体外循环心内直视术对外周血单个核细胞蛋白质表达谱的作用

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作者 杨艳琴 唐靖 +4 位作者 古妙宁 郭远波 赵振龙 陈晔明 陈雯婷 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期470-476,共7页

目的:观察体外循环(CPB)心内直视术患者外周血单个核细胞蛋白质表达谱的变化。方法:11例体外循环心内直视术患者,分别于体外循环前(T0)、体外循环主动脉开放后1 h(T1)和术毕(T2)3个时点抽取动脉血,分离外周血单个核细胞(PBMCs),采用双... 目的:观察体外循环(CPB)心内直视术患者外周血单个核细胞蛋白质表达谱的变化。方法:11例体外循环心内直视术患者,分别于体外循环前(T0)、体外循环主动脉开放后1 h(T1)和术毕(T2)3个时点抽取动脉血,分离外周血单个核细胞(PBMCs),采用双向电泳和质谱方法比较、分析3个时间点差异蛋白的表达,并采用W estern blot进行验证。结果:双向电泳和质谱鉴定出12个差异蛋白,其中S100A9表达量于CPB后1 h达到高峰,手术结束时开始下降,但未回复到术前水平(P<0.05)。结论:体外循环能上调外周血单个核细胞S100A9等蛋白的表达。 展开更多

关键词 体外循环 S100蛋白质类/代谢 炎症 单核细胞 电泳 凝胶 双向

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尿中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白对脑动脉支架置入术后造影剂肾病严重程度的预测价值 被引量：7

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作者 王兆平 刘洁一 +5 位作者 庄雷 高峰 吴继霞 王莹峰 张海燕 张爱娣 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 2015年第1期14-17,共4页

目的 评价老年患者尿中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）对脑动脉支架置入术后致造影剂肾病（CIN）的早期诊断价值及其严重程度的预测价值.方法 选择CIN患者15例（CIN组）,其中CIN Ⅰ期12例,CINⅡ期3例;非CIN患者15例（对照组）... 目的 评价老年患者尿中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）对脑动脉支架置入术后致造影剂肾病（CIN）的早期诊断价值及其严重程度的预测价值.方法 选择CIN患者15例（CIN组）,其中CIN Ⅰ期12例,CINⅡ期3例;非CIN患者15例（对照组）,连续收集尿标本进行NGAL分析.结果 与对照组比较,CIN组及CIN Ⅰ期、CINⅡ期患者术后3、6、12、24 h和CINⅡ期患者术后48 h尿NGAL明显增高,CIN组及CIN Ⅰ期、CINⅡ期患者尿NGAL术后0～3 h、0～6 h、0～12 h、0～24 h、0～48 h绝对变化值明显增高（P＜0.05）.与CIN Ⅰ期比较,CINⅡ期患者尿NGAL术后0～6 h、0～12 h绝对变化值明显增高（P＜0.05）.CIN组术后0～6h尿NGAL绝对变化值与术后48 h估算肾小球滤过率呈负相关（r=-0.480,P=0.001）.结论 动态监测尿NGAL既可早期诊断CIN,也可对CIN严重程度有一定的预测作用. 展开更多

关键词 脂笼蛋白质类 中性白细胞 明胶酶类 支架 肾病 造影剂 尿 脑动脉 早期诊断

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冠心病合并代谢综合征患者胰岛素抵抗与单核细胞趋化蛋白-1的关系

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作者 乔平 马业新 +1 位作者 郭小梅 李新民 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 北大核心 2006年第11期756-759,共4页

目的研究冠心病合并代谢综合征患者胰岛素抵抗与单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达的关系。方法选择单纯代谢综合征患者37例(A组),单纯冠心病患者31例(B组),冠心病合并代谢综合征患者39例(C组)和正常对照组28例(D组)。对所有受试者测量其... 目的研究冠心病合并代谢综合征患者胰岛素抵抗与单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达的关系。方法选择单纯代谢综合征患者37例(A组),单纯冠心病患者31例(B组),冠心病合并代谢综合征患者39例(C组)和正常对照组28例(D组)。对所有受试者测量其身高、体重、腰围、臀围;测血脂、空腹血糖、胰岛素、MCP-1;计算体重指数、腰臀比、胰岛素抵抗指数并进行比较。结果A、B、C 3组患者的胰岛素、胰岛素抵抗指数、MCP-1均高于D组,C组的胰岛素抵抗指数、MCP-1分别高于A、B两组。直线相关分析显示,胰岛素抵抗指数与体重指数、腰围、甘油三酯、空腹血糖、胰岛素和MCP-1呈正相关,与高密度脂蛋白呈负相关,差异有显著性意义;逐步回归分析显示,胰岛素抵抗指数与空腹血糖、胰岛素、甘油三酯、高密度脂蛋白、MCP-1、体重指数相关。结论冠心病合并代谢综合征患者的胰岛素抵抗度和炎性因子MCP-1的表达异常升高,同时,胰岛素抵抗与MCP-1的异常表达相关。 展开更多

