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锰中毒对鸡肝脏细胞色素P450酶系及CYP2H1 mRNA转录水平的影响 被引量:1
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作者 唐洪鹏 毕明玉 +3 位作者 陈蕾 张雯 于宪一 徐世文 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期214-219,共6页
本研究旨在探讨锰对公鸡肝脏细胞色素P450酶系的影响。50日龄海兰褐公鸡400只,随机分为4组,分别在饲料中添加0、600、900、1 800 mg.kg-1MnCl2建立亚慢性锰中毒模型,于30、60、90 d采取肝脏检测肝微粒体细胞色素P450酶系活性以及CYP2H1... 本研究旨在探讨锰对公鸡肝脏细胞色素P450酶系的影响。50日龄海兰褐公鸡400只,随机分为4组,分别在饲料中添加0、600、900、1 800 mg.kg-1MnCl2建立亚慢性锰中毒模型,于30、60、90 d采取肝脏检测肝微粒体细胞色素P450酶系活性以及CYP2H1基因转录水平的变化。结果显示,细胞色素P450、b5含量,氨基吡啉-N-脱甲基酶(AND)和苯胺-4-羟化酶(AH)活性在各个时间点随染锰剂量的增加,基本呈降低趋势,且高剂量组均极显著(P<0.01)低于正常组,低、中剂量组有高于正常组的情况。NADPH-细胞色素C还原酶(CR)和红霉素-N-脱甲基酶(ERND)的活性的变化规律不明显,30和60 d NADPH-细胞色素C还原酶活性呈降低趋势,而90 d时呈升高趋势,且高剂量组极显著(P<0.01)高于正常组。红霉素-N-脱甲基酶在30 d时呈升高趋势,60和90 d时呈波动性降低变化,且高剂量组均极显著(P<0.01)低于正常组。在各个时间点,CYP2H1 mRNA的转录水平除30 d低、高剂量组,60 d中剂量组,90 d低剂量组高于正常组外,其他组均低于正常组。结果提示,锰中毒可影响鸡肝脏细胞色素P450酶系以及CYP2H1 mRNA的转录水平。 展开更多
关键词 锰中毒 肝脏 细胞色素P450 cyp2H1基因
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细胞色素P450 CYP2D6*10B缺陷等位基因与利培酮治疗效应的关系 被引量:5
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作者 郭晓云 成俊祥 +2 位作者 江开达 杨瑞 杨献军 《上海精神医学》 2010年第1期18-21,共4页
目的探讨CYP2D6*10B缺陷等位基因与利培酮治疗效应的关系。方法采用等位基因的特异性扩增法,根据是否含有突变型CYP2D6*10B缺陷等位基因将70例精神分裂症患者分为野生型等位基因的纯合型(w/w)组(16例),突变型等位基因的纯合型(m/m)组(16... 目的探讨CYP2D6*10B缺陷等位基因与利培酮治疗效应的关系。方法采用等位基因的特异性扩增法,根据是否含有突变型CYP2D6*10B缺陷等位基因将70例精神分裂症患者分为野生型等位基因的纯合型(w/w)组(16例),突变型等位基因的纯合型(m/m)组(16例)以及野生型和突变型等位基因的杂合型(m/w)组(38例),观察3组患者利培酮4~6mg/d治疗6周后疗效与不良反应。采用阳性和阴性症状量表(PANSS)评价疗效,副反应量表(TESS)和锥体外系不良反应量表(RSESE)评定药物不良反应。PANSS减分率≥30%为有效。结果治疗6周后,有效者58例。有效组w等位基因频率(0.43)明显低于无效组(0.83),有效组的m等位频率(0.57)明显高于无效组(0.17)。自第4周起,m/w,m/m型PANSS减分值明显多于w/w型。3种基因型患者组间不良反应差异无统计学意义。结论利培酮治疗携带CYP2D6*10B缺陷等位基因患者的疗效优于治疗野生型等位基因患者的疗效。CYP2D6*10B缺陷等位基因与利培酮不良反应无关联。 展开更多
关键词 精神分裂症 细胞色素P450 cyp2D6 基因型 抗精神病药 治疗结果
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猪肝微粒体中细胞色素P450 CYP2A19和CYP1A的分离
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作者 Matal J 晋大鹏 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2009年第12期148-148,共1页
