应用抑制消减杂交克隆内皮细胞内毒素刺激后相关基因 被引量：10

1

作者 梁自文 罗向东 杨宗城 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期336-338,共3页

提取人脐静脉内皮细胞经内毒素刺激 6h后的mRNA并合成cDNA ,与对照组进行抑制消减杂交 ,经菌落斑点杂交筛选出阳性克隆 ,进行测序和同源性分析 ,并采用Northern杂交验证新的cDNA序列。共获得 2 5条差异表达基因 ,涉及与编码炎症介质、... 提取人脐静脉内皮细胞经内毒素刺激 6h后的mRNA并合成cDNA ,与对照组进行抑制消减杂交 ,经菌落斑点杂交筛选出阳性克隆 ,进行测序和同源性分析 ,并采用Northern杂交验证新的cDNA序列。共获得 2 5条差异表达基因 ,涉及与编码炎症介质、胞内信号传导、细胞骨架、细胞凋亡和能量代谢相关的基因 ,其中 3条为新基因序列。结果表明 ,抑制消减杂交技术有效地克隆了内皮细胞内毒素刺激后相关基因 ,有助于阐明内毒素激活血管内皮细胞的机制 。 展开更多

关键词 抑制消减杂交 克隆 内皮细胞 内毒素 相关基因 分子机制

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幽门螺杆菌细胞毒素相关基因A及细胞毒素相关蛋白A研究进展 被引量：4

2

作者 吴炜景 赵亚刚 《实用医学杂志》 CAS 2008年第19期3439-3441,共3页

1983年．澳大利亚学者Marshall和Warren从慢性胃炎患者的胃黏膜活检标本中分离出幽门螺杆菌（Helicobacter pylori，以下简称耶），成为胃细菌学研究领域的重要突破。25年来，人们对坳从基础到临床进行了深入细致的研究，逐步认识到咖... 1983年．澳大利亚学者Marshall和Warren从慢性胃炎患者的胃黏膜活检标本中分离出幽门螺杆菌（Helicobacter pylori，以下简称耶），成为胃细菌学研究领域的重要突破。25年来，人们对坳从基础到临床进行了深入细致的研究，逐步认识到咖与慢性胃炎、消化性溃疡、胃MALT淋巴瘤、胃癌以及某些胃肠道外疾病有密切关系。1994年，世界卫生组织国际癌症研究机构（IARC）正式将耶列为Ⅰ类（即肯定的）致癌原。据2000年资料统计．全球每年约有65万人因胃癌死亡． 展开更多

关键词 幽门螺杆菌细胞毒素相关基因A 细胞毒素相关蛋白A 胃MALT淋巴瘤 慢性胃炎患者 胃肠道外疾病 世界卫生组织 消化性溃疡 活检标本

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滴金法检测幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白A抗体试剂盒的研制及应用

3

作者 侯瑜 张菊 +3 位作者 李质馨 田洪艳 刘晓冬 徐冶 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期520-520,共1页

目的　建立一种快速、简易的检测血清中抗幽门螺杆菌 (Hp)细胞毒素相关蛋白A(CagA)抗体的胶体金免疫渗滤法 (DIGFA)。方法　采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒 ,标记葡萄球菌A蛋白 (SPA) ,将重组的CagA抗原固定于硝酸纤维素膜上 ,制... 目的　建立一种快速、简易的检测血清中抗幽门螺杆菌 (Hp)细胞毒素相关蛋白A(CagA)抗体的胶体金免疫渗滤法 (DIGFA)。方法　采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒 ,标记葡萄球菌A蛋白 (SPA) ,将重组的CagA抗原固定于硝酸纤维素膜上 ,制成免疫渗滤试剂盒。血清中抗CagA抗体与试剂盒上金标记物及硝酸纤维素膜上的固相抗原结合后 ,形成肉眼可见的红色斑点。结果　用DIGFA与酶联免疫吸附试验 (ELISA)试剂盒对比检测了 32 6份血清标本中抗CagA抗体 ,本方法的特异性为 95 .8% ,敏感性为 97.3% ,两种方法符合率为 96 .6 %。结论　DIGFA检测血清中的抗CagA抗体特异性强、灵敏度高、简便快速 ,无需特殊仪器设备 。 展开更多

关键词 幽门螺杆菌 细胞毒素相关蛋白A 抗体 胶体金免疫渗滤法

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用单克隆抗体筛选小细胞肺癌相关抗原基因

4

作者 李斯德 曹晓波 +2 位作者 王斌 张倩 莫忠根 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1995年第4期263-263,共1页

