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牛坏死杆菌白细胞毒素PL2蛋白的生物信息学分析及其原核表达鉴定
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作者 于思雯 肖佳薇 +3 位作者 毕栏 王天硕 贺显晶 郭东华 《黑龙江八一农垦大学学报》 2024年第3期38-43,98,共7页
为确定牛坏死杆菌(Fusobacterium necrophorum)白细胞毒素PL2蛋白的组成结构及生物信息学特性。根据NCBI数据库中的牛坏死杆菌白细胞毒素PL2基因序列及其编码蛋白的氨基酸序列,利用生物信息学软件对PL2蛋白的理化性质、B细胞及T细胞抗... 为确定牛坏死杆菌(Fusobacterium necrophorum)白细胞毒素PL2蛋白的组成结构及生物信息学特性。根据NCBI数据库中的牛坏死杆菌白细胞毒素PL2基因序列及其编码蛋白的氨基酸序列,利用生物信息学软件对PL2蛋白的理化性质、B细胞及T细胞抗原表位等进行了预测研究,并利用原核表达系统构建重组质粒pGEX-6p-1-PL2-1、pGEX-6p-1-PL2-2、pGEX-6p-1-PL2-3,采用SDS-PAGE检测PL2蛋白的表达,将获得的重组蛋白经Western blot验证。PL2蛋白是由332个氨基酸构成的富含丝氨酸的稳定亲水蛋白,二级结构以无规卷曲和α螺旋居多。预测该蛋白含有10个B细胞优势抗原表位和16个T细胞优势抗原表位,利用PCR扩增得到的pGEX-6p-1-PL2-1为228 bp、pGEX-6p-1-PL2-2为300 bp、pGEX-6p-1-PL2-3为588 bp。SDS-PAGE证明3个蛋白成功表达,蛋白大小为34 kDa,Western blot结果表明,该重组蛋白PL2-1具有良好的反应原性。牛坏死杆菌白细胞毒素PL2蛋白为膜外蛋白,不存在跨膜区,含有多个磷酸化位点及多个B细胞、T细胞抗原表位,根据抗原表位预测结果获得的重组蛋白PL2-1具有良好的反应原性,可作为潜在抗原用于牛坏死杆菌病亚单位疫苗研发。 展开更多
关键词 牛坏死杆菌 细胞毒素PL2蛋白 生物信息学分析 原核表达
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亚油酸氧化产物——白细胞毒素和白细胞毒素二醇的研究进展
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作者 宋慧 耿志明 +6 位作者 任双 王道营 杜盼盼 张牧焓 孙冲 刘芳 徐为民 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第5期223-229,共7页
白细胞毒素(leukotoxin,Ltx)和白细胞毒素二醇(leukotoxin diol,Ltxd)是亚油酸的氧化产物,研究表明,Ltx和Ltxd具有细胞毒性,与哺乳动物多种疾病相关,而外源性Ltx和Ltxd的摄入可以引起哺乳动物内分泌紊乱。本文系统综述Ltx和Ltxd的发现... 白细胞毒素(leukotoxin,Ltx)和白细胞毒素二醇(leukotoxin diol,Ltxd)是亚油酸的氧化产物,研究表明,Ltx和Ltxd具有细胞毒性,与哺乳动物多种疾病相关,而外源性Ltx和Ltxd的摄入可以引起哺乳动物内分泌紊乱。本文系统综述Ltx和Ltxd的发现、形成机理、病理和生理学意义、毒性作用以及检测方法,并对未来的研究重点进行展望。 展开更多
关键词 亚油酸 脂质氧化 细胞毒素 细胞毒素二醇
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坏死杆菌白细胞毒素作为腐蹄病亚单位疫苗候选抗原的研究前景 被引量:3
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作者 郭东华 孙东波 +2 位作者 武瑞 范春玲 孙斌 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2009年第3期137-139,共3页