关键词 冠状动脉疾病 代谢综合征 胰岛素抗药性 单核细胞化学吸引蛋白质类

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8-甲氧沙林对黑素细胞内游离钙浓度及细胞骨架蛋白形成的影响 被引量：2

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作者 张宪旗 郑敏 +1 位作者 牟宽厚 冯捷 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期348-351,共4页

目的:观察8-甲氧沙林对体外培养黑素细胞内游离钙浓度、细胞骨架蛋白形成的影响。方法:正常人黑素细胞取自包皮环切术切取的包皮,用激光共聚焦扫描显微镜检测细胞内游离钙浓度,用罗丹明结合毒伞素对细胞骨架蛋白进行特异性染色。结果:8... 目的:观察8-甲氧沙林对体外培养黑素细胞内游离钙浓度、细胞骨架蛋白形成的影响。方法:正常人黑素细胞取自包皮环切术切取的包皮,用激光共聚焦扫描显微镜检测细胞内游离钙浓度,用罗丹明结合毒伞素对细胞骨架蛋白进行特异性染色。结果:8-甲氧沙林可使细胞内游离钙离子浓度升高,促进黑素细胞骨架蛋白合成。结论:8-甲氧沙林可能通过诱导黑素细胞内钙离子浓度升高和细胞骨架actin蛋白生成,从而影响黑素细胞的迁移。 展开更多

关键词 黑素细胞/药物作用 甲氧西林/药理学 钙/代谢 细胞骨架 细胞支架蛋白质类/代谢 细胞 培养的

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CXC趋化因子受体4通过S期激酶相关蛋白2调控乳腺癌细胞周期的机制 被引量：5

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作者 王海凤 陈天天 +7 位作者 王月月 李钰 张凌宇 丁勇兴 陈素莲 王文锐 杨清玲 陈昌杰 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期357-363,共7页

目的:探讨CXC趋化因子受体4(CXCR4)通过PI3K/Akt和ERK信号通路调控S期激酶相关蛋白2(Skp2)的表达,进而影响乳腺癌细胞周期的机制。方法:利用干扰及过表达技术下调或上调CXCR4的表达后,通过实时定量PCR和蛋白质印迹法检测CXCR4与Skp2调... 目的:探讨CXC趋化因子受体4(CXCR4)通过PI3K/Akt和ERK信号通路调控S期激酶相关蛋白2(Skp2)的表达,进而影响乳腺癌细胞周期的机制。方法:利用干扰及过表达技术下调或上调CXCR4的表达后,通过实时定量PCR和蛋白质印迹法检测CXCR4与Skp2调控的关联性;蛋白质印迹法检测CXCR4干扰及过表达后对信号蛋白及Skp2下游相关基因表达的影响;通过碘化丙啶(PI)染色法检测CXCR4、PI3K/Akt通路抑制剂LY294002及ERK通路抑制剂U0126对乳腺癌细胞周期的影响。结果:干扰CXCR4后,Skp2表达下调;过表达CXCR4后,Skp2表达上调。CXCR4可通过对信号蛋白的调控影响Skp2及Skp2下游相关基因的表达。干扰CXCR4后,G_0/G_1期细胞比例增加,S期细胞比例相应减少,CXCR4与LY294002及U0126联合作用对细胞周期的阻断更加明显。结论:CXCR4能够通过对信号蛋白PI3K/Akt及ERK的调控,影响Skp2及Skp2下游相关基因的表达,阻断CXCR4/Akt/Skp2或CXCR4/ERK/Skp2信号通路后可有效诱导细胞周期阻滞,从而抑制乳腺癌细胞的增殖。 展开更多

关键词 乳腺肿瘤/病理生理学 受体 CXCR4/生物合成 受体 CXCR4/遗传学 S期激酶相关蛋白质类/代谢 细胞系 肿瘤/代谢 细胞增殖 细胞周期

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长链非编码RNA RP11-770J1.3和跨膜蛋白25对紫杉醇耐药人乳腺癌细胞株耐药性的影响 被引量：5

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作者 李钰 王月月 +5 位作者 王海凤 张凌宇 丁勇兴 陈素莲 杨清玲 陈昌杰 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期364-370,共7页