用分子生物学技术克隆肿瘤相关抗原基因对认识肿瘤抗原本质、深入研究肿瘤抗原的结构和功能、研究肿瘤多肽疫苗有重要意义。我们已获得一组抗人小细胞肺癌单克隆抗体，并在体外证实该抗体所识别的抗原在靶细胞有较好的特异性和较高分布... 用分子生物学技术克隆肿瘤相关抗原基因对认识肿瘤抗原本质、深入研究肿瘤抗原的结构和功能、研究肿瘤多肽疫苗有重要意义。我们已获得一组抗人小细胞肺癌单克隆抗体，并在体外证实该抗体所识别的抗原在靶细胞有较好的特异性和较高分布密度，是多肽性抗原决定簇。在此基础上，以抗体为探针，筛选小细胞肺癌基因库，目的在于寻找编码抗体所识别抗原的肿瘤相关基因。 展开更多

关键词 小细胞肺癌 单克隆抗体 肿瘤相关抗原 肿瘤抗原 基因 体外 多肽疫苗 原基 结构和功能 筛选

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TLR5rs5744168基因多态性与抗中性粒细胞胞浆抗体相关性小血管炎的相关性 被引量：2

5

作者 何林檩 薛超 +3 位作者 廖蕴华 韦素珍 龚爱媚 赖彦妃 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第17期2821-2825,共5页

目的:探讨基因TLR5 R392X(C>T)(rs5744168)多态性与抗中性粒细胞胞浆抗体相关性小血管炎(ANCA相关性小血管炎,AAV)的相关性。方法:利用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析法(PCR-RFLP)来鉴定120例AAV患者和212例正常人的TLR5 R3... 目的:探讨基因TLR5 R392X(C>T)(rs5744168)多态性与抗中性粒细胞胞浆抗体相关性小血管炎(ANCA相关性小血管炎,AAV)的相关性。方法:利用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析法(PCR-RFLP)来鉴定120例AAV患者和212例正常人的TLR5 R392X基因型,并收集资料进行分析。结果 :(1)两组TT型均缺失,AAV组CC、CT型频率分别为82.50%、17.70%,对照组分别为88.68%、11.32%,C和T等位基因分布频率AAV组为91.25%、8.75%,对照组为94.34%、5.66%,两组基因型及等位基因分布频率比较差异无统计学意义(P<0.05)。(2)AAV组中两种基因型血沉、尿蛋白定量等水平比较差异有统计学意义(P<0.05),CC型较高。(3)将单因素进行二元Logistic回归分析,发现TLR5 R392X基因多态性对AAV患病风险无关联,总胆固醇与AAV发病有关联。结论:TLR5 R392X基因可能与广西AAV患者的遗传易感性不相关,可能与其血沉、尿蛋白定量等水平存在关联。 展开更多

关键词 抗中性粒细胞胞浆抗体相关性小血管炎 TLR5 单核苷酸多肽性 基因

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幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白A在特发性血小板减少性紫癜发病机制中的作用 被引量：9

6

作者 雷瑚仪 赵谢兰 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2012年第1期58-60,共3页

目的目前,认为幽门螺杆菌(helicobacter pylori,Hp)感染是引起特发性血小板减少性紫癜(idiopathic thrombo-cytopenic purpura,ITP)的病因之一。研究幽门螺杆菌细胞毒素相关基因蛋白A(cytotoxin-associated gene protein,cagA)与特发性... 目的目前,认为幽门螺杆菌(helicobacter pylori,Hp)感染是引起特发性血小板减少性紫癜(idiopathic thrombo-cytopenic purpura,ITP)的病因之一。研究幽门螺杆菌细胞毒素相关基因蛋白A(cytotoxin-associated gene protein,cagA)与特发性血小板减少性紫癜的血小板相关IgG抗体(platelet associated IgG,PA-IgG)及血小板数量变化的关系有助于探索Hp感染引起ITP的机制。文中通过检测ITP患者血清中cagA、PA-IgG和PLT数量,分析Hp感染与ITP发生的关系。方法快速尿素酶试验(rapid urease test,RUT)及14C尿素呼气试验(UBT)检测Hp。60例ITP患者分为Hp-、Hp+cagA-及Hp+cagA+3组,酶联免疫法测定外周血cagA、PA-IgG,用血细胞仪测定血小板计数,并比较抗Hp治疗前后的变化。结果 Hp+cagA+组的PA-IgG水平与Hp-和Hp+cagA-组比较明显升高(P<0.05),血小板计数与Hp-和Hp+cagA-组比较明显降低(P<0.05)。Hp+cagA-组的PA-IgG水平及血小板计数与Hp-组相比无统计学意义显著性差异(P>0.05)。Hp+cagA-组抗Hp治疗后PA-IgG水平下降及血小板计数上升不明显(P>0.05)。Hp+cagA+组抗Hp治疗后PA-IgG水平下降及血小板计数上升明显(P<0.01)。结论 Hp感染者可能由于其cagA导致PA-IgG升高而使血小板计数降低,参与ITP的发病机制。 展开更多

