著低于CD68^(+)B淋巴细胞高表达组(P=0.039)。CD68^(+)B淋巴细胞比例不同分组间DLBCL的分子分型差异有统计学意义(P=0.0095)。DLBCL中CD68^(+)B淋巴细胞来源于肿瘤细胞。使用PMA处理DLBCL细胞后CD68^(+)细胞和CD68^(+)PAX5^(-)细胞比例显著上升(P<0.05)、其他巨噬细胞标志物CD68、ARG1、CD163、CD206、Dectin-1、PU.1、C/EBPα、C/EBPβ以及PAX5 mRNA相对表达量与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。PMA处理DLBCL细胞后细胞吞噬能力增强。结论DLBCL组织中存在一定比例的CD68^(+)B淋巴细胞。CD68^(+)B淋巴细胞比例与患者预后、分子分型相关。体外可以诱导DLBCL细胞系分化为CD68^(+)肿瘤细胞。 展开更多
关键词 弥漫大B细胞淋巴瘤 巨噬细胞表型B细胞 免疫荧光
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电针干预MCAO大鼠脑动脉平滑肌细胞表型转化机制研究
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作者 韩佳炜 杨继维 +3 位作者 殷秀梅 陈林玲 贾蓝羽 杜元灏 《辽宁中医杂志》 北大核心 2025年第10期171-178,I0003-I0005,共11页
目的 本研究以大脑中动脉血管平滑肌细胞表型稳态及转化特征为切入点,观察脑梗死急性期血管平滑肌细胞表型标志性蛋白和表型转化调节因子的表达变化及电针干预效应,以深入探讨脑梗死急性期血管舒缩运动机能障碍的分子机制。方法 健康雄... 目的 本研究以大脑中动脉血管平滑肌细胞表型稳态及转化特征为切入点,观察脑梗死急性期血管平滑肌细胞表型标志性蛋白和表型转化调节因子的表达变化及电针干预效应,以深入探讨脑梗死急性期血管舒缩运动机能障碍的分子机制。方法 健康雄性Wistar大鼠90只(30只用于电镜观察,30只用于免疫组化检测,30只用于ELISA检测)随机分为4组:空白组(n=9)、假手术组(n=9)、模型组(n=36)、电针组(n=36)。动物模型建立后,将模型组和电针组在术后3 h、6 h、24 h、72 h随机分为4个亚组,每组9只大鼠。采用Longa腔内线栓法建立永久性大脑中动脉闭塞大鼠模型,电针组予2 Hz/15 Hz,2 mA电针持续刺激“人中穴”20 min,其中3 h、6 h、24 h组仅在造模后即刻针刺1次,而72 h则每日针刺1次,其余组别在对应时间点给予抓取固定。采用NSS评分法对各组大鼠神经功能缺损情况进行评估;透射电镜观察MCAO大鼠血管平滑肌细胞形态学变化及电针干预效应;免疫组化法检测表型标志性蛋白α-SMA和OPN表达变化及电针干预效应;ELISA法检测表型转化调节因子PDGF-BB和TGF-β1表达变化及电针干预效应。结果 与模型组相比,电针组NSS评分在梗死后72 h明显降低(P<0.05);电镜下显示电针组呈收缩表型的血管平滑肌细胞较同时相模型组增加;免疫组化和ELISA结果表明电针组α-SMA阳性表达在梗死后6 h、24 h、72 h明显高于模型组(P<0.01);而OPN阳性表达和PDGF-BB表达在梗死后6 h、24 h、72 h明显低于模型组(P<0.05、P<0.01);电针组TGF-β1表达在梗死后24 h、72 h高于模型组(P<0.05)。结论 电针人中穴可通过影响表型转化调节因子表达,减少梗死后表型异常转化,在一定程度上维持血管平滑肌细胞的收缩表型,为脑梗死后代偿血流提供条件。 展开更多
关键词 脑梗死 电针 血管平滑肌细胞表型 表型转化调节因子 “人中”穴
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梅尼埃病与免疫细胞表型之间的关系:双向孟德尔随机化研究
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作者 任银先 肖芝 于亚峰 《中华耳科学杂志》 北大核心 2025年第5期637-642,共6页
目的通过孟德尔随机化(Mendelian randomization,MR),探索免疫细胞表型与梅尼埃病(Meniere's disease,MD)易感性之间的关系。方法利用在线的全基因组关联研究(genome-wide association study,GWAS)数据库中的731种免疫表型和MD的GWA... 目的通过孟德尔随机化(Mendelian randomization,MR),探索免疫细胞表型与梅尼埃病(Meniere's disease,MD)易感性之间的关系。方法利用在线的全基因组关联研究(genome-wide association study,GWAS)数据库中的731种免疫表型和MD的GWAS数据进行两样本MR研究。逆方差加权为主要分析方法,与免疫表型相关的单核苷酸多态性作为暴露因素。使用敏感性分析校正来检验MR假设。此外,通过反向MR验证了免疫细胞表型和MD之间反向因果关系。结果共确定了33种免疫细胞表型与MD的因果关系,其中包含B细胞组11种、Treg组5种、TBNK组4种、成熟阶段的T细胞组7种、髓系细胞组2种和常规树突状细胞组4种。有20种表型对MD有潜在保护作用,其余13种表型则是危险因素。结论MR分析表明免疫细胞与MD密切相关,部分有保护作用,部分是危险因素。 展开更多
关键词 免疫细胞表型 孟德尔随机化研究 梅尼埃病
