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产气荚膜梭菌重组NetB毒素细胞毒性作用研究 被引量:3
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作者 王莹莹 乔艺然 +6 位作者 赵蕾 刘鹏 任玉东 李广兴 黄小丹 张瑞莉 杨贵君 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期1018-1025,共8页
坏死性肠炎B样毒素(NetB)是新近发现的由产气荚膜梭菌产生与鸡坏死性肠炎发生密切相关的成孔毒素。本研究通过观察NetB毒素对HeLa细胞以及小鼠肠道的毒性损伤作用,进一步阐明该毒素在鸡坏死性肠炎发病过程中的作用。采用PCR方法扩增Net... 坏死性肠炎B样毒素(NetB)是新近发现的由产气荚膜梭菌产生与鸡坏死性肠炎发生密切相关的成孔毒素。本研究通过观察NetB毒素对HeLa细胞以及小鼠肠道的毒性损伤作用,进一步阐明该毒素在鸡坏死性肠炎发病过程中的作用。采用PCR方法扩增NetB毒素基因片段,构建重组表达质粒pGEX-NetB并转化E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导表达获得重组NetB蛋白,纯化鉴定后用复性的蛋白质进行HeLa细胞毒性试验。结果如下:光镜观察可见,NetB蛋白作用2h后,部分细胞出现肿胀变圆,少数细胞破裂,细胞质外溢;12h后,细胞已无正常形态,细胞圆缩,细胞因坏死脱落溶解空隙增大,偶见病变细胞聚集成团;48h后,细胞坏死明显,只残存细胞溶解后的碎片。HE染色后观察可见病变细胞染色不均,细胞膜碎裂而不完整,细胞质外溢。电镜观察可见,病变细胞缺少完整的细胞膜结构,细胞质外溢,细胞核形状不规则,核膜膨出,核仁边集,亚细胞器也出现不同程度的病变,其中线粒体病变最为明显。通过对小鼠病理模型观察可见,接种NetB毒素小鼠发病迅速,腹部膨大,肠道臌气明显;组织学观察表明接种小鼠内脏器官出现不同程度的病理变化,以小肠最为明显,表现为肠黏膜损伤,绒毛断裂、脱落等。NetB毒素可引起HeLa细胞细胞膜损伤而呈现细胞毒性;小鼠体内试验NetB毒素可复制出NE典型病变,表明NetB毒素与NE的发病密切相关。 展开更多
关键词 产气荚膜梭菌 NetB毒素 细胞毒性试验 小鼠病理模型
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纤维素类可吸收止血材料的体外细胞毒性评价 被引量:7
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作者 喻炎 马凤森 +1 位作者 陆佳骏 陈海波 《材料导报》 EI CAS CSCD 北大核心 2018年第6期874-880,887,共8页
通过体外细胞毒性试验评价速即纱、英洁尔、泰可聆三种可吸收止血材料的细胞相容性,旨在为纤维素类可吸收止血材料的临床安全应用提供参考。采用四唑盐比色法(MTT比色法)、细胞形态分析、琼脂扩散法以及滤膜扩散法,评价三种材料对L929... 通过体外细胞毒性试验评价速即纱、英洁尔、泰可聆三种可吸收止血材料的细胞相容性,旨在为纤维素类可吸收止血材料的临床安全应用提供参考。采用四唑盐比色法(MTT比色法)、细胞形态分析、琼脂扩散法以及滤膜扩散法,评价三种材料对L929成纤维细胞增殖活性的影响及细胞毒性反应。各材料按50.00mg/mL加入不完全细胞培养液浸提24h后,离心得浸提液,此浓度设为100%,依次稀释得50.0%、25.0%、12.5%、6.25%、3.13%、1.56%、0.78%、0.39%材料浸提液。MTT比色法结合细胞形态分析显示:英洁尔材料各浸提液浓度无明显的细胞毒性,速即纱与泰可聆材料浸提液在浓度稀释至25.0%以下时,才不会出现明显的细胞毒性。对于三种材料本身,琼脂扩散法与滤膜扩散法均显示英洁尔材料无明显的细胞毒性,而速即纱与泰可聆材料有明显的细胞毒性。三种不同止血材料的细胞相容性不同,须选择适宜的评价方法。 展开更多
关键词 细胞毒性试验 止血材料 MTT比色法 细胞形态分析 琼脂扩散法 滤膜扩散法
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重组人乳铁蛋白对原代肝·肾细胞的毒性研究
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作者 梁佳 戴蕴青 +1 位作者 车会莲 陈敏 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2011年第36期22579-22581,共3页