细胞色素P450为一类蛋白质超家族,在许多化学物质的生物转化中起重要作用,如纯化的CYPs可用于结构的研究或测定药物的代谢途径。本研究中,猪肝微粒体细胞色素P450(CYP)经octylamino琼脂糖和羟基磷灰石柱层析,纯化出CYP1A和CYP2A19两种C... 细胞色素P450为一类蛋白质超家族,在许多化学物质的生物转化中起重要作用,如纯化的CYPs可用于结构的研究或测定药物的代谢途径。本研究中,猪肝微粒体细胞色素P450(CYP)经octylamino琼脂糖和羟基磷灰石柱层析,纯化出CYP1A和CYP2A19两种CYPs。经Western blotting鉴定,抗大鼠和人的CYP1A2抗体能识别猪CYP1A;抗人的CYP2A6抗体能识别CYP2A19。通过特定的底物7-乙氧异吩唑酮、7-甲氧基-3H-吩恶嗪-3-酮(CYP1A)和香豆素(CYP2A19)测定酶的活性,酶分离结果表明,动力学参数与人的模式相类似。因此,猪肝微粒体细胞色素能用来检测兽药的新陈代谢及在猪肉中的药物残留。结果表明,在检测人外源化学物质的生物转化时,猪可能是一个合适的试验模型。 展开更多
关键词 细胞色素P450 肝微粒体 cyp1a cyp2A19
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细胞色素P450酶1A2和2C19基因多态性与难治性抑郁症的关联分析 被引量:11
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作者 陈静 陆峥 +3 位作者 江三多 蔡军 钱伊萍 李霞 《上海精神医学》 2005年第2期95-98,共4页
目的探讨细胞色素P450酶(cytochromeP450enzymes,CYP)1A2、2C19基因多态性与难治性抑郁症的关联。方法应用聚合酶链反应(PCR)扩增技术及限制性片段长度多态性(RFLP)测定79例难治性抑郁症患者及107名正常对照者CYP1A2C163A、CYP2C19G681... 目的探讨细胞色素P450酶(cytochromeP450enzymes,CYP)1A2、2C19基因多态性与难治性抑郁症的关联。方法应用聚合酶链反应(PCR)扩增技术及限制性片段长度多态性(RFLP)测定79例难治性抑郁症患者及107名正常对照者CYP1A2C163A、CYP2C19G681A基因多态性。结果两组间基因型及等位基因分布差异无显著性(χ2=3.605,P>0.05;χ2=3.154,P>0.05)。难治性抑郁症患者对照组间基因型及等位基因分布差异无显著性(χ2=0.853,P>0.05;χ2=0.568,P>0.05)。79名患者中46名接受氟西汀合并小剂量利培酮(0.5~2.0mg/d)治疗,将其分为治疗有效组和无效组,两组间CYP1A2C163A(χ2=0.785,P>0.05;χ2=7.142,P>0.05)CYP2C19G681A(χ2=3.008,P>0.05;χ2=2.722,P>0.05)基因型及等位基因分布差异均无显著性。根据CYP2C19G681A基因多态性将患者分为无突变组(G/G型)和突变组(G/A型和A/A型),两组患者CYP1A2C163A基因型及等位基因分布差异无显著性(χ2=0.252,P>0.05;χ2=0.682,P>0.05)。结论CYP1A2C163A和CYP2C19G681A基因多态性与难治性抑郁症无显著关联,不是影响利培酮对氟西汀增效作用的主要因素。 展开更多
关键词 细胞色素P450酶 难治性抑郁症 基因多态性 关联分析 聚合酶链反应(PCR) cyp2C19 限制性片段长度多态性 P〉0.05 cyp1a2 抑郁症患者 分布差异 等位基因 显著性 基因型 正常对照 扩增技术 方法应用 增效作用 利培酮 氟西汀
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性别对华南地区汉族人群细胞色素P450酶2C19基因遗传多态性的影响 被引量:5
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作者 徐韫健 王慧 宋金龙 《山东医药》 CAS 2013年第12期63-65,共3页
目的研究华南地区汉族人群细胞色素P450酶(CYP)2C19基因遗传多态性。方法应用基因芯片法对359例来院就诊的心血管疾病患者进行CYP2C19基因检测,按性别分类进行遗传多态性分析。以22例健康人作为对照组。结果基因型为野生型*1/*1型占42.3... 目的研究华南地区汉族人群细胞色素P450酶(CYP)2C19基因遗传多态性。方法应用基因芯片法对359例来院就诊的心血管疾病患者进行CYP2C19基因检测,按性别分类进行遗传多态性分析。以22例健康人作为对照组。结果基因型为野生型*1/*1型占42.3%(152/359),突变型*1/*2型占45.7%(164/359)、*1/*3型占7.8%(28/359)、*2/*2型占10.3%(37/359)、*2/*3型占1.4%(5/359)、*3/*3型占0.6%(2/359)。男性中基因型为*1/*1型占41.2%(91/221)、*1/*2型占37.1%(82/221)、*1/*3型占7.2%(16/221)、*2/*2型占12.7%(28/221)、*2/*3型占1.4%(3/221)、*3/*3型为0,女性中基因型为*1/*1型占44.2%(61/138)、*1/*2型占37.7%(52/138)、*1/*3型占8.7%(12/138)、*2/*2型占6.5%(9/138)、*2/*3型占1.4%(2/138)、*3/*3型占1.4%(2/138),男性和女性中各类基因型的发生率均无统计学差别(P>0.05)。结论性别对华南地区汉族人群CYP2C19基因遗传多态性无影响。 展开更多
关键词 酶制剂 细胞色素P450酶 cyp2C19 基因多态性