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GNE基因p.V543M纯合错义突变对细胞表型的影响及其机制
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作者 吴若兰 李慧龙 +3 位作者 吴娉芸 杨琪 宛雪婷 吴苑 《中南大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第1期105-118,共14页
目的:UDP-N-乙酰葡糖胺-2-差向异构酶/N-乙酰甘露糖胺激酶(uridine diphospho-N-acetylglucosamine 2-epimerase/N-acetylmannosamine kinase,GNE)肌病是一种进行性神经退行性变性疾病,与GNE基因的纯合或复合杂合错义突变有关。本研究... 目的:UDP-N-乙酰葡糖胺-2-差向异构酶/N-乙酰甘露糖胺激酶(uridine diphospho-N-acetylglucosamine 2-epimerase/N-acetylmannosamine kinase,GNE)肌病是一种进行性神经退行性变性疾病,与GNE基因的纯合或复合杂合错义突变有关。本研究旨在探讨GNE p.V543M纯合错义突变对细胞表型的影响并进行相关机制探索。方法:基于人胚肾细胞株(human embryonic kidney 293 cell,HEK 293T)构建GNE基因野生型(WT-GNE组)和GNE p.V543M突变型(MUT-GNE组)的过表达模型。分别采用蛋白质印迹法和免疫荧光法检测GNE蛋白的表达水平和亚细胞定位。分别采用细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)法和结晶紫染色实验、CCK-8法、流式细胞术和Hoechst 33342/碘化丙啶(propidium iodide,PI)染色、四甲基罗丹明乙酯(tetramethylrhodamine ethyl ester,TMRE)染色,评估GNE p.V543M突变对细胞黏附、增殖、凋亡、线粒体膜电位的影响。检测唾液酸合成水平及GNE双功能酶活性。采用实时聚合酶链反应检测唾液酸合成相关酶的mRNA转录水平。结果:蛋白质印迹法结果表明过表达GNE的细胞模型建立成功。免疫荧光染色结果显示MUT-GNE组的GNE蛋白与golgin-97的共定位程度显著低于WT-GNE组(Pearson相关系数:0.65±0.08 vs 0.83±0.06,P<0.05)。与WT-GNE组相比,MUT-GNE组细胞黏附能力增强、细胞增殖能力及线粒体膜电位降低(均P<0.05)。2组细胞凋亡情况无明显差异。与WT-GNE组相比,MUT-GNE组唾液酸合成量减少,激酶活性显著降低,唾液酸生物合成相关酶的转录水平下调,差异均有统计学意义(均P<0.001)。结论:GNE p.V543M突变可通过降低GNE酶活性及唾液酸生物合成相关酶的mRNA转录水平,影响唾液酸的合成,导致细胞表型发生改变。 展开更多
关键词 GNE肌病 UDP-N-乙酰葡糖胺-2-差向异构酶/N-乙酰甘露糖胺激酶 p.V543M突变 唾液酸 细胞表型 线粒体
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脑梗死后血管平滑肌细胞表型转化机制研究进展
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作者 李泓涛 杜红根 +1 位作者 李晶 杜元灏 《辽宁中医杂志》 北大核心 2025年第10期210-214,共5页
目的 了解发生脑梗死后,脑血管VSMCs表型转化机制研究进展。方法 通过搜索近十年Pubmed、Web of science、中国知网(CNKI)、万方(Wangfan)、维普(VIP)等国内外数据库进行文献检索,将脑梗死VSMCs表型转化、针刺干预脑梗死文献进行纳入,... 目的 了解发生脑梗死后,脑血管VSMCs表型转化机制研究进展。方法 通过搜索近十年Pubmed、Web of science、中国知网(CNKI)、万方(Wangfan)、维普(VIP)等国内外数据库进行文献检索,将脑梗死VSMCs表型转化、针刺干预脑梗死文献进行纳入,通过导入文献管理软件进行手工筛选分类。结果 脑梗死后脑血管VSMCs发生了表型转化,在表型标志性蛋白、促表型转化因子、相关信号通路、非编码RNA研究均有涉及。结论 VSMCs的表型转化是一个多层次、多因子的调控效应所发挥的综合结果,优势通路和关键因子的筛选、不同通路和关键因子的协调配合对于明确VSMCs的表型转化仍然具有重要意义,其能够丰富发展“脑表面血管”学说,为临床治疗干预提供新的治疗思考和新的治疗靶点,为针刺干预脑梗死提供基础实验支持参考。 展开更多
关键词 脑梗死表型转化血管平滑肌细胞 研究进展
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淫羊藿苷对抑郁症模型小胶质细胞表型转化的调控作用 被引量:9
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作者 曹利华 高松 +5 位作者 王笑雨 王真真 贺红娟 李娜 白明 苗明三 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期187-195,共9页