腐蹄病(foot rot)是侵害反刍动物趾间皮肤及深层软组织为主的,严重影响奶牛生产性能和产奶质量的一种常见疾病。由于传统的灭活菌苗具有免疫效果差、副反应严重及大量生产困难等缺点,使腐蹄病基因工程疫苗的研究成为热点。笔者对坏死杆... 腐蹄病(foot rot)是侵害反刍动物趾间皮肤及深层软组织为主的,严重影响奶牛生产性能和产奶质量的一种常见疾病。由于传统的灭活菌苗具有免疫效果差、副反应严重及大量生产困难等缺点,使腐蹄病基因工程疫苗的研究成为热点。笔者对坏死杆菌白细胞毒素作为腐蹄病亚单位疫苗候选抗原研究的最新进展进行综述,希望为腐蹄病亚单位疫苗的研究提供参考。 展开更多
关键词 腐蹄病 坏死杆菌 细胞毒素 亚单位疫苗
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奶牛腐蹄病坏死杆菌分离鉴定及白细胞毒素基因lktA1序列分析 被引量:3
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作者 高晶 李春秋 +9 位作者 姚爽 张立春 王欣宇 王志慧 赵喜文 魏姗 王恩雨 孙东波 武瑞 郭东华 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第9期2308-2312,共5页
为分离纯化奶牛腐蹄病坏死杆菌,分析其与其他菌株的亲缘关系,本研究利用坏死杆菌白细胞毒素特异性引物,对奶牛腐蹄病病牛蹄部拭子样品进行了PCR检测,利用厌氧培养基对PCR检测阳性样品进行了坏死杆菌的分离培养,以分离的坏死杆菌基因组DN... 为分离纯化奶牛腐蹄病坏死杆菌,分析其与其他菌株的亲缘关系,本研究利用坏死杆菌白细胞毒素特异性引物,对奶牛腐蹄病病牛蹄部拭子样品进行了PCR检测,利用厌氧培养基对PCR检测阳性样品进行了坏死杆菌的分离培养,以分离的坏死杆菌基因组DNA为模板,对白细胞毒素基因进行了克隆和序列分析。结果显示,9份奶牛腐蹄病病牛蹄部拭子样品PCR检测结果均为阳性,对其中一份样品中的坏死杆菌进行分离培养,获得了纯培养物,命名为bFR13-1。坏死杆菌bFR13-1菌株白细胞毒素基因测序结果显示,与GenBank已发表的H05、A25和B35菌株的白细胞毒素基因在核苷酸水平的同源性分别为98.40%、98.35%和90.79%,推导氨基酸的同源性分别为97.7%、97.6%和89.0%。进化树分析结果显示,坏死杆菌bFR13-1菌株白细胞毒素与H05菌株的同源性最高,bFR13-1菌株与H05菌株和A25菌株呈较近亲缘关系。结果表明,不同坏死杆菌分离株的白细胞毒素呈现一定的变异性,这种变化是否与坏死杆菌致病性相关,值得深入研究。 展开更多
关键词 奶牛腐蹄病 坏死杆菌 细胞毒素
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影响坏死梭杆菌分泌白细胞毒素因素的研究 被引量:2
5
作者 冯二凯 陈立志 +3 位作者 刘晓颖 汪孙杰 曹阅 徐晶 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2012年第11期12-17,共6页
利用已分离坏死梭杆菌菌株,建立坏死梭杆菌白细胞毒素活性体外检测方法,并评价培养条件对坏死梭杆菌天然白细胞毒素活性的影响。结果表明,预还原、厌氧无菌心脑浸液肉汤培养基(pH7.3左右)、培养时间10h~12h(对数生长期后期),此工艺参... 利用已分离坏死梭杆菌菌株,建立坏死梭杆菌白细胞毒素活性体外检测方法,并评价培养条件对坏死梭杆菌天然白细胞毒素活性的影响。结果表明,预还原、厌氧无菌心脑浸液肉汤培养基(pH7.3左右)、培养时间10h~12h(对数生长期后期),此工艺参数下获取的细菌培养物上清液的白细胞毒性最大。获得的坏死梭杆菌天然白细胞毒素经Western blot证实,能被抗白细胞毒素重组BSBSE蛋白的兔血清识别,表明提取的白细胞毒素具有反应原性。 展开更多
关键词 坏死梭杆菌 细胞毒素 分泌 影响
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胶体金渗滤法检测幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白A抗体 被引量:2
6