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细胞色素P450 2E1的研究进展 被引量:2
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作者 武淑琴 王成双 +1 位作者 王新 李鹏 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第11期165-170,共6页
细胞色素P450 2E1(CYP2E1)是机体对药物和低分子化合物代谢的主要酶之一,且CYP2E1的活性增强或高表达与临床多种疾病密切相关。文章综述了国内外CYP2E1的蛋白结构、功能、定位机制及基因多态性等方面的研究进展。从而为进一步探索机体内... 细胞色素P450 2E1(CYP2E1)是机体对药物和低分子化合物代谢的主要酶之一,且CYP2E1的活性增强或高表达与临床多种疾病密切相关。文章综述了国内外CYP2E1的蛋白结构、功能、定位机制及基因多态性等方面的研究进展。从而为进一步探索机体内CYP2E1的生物学效应及其与临床疾病的相关性奠定基础。 展开更多
关键词 细胞色素P450 2E1(cyp2E1) 蛋白结构 功能 基因多态性 肝脏毒性
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稳定高表达CYP2E1基因肝癌HepG2细胞系的构建 被引量:2
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作者 熊永福 闫再华 +1 位作者 杨召 李敬东 《山东医药》 CAS 北大核心 2015年第7期8-10,I0002,共4页
目的构建稳定高表达CYP2E1基因的肝癌HepG2细胞系。方法通过NCBI查询CYP2E1的编码序列,设计并构建表达质粒p LV(Exp)-Puro-CMVm-CYP2E1,用载体对应的慢病毒包装质粒(p MDLg/pRRE、pRSVREV和p MD2.G)共同转染293T细胞。利用携带CYP2E1基... 目的构建稳定高表达CYP2E1基因的肝癌HepG2细胞系。方法通过NCBI查询CYP2E1的编码序列,设计并构建表达质粒p LV(Exp)-Puro-CMVm-CYP2E1,用载体对应的慢病毒包装质粒(p MDLg/pRRE、pRSVREV和p MD2.G)共同转染293T细胞。利用携带CYP2E1基因的慢病毒(Lenti-CYP2E1-e GFP-Puro)感染HepG2细胞系,采用嘌呤霉素抗性筛选方法构建高表达CYP2E1肝癌HepG2细胞系。增强绿色荧光蛋白检测转染情况,荧光定量PCR及Western blotting检测HepG2、空载及转染CYP2E1基因的HepG2细胞系中CYP2E1 mRNA和蛋白。结果 HepG2细胞系均成功转染CYP2E1基因。HepG2、空载及转染CYP2E1基因的HepG2细胞系中CYP2E1mRNA相对表达量分别为1.02±0.06、1.06±0.05、7.42±0.07,蛋白相对表达量分别为0.26±0.02、0.29±0.01、1.61±0.08,转染CYP2E1基因的HepG2细胞系与前两者比较,P均<0.05。结论通过慢病毒转染成功构建了稳定高表达CYP2E1基因的肝癌HepG2细胞系。 展开更多
关键词 cyp2E1基因 慢病毒载体 肝癌 HEPG2细胞
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CYP2C19基因型与药物代谢相关性研究进展 被引量:2
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作者 安向阳 王颖 +2 位作者 刘贤 崔超 周波 《中国医药科学》 2024年第2期36-39,共4页
细胞色素P450(CYP450)家族是人体内最重要的药物氧化代谢酶之一,而细胞色素P4502C19(CYP2C19)是CYP450家族中重要一员,参与许多药物的氧化代谢。药物代谢酶的基因多态性被认为是个体间药物反应差异最主要的原因,CYP2C19基因多态性影响... 细胞色素P450(CYP450)家族是人体内最重要的药物氧化代谢酶之一,而细胞色素P4502C19(CYP2C19)是CYP450家族中重要一员,参与许多药物的氧化代谢。药物代谢酶的基因多态性被认为是个体间药物反应差异最主要的原因,CYP2C19基因多态性影响许多药物的代谢,并与几种常用处方药的临床疗效和安全性问题密切相关。根据CYP2C19基因多态性可将人群分为慢代谢型、中间代谢型、正常代谢型和超快代谢型四大类。本文主要介绍CYP2C19基因多态性与其代谢药物相关性的研究进展,以期为临床个体化合理用药提供参考依据。 展开更多
关键词 细胞色素P450 cyp2C19 基因多态性 药物代谢
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氯氮平疗效与细胞色素P4501A2酶基因多态性的关联研究 被引量:4
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作者 李飞 江开达 +3 位作者 江三多 钱伊萍 汤国梅 汪栋祥 《上海精神医学》 北大核心 2004年第3期136-140,共5页