探索淫羊藿苷抗抑郁的作用机制,将SPF级KM小鼠分为空白组、模型组、盐酸氟西汀组(10 mg/kg)、淫羊藿苷高(50 mg/kg)、低(25 mg/kg)剂量组。除空白组外,其余各组小鼠采用56 d慢性不可预知温和应激建立抑郁症模型。造模第1 d开始灌胃给予... 探索淫羊藿苷抗抑郁的作用机制,将SPF级KM小鼠分为空白组、模型组、盐酸氟西汀组(10 mg/kg)、淫羊藿苷高(50 mg/kg)、低(25 mg/kg)剂量组。除空白组外,其余各组小鼠采用56 d慢性不可预知温和应激建立抑郁症模型。造模第1 d开始灌胃给予各组小鼠相应药物,连续56 d。于给药后第53~56 d,进行行为学测试。末次给药后,取材。酶联免疫吸附剂实验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测脑组织匀浆白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素10(interleukin-10,IL-10)、五羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)、多巴胺(dopamine,DA)、去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)水平;实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,RT-PCR)检测脑组织中IL-6、IL-10、诱导性一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)、分化簇206(cluster of differentiation 206,CD206)mRNA表达;蛋白免疫印迹(Western blot)检测脑组织iNOS、CD206蛋白表达。体外培养小鼠小胶质细胞(BV-2),采用细胞增殖与毒性检测试剂盒(Cell Counting Kit-8,CCK-8)法检测淫羊藿苷的细胞毒性。BV-2细胞暴露于100μg/mL脂多糖及15μg/mL、25μg/mL的淫羊藿苷24 h后,收集细胞。免疫荧光技术检测细胞iNOS、CD206蛋白表达。研究结果表明,慢性不可预知温和应激致抑郁症模型制备成功,淫羊藿苷可降低抑郁症小鼠脑组织IL-6水平及IL-6、iNOS mRNA表达,升高脑组织IL-10、5-HT、DA、NE水平及IL-10、CD206 mRNA表达;降低脑组织iNOS蛋白,升高CD206蛋白表达;改善模型小鼠抑郁症样行为。淫羊藿苷可降低LPS刺激的BV-2细胞iNOS蛋白表达,升高CD206蛋白表达。结果表明,淫羊藿苷抑制小胶质细胞M1表型转化,促进M2表型转化,从而改善模型小鼠抑郁样行为。 展开更多
关键词 淫羊藿苷 抑郁症 小胶质细胞表型转化 细胞炎症模型
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益智对TREM2调控小胶质细胞表型转化的调节作用 被引量:1
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作者 彭景 杨云方 +3 位作者 张悦 吴博 贾英 颜廷旭 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期666-671,共6页
目的 研究益智对小胶质细胞表型转化的调节作用。方法 采用LPS诱导建立M1型小胶质细胞模型,通过检测M1和M2型小胶质细胞标记物表达,初步证实益智提取物可抑制LPS诱导的M1型小胶质细胞的过度活化并促进其向M2型的转化。TREM2-siRNA转染... 目的 研究益智对小胶质细胞表型转化的调节作用。方法 采用LPS诱导建立M1型小胶质细胞模型,通过检测M1和M2型小胶质细胞标记物表达,初步证实益智提取物可抑制LPS诱导的M1型小胶质细胞的过度活化并促进其向M2型的转化。TREM2-siRNA转染实验敲低BV2细胞中TREM2蛋白表达,通过RT-qPCR法检测M1、M2型细胞标志物的mRNA表达,免疫荧光和Western blot法进一步验证M1、M2型细胞标志物的表达以及PI3K/Akt信号通路相关蛋白表达。结果 与对照组比较,LPS处理的BV2细胞M2型标记物IL-10、Arg-1 mRNA与蛋白表达降低(P<0.01);与LPS组比较,益智组IL-10、Arg-1 mRNA表达与蛋白升高(P<0.01)。抑制TREM2蛋白表达后,与转染对照组比较,转染实验组BV2细胞IL-10、Arg-1 mRNA与蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01),TNF-α mRNA与蛋白表达升高(P<0.01)。在无转染TREM2中,给予益智提取物共培养后,PI3K、p-Akt/Akt蛋白表达升高(P<0.01),而在抑制TREM2蛋白表达后,PI3K、p-Akt/Akt蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01)。结论 益智可以通过TREM2受体蛋白激活PI3K/Akt信号通路,调节M1和M2型小胶质的表型转化,改善神经炎症。 展开更多
关键词 益智 小胶质细胞表型转化 TREM2 神经炎症
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大肠癌患者手术前后淋巴细胞表型CD8 CD28的表达及其临床意义 被引量:4
