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题名改进快速细胞破碎法鉴定转化子DNA
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作者
潘光武
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机构
中国农业科学院兰州兽医研究所
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出处
《甘肃畜牧兽医》
北大核心
1994年第2期9-10,共2页
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文摘
使用改进的破粹细胞凝胶缓冲液（Ｃｒａｃｋｉｎｇｇｅｌｂｕｆｆｅｒ），增加了该凝胶缓冲液内的ＢＤＴＡ和蔗糖浓度，并用氯霉素扩增的方法代替菌落刮取的操作程序，将裂解含转化子的受体菌大肠杆菌Ｋ１２ＨＢ１０１或ＪＭ１０７先作冷处理，再经４０℃水浴，离心沉淀解聚的核蛋白，ＳＤＳ蛋白质复合物及细胞碎片，取上清液在０．７％的琼脂糖胶上作水平电泳５小时，在紫外检测仪下直接观察重组质粒ＰＢＲ３２２或ｐＵＣ１９的ＤＮＡ区带，取得较满意的结果。
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关键词
DNA
细胞破碎法
鉴定
禽病
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分类号
S854.44
[农业科学—临床兽医学]
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题名氯化血红素提取中超声波细胞破碎条件的研究
被引量：11
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作者
马永征
宋宏新
李敏康
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机构
陕西科技大学生命科学与工程学院
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出处
《陕西科技大学学报（自然科学版）》
2005年第2期41-44,共4页
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文摘
将超声波细胞破碎法应用于氯化血红素的提取,研究了破碎功率、时间和红细胞浓度(以红细胞与加入水的比例表示,V红细胞∶V水)对红细胞破碎程度的影响。实验得出,红细胞破碎的最佳条件为:超声波破碎功率为200W,时间为10min,红细胞与加入水的比例为5∶1。
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关键词
超声波
氯化血红素
细胞破碎法
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Keywords
supersonic wave
hemin
disrupt red cell
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分类号
Q681
[生物学—生物物理学]
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题名大肠埃希菌周质抗体细胞释放工艺方法研究
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作者
陈璩
罗勤
夏亮
王明蓉
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机构
中国医药集团总公司四川抗菌素工业研究所
成都希尔思生物分子有限公司
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出处
《中国抗生素杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第4期270-273,共4页
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文摘
本文应用细胞裂解液提取法、超声波细胞破碎法、细胞冻融法、bugbuster提取法和高压细胞破碎法,对比研究了从大肠埃希菌周质中提取可溶性抗体的相关参数,并通过SDS-PAGE电泳,BCA蛋白浓度测定和ELISA法检测了上述四种方法的有效性。结果表明,对于试验室小试规模的抗CEA抗体的细胞释放,超声法破碎,提取的目的抗体量最多,优于细胞裂解液提取法,冻融法和bugbuster法,最佳条件为:细胞缓冲液与湿菌体的比例为5mL/g,磁力搅拌混匀,冰浴中以250W功率,超声波破碎:4s工作5s间隔140次。另外,对于大规模抗体的制备,高压破碎仪在850Pa下,破碎两次效果最佳。
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关键词
大肠埃希菌
细胞裂解液提取法
超声波破碎法
高压细胞破碎法
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Keywords
Escherichia coli
Extraction buffer method
Ultrasonic disruption
High-pressure cracker
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分类号
Q511
[生物学—生物化学]
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题名植物叶片基因组DNA快速提取方法
被引量：8
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作者
迟婧
耿丽丽
高继国
束长龙
张杰
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机构
东北农业大学生命科学学院
中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室
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出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第9期51-57,共7页
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基金
国家高技术研究发展计划"863项目"(2013AA102701)
转基因重大专项(2011ZX08009-003-001)
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文摘
为了满足分子生物学研究中大量植株基因需要PCR检测的需求,建立了一种无需研磨、无需有机试剂抽提的快速提取植物叶片基因组DNA的方法。通过比较基因组DNA的浓度及PCR检测结果,获得了最佳提取条件,即约50 mg叶片加入150μL含1%β-巯基乙醇的TE提取液,快速破碎1 min。破碎后的样品4℃13 500×g离心1 min,上清于-20℃冷冻后室温融解,4℃、13 500×g离心1 min,离心后收集的上清溶液即可用于PCR检测。整个提取过程仅需10-12 min,具有样品用量小、操作简单、廉价、高效等优点。使用此方法提取的烟草、水稻、大豆、玉米、油菜和花生的基因组DNA均可用于PCR扩增,并可成功扩增长度为3 244 bp的基因片段。此方法提取的基因组DNA也可用于对未知基因的扩增,获得4条新的花生actin基因序列。
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关键词
基因组DNA
快速提取
细胞破碎法
PCR
扩增
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Keywords
Genomic DNA
Rapid extraction
Cell disruption
PCR amplification
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分类号
Q943.2
[生物学—植物学]
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题名藻胆蛋白的分离纯化研究进展
被引量：9
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作者
郑蔚然
丁玉庭
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机构
浙江工业大学生物与环境工程学院
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出处
《微生物学杂志》
CAS
CSCD
2008年第4期70-73,共4页
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文摘
藻胆蛋白(phycobiliprotein,PBP)的生物活性使其具有广泛的应用前景,藻胆蛋白的分离纯化一直是国内外的研究热点。综述了近年来国内外藻胆蛋白的分离纯化进展,主要包括提取原料、细胞破碎法和分离纯化3个方面。
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关键词
藻胆蛋白
提取原料
细胞破碎法
分离纯化
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Keywords
phycobiliprotein （PBP）
raw material
cell-disruption
separation and purification
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分类号
Q949.2
[生物学—植物学]
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题名玫瑰花红色素提取工艺的改进及应用研究
被引量：4
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作者
柳滢春
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机构
中山火炬职业技术学院
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出处
《安徽农业科学》
CAS
2012年第8期4854-4855,共2页
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基金
中山市农业科技攻关项目(20114A236)
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文摘
[目的]对玫瑰花红色素的提取工艺进行改进,并进行实际应用。[方法]在浸提前,采用冻融-研磨法破碎细胞,并将改进工艺与原工艺进行比较。[结果]新改进的工艺对玫瑰花色素的提取量比原工艺提高24.50%,且新工艺简单实用;玫瑰花红色素在不同的pH条件下显示不同的颜色;将自制的玫瑰花红色素加入白酒、白醋及饮料中制备出特色玫瑰花系列产品,产品性质稳定。[结论]该研究为天然玫瑰红色素的进一步开发和利用提供了依据。
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关键词
玫瑰
红色素
浸提
冻融-研磨联合细胞破碎法
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Keywords
Rose
Red pigment
Extraction
Freezing -thawing and grinding combined cell -break method
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分类号
S573.7
[农业科学—作物学]
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