关键词 幽门螺杆菌 细胞毒素相关蛋白A 特发性血小板减少性紫癜 血小板相关抗体

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基于生物信息学鉴定ANCA相关性血管炎与新型冠状病毒感染的关键表达基因及潜在治疗靶点

7

作者 钭张琪 杨华 +2 位作者 张彬娥 张旭珍 金烈 《中国防痨杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第S01期9-12,共4页

目的:利用生物信息学方法挖掘抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)相关性血管炎(AAV)与新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的关键表达基因,寻找潜在治疗靶点。方法:在GEO数据库中下载GSE104948数据集,利用R语言筛选AAV的差异表达基因(DEGs);在基因数据... 目的:利用生物信息学方法挖掘抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)相关性血管炎(AAV)与新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的关键表达基因,寻找潜在治疗靶点。方法:在GEO数据库中下载GSE104948数据集,利用R语言筛选AAV的差异表达基因(DEGs);在基因数据库Gene Card、NCBI、KEGG和OMIM中下载COVID-19相关基因;将这两种疾病的基因簇取交集,以获取AAV和COVID-19的重叠基因(co-DEGs)。对co-DEGs进行GO和KEGG功能富集分析。利用STRING在线数据库对co-DEGs进行蛋白互作分析,Cytoscape软件用于构建并可视化互作网络,其插件MCODE和Cyto Hubba分别用于关键基因的筛选。最后,对关键基因进行诊断价值分析。结果:在AAV的基因表达谱中,共鉴定385个DEGs,包括161个上调基因和224个下调基因;四个基因数据库中共有4434个与COVID-19相关的基因;两者取交集共鉴定得到45个与AAV和COVID-19相关的关键表达基因。功能富集分析结果显示,co-DEGs与白细胞游走、补体和凝血级联反应、病毒蛋白与细胞因子及细胞因子受体的相互作用等通路密切相关。最后,基于多种算法得到潜在候选基因CCR1、CCR2、MMP9、CASP1以及CD163,并发现这些基因都具有较高地诊断价值。结论:本研究表明CCR1、CCR2、MMP9、CASP1、CD163可能是诊断AAV和COVID-19的关键基因。 展开更多

关键词 抗中性粒细胞胞浆抗体相关性血管炎 新型冠状病毒肺炎 GEO数据库 生物信息学分析 差异表达基因 关键基因

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幽门螺杆菌相关性胃肠粘膜病患儿血清CagA抗体、VacA抗体检测及其临床意义 被引量：6

8

作者 阎晓莉 王宝珠 拜康利 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第12期729-731,共3页

为了解幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)相关性胃肠粘膜病患儿血清中细胞毒素相关基因抗原(CagA)、空泡毒素抗原(VacA)的有无及其临床意义,应用免疫印迹法对46例慢性胃炎和25例消化性溃疡患儿血清CagA抗体、VacA抗体进行了检... 为了解幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)相关性胃肠粘膜病患儿血清中细胞毒素相关基因抗原(CagA)、空泡毒素抗原(VacA)的有无及其临床意义,应用免疫印迹法对46例慢性胃炎和25例消化性溃疡患儿血清CagA抗体、VacA抗体进行了检测。结果:①慢性胃炎小儿血清H.Pylori CagA抗体(+)、VacA抗体(+)检出率为28.3％,消化性溃疡患儿为64.0％,两组比较差异有显著性(P<0.05);②对慢性胃炎炎症活动程度进行分组检测,中、重度急性活动性胃炎患儿中H.Pylori CagA抗体(+)、VacA抗体(+)检出率为50.0％,与轻症者比较差异有显著性(P<0.05)。提示 H.pylori菌株存在不同致病能力,CagA、VacA是致小儿 H.Pylori相关性胃肠粘膜病重要的毒力因素;通过检测CagA、VacA抗体,可及时指导临床治疗。 展开更多

关键词 幽门螺杆菌相关性胃肠粘膜病 检测 临床意义 儿童 细胞毒素相关基因抗体 空泡毒素抗体

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抗T免疫毒素用于异基因骨髓移植的实验研究及初步应用 被引量：3

9

作者 沈倍奋 黎燕 +3 位作者 陈兴 贺永怀 陈勇 孙瑛勋 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1994年第1期18-22,共5页

异基因骨髓移植是治疗白血病的有效途径,其主要并发症是供体骨髓中成熟T细胞介导的移植物抗宿主病(GVHD)。抗人T淋巴细胞的单克隆抗体与蓖麻毒素组成的抗T免疫毒素能特异性地去除T细胞。体外实验证明它们能有效地抑制靶细胞的蛋白质合成... 异基因骨髓移植是治疗白血病的有效途径,其主要并发症是供体骨髓中成熟T细胞介导的移植物抗宿主病(GVHD)。抗人T淋巴细胞的单克隆抗体与蓖麻毒素组成的抗T免疫毒素能特异性地去除T细胞。体外实验证明它们能有效地抑制靶细胞的蛋白质合成和T细胞功能。在1×10^(-9)mol/L浓度时对靶细胞的杀伤可达到99.9％,而对非靶细胞则无细胞毒作用。该浓度的抗T免疫毒素对骨髓中造血干祖细胞的增殖没有明显影响。在10例异基因骨髓移植中(8例为HLA二个位点不相同的移植)用它在体外清除供体骨髓中的T细胞,结果未见明显的GVHD发生。 展开更多