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作者 陈腾 施靖华 +2 位作者 赵荣华 李华宝 李莉 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期413-415,共3页
目的:探讨大肠癌患者外周血淋巴细胞(PBL)表型CD8、CD28变化及其临床意义。方法:应用CD8、CD28单克隆抗体,采用流式细胞术,对35例大肠癌患者PBL表型CD8、CD28进行测定。结果:肿瘤组淋巴细胞CD8的表达显著高于对照组(P<0.01);而CD28、... 目的:探讨大肠癌患者外周血淋巴细胞(PBL)表型CD8、CD28变化及其临床意义。方法:应用CD8、CD28单克隆抗体,采用流式细胞术,对35例大肠癌患者PBL表型CD8、CD28进行测定。结果:肿瘤组淋巴细胞CD8的表达显著高于对照组(P<0.01);而CD28、CD8+/CD28+的表达则低于对照组(P<0.01);DukesD期大肠癌组CD8+/CD28+的表达明显低于DukesB期组(P<0.05);淋巴结转移组CD28、CD8+/CD28+的表达低于无淋巴结转移组(P<0.01);浸润浆膜层组CD8的表达高于未浸润浆膜层组,而CD28,CD8+/CD28+的表达则低于未浸润浆膜层组(P<0.01,P<0.05)。结论:大肠癌患者淋巴细胞CD8、CD28的表达与肿瘤的生物学行为密切相关。观察淋巴细胞表型CD8、CD28变化,对大肠癌患者的免疫状态及预后监测具有一定的参考价值。 展开更多
关键词 大肠癌 淋巴细胞表型CD8 淋巴细胞表型CD28 流式细胞
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芪参益气滴丸联合间充质干细胞移植改善小鼠心功能与巨噬细胞表型的相关性研究 被引量:12
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作者 何贵新 秦伟彬 +5 位作者 林琳 刘鹏业 陈雅璐 任加以 陈天宇 吴凯 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2019年第7期1554-1557,I0007,I0008,共6页
目的:基于心肌梗死后巨噬细胞在损伤心肌修复过程中的主要效应及炎症影响干细胞的存活,探讨芪参益气滴丸是否可以影响巨噬细胞表型从而达到提高骨髓间充质干细胞的存活率、加强心肌细胞保护作用。方法:本研究采用eGFP+/-雄性实验小鼠,... 目的:基于心肌梗死后巨噬细胞在损伤心肌修复过程中的主要效应及炎症影响干细胞的存活,探讨芪参益气滴丸是否可以影响巨噬细胞表型从而达到提高骨髓间充质干细胞的存活率、加强心肌细胞保护作用。方法:本研究采用eGFP+/-雄性实验小鼠,将小鼠随机分为PBS组(MI+PBS)、干细胞移植芪参益气滴丸组(MI+MSCs+QSYQ)和干细胞组(MI+MSCs),每组20只实验小鼠。心肌梗死模型造模前2周干细胞移植芪参益气滴丸组开始予芪参益气滴丸溶液灌胃(3.9 mg/mL,无菌水溶解),而其他两组则予等量无菌水灌胃作为对照。将实验前期分离培养所获得小鼠骨髓间充质干细胞计数后PBS重悬备用,采取开胸结扎心脏前降支建立小鼠心肌梗死模型,建立心肌梗死模型后运用30G进样针抽取20μL干细胞悬液,在心肌小鼠模型梗死区取4个点均匀注射,每个点注射量约5μL。空白组则予抽取等量的PBS,操作方法一致,术后撤除呼吸机,缝合术口。造模前、干细胞移植后2周、3周行超声心动图检测,评估心功能及左室重构情况,观察3周后处死实验小鼠,留取心脏标本予HE染色计算心肌梗死面积,并最终于荧光显微镜下观察巨噬细胞表型特征。结果:干细胞移植3周后心脏超声评估结果显示MI+MSCs+QSYQ组的LVIDd、LVIDs明显小于另外两组,而心脏FS和EF值均明显升高(P<0.05),心肌HE染色结果提示与单纯注射PBS相比较,移植MSCs能够明显减少梗死面积,且明芪参益气滴丸联合MSCs能够进一步减少心肌梗死面积。免疫荧光双标方提示间质充质干细胞移植3周后3组实验小鼠心肌梗死区均无M1型巨噬细胞亚群滞留,而存在大量M2型巨噬细胞浸润,并且MI+MSCs+QSYQ组的M2型巨噬细胞数量最多。结论:心肌梗死后骨髓间充质干细胞移植具有促进小鼠巨噬细胞向M2型表型转化的作用,而芪参益气滴丸联合骨髓间充质干细胞移植能够进一步增加巨噬细胞向M2型表型转化及炎症消退、心肌的修复效应。 展开更多
关键词 间质充质干细胞 芪参益气滴丸 心肌梗死 巨噬细胞表型 小鼠
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供体年龄影响融合生长内皮祖细胞对平滑肌细胞表型转换及增殖迁移的作用 被引量:6
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作者 朱光旭 周芳 +5 位作者 阮光萍 宋明宝 杨建勇 黄岚 康华莉 潘兴华 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期769-776,共8页