作者 侯瑜 张菊 +3 位作者 李质馨 田洪艳 刘晓冬 徐冶 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期357-357,共1页
目的 建立一种快速、简易的检测血清中抗幽门螺杆菌 (HP)细胞毒素相关蛋白A(CagA)抗体的胶体金免疫渗滤法(DIGFA)。方法 采用枸橼酸三钠还原法制备胶体金颗粒 ,标记葡萄球菌A蛋白 (SPA) ,将重组的CagA抗原固定于硝酸纤维素膜上。血清... 目的 建立一种快速、简易的检测血清中抗幽门螺杆菌 (HP)细胞毒素相关蛋白A(CagA)抗体的胶体金免疫渗滤法(DIGFA)。方法 采用枸橼酸三钠还原法制备胶体金颗粒 ,标记葡萄球菌A蛋白 (SPA) ,将重组的CagA抗原固定于硝酸纤维素膜上。血清中抗CagAIgG与金标记SPA及硝酸纤维素膜上的固相抗原结合后 ,形成肉眼可见的红色斑点。结果 用DIGFA与酶联免疫吸附试验 (ELISA)试剂盒对比检测了 32 6份血清标本中抗CagA抗体 ,两法符合率为 96 .6 %。结论 DIGFA检测血清中的抗CagA抗体特异性强 ,简便快速 ,无需特殊仪器设备 ,有实用价值。 展开更多
关键词 胶体金渗滤法 检测 幽门螺杆菌 抗体 细胞毒素相关蛋白A 酶联免疫吸附试验法
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幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白A在特发性血小板减少性紫癜发病机制中的作用 被引量:9
7
作者 雷瑚仪 赵谢兰 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2012年第1期58-60,共3页
目的目前,认为幽门螺杆菌(helicobacter pylori,Hp)感染是引起特发性血小板减少性紫癜(idiopathic thrombo-cytopenic purpura,ITP)的病因之一。研究幽门螺杆菌细胞毒素相关基因蛋白A(cytotoxin-associated gene protein,cagA)与特发性... 目的目前,认为幽门螺杆菌(helicobacter pylori,Hp)感染是引起特发性血小板减少性紫癜(idiopathic thrombo-cytopenic purpura,ITP)的病因之一。研究幽门螺杆菌细胞毒素相关基因蛋白A(cytotoxin-associated gene protein,cagA)与特发性血小板减少性紫癜的血小板相关IgG抗体(platelet associated IgG,PA-IgG)及血小板数量变化的关系有助于探索Hp感染引起ITP的机制。文中通过检测ITP患者血清中cagA、PA-IgG和PLT数量,分析Hp感染与ITP发生的关系。方法快速尿素酶试验(rapid urease test,RUT)及14C尿素呼气试验(UBT)检测Hp。60例ITP患者分为Hp-、Hp+cagA-及Hp+cagA+3组,酶联免疫法测定外周血cagA、PA-IgG,用血细胞仪测定血小板计数,并比较抗Hp治疗前后的变化。结果 Hp+cagA+组的PA-IgG水平与Hp-和Hp+cagA-组比较明显升高(P<0.05),血小板计数与Hp-和Hp+cagA-组比较明显降低(P<0.05)。Hp+cagA-组的PA-IgG水平及血小板计数与Hp-组相比无统计学意义显著性差异(P>0.05)。Hp+cagA-组抗Hp治疗后PA-IgG水平下降及血小板计数上升不明显(P>0.05)。Hp+cagA+组抗Hp治疗后PA-IgG水平下降及血小板计数上升明显(P<0.01)。结论 Hp感染者可能由于其cagA导致PA-IgG升高而使血小板计数降低,参与ITP的发病机制。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 细胞毒素相关蛋白A 特发性血小板减少性紫癜 血小板相关抗体
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坏死梭杆菌白细胞毒素研究进展 被引量:2
8
