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流式细胞仪测定荔枝倍性和基因组大小的细胞核提取液筛选与应用
被引量：
16
1
作者
赖彪
吴传龙
+5 位作者
秦永华
刘成明
冯奇瑞
叶自行
胡桂兵
王惠聪
《果树学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第7期939-946,共8页
【目的】流式细胞术是目前测定植物倍性和基因组大小差异的最快、最有效的方法。建立适合荔枝的流式细胞术的方法,对荔枝倍性育种以及基因组大小的确定是必不可少的。【方法】笔者以荔枝的幼嫩叶片为材料,筛选适合荔枝的细胞核提取液配...
【目的】流式细胞术是目前测定植物倍性和基因组大小差异的最快、最有效的方法。建立适合荔枝的流式细胞术的方法,对荔枝倍性育种以及基因组大小的确定是必不可少的。【方法】笔者以荔枝的幼嫩叶片为材料,筛选适合荔枝的细胞核提取液配方,建立利用流式细胞仪测定荔枝倍性和基因组大小的方法。用改进的标准两步法,比较了6 种常用细胞核提取液提取细胞核的效果。【结果】利用WPB(Woody Plant Buffer)提取的大部分荔枝品种(品系)叶片细胞核稳定、分辨率高、细胞碎片少且细胞G0/G1峰的变异系数(CV)较低,平均CV值为5.12%,说明该配方适用于酚类物质丰富的荔枝细胞核的提取。同时以已知染色体数量的‘无核荔’(2n=30)为外标,检测了18 个品种(品系)的倍性,发现参测样品的G0/G1峰与‘无核荔’G0/G1峰的荧光均值的比值为0.78~1.24,说明所测荔枝品种(品系)均为二倍体。以已知基因组大小的‘Stupické polní rané’番茄为内标测定了14 个品种(品系)的基因组大小,结果表明荔枝基因大小约为550~620 Mb,平均602 Mb,不同荔枝品种(品系)间基因组大小存在一定差异。【结论】WPB细胞核提取液提取的荔枝幼嫩的叶片的细胞核质量好,可用于流式细胞术荔枝倍性和基因组大小的测定,测定的结果显示参测荔枝品种(品系)均为二倍体,无单倍或多倍的情况,不同荔枝品种基因组大小有一定的差异。
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关键词
荔枝
流式
细胞
术
细胞核提取液
倍性
基因组大小
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职称材料
流式细胞术检测4种提取沙棘核DNA方法的比较
被引量：
4
2
作者
周香艳
张宁
+2 位作者
王旺田
王翠玲
吴兵
《甘肃农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第4期155-160,共6页
采用4种不同提取细胞核的方法,测定了6个不同沙棘品种的核DNA含量,比较了4种不同提取方法测得的CV值的差异.结果表明:4种提取沙棘核DNA的方法所测得的内标CV值为2.49%～11.31%,待测样CV值为2.53%～12.08%.当Tris.MgCl2法测定时,细胞核...
采用4种不同提取细胞核的方法,测定了6个不同沙棘品种的核DNA含量,比较了4种不同提取方法测得的CV值的差异.结果表明:4种提取沙棘核DNA的方法所测得的内标CV值为2.49%～11.31%,待测样CV值为2.53%～12.08%.当Tris.MgCl2法测定时,细胞核全部破碎,故未得到流式图;用Otto's法测得的CV值最小,内标与待测样CV值分别为2.49%～3.35%,2.53%～3.56%.因此,Otto's法为最适宜提取沙棘细胞核DNA的方法.
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关键词
沙棘
流式
细胞
术
细胞核提取液
核DNA含量
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职称材料
流式细胞术估测胡椒属植物基因组大小方法的建立及应用
被引量：
1
3
作者
伍宝朵
胡丽松
+5 位作者
冯楗雄
范睿
郭芬
吉训志
郝朝运
闫林
《热带作物学报》
CSCD
北大核心
2023年第11期2265-2272,共8页
为建立胡椒属资源基因组大小流式细胞术测定方法,本研究筛选了6种细胞核提取液和3种不同部位叶片,以已知基因组大小的黄瓜为标样,运用流式细胞术对胡椒属资源基因组大小进行了测定。结果表明:改良细胞核提取液和倒一叶是适合胡椒流式细...
