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黄芪甲苷对缺氧/复氧诱导大鼠心肌细胞能量代谢重编程的影响及机制
被引量:
5
1
作者
张蒙
王新东
《山东医药》
CAS
2021年第31期13-16,共4页
目的探讨黄芪甲苷(AS-Ⅳ)对缺氧/复氧(H/R)诱导大鼠心肌细胞(H9c2细胞)能量代谢重编程的影响及机制。方法常规培养H9c2细胞,细胞贴壁后随机分组。空白对照组正常培养,缺氧/复氧组(H/R组)放至95%N2+5%CO_(2)培养箱缺氧3 h、95%O_(2)+5%CO...
目的探讨黄芪甲苷(AS-Ⅳ)对缺氧/复氧(H/R)诱导大鼠心肌细胞(H9c2细胞)能量代谢重编程的影响及机制。方法常规培养H9c2细胞,细胞贴壁后随机分组。空白对照组正常培养,缺氧/复氧组(H/R组)放至95%N2+5%CO_(2)培养箱缺氧3 h、95%O_(2)+5%CO_(2)培养箱复氧3 h。H/R+黄芪甲苷低剂量组(H/R+AS-ⅣL组)、H/R+黄芪甲苷高剂量组(H/R+AS-ⅣH组)分别加入800、1600μmol/L干预6 h后再H/R处理;H/R+黄芪甲苷高剂量+腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)抑制剂组(H/R+AS-ⅣH+AMPKI组)加入AS-Ⅳ1600μmol/L干预6 h+10μmol/L Compound C干预2 h后再行H/R处理。用紫外分光度法检测各组二磷酸腺苷(ADP)、三磷酸腺苷(ATP)、乙酰辅酶A(Acetyl-CoA),Seahorse XF能量代谢分析法检测细胞外酸化率(ECAR)、氧气消耗速率(OCR),用qRT-PCR检测细胞内AMPK mRNA表达,用Western blotting法检测细胞内AMPKα、磷酸化AMPKα(p-AMPKα)蛋白表达。结果与空白对照组比较,H/R组ADP、ATP低,Acetyl-CoA高,ECAR高,AMPK mRNA及AMPKα、p-AMPKα蛋白相对表达量低(P均<0.05);与H/R组比较,H/R+AS-ⅣL组、H/R+AS-ⅣH组ADP、ATP高,Acetyl-CoA低,OCR高,ECAR低,AMPK mRNA及AMPKα、p-AMPKα蛋白相对表达量高(P均<0.05);与H/R+AS-IVH组比较,H/R+AS-ⅣH+AMPKI组ADP、ATP低,Acetyl-CoA高,OCR低,ECAR高,AMPK mRNA及AMPKα、p-AMPKα蛋白相对表达量低(P均<0.05)。结论黄芪甲苷可改善H/R诱导的大鼠心肌细胞能量代谢重编程,其作用机制可能与激活AMPK信号有关。
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关键词
黄芪甲苷
心肌
细胞
细胞能量代谢重编程
缺氧/复氧
大鼠
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题名
黄芪甲苷对缺氧/复氧诱导大鼠心肌细胞能量代谢重编程的影响及机制
被引量:
5
1
作者
张蒙
王新东
机构
南京中医药大学第三临床学院
南京中医药大学附属中西医结合医院心血管科
出处
《山东医药》
CAS
2021年第31期13-16,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目(81973766)
江苏省研究生科研与实践创新计划项目(SJCX21-0801)
江苏省名老中医专家董其美传承工作室建设项目(苏中医科教〔2019〕10号)。
文摘
目的探讨黄芪甲苷(AS-Ⅳ)对缺氧/复氧(H/R)诱导大鼠心肌细胞(H9c2细胞)能量代谢重编程的影响及机制。方法常规培养H9c2细胞,细胞贴壁后随机分组。空白对照组正常培养,缺氧/复氧组(H/R组)放至95%N2+5%CO_(2)培养箱缺氧3 h、95%O_(2)+5%CO_(2)培养箱复氧3 h。H/R+黄芪甲苷低剂量组(H/R+AS-ⅣL组)、H/R+黄芪甲苷高剂量组(H/R+AS-ⅣH组)分别加入800、1600μmol/L干预6 h后再H/R处理;H/R+黄芪甲苷高剂量+腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)抑制剂组(H/R+AS-ⅣH+AMPKI组)加入AS-Ⅳ1600μmol/L干预6 h+10μmol/L Compound C干预2 h后再行H/R处理。用紫外分光度法检测各组二磷酸腺苷(ADP)、三磷酸腺苷(ATP)、乙酰辅酶A(Acetyl-CoA),Seahorse XF能量代谢分析法检测细胞外酸化率(ECAR)、氧气消耗速率(OCR),用qRT-PCR检测细胞内AMPK mRNA表达,用Western blotting法检测细胞内AMPKα、磷酸化AMPKα(p-AMPKα)蛋白表达。结果与空白对照组比较,H/R组ADP、ATP低,Acetyl-CoA高,ECAR高,AMPK mRNA及AMPKα、p-AMPKα蛋白相对表达量低(P均<0.05);与H/R组比较,H/R+AS-ⅣL组、H/R+AS-ⅣH组ADP、ATP高,Acetyl-CoA低,OCR高,ECAR低,AMPK mRNA及AMPKα、p-AMPKα蛋白相对表达量高(P均<0.05);与H/R+AS-IVH组比较,H/R+AS-ⅣH+AMPKI组ADP、ATP低,Acetyl-CoA高,OCR低,ECAR高,AMPK mRNA及AMPKα、p-AMPKα蛋白相对表达量低(P均<0.05)。结论黄芪甲苷可改善H/R诱导的大鼠心肌细胞能量代谢重编程,其作用机制可能与激活AMPK信号有关。
关键词
黄芪甲苷
心肌
细胞
细胞能量代谢重编程
缺氧/复氧
大鼠
Keywords
astragalosideⅣ
cardiomyocytes
energy metabolism reprogramming
hypoxia/reoxygenation
rats
分类号
R542.2 [医药卫生—心血管疾病]
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作者
出处
发文年
被引量
操作
1
黄芪甲苷对缺氧/复氧诱导大鼠心肌细胞能量代谢重编程的影响及机制
张蒙
王新东
《山东医药》
CAS
2021
5
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