目的 探讨氯氮平临床疗效的个体差异与其代谢酶细胞色素P4 5 0 1A2 (cytochromeP4 5 01A2 ,CYP1A2 )酶基因单核苷酸多态性的相关性。方法 对 99例符合CCMD 2 R精神分裂症诊断标准的患者和 10 6例健康对照者作病例 对照研究。分裂症... 目的 探讨氯氮平临床疗效的个体差异与其代谢酶细胞色素P4 5 0 1A2 (cytochromeP4 5 01A2 ,CYP1A2 )酶基因单核苷酸多态性的相关性。方法 对 99例符合CCMD 2 R精神分裂症诊断标准的患者和 10 6例健康对照者作病例 对照研究。分裂症患者给予氯氮平治疗 2个月 ,用阳性和阴性症状量表 (positiveandnegativesymptomscale,PANSS)评分评价氯氮平疗效。采用聚合酶链反应扩增及限制性片段长度多态性 (PCR RFLP)技术对CYP1A2 /C734A单核苷酸突变进行检测 ,分析氯氮平临床疗效的个体差异与其主要代谢酶CYP1A2 /C734A酶基因单核苷酸多态性的相关性。结果  (1)中国上海地区人群的CYP1A2 /C734A突变率为 6 1 3% ,患者组和健康对照组之间的基因型和等位基因频率无显著性差异 (χ2 =2 4 8,df=2 ;χ2 =1 80 ,df=1,P >0 0 5 ) ,CYP1A2 /C734A突变的多态性分布在分裂症的易感性及年龄、性别、发病年龄、病程、最大日用药剂量等其他相关因素中亦无显著性差异。 (2 )有阳性家族史的分裂症患者其纯合突变基因型 (AA)的频率较健康对照组有明显增多 (χ2 =5 2 8,df=1,P <0 0 5 )。 (3)CYP1A2 /C734A基因型、等位基因频率总体分布与氯氮平疗效之间无相关性 (χ2 =3 4 7,df=2 ;χ2 =2 77,df=1,P >0 0 5 )。 (4 ) 展开更多
关键词 氯氮平 细胞色素P450 1a2 基因多态性 精神分裂症 抗精神病药物
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细胞色素P450 2C19基因多态性与氯吡格雷抗血小板作用相关性的Meta分析 被引量:1
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作者 查成喜 邢福军 +1 位作者 杨邵华 韩跃武 《循证医学》 CSCD 2013年第5期285-291,共7页
目的利用Meta分析的方法评估氯吡格雷抗血小板作用的效果和细胞色素P450 2C19基因(CYP2C19)多态性之间的相关性。方法计算机检索中国知网、万方、维普、中国生物医学文献数据库、Cochrane图书馆、SCI、EMBASE和PubMed数据库,并手工检索... 目的利用Meta分析的方法评估氯吡格雷抗血小板作用的效果和细胞色素P450 2C19基因(CYP2C19)多态性之间的相关性。方法计算机检索中国知网、万方、维普、中国生物医学文献数据库、Cochrane图书馆、SCI、EMBASE和PubMed数据库,并手工检索相关杂志,收集氯吡格雷使用患者CYP2C19 A/G位点多态性的基因频率和抗血小板效应的独立病例对照研究,提取有效的数据,用RevMan 5.0软件进行Meta分析。结果共纳入8个病例对照研究,包括1 538例GG基因型患者和4 413例GA或者AA患者。Meta分析结果表明:使用氯吡格雷作为抗血小板药物的患者中,CYP2C19突变型(GA或者AA)携带者比野生型GG携带者的药物敏感性差[比值比=0.23,95%可信区间(0.13,0.40)];血浆药物浓度前者远低于后者[均数差=-17.38,95%可信区间(-25.59,-9.16)];血小板反应指数前者较后者明显降低[均数差=12.87,95%可信区间(8.48,17.26)];支架植入后血栓形成情况前者较后者有明显增加[比值比=3.68,95%可信区间(2.17,6.24)];血栓导致的死亡率前者也较后者增高[比值比=3.68,95%可信区间(1.82,7.43)];然而,对于心肌梗死的情况前者与后者之间无差异[比值比=1.25,95%可信区间(0.96,1.63)]。结论 Meta分析结果表明,CYP2C19基因多态性与氯吡格雷药物反应作用之间存在着一定的相关性,且易导致由于血小板凝集而造成的患者死亡。 展开更多
关键词 细胞色素P450 cyp2C19基因 多态性 氯吡格雷 META分析
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细胞色素P4502E1基因多态性对再生障碍性贫血易感性的影响 被引量:1
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作者 陈海霞 王晓春 王铁兵 《中国医学工程》 2005年第5期477-479,482,共4页