目的:探讨老龄和年轻个体来源融合生长状态内皮祖细胞(EPCs)对血管平滑肌细胞(SMCs)表型转换以及增殖和迁移的调节作用。方法:脱臼处死1~2月龄、19~26月龄SD大鼠,应用含15% FBS的DMEM/F12培养基(含内皮细胞生长添加剂100 mg... 目的:探讨老龄和年轻个体来源融合生长状态内皮祖细胞(EPCs)对血管平滑肌细胞(SMCs)表型转换以及增殖和迁移的调节作用。方法:脱臼处死1~2月龄、19~26月龄SD大鼠,应用含15% FBS的DMEM/F12培养基(含内皮细胞生长添加剂100 mg/L、肝素100 mg/L、青霉素、链霉素各1×105 U/L)培养EPCs,取1~2月龄大鼠腹主动脉,组织块法培养血管SMCs,应用DiI-Ac-LDL与FITC-UEA-1荧光双染以及α-SM-actin免疫荧光分别对EPCs和SMCs进行鉴定。建立细胞共培养体系,上室为融合生长状态的EPCs,下室为SMCs,实验分4组:(1)第3代SMCs(P3)组;(2)第4代SMCs(P4)组;(3)第4代SMCs与年轻大鼠来源EPCs共培养(P4YE)组;(4)第4代SMCs与老龄大鼠来源EPCs共培养( P4AE)组。 Western blotting检测α-SM-actin和osteopontin蛋白的表达;[3 H ]-TdR掺入法检测SMCs增殖;细胞划痕实验检测SMCs的迁移能力。结果:与P3组相比, P4组的SMCsα-SM-actin表达显著下调,而osteopontin表达显著增强;P4YE组SMCs的α-SM-actin及osteopontin表达与P3组比较未见有显著差别;与P4组相比,年轻和老龄大鼠来源的EPCs均显著促进第4代SMCs的α-SM-actin和下调osteopontin的表达,抑制第4代SMCs的增殖和迁移;与老龄大鼠来源的EPCs相比,年轻大鼠来源的EPCs更能够显著延迟SMCs表型由收缩型向合成型转换,抑制SMCs增殖和迁移。结论:共培养融合生长状态的EPCs使血管SMCs表型转换延迟、抑制SMCs增殖和迁移,年轻大鼠来源的EPCs较老龄大鼠来源的EPC更显著延迟血管SMCs表型由收缩型向合成型转换,并具有更强的抑制血管SMCs增殖和迁移的能力。 展开更多
关键词 内皮祖细胞 平滑肌细胞 细胞表型 细胞增殖 细胞迁移
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胰岛素样生长因子Ⅰ与透明质酸对人胚关节软骨细胞表型的影响 被引量:14
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作者 黄建荣 刘尚礼 +4 位作者 宋卫东 李卫平 郑召民 沈慧勇 黄东生 《中山医科大学学报》 CSCD 北大核心 2002年第6期419-422,426,共5页
【目的】研究胰岛素样生长因子Ⅰ (IGF Ⅰ )和透明质酸 (HA)联合培养对人关节软骨细胞生物学行为的影响 ,判断其稳定软骨细胞表型的效果。【方法】分离培养人关节软骨细胞 ,从第 4代开始 ,用hIGF Ⅰ和HA联合培养 ,通过电镜观察、甲苯胺... 【目的】研究胰岛素样生长因子Ⅰ (IGF Ⅰ )和透明质酸 (HA)联合培养对人关节软骨细胞生物学行为的影响 ,判断其稳定软骨细胞表型的效果。【方法】分离培养人关节软骨细胞 ,从第 4代开始 ,用hIGF Ⅰ和HA联合培养 ,通过电镜观察、甲苯胺蓝染色、Ⅱ型胶原和aggrecan免疫组化及RT PCR判断联合培养第 8代软骨细胞表型的变化。自然传代的第 6代细胞为对照组。【结果】IGF Ⅰ和HA联合培养的第 8代细胞胞浆内含有丰富的粗面内质网和分泌小泡 ;RT PCR显示Ⅱ型胶原mRNA表达阳性而Ⅰ型胶原mRNA表达阴性 ;甲苯胺蓝染色显示细胞浆内有大量的紫色异染颗粒 ;Ⅱ型胶原和aggrecan免疫组化见 80 %~ 92 %的细胞染色呈阳性或强阳性 ,平均灰度分别为 85 92和 116 2 3,均显著低于对照组 ,说明处理组染色较对照组增强。【结论】IGF Ⅰ和HA联合培养的第 8代细胞仍能保持透明软骨细胞的表型 ,为体外获得高数量级别的有正常功能的人关节软骨细胞提供一种新方法。 展开更多
关键词 胰岛素样生长因子I 透明质酸 人胚关节 软骨细胞表型 关节损伤
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胃癌患者外周血DCs细胞表型变化研究 被引量:5
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作者 张坤 余佩武 +3 位作者 高朋芬 汪灏 刘伟 饶云 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第13期1207-1209,共3页
目的 研究胃癌患者外周血树突状细胞 (DCs)细胞表型表达水平 ,与正常人DCs细胞表型表达进行比较并分析其临床意义。方法 分离培养胃癌患者及正常人外周血DCs ,流式细胞仪检测细胞表型表达变化。结果 培养第 3天 ,DCs细胞表型表达均较... 目的 研究胃癌患者外周血树突状细胞 (DCs)细胞表型表达水平 ,与正常人DCs细胞表型表达进行比较并分析其临床意义。方法 分离培养胃癌患者及正常人外周血DCs ,流式细胞仪检测细胞表型表达变化。结果 培养第 3天 ,DCs细胞表型表达均较低 ,两组之间差异不显著 ;培养第 7天 ,两组培养DCs细胞表型表达均较第 3天显著升高 ,且两组之间差异非常显著 ;培养第 12天 ,DCs表型表达较培养第 3天差异非常显著 ,较培养第 7天差异不显著 ,两组之间差异显著。结论 外周血培养DCs的细胞表型表达随培养时间推移而升高 ,至细胞成熟时趋于稳定 ;胃癌患者DCs细胞表型表达较正常人显著降低 ,了解胃癌患者体内DCs细胞表型表达水平 ,对评判患者预后及生物治疗疗效有一定的参考价值。 展开更多
关键词 胃癌 树突状细胞 细胞表型