关键词 抗T免疫毒素 异基因骨髓移植 实验研究 T细胞 移植物抗宿主病 单克隆抗体 蓖麻毒素

全文增补中

鬼臼毒素衍生物LN-13诱导多药耐药细胞K562/A02凋亡及其机制 被引量：1

10

作者 高晨光 张猜 +3 位作者 赵安妮 李楠 陈虹 曹波 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期100-104,共5页

目的研究新型鬼臼毒素衍生物LN-13对多药耐药肿瘤细胞株K562/A02产生的凋亡作用及潜在机制。方法MTT法测定LN-13和阳性对照药VP-16抑制K562/A02细胞48 h后的生长情况及其IC50值,Hoechst 33342、PI双染色观察LN-13作用K562/A02细胞48 h... 目的研究新型鬼臼毒素衍生物LN-13对多药耐药肿瘤细胞株K562/A02产生的凋亡作用及潜在机制。方法MTT法测定LN-13和阳性对照药VP-16抑制K562/A02细胞48 h后的生长情况及其IC50值,Hoechst 33342、PI双染色观察LN-13作用K562/A02细胞48 h后的形态变化,流式细胞术测定LN-13作用K562/A02细胞48 h的凋亡情况,RTPCR检测LN-13作用K562/A02细胞后Bcl-2、Bax、Caspase-3、mdr-1基因表达的影响,Western blot检测LN-13作用K562/A02细胞后P-gp的表达情况。结果 LN-13对K562/A02细胞生长有显著地抑制,IC50值3.32μmol·L^(-1),Hoechst 33342、PI双染色观察到LN-13作用后,K562/A02细胞发生明显凋亡形态。流式细胞术检测LN-13(2、4、8μmol·L^(-1))作用K562/A02细胞48 h后,出现剂量递增趋势的凋亡比例,分别达到15.0%、48.0%、68.96%。另外,随着LN-13剂量增加,K562/A02细胞的Bax、Caspase-3基因表达增加,mdr-1基因表达减少,另外也下调了P-gp表达,差异有统计学意义。结论 LN-13可诱导多药耐药肿瘤细胞K562/A02产生凋亡作用,其机制可能是通过抑制P-gp蛋白表达及凋亡相关基因表达。 展开更多

关键词 K562细胞 K562/A02细胞 新型鬼臼毒素衍生物LN-13 凋亡 P糖蛋白 多药耐药 凋亡相关基因

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CD52单抗通过清除活化T细胞对IL-10基因敲除小鼠结肠炎的干预作用 被引量：1

11

作者 刘建辉 朱维铭 《肠外与肠内营养》 北大核心 2018年第4期243-247,共5页

目的:观察CD52单抗对IL-10基因敲除小鼠结肠炎的干预作用并探究其干预作用的可能机制。方法:给予CD52单抗治疗后,计算疾病活动度指数,检测结肠病理学评分,外周血、脾脏及结肠固有层单个核细胞中T淋巴细胞的清除情况,结肠组织炎性因子水... 目的:观察CD52单抗对IL-10基因敲除小鼠结肠炎的干预作用并探究其干预作用的可能机制。方法:给予CD52单抗治疗后,计算疾病活动度指数,检测结肠病理学评分,外周血、脾脏及结肠固有层单个核细胞中T淋巴细胞的清除情况,结肠组织炎性因子水平及相关细胞因子的m RNA转录水平的变化。结果:CD52单抗能有效降低疾病活动度评分、结肠病理学评分,能显著地清除模型小鼠外周血、脾脏及结肠固有层单个核细胞中CD3+T细胞,明显降低结肠组织中IFN-γ、IL-17的表达水平,同时增加了IL-5和IL-13的表达,并相应下调TNF-α、IFN-γ、IL-17和IL-6及炎症调控因子IL-12和IL-23的m RNA表达水平。结论:抗CD52单抗能有效地治疗IL-10基因敲除小鼠的结肠炎,其干预效果与活化T细胞的直接清除相关,此外,其对IL-12/23通路的下调及Th2反应的诱导作用亦可能与干预作用相关。 展开更多