作者 冯二凯 陈立志 刘晓颖 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2009年第7期68-71,共4页
坏死梭杆菌白细胞毒素(Lkt)是一组对反刍动物白细胞特别是多形性白细胞(PMNs)有特异性毒性作用的细胞外毒素,被认为是坏死梭杆菌感染动物的主要毒力因子。白细胞毒素的物理稳定性较低,高温或极端pH环境中都能使白细胞毒素活性丧失。研... 坏死梭杆菌白细胞毒素(Lkt)是一组对反刍动物白细胞特别是多形性白细胞(PMNs)有特异性毒性作用的细胞外毒素,被认为是坏死梭杆菌感染动物的主要毒力因子。白细胞毒素的物理稳定性较低,高温或极端pH环境中都能使白细胞毒素活性丧失。研究发现,白细胞毒素开放阅读框(ORF)全长9 726bp,由3个基因(lktB、A和C)组成,结构基因是第2个基因(lktA)。白细胞毒素对白细胞的毒性作用有剂量依赖性,并且溶血活性较低,不能在豚鼠猪皮肤上形成皮肤坏死症状。 展开更多
关键词 坏死梭杆菌 细胞毒素 开放阅读框 溶血活性
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坏死梭杆菌白细胞毒素研究进展 被引量:2
9
作者 张秀华 陈立志 刘晓颖 《动物医学进展》 CSCD 2007年第9期74-77,共4页
坏死梭杆菌是动物和人的各种坏死化脓感染的条件性致病菌。坏死梭杆菌的白细胞毒素是一种高度不稳定性分泌蛋白,被认为是主要的毒力因子。坏死梭杆菌白细胞毒素基因的开放阅读框(lk-tAORF)包括9 726 bp,编码3 241个氨基酸,总分子质量为3... 坏死梭杆菌是动物和人的各种坏死化脓感染的条件性致病菌。坏死梭杆菌的白细胞毒素是一种高度不稳定性分泌蛋白,被认为是主要的毒力因子。坏死梭杆菌白细胞毒素基因的开放阅读框(lk-tAORF)包括9 726 bp,编码3 241个氨基酸,总分子质量为336 ku的蛋白,且与其他细菌的细胞毒素没有任何相似的序列。覆盖在整个坏死梭杆菌lktA ORF上的5个短的重叠的多肽分别是BSBSE,SX,GAS,SH和FINAL,将它们在大肠埃希菌中表达,所有的多肽都有免疫原性,但GAS引起最小的抗体反应,BSB-SE和SH对坏死梭杆菌攻击诱导产生了很强的保护力,比坏死梭杆菌的培养上清内全长活性lkt或无活性上清的保护性要好得多。 展开更多
关键词 坏死梭杆菌 细胞毒素 毒力因子
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牛腐蹄病坏死杆菌H05菌株白细胞毒素基因的克隆与序列分析 被引量:2
10
作者 郭东华 孙玉国 +3 位作者 李林 王君伟 张建涛 王洪斌 《黑龙江八一农垦大学学报》 2008年第4期48-51,共4页
以黑龙江省分离的牛腐蹄病坏死杆菌H05菌株基因组DNA为模板,参考GenBank发表的羊腐蹄病坏死杆菌A25菌株白细胞毒素基因核苷酸序列,设计5对覆盖白细胞毒素基因完整开放阅读框(ORF)的引物,通过PCR扩增获得了H05菌株白细胞毒素基因5个相互... 以黑龙江省分离的牛腐蹄病坏死杆菌H05菌株基因组DNA为模板,参考GenBank发表的羊腐蹄病坏死杆菌A25菌株白细胞毒素基因核苷酸序列,设计5对覆盖白细胞毒素基因完整开放阅读框(ORF)的引物,通过PCR扩增获得了H05菌株白细胞毒素基因5个相互重叠的DNA片段,将它们克隆到pMD18-T载体中。测序结果显示:牛腐蹄病坏死杆菌H05菌株白细胞毒素基因长为9723bp,编码一个3240个氨基酸的蛋白质,与羊腐蹄病坏死杆菌白细胞毒素蛋白的核苷酸和氨基酸的同源性分别为99.75%和99.63%,缺失了1078位的天冬酰胺。 展开更多
关键词 牛腐蹄病 坏死杆菌 细胞毒素基因 序列分析
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老年脑梗死患者血清细胞毒素相关蛋白阳性幽门螺杆菌抗体、内皮素以及超敏C-反应蛋白的表达及其相关性分析 被引量:1
11
作者 李莉娜 李素花 付唆林 《中国医药导报》 CAS 2012年第17期85-86,89,共3页