目的探讨CYP2E1基因多态性对再障遗传易感性的影响。方法应用病例对照分子流行病学研究方法,采用PCR-RFLP和PCR方法分别分析72例再障病人和80例健康对照的CYP2E1的PstΙ和CYP2E1的96bp插入多态性。结果CYP2E1(c1c2,c2c2)基因型在再障组... 目的探讨CYP2E1基因多态性对再障遗传易感性的影响。方法应用病例对照分子流行病学研究方法,采用PCR-RFLP和PCR方法分别分析72例再障病人和80例健康对照的CYP2E1的PstΙ和CYP2E1的96bp插入多态性。结果CYP2E1(c1c2,c2c2)基因型在再障组和对照组的频率分别为50.00%,45.00%,差异无显著性(P>0.05);CYP2E1的96bp插入多态在再障组和对照组的频率分别为41.67%,27.50%,亦差异无显著性(P>0.05);联合分析时,发现CYP2E1(c1c2,c2c2)+Ins96(+/+,+/-)基因型的个体较正常野生型个体患再障危险性升高(OR值为4.88,P<0.05)。结论CYP2E1(c1c2,c2c2)+Ins96(+/+,+/-)基因型与再障遗传易感性有关,可能在再障的发病过程中起重要作用。 展开更多
关键词 细胞色素cyp2E1 多态性 再生障碍性贫血
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胰岛素样生长因子1对人RPE细胞分泌TGF-β2、MMP-2的影响及机制研究 被引量:1
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作者 晁荣荣 郑柳 +1 位作者 范晶 丁芝祥 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2024年第7期512-517,共6页
目的研究胰岛素样生长因子1(IGF-1)对人视网膜色素上皮细胞(ARPE-19)表达转化生长因子β2(TGF-β2)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)的影响,并探索其作用机制。方法ARPE-19细胞分别按不同浓度IGF-1和不同浓度LY294002培养6 h、12 h、24 h、48 h... 目的研究胰岛素样生长因子1(IGF-1)对人视网膜色素上皮细胞(ARPE-19)表达转化生长因子β2(TGF-β2)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)的影响,并探索其作用机制。方法ARPE-19细胞分别按不同浓度IGF-1和不同浓度LY294002培养6 h、12 h、24 h、48 h,采用CCK-8法检测细胞活力,确定IGF-1、LY294002的最佳作用浓度与时间。细胞划痕法检测细胞迁移活性。ELISA法检测细胞培养上清液中TGF-β2浓度。将ARPE-19细胞分为对照组、IGF-1组(80μg·L^(-1) IGF-1)、IGF-1+LY294002组(80μg·L^(-1) IGF-1+30 mmol·L^(-1) LY294002)、LY294002组(30 mmol·L^(-1) LY294002),使用无血清DMEM/F12培养基培养,对照组不做任何处理,分别采用RT-PCR、Western blot检测细胞中TGF-β2、MMP-2、磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)的mRNA和蛋白表达量。结果与0μg·L^(-1) IGF-1比较,80μg·L^(-1) IGF-1的细胞活力24 h变化显著(P<0.05),故确定其为IGF-1最佳作用浓度和时间。与0 mmol·L^(-1) LY294002比较,24 h的30 mmol·L^(-1) LY294002接近半数抑制浓度,故确定其为LY294002最佳作用时间和浓度。细胞划痕法检测结果显示,0μg·L^(-1) IGF-1组、40μg·L^(-1) IGF-1组、80μg·L^(-1) IGF-1组细胞迁移率整体比较及两两比较差异均有统计学意义(均为P<0.05)。ELISA检测结果显示,0μg·L^(-1) IGF-1组、40μg·L^(-1) IGF-1组、80μg·L^(-1) IGF-1组细胞上清液中TGF-β2浓度整体比较及两两比较差异均有统计学意义(均为P<0.05)。RT-PCR、Western blot检测结果显示,IGF-1、LY294002培养24 h,与对照组比较,IGF-1组细胞中TGF-β2、MMP-2、PI3K、AKT的mRNA与蛋白表达水平均升高,而LY294002组细胞中TGF-β2、MMP-2、PI3K、AKT的mRNA与蛋白表达水平均下降(均为P<0.05);与IGF-1组比较,IGF-1+LY294002组细胞中TGF-β2、MMP-2、PI3K、AKT的mRNA与蛋白表达水平均下降(均为P<0.05)。结论IGF-1能促进ARPE-19细胞增殖、迁移;IGF-1可能通过PI3K/AKT信号通路上调ARPE-19细胞中TGF-β2、MMP-2的表达,参与近视的发生与发展。 展开更多
关键词 近视 视网膜色素上皮细胞 胰岛素样生长因子1 磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B通路 转化生长因子Β2 基质金属蛋白酶2
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家蚕细胞色素P450 CYP337A1的原核表达 被引量:1