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大剂量γ射线对树突状细胞表型及功能的影响 被引量:4
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作者 周传丰 杨彦勇 +6 位作者 刘聪 崔建国 高福 李百龙 程赢 孙顶 蔡建明 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期364-367,共4页
目的探讨大剂量电离辐射对树突状细胞(DC)表型及免疫功能的影响和辐射致免疫抑制的机制。方法以粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和白介素-4(IL-4)诱导造血干细胞产生DC,给予0、10、20、30 Gyγ射线照射,并于照后24 h进行脂多糖(LPS... 目的探讨大剂量电离辐射对树突状细胞(DC)表型及免疫功能的影响和辐射致免疫抑制的机制。方法以粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和白介素-4(IL-4)诱导造血干细胞产生DC,给予0、10、20、30 Gyγ射线照射,并于照后24 h进行脂多糖(LPS)处理(1μg/ml)使之成熟。用Transwell法研究DC的迁移能力,流式细胞术检测DC表面分子(CD80、CD86、MHC-Ⅱ和CCR7)的表达,ELISA检测细胞因子(IL-6、IL-10和PGE2)的分泌。结果大剂量γ射线对DC的表型无影响,却能抑制DC向CCL19的迁移,同时下调CCR7的表达,减少IL-6、IL-10和PGE2等细胞因子的分泌。结论大剂量γ射线可以通过下调CCR7和诱导凋亡抑制DC的迁移,减少细胞因子的分泌,导致免疫抑制。 展开更多
关键词 Γ射线 辐射损伤 树突状细胞 细胞表型
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结节病患者肺功能检测和BALF淋巴细胞表型关系的研究 被引量:5
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作者 何晓琳 刘志 +2 位作者 黄丽霞 李振华 于润江 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期130-132,共3页
目的 :通过测定结节病患者的肺通气功能、弥散功能、血气分析以及支气管肺泡灌洗液 (BALF)的细胞学 ,并就其之间的相关性进行分析 ,以探究肺功能测定指标与BALF检测之间的相关性。方法 :结节病患者及正常对照组各 18例 ,行肺通气功能和... 目的 :通过测定结节病患者的肺通气功能、弥散功能、血气分析以及支气管肺泡灌洗液 (BALF)的细胞学 ,并就其之间的相关性进行分析 ,以探究肺功能测定指标与BALF检测之间的相关性。方法 :结节病患者及正常对照组各 18例 ,行肺通气功能和弥散功能及动脉血气分析检测 ,所有受试者均行支气管肺泡灌洗液 (BALF)细胞学检查。结果 :(1)与正常对照组相比 ,结节病组静息状态肺通气功能基本正常 (P >0 .0 5 ) ,单口呼吸法肺弥散功能(DLCO % )减低 (P <0 .0 5 ) ,并有小气道功能障碍 ,尤以FEF50 %减低明显 (P <0 .0 5 )。 (2 )结节病患者BALF中淋巴细胞 %明显增高 (P <0 .0 1) ,CD+4 /CD+8亦明显高于对照组 (P <0 .0 5 )。 (3)结节病患者DLCO %减低与BALF中淋巴细胞 %增加及CD+4 /CD+8比增加均呈负相关 (分别为 r=- 0 .6 7,P <0 .0 1和 r=- 0 .5 5 ,P <0 .0 5 ) ,且小气道功能中FEF50 %减低与BALF中淋巴细胞 %增加呈明显负相关 (r =- 0 .5 4,P <0 .0 5 )。结论 :肺弥散功能以及小气道功能的检查与BALF细胞学检测指标存在较明显的相关性 ,可作为早期结节病病情活动性判定的一项重要参考指标。 展开更多
关键词 结节病 弥散功能 小气道功能 支气管肺泡灌洗液 淋巴细胞表型 肺功能
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胰岛素对大鼠血管平滑肌细胞表型转化的影响 被引量:6
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作者 王旭开 王燕 +2 位作者 何作云 刘光耀 杨成明 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第10期1090-1094,共5页
目的:探讨胰岛素对体外培养的血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)表型转化的影响。方法:用酶消化法分离大鼠VSMC,采用免疫组织化学法检测胰岛素作用后VSMC肌动蛋白(α-SM actin),RT-PCR检测胰岛素作用后VSMC中bFGF、TGF... 目的:探讨胰岛素对体外培养的血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)表型转化的影响。方法:用酶消化法分离大鼠VSMC,采用免疫组织化学法检测胰岛素作用后VSMC肌动蛋白(α-SM actin),RT-PCR检测胰岛素作用后VSMC中bFGF、TGF-β、PDGF、matrix Gla和OPN各目的基因mRNA相对表达水平。结果:胰岛素组VSMC的3H-TdR掺入值比对照组升高47%(P<0.01),VSMC α-SM actin免疫组化结果显示对照组的α-SM actin比胰岛素组染色深。而matrixGla和OPN在培养的VSMC中mRNA的表达量,胰岛素组明显高于对照组(P<0.05),同时bFGF、TGF-β、PDGF的表达胰岛素组也明显高于对照组(P<0.05)。并可明显见到细胞骨架F-actin、G-actin重新分布。结论:在合成表型的matrix Gla和OPN表达量明显高于收缩表型,而合成表型的α-SM actin表达量明显低于收缩表型。提示胰岛素对VSMC的表型转化起了一定作用。胰岛素在促进了VSMC增殖的同时,伴有VSMC由收缩型转变为合成型及细胞骨架F-actin、G-actin重新分布。 展开更多