目的研究老年脑梗死患者细胞毒素相关蛋白阳性幽门螺杆菌抗体(CagA-Hp.lgG),内皮素(ET)以及超敏C-反应蛋白(hs-CRP)的表达情况,并对三者的相关性进行分析。方法选择2006年7月~2010年5月到河北联合大学附属医院就诊的发病1周内的... 目的研究老年脑梗死患者细胞毒素相关蛋白阳性幽门螺杆菌抗体(CagA-Hp.lgG),内皮素(ET)以及超敏C-反应蛋白(hs-CRP)的表达情况,并对三者的相关性进行分析。方法选择2006年7月~2010年5月到河北联合大学附属医院就诊的发病1周内的老年脑梗死患者40例,均为CagA阳性Hp感染者。另选取相同时间区间内到该院进行健康查体的老年者40例。将脑梗死患者与健康查体者分别归于病例组和健康组。采用ELISA法分别检测两组受试者CagA-Hp.lgG浓度、血清ET浓度以及hs-CRP浓度。对病例组中CagA-Hp.lgG浓度与ET和hs-CRP浓度的关系分析采用相关性检验,计算相关系数r值和P值。结果病例组中CagA-Hp.lgG值为(100.3±11.9)U/mL,血清ET为(86.4±14.2)ng/L,hs-CRP值为(74.8±11.5)mg/L;健康组中CagA-Hp.lgG值为(46.2±7.1)U/mL,血清ET为(39.8±7.1)ng/L,hs-CRP值为(17.4±3.5)mg/L;病例组中三种指标值均明显高于健康组,差异有统计学意义(P〈0.05)。相关性分析显示,CagA-Hp.lgG与ET及hs-CRP均呈正相关(r=0.413,P=0.015;r=0.420,P=0.014)。结论 CagA-Hp.lgG、ET以及hs-CRP在老年脑梗死患者中表达比健康查体者明显增多;CagA-Hp.lgG与ET和hs-CRP均呈正相关性。 展开更多
关键词 细胞毒素相关蛋白 幽门螺杆菌 血清内皮素 老年脑梗死
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幽门螺旋杆菌细胞毒素相关蛋白A真核表达载体的构建与表达 被引量:1
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作者 万小勇 杨登元 《成都医学院学报》 CAS 2013年第5期604-607,共4页
目的构建幽门螺旋杆菌(Helicobacter pylori,Hp)细胞毒素相关蛋白A(cytotoxin-associated protein,CagA)基因表达载体并表达其编码蛋白。方法从胃黏膜活检标本中分离Hp,提取核酸,采用RT-PCR技术扩增CagA基因,将其克隆至pEGFP真核表达载... 目的构建幽门螺旋杆菌(Helicobacter pylori,Hp)细胞毒素相关蛋白A(cytotoxin-associated protein,CagA)基因表达载体并表达其编码蛋白。方法从胃黏膜活检标本中分离Hp,提取核酸,采用RT-PCR技术扩增CagA基因,将其克隆至pEGFP真核表达载体中,构建Hp CagA基因真核表达载体并转染293-T细胞表达其编码蛋白。结果通过PCR、双酶切、测序鉴定证实CagA基因的真核表达载体构建成功,免疫印迹法证实CagA蛋白的表达。结论成功构建了Hp CagA基因真核表达载体并表达其编码蛋白,为后期功能研究提供了材料和基础。 展开更多
关键词 幽门螺旋杆菌 细胞毒素相关蛋白A基因 分子克隆 真核表达
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细胞毒素类药物不良反应的调查及防护对策 被引量:2
13
作者 张纯英 张仁芳 +2 位作者 解玉萍 朱香华 牛风英 《护士进修杂志》 北大核心 2003年第11期1018-1019,共2页
目的调查肿瘤科护士对细胞毒素类药物不良反应的发生现状 ,探讨其防护措施。方法将可能发生的不良反应分成是、否、常有、不常有四个层次 ,制成表格式问卷 ,对本地区三级和二级共 6所医院正在或曾经在肿瘤科工作过的护士进行问答式调查... 目的调查肿瘤科护士对细胞毒素类药物不良反应的发生现状 ,探讨其防护措施。方法将可能发生的不良反应分成是、否、常有、不常有四个层次 ,制成表格式问卷 ,对本地区三级和二级共 6所医院正在或曾经在肿瘤科工作过的护士进行问答式调查。结果 6所医院发放问卷 30 0份 ,收回 2 89份 ,有效问卷 2 76份 ,发生不良反应问卷 1 4 6份 ,占 5 2 .9% ;5 3份问卷发生两种不良反应 ,占 36 .3% ;38份发生三种不良反应 ,占 2 6 .0 3% ;4 5份问卷显示常有不良反应发生 ,占 30 .82 %。结论长期接触细胞毒素类药物可以发生不良反应 ,加强自我防护 ,严格按规定使用细胞毒素类药物 。 展开更多