关键词 抗CD52单克隆抗体 IL-10基因敲除小鼠 T细胞清除 T细胞相关炎症

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转基因山羊在其乳汁中表达单克隆抗体

12

作者 王颖 《生物技术通报》 CAS CSCD 1995年第5期21-22,共2页

Genzyme Transgenics Corp(Framingham,MA)已证实,转基因山羊可在乳汁中产生复合单克隆抗体(MAb);该公司与Bristol-Myers Squibb Co.(BMS) (Princeton,NJ)签定一项协议,使养育在马萨诸塞州农场的这些转基因山羊表达BMS的抗癌BR96 Mab。 ... Genzyme Transgenics Corp(Framingham,MA)已证实,转基因山羊可在乳汁中产生复合单克隆抗体(MAb);该公司与Bristol-Myers Squibb Co.(BMS) (Princeton,NJ)签定一项协议,使养育在马萨诸塞州农场的这些转基因山羊表达BMS的抗癌BR96 Mab。 Genzyme Transgenic公司已经证实,可以在山羊乳汁中高水平表达人抗-凝集蛋白抗-凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)。它还证明,如果按相同的遗传工程方法处理小鼠胚胎。 展开更多

关键词 转基因山羊 单克隆抗体 山羊乳汁 马萨诸塞州 小鼠胚胎 肿瘤相关抗原 工程方法 高水平表达 细胞培养 生物技术革命

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结直肠腺瘤危险因素及幽门螺杆菌感染与腺瘤特征和血清胃泌素水平的相关性研究 被引量：24

13

作者 陈志涛 王萍 +2 位作者 孙圣斌 张姮 吴杰 《中国全科医学》 CAS 北大核心 2017年第2期154-158,共5页

背景幽门螺杆菌(Hp)感染不仅是胃癌的主要致病因素,而且与结直肠腺瘤相关,但在不同种族间的结论不一致。目的探讨结直肠腺瘤患者的危险因素,以及Hp感染与腺瘤特征和血清胃泌素水平的相关性。方法回顾性收集2011—2015年华中科技大学同... 背景幽门螺杆菌(Hp)感染不仅是胃癌的主要致病因素,而且与结直肠腺瘤相关,但在不同种族间的结论不一致。目的探讨结直肠腺瘤患者的危险因素,以及Hp感染与腺瘤特征和血清胃泌素水平的相关性。方法回顾性收集2011—2015年华中科技大学同济医学院附属武汉市中心医院收治的结直肠腺瘤患者1 000例为结直肠腺瘤组,同时收集同时期本院通过结肠镜行结肠癌筛查未见肠道异常者1 500例为对照组。收集两组患者一般资料,采用14C尿素呼气试验检测Hp感染情况。酶联免疫吸附试验法测定血清细胞毒素相关基因A(Cag A)蛋白和胃泌素水平。结直肠腺瘤组患者根据Hp感染情况分为Hp感染者(n=623)及非Hp感染者(n=377),Hp感染者根据是否表达Cag A蛋白进一步分为Cag A蛋白(+)(n=510)和Cag A蛋白(-)(n=113)。结直肠腺瘤危险因素采用多因素Logistic回归分析。结果结直肠腺瘤组患者Hp感染率较对照组升高〔62.30%(623/1 000)与54.33%(815/1 500),OR=1.39,95%CI(1.18,1.64),P<0.001〕。多因素Logistic回归分析结果显示:高脂血症、结肠癌家族史及Hp感染为结直肠腺瘤的独立危险因素(P<0.05)。结直肠腺瘤患者Hp感染者与非Hp感染者腺瘤数目、腺瘤蒂部分型、腺瘤病理类型比较,差异均无统计学意义(P>0.05);Hp感染者与非Hp感染者腺瘤大小及腺瘤伴高级别上皮内瘤变发生率比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结直肠腺瘤患者Cag A蛋白(+)Hp感染者血清胃泌素水平〔(65.78±9.23)ng/L〕高于Cag A蛋白(-)Hp感染者〔(55.04±8.05)ng/L〕和非Hp感染者〔(51.04±4.95)ng/L〕(P<0.05)。结论高脂血症、结肠癌家族史及Hp感染为结直肠腺瘤的危险因素,结直肠腺瘤患者Cag A蛋白(+)Hp感染者血清胃泌素水平升高。推测Cag A蛋白所释放的促炎因子可能会促进结直肠上皮细胞的增殖,导致Cag A蛋白(+)Hp感染人群结直肠上皮细胞增殖活跃、异常增生,从而增加结直肠腺瘤的发生。 展开更多

关键词 结直肠肿瘤 幽门螺杆菌 细胞毒素相关基因A 胃泌素类

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幽门螺杆菌细胞毒导致胃癌发生的作用机制 被引量：16

14

作者 胡洁 孙哲 梅林 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期156-159,共4页

幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染导致胃癌的重要原因之一是它的细胞毒作用。细胞毒素相关基因致病岛(cytotoxin-associated gene pathogenicity island,cagPAI)和空泡毒素A(vacuolatingcytotoxin A,vacA)是Hp最典型的细胞毒代表... 幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染导致胃癌的重要原因之一是它的细胞毒作用。细胞毒素相关基因致病岛(cytotoxin-associated gene pathogenicity island,cagPAI)和空泡毒素A(vacuolatingcytotoxin A,vacA)是Hp最典型的细胞毒代表。cagPAI可诱发促炎因子的释放及增强促上皮细胞增殖信号的兴奋程度;vacA则导致上皮空泡化和病原体黏附。明确cagPAI和vacA在胃癌发生发展过程中的作用,将有利于全面理解Hp感染对机体造成的危害以及根治Hp感染的重要意义。 展开更多