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)RP11-770J1.3和跨膜蛋白25(TMEM25)对紫杉醇耐药人乳腺癌细胞株耐药性的影响。方法:利用实时定量PCR检测lncRNA RP11-770J1.3和TMEM25在人乳腺癌细胞MCF-7和紫杉醇耐药细胞株(MCF-7/PR)中的表达。在MCF-7... 目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)RP11-770J1.3和跨膜蛋白25(TMEM25)对紫杉醇耐药人乳腺癌细胞株耐药性的影响。方法:利用实时定量PCR检测lncRNA RP11-770J1.3和TMEM25在人乳腺癌细胞MCF-7和紫杉醇耐药细胞株(MCF-7/PR)中的表达。在MCF-7/PR中转染lncRNA RP11-770J1.3和TMEM25的干扰片段,磺酰罗丹明B法检测MCF-7/PR对紫杉醇药物敏感性的变化,并运用实时定量PCR和蛋白质印迹法检测多药耐药相关蛋白(MRP)、乳腺癌耐药蛋白(BCRP)、多药耐药基因1(MDR1)及其编码产物P-gp mRNA和蛋白水平的改变。结果:lncRNA RP11-770J1.3和TMEM25在MCF-7/PR中表达上调(P<0.05或P<0.01)。与空白对照组和紫杉醇阴性对照组比较,干扰lncRNA RP11-770J1.3和TMEM25的表达可以提高MCF-7/PR对紫杉醇的药物敏感性,并下调耐药相关基因MRP、BCRP、MDR1及其编码产物P-gp的表达(均P<0.05);与单独干扰lncRNA RP11-770J1.3或TMEM25比较,同时干扰lncRNA RP11-770J1.3和TMEM25的作用更加明显(P<0.05)。结论:MCF-7/PR中lncRNA RP11-770J1.3和TMEM25的表达上调,联合干扰lncRNA RP11-770J1.3和TMEM25的表达可以提高MCF-7/PR对紫杉醇的敏感性。 展开更多

关键词 RNA 膜蛋白质类/代谢 乳腺肿瘤/病理生理 聚合酶链反应 紫杉 酚/药理学 细胞系 肿瘤/病理学 肿瘤细胞 培养的 抗药性 肿瘤

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细胞周期蛋白依赖激酶抑制剂诱导HL-60细胞凋亡及分子机制研究 被引量：2

7

作者 韩艳霞 尤良顺 +3 位作者 刘辉 毛莉萍 叶琇锦 钱文斌 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期174-178,共5页

目的：探讨细胞周期蛋白依赖激酶（ CDK ）抑制剂SNS-032诱导人急性髓系白血病HL-60细胞凋亡的效应及可能的机制。方法：以CDK抑制剂SNS-032作用于HL-60细胞株，实验细胞分为对照组、SNS-032组、白细胞介素（ IL）-6组和SNS-032＋IL-6组... 目的：探讨细胞周期蛋白依赖激酶（ CDK ）抑制剂SNS-032诱导人急性髓系白血病HL-60细胞凋亡的效应及可能的机制。方法：以CDK抑制剂SNS-032作用于HL-60细胞株，实验细胞分为对照组、SNS-032组、白细胞介素（ IL）-6组和SNS-032＋IL-6组。 MTT法检测细胞存活率，流式细胞术检测细胞凋亡， microRNA芯片技术分析细胞microRNA的表达谱差异，蛋白质印迹法检测JAK／STAT3相关信号通路蛋白的表达。结果：SNS-032可降低细胞存活率，诱导HL-60细胞凋亡，对照组、100 nmol／L 和200 nmol／L 的 SNS-032干预组细胞凋亡率分别为（5.9±1.7）％、（12.1±3.1）％和（59.4±3.6）％。 microRNA 芯片分析结果显示， SNS-032显著下调HL-60细胞miR-30a、miR-183、miR-20b、miR-26b、miR-20a、miR-589、miR-107、miR-181 a、miR-106 a、miR-17和miR-378 c的表达水平，显著上调miR-320 a的表达水平。蛋白质印迹法显示 SNS-032可抑制 STAT3的磷酸化和 JAK2、MCL-1、C-MYC蛋白的表达。作为JAK／STAT3通路的激活剂， IL-6联合SNS-032不能逆转后者对HL-60细胞的杀伤作用（ P＞0.05），也不能逆转SNS-032对JAK2蛋白表达和磷酸化STAT3的抑制作用。结论：SNS-032能显著诱导人急性髓系白血病HL-60细胞发生凋亡，其机制可能与抑制JAK2和STAT3磷酸化、抑制MCL-1和C-MYC及与之相关的miR-17-92基因簇表达水平有关。 展开更多

关键词 白血病 髓样 急性 微RNAs 细胞周期蛋白质依赖激酶类/生物合成 Janus激酶类 STAT3转录因子 蛋白酪氨酸激酶类/代谢 信号传导 HL-60 细胞 细胞凋亡 肿瘤细胞 培养的