为建立胡椒属资源基因组大小流式细胞术测定方法,本研究筛选了6种细胞核提取液和3种不同部位叶片,以已知基因组大小的黄瓜为标样,运用流式细胞术对胡椒属资源基因组大小进行了测定。结果表明:改良细胞核提取液和倒一叶是适合胡椒流式细胞术的提取液和取样部位;栽培胡椒品种古晋、Aman和EMAS胡椒的基因组大小为667.94~719.32 Mb,而热引1号、柬埔寨小叶种、班尼约尔1号和73F5的基因组大小为759.69~785.38 Mb,因此不同栽培品种之间基因组大小存在差异;推算基因组大于900 Mb的石楠藤和山蒟的染色体条数应该是大于52且为13的倍数,基因组大小在600~800 Mb范围内种质的染色体数可能是52条。杂交种不但具有与栽培胡椒和黄花胡椒相近的表型,其基因组大小也几乎等于栽培胡椒和黄花胡椒的平均值,推测杂交种可能是栽培胡椒和黄花胡椒的杂交后代。本研究可为胡椒属资源基因组大小测定提供方法,也将为胡椒属种质资源评价及远源杂交等研究提供技术基础。
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关键词
胡椒属
流式
细胞
术
细胞核提取液
基因组大小
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职称材料
题名
流式细胞仪测定荔枝倍性和基因组大小的细胞核提取液筛选与应用
被引量：
16
1
作者
赖彪
吴传龙
秦永华
刘成明
冯奇瑞
叶自行
胡桂兵
王惠聪
机构
长江师范学院现代农业与生物工程学院
华南农业大学园艺学院
出处
《果树学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第7期939-946,共8页
基金
国家现代农业产业技术体系建设专项资金资助项目“国家荔枝龙眼产业技术体系”(CARS-33)
长江师范学院校级科研项目(2016KYQD20和2016XJQN06)
文摘
【目的】流式细胞术是目前测定植物倍性和基因组大小差异的最快、最有效的方法。建立适合荔枝的流式细胞术的方法,对荔枝倍性育种以及基因组大小的确定是必不可少的。【方法】笔者以荔枝的幼嫩叶片为材料,筛选适合荔枝的细胞核提取液配方,建立利用流式细胞仪测定荔枝倍性和基因组大小的方法。用改进的标准两步法,比较了6 种常用细胞核提取液提取细胞核的效果。【结果】利用WPB(Woody Plant Buffer)提取的大部分荔枝品种(品系)叶片细胞核稳定、分辨率高、细胞碎片少且细胞G0/G1峰的变异系数(CV)较低,平均CV值为5.12%,说明该配方适用于酚类物质丰富的荔枝细胞核的提取。同时以已知染色体数量的‘无核荔’(2n=30)为外标,检测了18 个品种(品系)的倍性,发现参测样品的G0/G1峰与‘无核荔’G0/G1峰的荧光均值的比值为0.78~1.24,说明所测荔枝品种(品系)均为二倍体。以已知基因组大小的‘Stupické polní rané’番茄为内标测定了14 个品种(品系)的基因组大小,结果表明荔枝基因大小约为550~620 Mb,平均602 Mb,不同荔枝品种(品系)间基因组大小存在一定差异。【结论】WPB细胞核提取液提取的荔枝幼嫩的叶片的细胞核质量好,可用于流式细胞术荔枝倍性和基因组大小的测定,测定的结果显示参测荔枝品种(品系)均为二倍体,无单倍或多倍的情况,不同荔枝品种基因组大小有一定的差异。
关键词
荔枝
流式
细胞
术
细胞核提取液
倍性
基因组大小
Keywords
Litchi chinensis Sonn.