[目的]通过模拟肝、肾毒性的体外细胞试验,研究重组人乳铁蛋白是否对小鼠原代肝肾细胞具有毒性作用,为其进一步的安全性评价提供依据。[方法]采用模拟体外消化试验所得的重组人乳铁蛋白消化产物及重组人乳铁蛋白为受试物,牛乳铁蛋白为对... [目的]通过模拟肝、肾毒性的体外细胞试验,研究重组人乳铁蛋白是否对小鼠原代肝肾细胞具有毒性作用,为其进一步的安全性评价提供依据。[方法]采用模拟体外消化试验所得的重组人乳铁蛋白消化产物及重组人乳铁蛋白为受试物,牛乳铁蛋白为对照,以小鼠原代肝、肾细胞为平台,用MTT法检测受试物对细胞活性的半数抑制浓度(IC50),研究细胞毒性剂量-反应关系。[结果]在设定的试验条件下,未发现重组人乳铁蛋白对肝、肾细胞存在靶毒性,结果能与已进行的亚慢性毒性试验相互印证。[结论]为重组人乳铁蛋白的进一步安全性评价及其他转基因食品的安全性评价方法提供了参考。 展开更多
关键词 重组人乳铁蛋白 原代肝 细胞 细胞毒性试验 转基因食品安全性评价
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人鼻咽癌细胞SUME逃逸NK细胞免疫杀伤机制的初步探讨 被引量:2
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作者 牛新清 王玉红 +1 位作者 李强 王辉 《山东医药》 CAS 北大核心 2009年第52期9-11,共3页
目的探讨人鼻咽癌细胞SUME逃逸NK细胞免疫杀伤的机制。方法以K562细胞为对照,应用乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测不同效靶比时体外培养的同种异体自然杀伤(NK)细胞杀伤SUME细胞的活性。用RT-PCR检测K562和SUME细胞MHC-Ⅰ类链相关分子A和B(MI... 目的探讨人鼻咽癌细胞SUME逃逸NK细胞免疫杀伤的机制。方法以K562细胞为对照,应用乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测不同效靶比时体外培养的同种异体自然杀伤(NK)细胞杀伤SUME细胞的活性。用RT-PCR检测K562和SUME细胞MHC-Ⅰ类链相关分子A和B(MICA/B)、人巨细胞病毒糖蛋白UL16结合蛋白(ULBP)1~3基因,用流式细胞仪检测两组细胞MICA/B、ULBP1~3和HLA-Ⅰ分子的表达情况。结果同一效靶比时NK细胞杀伤SUME细胞的活性低于杀伤K562细胞的活性(P<0.05);K562和SUME细胞均表达基因MI-CA/B和ULBP1~3,但SUME细胞低表达MICA、MICB和ULBP1~3分子。结论SUME细胞逃逸NK细胞免疫杀伤的可能机制是SUME细胞高表达HLA-Ⅰ类分子,低表达NKG2D的配体MICA/B和ULBP1~3。 展开更多
关键词 鼻咽肿瘤 杀伤细胞 受体 杀伤细胞 细胞毒性试验 HLA-Ⅰ
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CD_3AK细胞体内、外抗喉鳞癌细胞株(Hep-2)的实验研究 被引量:1
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作者 张伟 诸小侬 +4 位作者 韩德民 陈靖 王津津 范尔钟 张进友 《耳鼻咽喉(头颈外科)》 1998年第2期104-108,共5页
为探索更理想的过继免疫治疗手段,对由健康人外周血分离、经 CD_3单克隆抗体与白细胞介素-2共同诱导激活的 CD_3AK 细胞的体外扩增情况及其杀伤喉癌细胞 Hep-2的活性水平进行了观察和研究,并与 LAK 细胞作了比较。研究发现,CD_3AK 细胞... 为探索更理想的过继免疫治疗手段,对由健康人外周血分离、经 CD_3单克隆抗体与白细胞介素-2共同诱导激活的 CD_3AK 细胞的体外扩增情况及其杀伤喉癌细胞 Hep-2的活性水平进行了观察和研究,并与 LAK 细胞作了比较。研究发现,CD_3AK 细胞除具有体外扩增能力强、存活时间长、IL-2依赖性低等特点外,其体内、外抗喉癌作用亦十分显著。培养早期,CD_3AK 细胞的抗瘤活性与常规培养的 LAK 细胞相似,延长培养时间至7~10天,则抗瘤活性大增,培养9天的CD_3AK 细胞在效靶比30:1的条件下平均抑瘤率高达99.8%,几乎完全抑制了喉癌细胞在裸鼠皮下的生长。研究提示,CD_3AK 细胞有望成为继 LAK 细胞之后的新一代肿瘤免疫杀伤细胞而应用于头颈肿瘤局部过继免疫治疗中。 展开更多