关键词 细胞毒素类药物 不良反应 防护对策
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滴金法检测幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白A抗体试剂盒的研制及应用
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作者 侯瑜 张菊 +3 位作者 李质馨 田洪艳 刘晓冬 徐冶 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期520-520,共1页
目的 建立一种快速、简易的检测血清中抗幽门螺杆菌 (Hp)细胞毒素相关蛋白A(CagA)抗体的胶体金免疫渗滤法 (DIGFA)。方法 采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒 ,标记葡萄球菌A蛋白 (SPA) ,将重组的CagA抗原固定于硝酸纤维素膜上 ,制... 目的 建立一种快速、简易的检测血清中抗幽门螺杆菌 (Hp)细胞毒素相关蛋白A(CagA)抗体的胶体金免疫渗滤法 (DIGFA)。方法 采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒 ,标记葡萄球菌A蛋白 (SPA) ,将重组的CagA抗原固定于硝酸纤维素膜上 ,制成免疫渗滤试剂盒。血清中抗CagA抗体与试剂盒上金标记物及硝酸纤维素膜上的固相抗原结合后 ,形成肉眼可见的红色斑点。结果 用DIGFA与酶联免疫吸附试验 (ELISA)试剂盒对比检测了 32 6份血清标本中抗CagA抗体 ,本方法的特异性为 95 .8% ,敏感性为 97.3% ,两种方法符合率为 96 .6 %。结论 DIGFA检测血清中的抗CagA抗体特异性强、灵敏度高、简便快速 ,无需特殊仪器设备 。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 细胞毒素相关蛋白A 抗体 胶体金免疫渗滤法
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幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白与胃癌的相关性
15
作者 李伏娥 叶红军 +2 位作者 王俊萍 李坚 钟李杰 《中国内镜杂志》 CSCD 2004年第7期41-42,45,共3页
目的探讨幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白与胃癌的相关性。方法采用免疫印迹法检测218例慢性浅表性胃炎(CSG) 、慢性萎缩性胃炎(CAG) 和胃癌(GC)患者血清细胞毒素相关蛋白抗体(CagA)。结果CagA抗体在218例患者中总检出率为69.27%。在慢性浅... 目的探讨幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白与胃癌的相关性。方法采用免疫印迹法检测218例慢性浅表性胃炎(CSG) 、慢性萎缩性胃炎(CAG) 和胃癌(GC)患者血清细胞毒素相关蛋白抗体(CagA)。结果CagA抗体在218例患者中总检出率为69.27%。在慢性浅表性胃炎、慢性萎缩性胃炎、胃癌患者中CagA抗体阳性率分别为55.43,74.11和90.24%,经χ2检验χ2分割法显示:三组胃疾病阳性率总体间差异有显著性;慢性浅表性胃炎与慢性萎缩性胃炎阳性率比较,差异有显著性;慢性浅表性胃炎与胃癌阳性率比较,差异有非常显著性;慢性萎缩性胃炎与胃癌阳性率比较,差异无显著性。结论慢性萎缩性胃炎和胃癌的发生与CagA阳性Hp感染有关,定期随访CagA抗体阳性Hp感染特别是已进入慢性萎缩性胃炎阶段的患者,可能有利于胃癌的早期诊断。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 细胞毒素相关蛋白抗体 胃癌