关键词 胰岛素 血管平滑肌细胞 细胞表型 细胞转化 酶消化法 免疫组织化学法 动脉粥样硬化 高胰岛素血症
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鼠输尿管完全梗阻后肾脏病理及足细胞表型改变的研究 被引量:6
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作者 于雪馨 王常林 +1 位作者 孙荣国 杨屹 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期1-3,共3页
目的观察鼠输尿管完全梗阻后肾脏病理和足细胞表型改变的时序变化,寻找输尿管梗阻后肾脏发生不可逆损伤的时相。方法建立单侧输尿管完全梗阻动物模型,梗阻后不同时间点取出肾脏,经HE染色和免疫荧光双标方法,观察肾脏病理及足细胞表型的... 目的观察鼠输尿管完全梗阻后肾脏病理和足细胞表型改变的时序变化,寻找输尿管梗阻后肾脏发生不可逆损伤的时相。方法建立单侧输尿管完全梗阻动物模型,梗阻后不同时间点取出肾脏,经HE染色和免疫荧光双标方法,观察肾脏病理及足细胞表型的改变。结果大体观察,梗阻24h后出现肾盂扩张,梗阻3d后出现肾皮质变薄。组织学观察,梗阻12h后出现一部分近曲小管扩张,小管上皮细胞呈水样变性肿胀,在梗阻3d后出现大量小管上皮细胞变形肿胀。免疫荧光双标法,梗阻24h后有少量足细胞、巨噬细胞同时被2种抗体标记,2d后足细胞呈减少趋势,而巨噬细胞逐渐增多。结论输尿管梗阻后在肾脏病理改变早于肾脏发生形态学改变的发生,输尿管梗阻后24h发生足细胞表型的改变,与肾脏肾盂出现明显扩张的时间相近,随着梗阻时间的延长,肾脏病理改变逐渐加重,足细胞转化逐渐增多。 展开更多
关键词 输尿管梗阻 细胞表型 肾脏损伤
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人胎儿胸腺细胞表型分析 被引量:5
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作者 刘白 马树俊 +3 位作者 宗淑贞 裴军 陶家平 龙振洲 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1992年第3期141-147,共7页
利用流式细胞计分析了人中期妊娠引产胎儿胸腺细胞的某些表面分子的表达,结果表明从胎儿发育的第17周直到儿童期,胸腺细胞 CD1、CD2、CD3、CD4、CD8、CD38、TCR 以及 HLA 抗原的表达无明显变化.在这一发育阶段,胸腺细胞表型呈现以下特征... 利用流式细胞计分析了人中期妊娠引产胎儿胸腺细胞的某些表面分子的表达,结果表明从胎儿发育的第17周直到儿童期,胸腺细胞 CD1、CD2、CD3、CD4、CD8、CD38、TCR 以及 HLA 抗原的表达无明显变化.在这一发育阶段,胸腺细胞表型呈现以下特征:1.CD3/TCRαβ分子的表达呈现从弱到强的连续性分布,可以分为三个亚群,从弱到强依次称为 L-CD3/TCRαβ、M-CD3/TCRαβ和 H-CD3/TCRαβ.个体之间三个亚群含量差异很大.2.大部分单阳性成熟型胸腺细胞也表达 CD1抗原.3.HLA Ⅰ类抗原在胸腺细胞上表达呈现密度不等的变化.大部分胸腺细胞为弱阳性,少部分为强阳性.HLA Ⅰ类抗原表达量和胸腺细胞成熟度相关.4.根据胸腺细胞比重将胸腺细胞分为 Thy-L 和 Thy-H2个亚群.Thy-L 亚群中成熟型和早期胸腺细胞含量较多,而 Thy-H 主要由中间发育阶段的胸腺细胞构成. 展开更多
关键词 胎儿 胸腺细胞表型 胸腺细胞分化
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阻断CD40-CD40L共刺激途径对T细胞表型及细胞因子分泌的作用研究 被引量:4
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作者 陈纯 黄绍良 +3 位作者 段连宁 李浩威 温冠媚 魏菁 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第8期534-537,共4页