Flow cytometry
Nuclei isolation buffer
Ploidy
Genome size
分类号
S667.1 [农业科学—果树学]
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职称材料
题名
流式细胞术检测4种提取沙棘核DNA方法的比较
被引量：
4
2
作者
周香艳
张宁
王旺田
王翠玲
吴兵
机构
甘肃农业大学生命科学技术学院
出处
《甘肃农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第4期155-160,共6页
文摘
采用4种不同提取细胞核的方法,测定了6个不同沙棘品种的核DNA含量,比较了4种不同提取方法测得的CV值的差异.结果表明:4种提取沙棘核DNA的方法所测得的内标CV值为2.49%～11.31%,待测样CV值为2.53%～12.08%.当Tris.MgCl2法测定时,细胞核全部破碎,故未得到流式图;用Otto's法测得的CV值最小,内标与待测样CV值分别为2.49%～3.35%,2.53%～3.56%.因此,Otto's法为最适宜提取沙棘细胞核DNA的方法.
关键词
沙棘
流式
细胞
术
细胞核提取液
核DNA含量
Keywords
Hippophae
flow cytometry
nuclear isolation buffer ； nuclear DNA content
分类号
S793.6 [农业科学—林木遗传育种]
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职称材料
题名
流式细胞术估测胡椒属植物基因组大小方法的建立及应用
被引量：
1
3
作者
伍宝朵
胡丽松
冯楗雄
范睿
郭芬
吉训志
郝朝运
闫林
机构
中国热带农业科学院香料饮料研究所
云南农业大学热带作物学院
海南省SimSoonliang院士工作站
农业农村部香辛饮料作物遗传资源利用重点实验室
出处
《热带作物学报》
CSCD
北大核心
2023年第11期2265-2272,共8页
基金
国家现代农业产业技术体系项目(No.CARS-11)
海南省院士创新平台科研专项(No.SQ2021PT0035)。
文摘
为建立胡椒属资源基因组大小流式细胞术测定方法,本研究筛选了6种细胞核提取液和3种不同部位叶片,以已知基因组大小的黄瓜为标样,运用流式细胞术对胡椒属资源基因组大小进行了测定。结果表明:改良细胞核提取液和倒一叶是适合胡椒流式细胞术的提取液和取样部位;栽培胡椒品种古晋、Aman和EMAS胡椒的基因组大小为667.94~719.32 Mb,而热引1号、柬埔寨小叶种、班尼约尔1号和73F5的基因组大小为759.69~785.38 Mb,因此不同栽培品种之间基因组大小存在差异;推算基因组大于900 Mb的石楠藤和山蒟的染色体条数应该是大于52且为13的倍数,基因组大小在600~800 Mb范围内种质的染色体数可能是52条。杂交种不但具有与栽培胡椒和黄花胡椒相近的表型,其基因组大小也几乎等于栽培胡椒和黄花胡椒的平均值,推测杂交种可能是栽培胡椒和黄花胡椒的杂交后代。本研究可为胡椒属资源基因组大小测定提供方法,也将为胡椒属种质资源评价及远源杂交等研究提供技术基础。
关键词
胡椒属
流式
细胞
术
细胞核提取液
基因组大小
Keywords
Piper L.
flow cytometry
modified nuclear extract
genomic size
分类号
S573.9 [农业科学—作物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
流式细胞仪测定荔枝倍性和基因组大小的细胞核提取液筛选与应用
赖彪
吴传龙
秦永华
刘成明
冯奇瑞
叶自行
胡桂兵
王惠聪
《果树学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019
16
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
流式细胞术检测4种提取沙棘核DNA方法的比较
周香艳
张宁
王旺田
王翠玲
吴兵
《甘肃农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012
4
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
流式细胞术估测胡椒属植物基因组大小方法的建立及应用
伍宝朵
胡丽松
冯楗雄
范睿
郭芬
吉训志
郝朝运
闫林
《热带作物学报》
CSCD
北大核心
2023
1
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