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作者 董元凌 艾均文 +3 位作者 柳照应 张湖静 李傲祥 朱勇 《中国蚕业》 2008年第2期20-22,26,共4页
以含有CYP337A1基因完全编码框的克隆载体质粒DNA为模板进行PCR扩增,产物经TA克隆测序鉴定后,亚克隆至原核融合表达载体PET50(b)(含有编码64.3 kD的Nus.Tag蛋白标签)中,在大肠杆菌BL21(DE3)中进行原核表达。利用SDS-PAGE方法,以空载和... 以含有CYP337A1基因完全编码框的克隆载体质粒DNA为模板进行PCR扩增,产物经TA克隆测序鉴定后,亚克隆至原核融合表达载体PET50(b)(含有编码64.3 kD的Nus.Tag蛋白标签)中,在大肠杆菌BL21(DE3)中进行原核表达。利用SDS-PAGE方法,以空载和未诱导菌体作对照,对细菌总蛋白进行电泳分析,结果表明:经1mmol/L IPTG诱导2h后,即能看到1条大约120 kD的蛋白质特异带,与预计大小一致。进一步利用不同时间、不同温度以及不同浓度的IPTG进行诱导结果比较,发现在诱导时间为2h,温度为32℃,IPTG浓度为0.6 mmol/L的诱导条件下,融合蛋白表达量最大。该实验为利用该基因的蛋白产物进行功能分析创造了条件。 展开更多
关键词 家蚕 细胞色素P450 cyp337A1 原核表达
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电针对非酒精性脂肪肝胰岛素抵抗及肝细胞色素P450 2E1表达的影响 被引量:3
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作者 曾志华 曾明慧 《江西中医药》 2010年第12期48-51,共4页
目的:研究电针对非酒精性脂肪肝(Non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)胰岛素抵抗及肝细胞色素P450 2E1(cyto-chrome P450 2E1,CYP 2E1)表达的影响。方法:SD大鼠33只随机分组,正常对照组(11只)、造模组(22只)。后者高脂饲料喂养8... 目的:研究电针对非酒精性脂肪肝(Non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)胰岛素抵抗及肝细胞色素P450 2E1(cyto-chrome P450 2E1,CYP 2E1)表达的影响。方法:SD大鼠33只随机分组,正常对照组(11只)、造模组(22只)。后者高脂饲料喂养8周后处死3只(正常对照组1只,造模组2只),验证造模成功后将造模组分为NAFLD模型组(10只)和电针治疗组(10只),后者施以电针"治疗"。12周末处死所有动物,检测血糖(FBG)、血清胰岛素(FINS)、血清游离脂肪酸(FFA),测定肝内丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)以及谷胱甘肽(GSH)含量,观察肝组织病理形态的变化和肝CYP 2E1表达。结果:与NAFLD模型组比较,电针组的肝组织脂肪变性和炎性损伤得以改善。免疫组化证明电针治疗能抑制脂肪肝肝细胞色素CYP 2E1的表达,电针组大鼠的血糖、血清胰岛素、血清游离脂肪酸指标均显著低于模型组(均P<0.05),肝内MDA、TG、TC显著降低(P<0.01),SOD、GSH活性升高(P<0.01)。结论:电针通过改善胰岛素抵抗状态和抑制肝CYP 2E1表达,从而减轻脂质过氧化反应,增强抗氧化能力,使肝组织的脂肪变性和炎性损伤得以改善。 展开更多
关键词 非酒精性脂肪肝 胰岛素抵抗 细胞色素P450 2E1 针灸治疗
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细胞色素P2C19基因多态性对行介入治疗急性心肌梗死患者抗血小板药物的影响
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作者 海冰峰 汤建民 +6 位作者 赵玉兰 黄亚萍 周盼盼 宿东升 朱银川 王丰云 来利红 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 北大核心 2020年第10期1095-1097,共3页
目的检测行PCI的急性心肌梗死(AMI)患者细胞色素P2C19(CYP2C19)基因多态性,分析不同基因型患者抗血小板治疗的疗效。方法收集2016年6月~2018年6月郑州大学第二附属医院心内科接受PCI首次治疗的AMI患者247例,其中快代谢型(EM)56例,中间... 目的检测行PCI的急性心肌梗死(AMI)患者细胞色素P2C19(CYP2C19)基因多态性,分析不同基因型患者抗血小板治疗的疗效。方法收集2016年6月~2018年6月郑州大学第二附属医院心内科接受PCI首次治疗的AMI患者247例,其中快代谢型(EM)56例,中间代谢型(IM)97例,慢代谢型(PM)94例,根据治疗方法分为氯吡格雷组172例和替格瑞洛组75例。采用流式细胞仪检测P选择素(CD62P)和血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa复合物纤维蛋白原受体(PAC-1)表达水平,采用PCR检测2组患者CYP2C19基因型。