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类风湿关节炎患者外周血单个核细胞中c-FLIP与外源性凋亡途径的相关性分析 被引量：2

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作者 林美娜 许瑞元 +2 位作者 章涛 张琳 梅序桥 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期381-388,共8页

目的:分析类风湿关节炎患者外周血单个核细胞(PBMC)中Fas相关死亡区样白介素1转换酶抑制蛋白(c-FLIP)与外源性凋亡途径相关蛋白死亡结构域蛋白(FADD)、caspase-8表达水平变化的相关性。方法:选择2014年1月至2015年6月福建医科大学附属... 目的:分析类风湿关节炎患者外周血单个核细胞(PBMC)中Fas相关死亡区样白介素1转换酶抑制蛋白(c-FLIP)与外源性凋亡途径相关蛋白死亡结构域蛋白(FADD)、caspase-8表达水平变化的相关性。方法:选择2014年1月至2015年6月福建医科大学附属漳州市医院类风湿关节炎患者60例,按照类风湿关节炎疾病活动指数将患者分为低、中、高活动度组(分别为22、20和18例)。同时选择健康体检者25名作为健康对照组。采用实时定量RT-PCR和蛋白质印迹法分别检测PBMC中c-FLIP、FADD和caspase-8的mRNA和蛋白表达水平,并采用Pearson检验对c-FLIP与FADD、caspase-8表达的相关性进行分析。结果:类风湿关节炎患者PBMC中c-FLIP、FADD和caspase-8的mRNA表达量均高于健康对照组(均P <0. 05)。其中,中活动度组PBMC中FADD和caspase-8的mRNA表达量高于低活动度组(均P <0. 05),c-FLIP的mRNA表达量与低活动度组相近(P>0. 05);高活动度组PBMC中c-FLIP的mRNA表达量高于中、低活动度组(均P <0. 05),caspase-8的mRNA表达量低于中、低活动度组(均P <0. 05),FADD的mRNA表达量高于低活动度组(P <0. 05)。类风湿关节炎患者PBMC中c-FLIP mRNA水平与FADD mRNA水平呈正相关(r=0. 323,P <0. 05),与caspase-8mRNA水平呈负相关(r=-1. 104,P <0. 05)。中活动度组c-FLIP和FADD蛋白表达量高于健康对照组、低活动度组和高活动度组(P <0. 05或P <0. 01);中、高活动度组caspase-8蛋白表达量高于健康对照组和低活动度组(P <0. 05或P <0. 01),且高活动度组caspase-8蛋白表达量高于中活动度组(P <0. 05)。结论:类风湿关节炎患者PBMC中凋亡相关蛋白c-FLIP可能参与了外源性凋亡途径,并可为类风湿关节炎病情评估提供参考。 展开更多

关键词 关节炎 类风湿/病理生理学 单核细胞/代谢 Fas相关死亡结构域蛋白质/代谢 凋亡调节蛋白质类 CASP8和FADD样细胞凋亡调节蛋白质/生理学 细胞凋亡

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肝素、IGFBP-4及IGF-1对肺成纤维细胞糖代谢及功能的影响 被引量：1

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作者 秦永新 万献尧 陈佰义 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期1768-1773,共6页

目的:探讨类胰岛素生长因子(IGF-1)及其结合蛋白-4(IGFBP-4)、肝素在肺纤维化形成过程中的相互关系。方法:选择二倍体人胚肺成纤维细胞(lung fibroblast,LF)株,分别给予100μg/L IGF-1、100μg/LIGF-1+100μg/LIGFBP-4、100μg/LIGF-1+... 目的:探讨类胰岛素生长因子(IGF-1)及其结合蛋白-4(IGFBP-4)、肝素在肺纤维化形成过程中的相互关系。方法:选择二倍体人胚肺成纤维细胞(lung fibroblast,LF)株,分别给予100μg/L IGF-1、100μg/LIGF-1+100μg/LIGFBP-4、100μg/LIGF-1+200μg/LIGFBP-4、100μg/LIGF-1+100μg/LIGFBP-4+100μg/L肝素、100μg/L IGF-1+100μg/L IGFBP-4+200μg/L肝素、100μg/L IGF-1+100μg/L肝素、100μg/LIGF-1+200μg/L肝素刺激24 h。检测细胞外弹性蛋白、胶原蛋白及细胞内葡萄糖转运蛋白-4(GLUT-4)、己糖激酶-2(HK-2)的含量。结果:与空白对照组相比,IGF-1组HK-2及GLUT-4mRNA及相应蛋白表达增强(P<0.05);加入IGFBP-4以后HK-2及GLUT-4mRNA及相应蛋白表达明显强于IGF-1组(P<0.05);而同时加入肝素与IGFBP-4后HK-2及GLUT-4mRNA及相应蛋白表达明显抑制(P<0.05),并且这一抑制效应随肝素用量增加而更加明显;但单加肝素时HK-2及GLUT-4mRNA及相关蛋白表达抑制不如前组明显(P<0.05)。结论:(1)IGF-1能够刺激肺成纤维细胞的糖代谢,使HK-2及GLUT-4mRNA及细胞外基质(ECM)蛋白表达增强;(2)单纯增加IGFBP-4不仅不能抑制IGF-1的刺激作用,反而增加HK-2及GLUT-4mRNA及相应蛋白表达,可能与IGFBP-4的降解有关;(3)IGFBP-4在肝素存在的情况下,能明显抑制IGF-1对肺成纤维细胞的刺激作用,使HK-2及GLUT-4及细胞外基质蛋白表达明显减少,说明肝素以及未被降解的IGFBP-4对肺纤维化可能是有效的防护因子。 展开更多