关键词 幽门螺杆菌 胃癌 细胞毒素相关基因致病岛 细胞毒素相关基因A 空泡毒素A IV型分泌系统 EPYIA基序

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幽门螺旋杆菌毒力因子CagA介导的ERK信号通路活化对胃癌细胞增殖和凋亡的影响 被引量：9

15

作者 刘粉霞 陈丽 +1 位作者 孙宁 吴亚薇 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期1063-1068,共6页

目的:探讨幽门螺旋杆菌毒力因子细胞毒素相关基因A蛋白(CagA)对细胞外调节蛋白激酶(ERK)信号通路的作用,阐明CagA的致癌机制。方法:构建pcDNA3.1/CagA真核表达载体,将胃癌AGS细胞分为空白对照组(空载体转染)、CagA转染组(GZ7/CagA转染)... 目的:探讨幽门螺旋杆菌毒力因子细胞毒素相关基因A蛋白(CagA)对细胞外调节蛋白激酶(ERK)信号通路的作用,阐明CagA的致癌机制。方法:构建pcDNA3.1/CagA真核表达载体,将胃癌AGS细胞分为空白对照组(空载体转染)、CagA转染组(GZ7/CagA转染)和CagA + ERKi组(ERK1/2抑制剂预处理+GZ7/CagA转染),采用Western blotting法测定各组细胞中CagA、磷酸化ERK(p-ERK)、总ERK (T-ERK)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和激活型caspase-3(cleaved caspase-3)蛋白表达水平,采用CCK-8法检测各组胃癌AGS细胞活性,采用流式细胞术检测胃癌AGS细胞凋亡率。结果:与空白对照组比较,CagA转染组胃癌细胞中CagA、p-ERK和Bcl-2蛋白表达水平明显升高( P <0.01),Bax和cleaved caspase-3蛋白表达水平明显降低( P <0.01);与CagA转染组比较,CagA+ERKi组胃癌细胞中p-ERK和Bcl-2蛋白表达水平明显降低( P <0.01),Bax和cleaved caspase-3蛋白表达水平明显升高( P <0.01);与CagA转染组比较,CagA+ERKi组各时间点胃癌细胞活性明显降低( P <0.01);与CagA转染组比较,CagA+ERKi 组胃癌细胞凋亡率明显升高( P <0.05)。结论:幽门螺旋杆菌毒力因子CagA可抑制胃癌细胞凋亡,促进胃癌细胞增殖,其机制可能与CagA活化ERK信号通路有关。 展开更多

关键词 幽门螺旋杆菌 细胞毒素相关基因A蛋白 细胞外调节蛋白激酶 胃癌细胞 细胞增殖 细胞凋亡

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LAIR基因的克隆、原核表达及免疫反应性鉴定 被引量：5

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作者 谢鑫 欧阳为明 +4 位作者 薛江楠 张新海 刘飞 庄然 金伯泉 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期118-120,123,共4页

目的 :克隆和表达淋巴细胞相关免疫球蛋白样受体 (leuko cyte associatedimmunoglobulin likereceptor ,LAIR ) ,鉴定抗LAIR 1单克隆抗体 (mAb)与LAIR 2分子的免疫反应性。方法 :利用RT PCR ,从人外周血单个核细胞 (PBMC)及白血病细胞系... 目的 :克隆和表达淋巴细胞相关免疫球蛋白样受体 (leuko cyte associatedimmunoglobulin likereceptor ,LAIR ) ,鉴定抗LAIR 1单克隆抗体 (mAb)与LAIR 2分子的免疫反应性。方法 :利用RT PCR ,从人外周血单个核细胞 (PBMC)及白血病细胞系Jurkat和HL 6 0中克隆了LAIRcDNA。将LAIR 1的胞膜外区基因及LAIR 2cDNA ,克隆入GST融合蛋白表达载体pGEX 4T 3中。以其转化E .coliBL2 1菌株后 ,在IPTG诱导下进行表达 ,表达产物用谷胱甘肽交联的Sepharose 4B纯化。用间接ELISA法 ,鉴定抗LAIR 1mAb对表达蛋白的免疫反应性。结果 :克隆并表达了LAIR 1和LAIR 2cDNA。同时克隆了 5种新的LAIR 1异型 ,其中从HL 6 0细胞克隆的 2种包含LAIR 1开放读框 (ORF) ,从Ju rkat细胞中克隆的 3种为LAIR 1cDNA片段。mAb鉴定表明LAIR 1与LAIR 2的免疫反应性不同。结论 :LAIR基因的转录、转录后的加工及表达 ,可能与个体和疾病状态有关。LAIR 1和LAIR 展开更多