结果2组患者CYP2C19基因型分布和代谢类型分型比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,氯吡格雷组EM患者CD62P和PAC-1表达明显低于IM和PM患者(3.36±0.54 vs 4.52±1.07和4.47±1.25,2.24±0.81 vs 3.07±0.84和3.54±0.96,P<0.01),IM与PM患者CD62P和PAC-1表达比较及替格瑞洛组EM、IM与PM患者CD62P和PAC-1表达比较,差异无统计学意义(P>0.05);氯吡格雷组EM、IM和PM患者CD62P和PAC-1表达分别明显高于替格瑞洛组同代谢类型患者(P<0.05,P<0.01)。结论氯吡格雷和替格瑞洛均可抑制血小板活化标志物CD62P和PAC-1表达,替格瑞洛对血小板活化标志物的抑制作用强于氯吡格雷、且不受CYP2C19基因多态性的影响,在临床上,优先推荐阿司匹林联合替格瑞洛用于PCI后抗血小板治疗。 展开更多
关键词 心肌梗死 细胞色素P-450cyp2C19 基因型 血小板聚集抑制剂 血小板活化
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基于密度泛函理论的细胞色素P450 1A2抑制剂的定量构效关系
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作者 易忠胜 叶廷文 +1 位作者 刘红艳 莫凌云 《桂林理工大学学报》 CAS 北大核心 2013年第1期99-106,共8页
在B3LYP/6-31G*水平上采用高斯09全优化计算了50个P450 1A2抑制剂的量子化学参数,应用基于预测的模型变量选择方法(VSMP)选择描述子最佳子集,建立了最高轨道占有能(EHOMO)和分子体积(Vm)与萘、内酯衍生物及其他化合物对细胞色素氧化酶P4... 在B3LYP/6-31G*水平上采用高斯09全优化计算了50个P450 1A2抑制剂的量子化学参数,应用基于预测的模型变量选择方法(VSMP)选择描述子最佳子集,建立了最高轨道占有能(EHOMO)和分子体积(Vm)与萘、内酯衍生物及其他化合物对细胞色素氧化酶P450 1A2抑制剂的两变量线性QSAR模型,结果表明:所选的2个分子结构描述符与50个抑制剂的活性之间具有很强的线性关系(相关系数r2=0.907 0)和内部预测能力(留多法交叉验证相关系数q2=0.751 7)。同时,将50个化合物分成奇数集和偶数集各自进行筛选建模,并彼此进行外部预测,对全部样本集、奇数集和偶数集样本模型进行了y-Randomization检验,结果表明描述符EHOMO和Vm建立的模型均非常稳定并具有很高的预测能力。 展开更多
关键词 细胞色素P450 1a2 抑制剂 定量结构-活性相关 密度泛函理论(DFT) VSMP
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稳定表达人细胞色素P4501A2的HepG2细胞的建立及其代谢效应
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作者 诸葛坚 叶森 余应年 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 2003年第5期403-406,共4页
目的 :建立稳定表达人细胞的色素 P4 5 0 1A2 (CYP1A2 )的 Hep G2细胞。方法 :将所克隆的野生型CYP1A2 c DNA从重组质粒 p GEM- CYP1A2中用 Kpn / Bam H 双酶切 ,并亚克隆到哺乳动物细胞表达载体p REP9中。再将重组质粒转化感受态大... 目的 :建立稳定表达人细胞的色素 P4 5 0 1A2 (CYP1A2 )的 Hep G2细胞。方法 :将所克隆的野生型CYP1A2 c DNA从重组质粒 p GEM- CYP1A2中用 Kpn / Bam H 双酶切 ,并亚克隆到哺乳动物细胞表达载体p REP9中。再将重组质粒转化感受态大肠杆菌 Top10 ,用氨苄青霉素抗性筛选和限制酶谱鉴定。改良的磷酸钙介导的细胞转染法将重组质粒 p REP9- CYP1A2转染肝癌细胞 Hep G2 ,用 RT- PCR技术对转基因细胞的 CYP1A2m RNA表达作了分析 ,并用 MTT法比较转基因细胞对黄曲霉素 B1(AFB1)细胞毒敏感试验。结果 :与 Hep G2细胞相比 ,Hep G2 - CYP1A2转基因细胞表达 CYP1A2 m RNA,能增强 AFB1的细胞毒作用。结论 :建立了稳定表达CYP1A2的转基因细胞系 ,可用于由 CYP1A2参与的毒理学与药物代谢研究。 展开更多
关键词 细胞色素P-450 细胞 HEPG2 黄曲霉素B1
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活血散结方药物血浆对PDGF干预下兔视网膜色素上皮细胞增殖相关因子及ERK1/2信号转导通路的影响 被引量:3
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作者 刘晓清 彭俊 +4 位作者 张又玮 谭涵宇 李建超 吴权龙 彭清华 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2019年第2期62-68,共7页