关键词 肝素 肺 成纤维细胞 糖代谢 胰岛素样生长因子1 胰岛素样生长因子结合蛋白质类

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慢性代谢性酸中毒显著诱导大鼠系膜细胞的增殖 被引量：2

10

作者 李琨 顾勇 +3 位作者 赖凌云 刘少军 郝传明 林善锬 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期1514-1519,共6页

目的:研究慢性代谢性酸中毒对大鼠肾小球体积、系膜细胞增殖、基质表达的影响及分子机制。方法:采用0·28mol/L NH4Cl喂饲大鼠构建大鼠慢性代谢性酸中毒模型。采用光镜结合图像分析软件观察和分析大鼠肾小球结构。从肾皮质分离大鼠... 目的:研究慢性代谢性酸中毒对大鼠肾小球体积、系膜细胞增殖、基质表达的影响及分子机制。方法:采用0·28mol/L NH4Cl喂饲大鼠构建大鼠慢性代谢性酸中毒模型。采用光镜结合图像分析软件观察和分析大鼠肾小球结构。从肾皮质分离大鼠肾小球,肾小球增殖细胞核抗原(PCAN)和p27的表达采用免疫组化和/或Westernblotting检测。肾皮质纤维连接蛋白(FN)mRNA的表达采用荧光定量RT-PCR检测。分别采用[3H]-TdR掺入法和ELISA方法检测了慢性酸负荷对体外培养的大鼠系膜细胞增殖及FN合成的影响。结果:各时点实验组大鼠动脉血pH、[HCO3-]均显著低于对照组(P<0·01)。第3、7、14d实验组大鼠肾重及肾/体重比值均显著大于对照组,而绝对体重与对照相比无显著差异;平均肾小球面积、肾小球丝球体面积、球内细胞总数以及系膜区细胞数均大于对照组(P<0·05),第14d大鼠肾小球系膜区面积与肾小球丝球体面积比值高于对照组(P<0·05);第3、7、14d Western blot-ting检测实验组大鼠肾小球PCNA表达增加,p27表达下调,免疫组织化学检测显示肾小球内阳性PCNA细胞主要位于系膜区;第7d、14d大鼠肾皮质FN mRNA的表达显著高于对照组(P<0·01)。体外系膜细胞[3H]-TdR掺入量随酸负荷强度而增高,酸负荷24h和48h,系膜细胞上清中FN含量显著增高。结论:慢性代谢性酸中毒能够诱导大鼠肾小球肥大、系膜细胞增生及细胞外基质增多,其机制与系膜细胞周期调控蛋白P27的表达下调有关。本研究为慢性代谢性酸中毒参与慢性肾小球疾病的硬化提供了体内和体外证据。 展开更多

关键词 酸中毒 代谢性 肾小球肥大 系膜细胞 纤维蛋白类 增殖细胞核抗原 蛋白质P27

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肿瘤细胞膜/质蛋白转位入核研究进展 被引量：1

11

作者 朱紫菱 谈静 邓红 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期318-325,共8页

蛋白质作为生命物质的基础,在不同组织细胞中呈现不同的定位,执行不同的功能。同种蛋白质在不同的亚细胞区域定位可以发挥不同的功能,甚至表现出截然相反的作用。功能蛋白和结构蛋白都能够发生定位的改变,直接或间接参与信号转导。细胞... 蛋白质作为生命物质的基础,在不同组织细胞中呈现不同的定位,执行不同的功能。同种蛋白质在不同的亚细胞区域定位可以发挥不同的功能,甚至表现出截然相反的作用。功能蛋白和结构蛋白都能够发生定位的改变,直接或间接参与信号转导。细胞癌变后,信号异常转导,原本在正常细胞的细胞膜/细胞质中表达的蛋白,却在肿瘤细胞中转位到细胞核而发生功能改变。结构蛋白入核主要通过蛋白断裂、蛋白含量改变以及蛋白相互结合实现。对关键蛋白分子的转位研究,有助于在临床应用中发现新的诊断标志物和治疗靶点。 展开更多

