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细胞凋亡检测蛋白AnnexinV的制备纯化和初步评价 被引量:2
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作者 陈大明 谢虹 +8 位作者 祁本忠 张颖梅 贾兵 杨红伟 罗志福 张锦荣 金小海 王凡 马大龙 《原子能科学技术》 EI CAS CSCD 2004年第z1期182-187,共6页
文章利用基因工程技术在大肠杆菌中高效表达了人重组AnnexinV,建立了批量获得AnnexinV工程菌诱导表达的最佳温度、时间和包涵体的操作程序。通过SDS PAGE分析和得到的AnnexinV标记上FITC后能对地塞米松引起Balb/c小鼠胸腺单细胞产生的... 文章利用基因工程技术在大肠杆菌中高效表达了人重组AnnexinV,建立了批量获得AnnexinV工程菌诱导表达的最佳温度、时间和包涵体的操作程序。通过SDS PAGE分析和得到的AnnexinV标记上FITC后能对地塞米松引起Balb/c小鼠胸腺单细胞产生的凋亡进行有效检测的实验表明:经过离子层析纯化后得到了高纯度、有生物活性的人重组AnnexinV纯品。细胞结合分析的结果显示:AnnexinV的KD值为8.53nmol/L,RT为8.79nmol/L。 展开更多
关键词 细胞凋亡 ANNEXIN V 诱导表达和纯化 FITG-Annexin V 细胞结合分析
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细胞凋亡检测剂^(125,131)I-Annexin Ⅴ的制备和初步评价 被引量:1
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作者 陈大明 金小海 +8 位作者 祁本忠 罗志福 贾兵 张颖妹 杨红伟 张锦荣 杜进 马大龙 王凡 《核化学与放射化学》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期209-214,共6页
利用国内基因工程制备的AnnexinⅤ,采用Iodo Gen标记方法,研究了125,131I AnnexinⅤ的标记条件。在每管加入50μgIodo Gen、pH=6~7.8、AnnexinⅤ的质量浓度大于25μg/mL的条件下,反应10min,标记物的标记率大于80%。经PD 10色谱柱纯化后... 利用国内基因工程制备的AnnexinⅤ,采用Iodo Gen标记方法,研究了125,131I AnnexinⅤ的标记条件。在每管加入50μgIodo Gen、pH=6~7.8、AnnexinⅤ的质量浓度大于25μg/mL的条件下,反应10min,标记物的标记率大于80%。经PD 10色谱柱纯化后,标记物的放化纯度大于95%,室温下,标记物能稳定40h。在正常小鼠体内的生物分布实验表明,碘标记的AnnexinⅤ主要浓聚于肝、脾、肾,在体内清除很快。凋亡细胞结合分析表明,碘标记的AnnexinⅤ保持了较好的生物活性,对PS的解离常数K为8.53nmol/L,结合容量RT为1.23×106结合位点数/个细胞。所制备的细胞凋亡检测剂125,131I AnnexinⅤ可以用于进一步的动物模型或人体实验。 展开更多
关键词 细胞凋亡 ANNEXIN V 制备 碘标记 稳定性 细胞结合分析 磷脂酰丝氨酸基团 核医学显像剂
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