目的观察活血散结方对血小板源性生长因子(PDGF)干预下兔视网膜色素上皮(RPE)细胞增殖的影响,探讨其分子机制。方法以RPE细胞为研究对象,体外进行RPE细胞原代培养及传代,建立PDGF干预下兔RPE细胞增殖模型,并选取PDGF最佳干预浓度。制备... 目的观察活血散结方对血小板源性生长因子(PDGF)干预下兔视网膜色素上皮(RPE)细胞增殖的影响,探讨其分子机制。方法以RPE细胞为研究对象,体外进行RPE细胞原代培养及传代,建立PDGF干预下兔RPE细胞增殖模型,并选取PDGF最佳干预浓度。制备活血散结方药物血浆,对兔RPE细胞增殖与毒性的影响进行测定,选取最佳的实验浓度。实验分为空白对照组(DMEM)、正常血浆组、PDGF(10μg/L)组、PDGF(10μg/L)+AG1296(10μmol/L)组、PDGF(10μg/L)+10%药物血浆组、PDGF(10μg/L)+20%药物血浆组。分别加入相应处理因素干预48 h,Transwell流式细胞仪检测细胞周期变化;Western blot检测兔RPE细胞cyclinD1蛋白、pERK1/2及ERK1/2蛋白表达。结果 10%、20%活血散结方药物血浆对RPE细胞周期、cyclin D1蛋白及p ERK1/2、ERK1/2蛋白有抑制作用,与AG1296抑制剂作用相当(P>0.05),与其他组比较差异均有统计学意义(P<0.01)。结论活血散结方药物血浆可能通过影响ERK信号通路及对周期蛋白的调控,抑制PDGF干预下兔RPE细胞增殖。 展开更多
关键词 活血散结方 药物血浆 视网膜色素上皮细胞 细胞周期 血小板源性生长因子 cyclin D1蛋白 pERK1/2蛋白 ERK1/2蛋白
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细胞色素P450 2E1的毒性机制研究进展 被引量:4
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作者 裴彦宇 高虹 《中国医药导报》 CAS 2015年第19期39-44,共6页
细胞色素P450 2E1(CYP2E1)在生物体内许多内源性或外源性物质的代谢过程中发挥着重要作用。CYP2E1主要分布在肝脏中,同时在肝外组织如心脏、肾脏等也有高表达。CYP2E1参与活性氧自由基的生成,引发氧化应激反应、脂质过氧化反应、炎性反... 细胞色素P450 2E1(CYP2E1)在生物体内许多内源性或外源性物质的代谢过程中发挥着重要作用。CYP2E1主要分布在肝脏中,同时在肝外组织如心脏、肾脏等也有高表达。CYP2E1参与活性氧自由基的生成,引发氧化应激反应、脂质过氧化反应、炎性反应和细胞凋亡等过程,进而对机体产生毒性,诱发脂肪性肝病、糖尿病及肿瘤等疾病。本文综述了CYP2E1的毒性机制研究进展以及其在心脏毒性评价中的展望,其可能作为一个潜在的心脏毒性评价新指标应用于新药安全性评价中。 展开更多
关键词 细胞色素P450 2E1 氧化应激 毒性 心脏毒性
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人类细胞色素P450 2E1酶在不同乙醇浓度下构象变化的分子动力学模拟(英文) 被引量:2
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作者 王衍 郑清川 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2015年第11期2226-2235,共10页
细胞色素P450(CYP)2E1家族酶是一种具有双重功能的单加氧酶,能够参与市场上6%药物的代谢而具有重要的作用.这类酶与酒精的消耗、糖尿病、肥胖症以及厌食症等密切相关,引起了广泛的研究兴趣.目前尚未见从原子水平上对这种酶在不同乙醇浓... 细胞色素P450(CYP)2E1家族酶是一种具有双重功能的单加氧酶,能够参与市场上6%药物的代谢而具有重要的作用.这类酶与酒精的消耗、糖尿病、肥胖症以及厌食症等密切相关,引起了广泛的研究兴趣.目前尚未见从原子水平上对这种酶在不同乙醇浓度下构象行为的研究.基于此,本文研究了花生四烯酸(AA)与CYP2E1复合物结构在不同乙醇浓度下构象与能量变化的特点.对于在不同乙醇浓度下AA与CYP2E1的复合物结构,采用分子动力学模拟结合自由能计算的方法进行研究.分子动力学模拟结果表明,His109和Lys243氨基酸残基对AA与CYP2E1的结合起到了至关重要的作用.当体系的乙醇浓度较高时,AA的结合能力有所下降,这种结合能力的下降是由于AA与CYP2E1之间氢键相互作用力的减弱所致.本研究对于AA与CYP2E1复合物结构在不同乙醇浓度下,AA分子与CYP2E1分子结合能力下降以及CYP2E1的构象变化给出了详细的解释.本研究工作得到的结论对于实验和理论研究均有重要意义,可为后续细胞色素P450酶类催化活性的研究提供理论支持. 展开更多
关键词 细胞色素P450 2E1 分子动力学模拟 结合自由能计算
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