关键词 淋巴细胞相关免疫球蛋白样受体 单克隆抗体 免疫反应性 RT-PCR 基因转录

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幽门螺杆菌cagA基因与胃粘膜损伤及增殖间关系的探讨 被引量：5

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作者 张霞 屈健宁 沈鼎明 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2002年第1期23-25,共3页

目的：探讨幽门螺杆菌（Ｈｐ）细胞毒素相关蛋白基因（ｃａｇＡ基因）与胃粘膜损伤及增殖的关系。方法：采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）法检测５０例患者Ｈｐ的ｃａｇＡ基因，并经ＨＥ染色评定胃粘膜炎症程度、肠化生、淋巴小结及萎缩的发... 目的：探讨幽门螺杆菌（Ｈｐ）细胞毒素相关蛋白基因（ｃａｇＡ基因）与胃粘膜损伤及增殖的关系。方法：采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）法检测５０例患者Ｈｐ的ｃａｇＡ基因，并经ＨＥ染色评定胃粘膜炎症程度、肠化生、淋巴小结及萎缩的发生率，免疫组化检测胃粘膜细胞核增殖抗原指数（ＰＣＮＡ　ＬＩ％）。结果：３７／５０例含有ｃａｇＡ基因，消化性溃疡ｃａｇＡ基因阳性率高于慢性胃炎（Ｐ＜０．０１）；ｃａｇＡ基因阳性者炎症程度和ＰＣＮＡ　ＬＩ％均高于阴性者（Ｐ　＜０．０５）；但两组肠化生﹑淋巴小结及萎缩发生率差异无显著性（Ｐ　＞０．０５）。结论：ｃａｇＡ基因阳性Ｈｐ感染后可增加胃粘膜的炎性损伤及细胞增殖。ｃａｇＡ基因为Ｈｐ毒力指标之一，但并非致病的单一指标。 展开更多

关键词 幽门螺杆菌 聚合酶链反应 细胞毒素相关蛋白基因

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幽门螺杆菌cagE和virB11基因与胃癌的关系研究 被引量：5

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作者 郭宝文 杨琳 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1366-1368,共3页

目的观察幽门螺杆菌毒力相关基因cagE和virB11基因型与胃癌病理分期、淋巴结受累及远端转移的关系。方法应用PCR技术,进行cagE和virB11基因片段的扩增,分析幽门螺杆菌感染的胃癌患者cagE和virB11基因型的检出率。结果胃癌患者中幽门螺... 目的观察幽门螺杆菌毒力相关基因cagE和virB11基因型与胃癌病理分期、淋巴结受累及远端转移的关系。方法应用PCR技术,进行cagE和virB11基因片段的扩增,分析幽门螺杆菌感染的胃癌患者cagE和virB11基因型的检出率。结果胃癌患者中幽门螺杆菌感染率为54.44%(141/259)。cagE基因检出率为57.45%(81/141),virB11基因检出率为65.25%(92/141)。cagE和virB11基因型(+/-、-/+、+/+、-/-)在贲门癌和非贲门癌患者中的检出率明显不同(χ2=14.53,P=0.002),尤其是cagE+/virB11+基因型;与其他基因型相比,cagE+/virB11+基因型在T2、T3期、淋巴结转移(N0、N1)、无远处转移的癌变组织中呈现出高检出率。结论 cagE+/virB11+基因型与胃癌的浸润、早期淋巴结转移、无远处转移密切相关,可能是一种更具致病性的基因型,在胃癌的发生发展过程中起重要作用。 展开更多

关键词 胃肿瘤 螺杆菌 幽门 细胞毒素相关蛋白基因

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幽门螺杆菌vacA毒性片段与cagA融合基因的构建与表达

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作者 林珊珊 杨致邦 +1 位作者 刘淼 吴利先 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2004年第12期1032-1035,1044,共5页