关键词 喉肿瘤 鳞状上皮细胞 细胞毒性试验
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LAK细胞体外及裸鼠体内抗喉癌Hep-2细胞作用的研究
6
作者 陈靖 张伟 +4 位作者 王津津 诸小侬 范尔钟 王秋平 韩德民 《耳鼻咽喉(头颈外科)》 1998年第1期43-47,共5页
采用乳酸脱氢酶法测定不同浓度rIL-2诱导的LAK细胞在体外喉癌Hep-2细胞的杀瘤活性,证实rIL-2对LAK细胞抗喉癌Hep-2细胞杀伤力的激活呈剂量依赖性,1×10^6U/LrIL-2为诱导LAK细胞抗喉癌... 采用乳酸脱氢酶法测定不同浓度rIL-2诱导的LAK细胞在体外喉癌Hep-2细胞的杀瘤活性,证实rIL-2对LAK细胞抗喉癌Hep-2细胞杀伤力的激活呈剂量依赖性,1×10^6U/LrIL-2为诱导LAK细胞抗喉癌活性的最适2,在该条件下诱导的LAK细胞于2的第4-7天抗喉癌活性达到高峰,约为40-50%,至培养第11天仍可保持30%的杀瘤率。裸鼠体内实验上实。 展开更多
关键词 细胞毒性试验 裸鼠 IL-2 喉癌
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氮硫共掺碳点的制备及其生物成像考察 被引量:1
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作者 尹路遥 孙婷 +3 位作者 代英辉 李松荷 徐艳 王东凯 《沈阳药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期408-411,共4页
目的目前,多数文献报道的碳点以发射蓝光、绿光、黄光为主,为拓宽碳点的应用,制备发射长波长光的碳点是很有必要的。本文制备了发射红色荧光的碳点并对其光学性质及生物成像进行考察。方法以胱氨酸、聚乙二醇为原料,通过一步水热法制备... 目的目前,多数文献报道的碳点以发射蓝光、绿光、黄光为主,为拓宽碳点的应用,制备发射长波长光的碳点是很有必要的。本文制备了发射红色荧光的碳点并对其光学性质及生物成像进行考察。方法以胱氨酸、聚乙二醇为原料,通过一步水热法制备了氮硫共掺碳点(N,S co-doped CDs,NS-CDs),采用红外光谱、透射电镜、紫外和荧光光谱对其进行表征。采用MTT试验考察碳点的细胞毒性。将碳点与细胞共同孵育4 h后,利用激光共聚焦显微镜观察碳点在细胞中的成像情况。小鼠皮下注射NS-CDs溶液,进行活体成像考察。结果所制备的碳点含有氨基、羧基、羟基等官能团,粒径约为4.0 nm,为球状或者类球状;最大吸收波长为220 nm;荧光光谱显示碳点的最大激发波长和发射波长分别为540 nm和630 nm;碳点质量浓度为5 g·L-1时,细胞存活率仍在70%左右;共聚焦成像结果显示碳点主要分布于细胞质中;NS-CDs用于活体成像时,生物背景干扰小,成像良好。结论氮硫掺杂碳点生物相容性高,可用于细胞质成像和活体成像。 展开更多
关键词 碳点 细胞毒性试验 细胞质成像 活体成像
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肾移植术后发热少尿肾功能减退
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作者 周志韶 石群立 张苗 《医学研究生学报》 CAS 1989年第1期84-87,共4页
日期:1989年1月16日参加人员:临床各科室医务人员百余人本次讨论会发言热烈,先后有13位医师作了分析发言,现就主要发言者的内容整理如下: 病历摘要男性,32岁。主诉肾移植术后36天尿量减少,植入肾区隐痛不适3天,于1988年3月18日入院。患... 日期:1989年1月16日参加人员:临床各科室医务人员百余人本次讨论会发言热烈,先后有13位医师作了分析发言,现就主要发言者的内容整理如下: 病历摘要男性,32岁。主诉肾移植术后36天尿量减少,植入肾区隐痛不适3天,于1988年3月18日入院。患者因慢性肾小球肾炎、肾衰,于1988年2月11日在我院行异体肾移植术。1986年10月起维持性血透。术前胸片阴性。淋巴细胞毒性试验8%。肾移植术顺利。术后尿量增多,肾功能明显改善,BUN,SCr几乎正常。唯出现“尿漏”,于2月24日行输尿管修补术,术后情况良好,并于3月18日出院。出院后每日应用强的松20mg。 展开更多
关键词 肾功能 少尿 尿漏 尿量增多 术前胸片 排异反应 细胞毒性试验 维持性血透 移植术 慢性肾小球肾炎
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