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幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白对儿童胃粘膜炎症的影响
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作者 胡伟国 徐辉 +3 位作者 徐彰 黄开宇 程芹芹 黄爱芬 《浙江临床医学》 2004年第6期470-471,共2页
目的 探讨幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白 (CagA)与儿童胃粘膜炎症程度之间关系。方法 采用免疫印迹法检测88例幽门螺杆菌相关性慢性胃炎患儿血清CagA抗体 ,并观察胃粘膜病理变化。 结果 88例幽门螺杆菌相关性慢性胃炎患儿血清CagA抗体阳... 目的 探讨幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白 (CagA)与儿童胃粘膜炎症程度之间关系。方法 采用免疫印迹法检测88例幽门螺杆菌相关性慢性胃炎患儿血清CagA抗体 ,并观察胃粘膜病理变化。 结果 88例幽门螺杆菌相关性慢性胃炎患儿血清CagA抗体阳性74例 ,阳性率84.09 % ,其中胃粘膜轻度炎症12例 (16.22% )、中重度炎症62例 (83.7 % ) ;而14例CagA抗体阴性患儿胃粘膜轻度炎症7例(50.00 % )、中重度炎症7例 (50.00% ) ,两组相比 ,差异有显著性 ( χ2=6.07 ,P<0.05)。 结论 产CagA的幽门螺杆菌能引起胃粘膜较重的炎症。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白 儿童 胃粘膜炎症 免疫印迹法 检测
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江西眼镜蛇细胞毒素对白血病CEM细胞的抑制作用
17
作者 周军 朱金华 +4 位作者 余雄英 朱大诚 潘荣斌 周红 欧阳永伟 《江西中医药》 2018年第11期39-42,共4页
目的: 研究江西眼镜蛇细胞毒素对白血病CEM细胞的抑制作用及其机制。方法:以急性T淋巴细胞白血病CEM细胞作为研究对象,采用CCK-8比色试验检测江西眼镜蛇细胞毒素对CEM细胞的抑制作用;光镜下观察细胞毒素作用CEM细胞后的抑制情况和细胞... 目的: 研究江西眼镜蛇细胞毒素对白血病CEM细胞的抑制作用及其机制。方法:以急性T淋巴细胞白血病CEM细胞作为研究对象,采用CCK-8比色试验检测江西眼镜蛇细胞毒素对CEM细胞的抑制作用;光镜下观察细胞毒素作用CEM细胞后的抑制情况和细胞形态学改变;Western blotting 检测细胞毒素对CEM细胞的凋亡蛋白Caspase-3和Caspase-8表达影响。结果:江西眼镜蛇细胞毒素能明显抑制CEM细胞的增殖,抑制率与剂量成正相关;细胞毒素高浓度(2μM以上)作用下,抑制作用随时间延长呈现先增加后有所降低的趋势,最佳的作用时间在24h,此时IC50为1.613μM;细胞毒素在低浓度(0.25μM以下)时,随着作用时间的延长,抑制作用迅速下降。倒置显微镜下观察到各给药组作用24h后CEM细胞数目随药物浓度的增加而减少且折光能力也逐渐降低。光镜下观察到各给药组CEM细胞体积明显缩小,胞膜皱缩,甚至还个别细胞出现核膜裂解、染色质分割成块状。Western blotting检测到眼镜蛇细胞毒素不同浓度组的Caspase-3、Caspase-8蛋白表达比对照组均有增加,以高浓度(2μM)组增加明显。结论:江西眼镜蛇细胞毒素可以抑制CEM细胞增殖,其机制可能与其诱导CEM细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 淋巴细胞白血病 CEM细胞 细胞毒素 眼镜蛇毒 抑制作用 江西 CASPASE-8 Caspase-3
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液相色谱-串联质谱法测定百日咳和百白破疫苗中百日咳杆菌气管细胞毒素 被引量:6