关键词 肿瘤/病理生理学 蛋白质类/代谢 信号传导 肿瘤细胞 综述

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超排卵周期卵巢低反应患者卵泡液骨形成蛋白-15水平升高 被引量：6

12

作者 吴琰婷 陆秀娥 +3 位作者 王婷婷 何荣环 徐键 黄荷凤 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 2007年第5期439-442,共4页

目的：研究卵泡液中骨形成蛋白-15（BMP-15）的水平及其与超排卵周期卵巢低反应之间的关系。方法：对70例因输卵管性或男性因素不孕而行体外受精-胚胎移植（IVF-ET）的患者，采用本中心常规促超排卵方案，用Western印迹方法测定取卵时... 目的：研究卵泡液中骨形成蛋白-15（BMP-15）的水平及其与超排卵周期卵巢低反应之间的关系。方法：对70例因输卵管性或男性因素不孕而行体外受精-胚胎移植（IVF-ET）的患者，采用本中心常规促超排卵方案，用Western印迹方法测定取卵时各组卵泡液中BMP-15的水平。按取卵时卵泡发育数目不同，将卵巢对超排卵药物的反应分为低反应型（卵泡数≤3）和正常反应型（卵泡数4～13个）。结果：卵泡液中BMP-15的相对光密度（ROD），低反应组高于正常反应组（1．01±0．34VS0．77±0．24，P〈0．01），差异有显著性。结论：卵泡液中高BMP-15水平与促排卵周期卵巢低反应的发生有关。 展开更多

关键词 卵泡液 超排卵 骨形态发生蛋白质类 卵巢/细胞学 卵巢/代谢 受精 体外 胚胎移植 印迹法 蛋白质

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急性缺血性脑卒中患者血清铁调素25及铁代谢指标变化及临床意义 被引量：8

13

作者 孔德燕 黄振华 王凯华 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 2015年第5期455-458,共4页

目的探讨急性缺血性脑卒中(AIS)患者血清铁调素25及铁代谢指标的变化及其与病情严重程度和早期预后的关系。方法选择AIS患者178例作为病例组,神经功能缺损程度按美国国立卫生研究院卒中量表评分评定,并分为轻型57例、中型62例和重型59例... 目的探讨急性缺血性脑卒中(AIS)患者血清铁调素25及铁代谢指标的变化及其与病情严重程度和早期预后的关系。方法选择AIS患者178例作为病例组,神经功能缺损程度按美国国立卫生研究院卒中量表评分评定,并分为轻型57例、中型62例和重型59例,检测发病后24h、3、7、14和28d时血清铁调素25和铁蛋白水平。另选同期健康体检者150例作为对照组。结果病例组发病24h、3、7、14和28d血清铁调素25[(34.99±10.85)μg/L,(42.63±8.12)μg/L,(47.67±5.29)μg/L,(32.28±5.49)μg/L,(28.64±1.53)μg/L vs(22.65±4.88)μg/L,P=0.000]、铁蛋白[(208.38±22.35)μg/L,(280.56±18.11)μg/L,(299.44±18.07)μg/L,(97.88±15.19)μg/L和(90.67±10.92)μg/L vs(77.51±21.22)μg/L,P=0.000]高于对照组。病例组在不同时间点以及轻、中、重型患者血清铁调素25、铁蛋白水平比较,差异有统计学意义(P<0.01)。血清铁调素25水平与铁蛋白及白细胞介素6呈正相关(r=0.992,0.809,P<0.01)。结论血清铁调素25和铁蛋白水平可作为判断AIS病情严重程度及预后的生物学指标,提示铁代谢可能参与了脑梗死的全过程。 展开更多

关键词 卒中 铁代谢障碍 铁蛋白质类 白细胞介素6 脑梗死

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重组共表达质粒pIRES-hVEGF_(121)cDNA/hBMP-4在大鼠骨髓间充质干细胞中的共表达 被引量：2

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作者 周志林 汪春兰 +4 位作者 赵宇 韩雷 曹东升 丁浩 王帮河 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2007年第4期371-374,共4页