目的 :探讨应用抗CD4 0L单克隆抗体阻断CD4 0 CD4 0L共刺激途径后对T细胞表型及其分泌的细胞因子的影响 ,为体外阻断该共刺激途径诱导T细胞对异体移植抗原的免疫耐受提供实验依据。方法 :供鼠 (C5 7BL 6 H 2b)脾T细胞作为反应细胞 ,受... 目的 :探讨应用抗CD4 0L单克隆抗体阻断CD4 0 CD4 0L共刺激途径后对T细胞表型及其分泌的细胞因子的影响 ,为体外阻断该共刺激途径诱导T细胞对异体移植抗原的免疫耐受提供实验依据。方法 :供鼠 (C5 7BL 6 H 2b)脾T细胞作为反应细胞 ,受鼠 (BALB CH 2d)脾细胞作为刺激细胞 ,设单抗组 (加抗CD4 0L单抗 )和对照组 (不加单抗 ) ,初次混合淋巴细胞培养(MLR) 7天 ,在不同时间点采用3H TdR掺入法检测细胞增殖率 ,以ELISA法测定培养上清液中IFN γ、IL 2、IL 4、IL 10等的水平 ,第 5天采用流式细胞仪检测CD4 + T和CD8+ T细胞上CD2 5、CD6 9、CD4 0L和CD4 5RA的表达。再次MLR 5天 ,第 1、3、5天采用3H TdR掺入法测定细胞的增殖情况和ELISA法测定培养上清液中的上述细胞因子的水平。结果 :初次和再次MLR结果均显示 ,单抗组细胞增殖反应率明显低于对照组。初次MLR单抗组中CD4 + T和CD8+ T细胞比例明显低于对照组 (P <0 0 5 ) ;单抗组中CD4 + CD2 5 + T、CD4 + CD6 9+ T、CD8+ CD2 5 + T、CD4 + CD4 0L+ T和CD8+ CD6 9+ T细胞比例明显低于对照组 (P <0 0 5 ) ,而CD8+ CD4 0L+ T和CD4 + CD4 5RA +T细胞的比例与对照组相比无明显差异 (P >0 0 5 )。初次MLR中单抗组和对照组培养上清中IL 4和IL 10几乎无法测出 。 展开更多
关键词 CD40-CD40L T细胞表型 细胞因子 分泌作用 免疫耐受
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三维培养对脐带间充质干细胞表型及造血因子基因表达的影响 被引量:3
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作者 李芳 李栋 +4 位作者 刘欢 张坤 汪运山 高济凡 肖东杰 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期1408-1414,共7页
本研究探讨三维立体培养条件下脐带间充质干细胞(UC-MSC)的细胞表型变化及部分造血相关因子的基因表达,为下一步研究三维立体条件下的造血扩增及诱导分化提供基础。从脐带中分离出MSC,分别在二维及三维条件下培养,通过流式细胞术检测MS... 本研究探讨三维立体培养条件下脐带间充质干细胞(UC-MSC)的细胞表型变化及部分造血相关因子的基因表达,为下一步研究三维立体条件下的造血扩增及诱导分化提供基础。从脐带中分离出MSC,分别在二维及三维条件下培养,通过流式细胞术检测MSC表面抗原的表达水平,通过成血管试验比较了两种细胞的成血管能力,并通过实时定量PCR检测两种培养条件下造血相关细胞因子的基因表达情况。结果表明:从脐带中成功地分离出了MSC,在三维培养条件下其内皮细胞、内皮祖细胞和间充质原始干细胞的表面标记CD31、CD133和CD271等阳性细胞百分比显著增加,体外成血管能力增强;骨架蛋白β-actin基因在三维培养条件下表达上调,G-CSF、LIF、SCF、IL-1α、IL-1β、IL-3、IL-7和IL-11等与造血调控有关的细胞因子基因表达也有不同程度的增高,其中LIF、IL-3和IL-7升高尤为明显;免疫调控相关的细胞因子IL-10的表达也增高,而SDF-1和IL-6的表达虽有轻微的降低,但无显著性差异。结论:三维培养条件下UC-MSC的CD31、CD133和CD271表达上调,体外成血管能力增强,并且多个造血相关因子的基因表达水平上调。 展开更多
关键词 脐带 间充质干细胞 三维培养 细胞表型 细胞因子
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超短波促进巨噬细胞表型转化并抑制大鼠脊髓损伤后炎症反应的作用 被引量:8
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作者 高琳 冯智萍 +2 位作者 代辰飞 张志强 张立新 《中国康复理论与实践》 CSCD 北大核心 2018年第6期634-640,共7页
目的探讨超短波治疗对巨噬细胞表型转化及大鼠脊髓损伤的保护作用。方法 Sprague-Dawley大鼠96只随机分为假手术组、模型组和超短波组,每组32只。模型组和超短波组采用改良Allen法构建大鼠脊髓损伤模型,超短波组于术后第1天起于损伤部... 目的探讨超短波治疗对巨噬细胞表型转化及大鼠脊髓损伤的保护作用。方法 Sprague-Dawley大鼠96只随机分为假手术组、模型组和超短波组,每组32只。模型组和超短波组采用改良Allen法构建大鼠脊髓损伤模型,超短波组于术后第1天起于损伤部位行小剂量超短波治疗。采用BBB评分评估各组大鼠运动功能;HE染色评估各组脊髓空洞大小;免疫组织化学染色、实时PCR及Western blotting法检测各组脊髓组织中诱导型一氧化氮合酶(i NOS)、精氨酸酶-1(Arg-1)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)m RNA及蛋白表达。结果与模型组比较,超短波组BBB评分升高(P<0.05),i NOS和TNF-α表达减少,Arg-1表达增加(P<0.05)。结论超短波治疗可促进脊髓损伤周围巨噬细胞从M1型向M2型转化,抑制炎症反应并促进脊髓损伤后修复。 展开更多
关键词 脊髓损伤 超短波 巨噬细胞表型转化 肿瘤坏死因子-Α 修复 大鼠
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