目的　构建幽门螺杆菌空泡毒素 (VacA)毒性片段和细胞毒素相关蛋白 (CagA)的融合基因 (vlc) ,在原核细胞中表达 ,为Hp双价融合蛋白候选疫苗的研究提供材料。 方法　用GeneSOEing技术将vacA毒性亚单位片段 (v)与cagA保守片段 (c)用疏水... 目的　构建幽门螺杆菌空泡毒素 (VacA)毒性片段和细胞毒素相关蛋白 (CagA)的融合基因 (vlc) ,在原核细胞中表达 ,为Hp双价融合蛋白候选疫苗的研究提供材料。 方法　用GeneSOEing技术将vacA毒性亚单位片段 (v)与cagA保守片段 (c)用疏水性多肽接头 (Gly4Ser) 3 进行拼接 ,构建融合基因vlc,将vlc定向插入原核表达质粒pQE30 ,经DNA测序分析确认后 ,转化E .coliDH5a ,IPTG诱导表达 ,Westernblot分析其抗原性。结果　DNA序列分析表明融合基因的连接顺序、方向正确 ,有一个碱基发生了无义突变。工程菌诱导后可表达相对分子量为 5 8× 10 3 的融合蛋白 ,与预期分子量一致 ,约占菌体总蛋白的 8%。Westernblot显示融合蛋白具有良好的抗原性。结论　融合基因vlc构建成功 ,表达的融合蛋白具有良好的抗原性 ,有望进一步进行免疫保护性机制的研究和Hp疫苗的制备。 展开更多

关键词 幽门螺杆菌 空泡毒素 细胞毒素相关蛋白 融合基因 表达

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血清幽门螺杆菌抗体分型与胃部疾病的关系研究 被引量：35

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作者 何媛 赵晶 林泳 《中国全科医学》 CAS 北大核心 2019年第36期4424-4428,共5页

背景 我国幽门螺杆菌(H.pylori)感染率较高,但并非所有感染者存在着相同的临床结局,这除了与宿主遗传因素及环境因素相关外,可能还与H.pylori菌株基因型有关.目的 探讨血清H.pylori抗体分型与不同胃部疾病的关系及其临床意义.方法 纳入2... 背景 我国幽门螺杆菌(H.pylori)感染率较高,但并非所有感染者存在着相同的临床结局,这除了与宿主遗传因素及环境因素相关外,可能还与H.pylori菌株基因型有关.目的 探讨血清H.pylori抗体分型与不同胃部疾病的关系及其临床意义.方法 纳入2009年1月-2017年12月在广州医科大学附属广州市第一人民医院行胃镜检查并同期进行血清H.pylori抗体检测的患者2650例,根据胃镜及病理结果分为五组,其中慢性非萎缩性胃炎组1011例、慢性非萎缩性胃炎伴糜烂组468例、胃溃疡组795例、慢性萎缩性胃炎/不典型增生组236例、胃癌组140例.入选患者均未曾行H.pylori根除治疗,采用蛋白芯片法对H.pylori特异性抗体CagA、VacA和Ure进行血清学检测.统计分析H.pylori感染率、H.pylori分型与不同胃部疾病之间的关系.结果 各组H.pylori阳性率从高到低依次为慢性萎缩性胃炎/不典型增生组(74.58%)、胃溃疡组(74.34%)、胃癌组(72.14%)、慢性非萎缩性胃炎伴糜烂组(71.58%)和慢性非萎缩性胃炎组(64.49%),各组H.pylori感染率比较,差异有统计学意义(P<0.05).共检出H.pyloriⅠ型感染者1596例,H.pyloriⅡ型感染者259例.各组H.pyloriⅠ型阳性率均高于H.pyloriⅡ型,差异有统计学意义(P<0.05).各组H.pyloriⅠ型阳性率比较,差异有统计学意义(χ2=22.586,P<0.01);其中胃溃疡组H.pyloriⅠ型阳性率高于慢性非萎缩性胃炎/不典型增生组(P<0.005).1596例H.pyloriⅠ型患者中,以CagA+VacA抗体为主,占60.15%(960/1596),其次为VacA抗体,占34.27%(547/1596),CagA抗体占5.58%(89/1596).各组CagA+VacA抗体阳性率均高于本组CagA、VacA抗体阳性率,VacA抗体阳性率均高于本组CagA抗体阳性率(P<0.05).各组CagA抗体阳性率比较,差异有统计学意义(χ2=19.054,P<0.01);其中胃溃疡组高于慢性非萎缩性胃炎组(P<0.005).各组VacA抗体阳性率比较,差异有统计学意义(χ2=20.204,P<0.01);其中慢性非萎缩性胃炎组低于慢性非萎缩性胃炎伴糜烂组及胃溃疡组(P<0.005).各组Ure抗体阳性率比较,差异有统计学意义(χ2=63.967,P<0.01);其中慢性非萎缩性胃炎组高于胃溃疡组、慢性萎缩性胃炎/不典型增生组及胃癌组(P<0.005);慢性非萎缩性胃炎伴糜烂组高于胃溃疡组、慢性萎缩性胃炎/不典型增生组、胃癌组(P<0.005).结论 H.pylori感染与胃部病变密切相关,不同H.pylori菌株基因型的致病性不同;Ⅰ型菌株为胃部疾病的主要致病菌株,且以CagA+VacA抗体均表达者常见. 展开更多

关键词 幽门螺杆菌 幽门螺杆菌抗体 细胞毒素相关基因A 细胞空泡毒素 尿素酶 胃部疾病

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