目的观察重组共表达质粒pIRES-hVEGF121cDNA/hBMP-4转染大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)后的共表达情况,为骨缺损的联合基因治疗奠定基础。方法使用全骨髓培养法分离、培养大鼠MSCs;重组共表达质粒pIRES-hVEGF121cDNA/hBMP-4经酶切鉴定后,... 目的观察重组共表达质粒pIRES-hVEGF121cDNA/hBMP-4转染大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)后的共表达情况,为骨缺损的联合基因治疗奠定基础。方法使用全骨髓培养法分离、培养大鼠MSCs;重组共表达质粒pIRES-hVEGF121cDNA/hBMP-4经酶切鉴定后,在脂质体介导下将其转入大鼠MSCs,提取总RNA和总蛋白,进行RT-PCR和Western blot检测。结果重组共表达质粒pIRES-hVEGF121cDNA/hBMP-4成功转染至大鼠MSCs中,并获得有效表达。结论hVEGF121和hBMP-4在大鼠MSCs中获有效表达,为骨缺损的联合基因治疗奠定了基础。 展开更多

关键词 骨形态发生蛋白质类/生物合成 血管内皮生长因子类/生物合成 间质干细胞/代谢 基因表达

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Talin1在原发性肝细胞癌组织中的表达 被引量：1

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作者 张剑林 钱叶本 +1 位作者 朱立新 熊奇如 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2010年第3期386-389,共4页

目的探讨踝蛋白1(Talin1)在正常肝组织、原发性肝细胞癌(HCC)组织、癌旁组织中的表达情况;探讨Talin1表达与HCC发生及其预后的关系。方法采用免疫组织化学方法 (SP法)检测正常肝组织(10例)、HCC组织(32例)及其对应癌旁组织(32例)中的Tal... 目的探讨踝蛋白1(Talin1)在正常肝组织、原发性肝细胞癌(HCC)组织、癌旁组织中的表达情况;探讨Talin1表达与HCC发生及其预后的关系。方法采用免疫组织化学方法 (SP法)检测正常肝组织(10例)、HCC组织(32例)及其对应癌旁组织(32例)中的Talin1表达情况。结果正常肝组织、HCC组织及癌旁组织中均有Talin1表达,其阳性表达率分别为100%、62.5%和96.9%。Talin1表达于阳性细胞胞质及胞膜上;Talin1在HCC组织中的表达显著低于癌旁组织和正常肝组织(P<0.05);而正常肝组织与癌旁组织中的Talin1表达差异无统计学意义(P>0.05);Talin1的表达与肝癌患者性别、年龄、肿瘤个数、AFP表达水平及HB-sAg无关(P>0.05),与患者术后一年无瘤生存率无关(P>0.05);而与肝癌病理分化程度、包膜完整性、门脉癌栓形成及肿瘤大小相关(P<0.05)。结论 Talin1与HCC的癌变、浸润和转移有关;Talin1可作为HCC发生、发展的预测指标之一。 展开更多

关键词 肝肿瘤 癌 肝细胞 细胞支架蛋白质类 免疫组织化学

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rhBMP-2和bFGF复合至壳聚糖-Ⅰ型胶原支架后在体外的降解和释放 被引量：2

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作者 李容林 李春阳 +1 位作者 周超美 吴勇 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期1593-1597,共5页

目的:探讨rhBMP-2和bFGF复合至壳聚糖-Ⅰ型胶原支架材料后在体外的释放规律。方法:制备壳聚糖-Ⅰ型胶原支架及含rhBMP-2和bFGF的复合膜。扫描电镜观察测量支架孔径;体外观察降解情况,在不同时点收集浸出液,ELISA检测因子的释放浓度;观... 目的:探讨rhBMP-2和bFGF复合至壳聚糖-Ⅰ型胶原支架材料后在体外的释放规律。方法:制备壳聚糖-Ⅰ型胶原支架及含rhBMP-2和bFGF的复合膜。扫描电镜观察测量支架孔径;体外观察降解情况,在不同时点收集浸出液,ELISA检测因子的释放浓度;观察浸出液对牙周膜细胞的影响。结果:复合膜呈疏松多孔海绵状,高、中、低3种壳聚糖-Ⅰ型胶原支架平均孔径分别为(106±17)μm、(141±13)μm和(173±11)μm;复合膜在含溶菌酶的PBS中可以降解,壳聚糖浓度越高支架降解越慢,rhBMP-2和bFGF的释放开始为"爆发性",此后释放逐渐减慢,最后在低浓度可缓慢而持久地释放,壳聚糖浓度越高的复合支架,因子释放越慢越持久。与含溶菌酶的PBS间接接触的因子层随着其表面支架的降解而逐渐释放因子,释放延迟时间和表面支架的降解速度有关。复合bFGF因子支架的浸出液作用于HPDLCs,可以明显促进细胞的增殖。结论:壳聚糖-Ⅰ型胶原复合因子支架体外可以降解并释放因子,降解和因子释放速度与壳聚糖的浓度密切相关;可以通过分层制作复合因子支架来控制因子有序释放,所释放的因子具有正常生物学功能。 展开更多