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作者 龙珍 卫辰 +6 位作者 郭志谋 马霄 李月琪 姚劲挺 冀峰 李长坤 黄涛宏 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期155-161,共7页
百日咳杆菌气管细胞毒素(TCT)是一种引起百日咳及百日咳相关疫苗不良反应的毒性糖肽。尽管各国药典均规定了百日咳疫苗产品中TCT的含量限度,但均没有推荐TCT的含量测定方法。该研究发展了一种液相色谱-串联质谱法用于TCT的含量测定。实... 百日咳杆菌气管细胞毒素(TCT)是一种引起百日咳及百日咳相关疫苗不良反应的毒性糖肽。尽管各国药典均规定了百日咳疫苗产品中TCT的含量限度,但均没有推荐TCT的含量测定方法。该研究发展了一种液相色谱-串联质谱法用于TCT的含量测定。实验优化了包括色谱柱类型和流动相组成在内的TCT色谱条件。虽然TCT在反相色谱模式和亲水作用色谱(HILIC)模式下均具有较好的保留,但HILIC模式与蛋白质沉淀的前处理方法兼容性更好,因此采用HILIC模式分离TCT。优化所得的方法具有较宽的线性范围(5.76~369 ng/L),良好的重复性(峰面积的相对标准偏差不大于3.9%),各种基质中均有较好的回收率(96.4%~102.5%),且定量限是药典要求的TCT最高限量的1/1 279。将本方法用于共纯化百日咳疫苗、组分百日咳疫苗、共纯化无细胞百白破疫苗和组分无细胞百白破疫苗中TCT的检测,所有产品均未检出TCT,表明被检样品具有较好的工艺条件可避免TCT在产品中的残留。 展开更多
关键词 液相色谱 质谱 百日咳杆菌气管细胞毒素 百白破疫苗 百日咳疫苗
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幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白A与动脉粥样硬化的相关性研究进展 被引量:4
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作者 贾意国 王虹 +1 位作者 王慧 曲宝戈 《中国医药导报》 CAS 2015年第16期62-65,共4页
幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白A(Cag A)阳性菌株感染与动脉粥样硬化关系尚无一致结论。目前大量研究认为其可促进动脉粥样硬化的形成和发展,是动脉粥样硬化的重要危险因素之一,其主要机制可能是通过导致炎症损伤、血脂代谢紊乱、免疫反应... 幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白A(Cag A)阳性菌株感染与动脉粥样硬化关系尚无一致结论。目前大量研究认为其可促进动脉粥样硬化的形成和发展,是动脉粥样硬化的重要危险因素之一,其主要机制可能是通过导致炎症损伤、血脂代谢紊乱、免疫反应和直接作用等多种途径影响动脉粥样硬化的病理演变过程。但亦有一些研究持相反的观点,认为Cag A+Hp菌株感染与动脉粥样硬化的发生无关,其并未参与动脉粥样硬化的形成过程,因此,二者之间的确切关系尚不明确,还需要做更加深入的研究,从而为动脉粥样硬化的防治提供可靠的理论依据。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 细胞毒素相关蛋白A 动脉粥样硬化 机制
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幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白A与血管性痴呆的相关性研究
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作者 谭秀芳 《临床荟萃》 CAS 北大核心 2008年第9期649-651,共3页
关键词 螺杆菌 幽门 痴呆 血管性 细胞毒素相关蛋白
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