关键词 壳聚糖 胶原Ⅰ型 骨形态发生蛋白质类 成纤维细胞生长因子2 缓释 复合支架

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RNA干扰沉默DJ-1基因对Hep-2细胞裸鼠移植瘤生长的影响 被引量：1

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作者 沈志森 邓红霞 +4 位作者 叶栋 张建 裘世杰 李群 崔翔 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期349-355,共7页

目的：观察沉默DJ-1基因对人喉癌Hep-2细胞株裸鼠移植瘤的作用及其机制。方法：建立人喉癌Hep-2裸鼠移植瘤模型，24只裸鼠随机分为三组（每组8只）：对照组（5％葡萄糖溶液）、小剂量组（20μg 的DJ-1基因特异性小干扰RNA）、大剂量组... 目的：观察沉默DJ-1基因对人喉癌Hep-2细胞株裸鼠移植瘤的作用及其机制。方法：建立人喉癌Hep-2裸鼠移植瘤模型，24只裸鼠随机分为三组（每组8只）：对照组（5％葡萄糖溶液）、小剂量组（20μg 的DJ-1基因特异性小干扰RNA）、大剂量组（40μg的DJ-1基因特异性小干扰RNA）。各组瘤体内分别注射相应液体50μL，2次／周，共6次，每次测量瘤体质量及大小。停药后48 h脱颈椎法处死裸鼠，剥离瘤体，测瘤体质量，计算抑瘤率。采用免疫组织化学法分别检测剥离瘤体组织Caspase-3、Ki-67的表达情况；实时定量RT-PCR和蛋白质印迹法分别检测各组移植瘤 DJ-1、PTEN、survivin 基因和蛋白的表达。结果：小剂量组[（0．66±0．15） g]和大剂量组[（0．48±0．11） g]的瘤体质量均小于对照组[（0．83±0．16）g，均P ＜0．05]，且抑瘤率分别为（20．48±0．18）％和（42．16±0．13）％。小剂量组和大剂量组Caspase-3表达增高， Ki-67表达减少，与对照组差异均有统计学意义（均P ＜0．05）；与对照组比较，小剂量组和大剂量组DJ-1、survivin的mRNA和蛋白表达均减少（均P＜0．05），而PTEN的mRNA和蛋白表达均增加（均P＜0．05）。结论：大剂量的DJ-1小干扰RNA可能通过下调DJ-1和促进PTEN的表达，从而阻断PI3 K-PKB／Akt信号通路并调节survivin表达来促进肿瘤细胞凋亡，抑制人喉癌Hep-2裸鼠移植瘤的生长。 展开更多

关键词 喉肿瘤/病理生理学 癌 鳞状细胞/病理生理学 RNA干扰 基因沉默 肿瘤蛋白质类/代谢 疾病模型 动物

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箭头形平行平板流室下内皮细胞形态及功能的改变

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作者 舒强 王速 +1 位作者 金鑫 凌光烈 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期202-204,共3页

目的:观察不同血流状态下培养内皮细胞的形态及功能。方法:制作一种新的箭头形平行平板流室,高速摄像微粒子示踪技术行流体分析,测量细胞形态指数和F-肌动蛋白的免疫荧光染色。结果:液体在入口与狭窄开始处中点的流速为249.8mm/s,剪切... 目的:观察不同血流状态下培养内皮细胞的形态及功能。方法:制作一种新的箭头形平行平板流室,高速摄像微粒子示踪技术行流体分析,测量细胞形态指数和F-肌动蛋白的免疫荧光染色。结果:液体在入口与狭窄开始处中点的流速为249.8mm/s,剪切应力为71.9dyn/cm2,进入狭窄段时的流速为316mm/s,剪切应力为88.5dyn/cm2,细胞形态呈长纺锤形,方向沿液体流向排列,F-肌动蛋白纤维表达明显增加,呈束状,增密,上述区域液体为定常流。液体进入宽广区域后液体流速明显减慢并在两侧形成涡流甚至停滞,流速为54.4-119.6mm/s,剪切应力为15.6-34.4dyn/cm2,细胞近似圆形、卵圆形、多边形,F-肌动蛋白纤维表达似对照组。结论:新的箭头形平行平板流室是研究在不同血流状态下内皮细胞功能的良好装置。 展开更多

关键词 内皮 细胞支架蛋白质类 血流动力学 细胞形态

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大鼠BMP-7重组腺病毒构建及在肾小管上皮细胞中表达

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作者 杨肃文 王伟 +1 位作者 徐再春 朱芸芸 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期71-78,共8页

目的:利用AdEasyTMsystem构建携带大鼠BMP-7基因的重组腺病毒,并鉴定其在原代肾小管上皮细胞中的表达。方法:将BMP-7全长序列分为46个片段分段合成,再采用PCR方法将合成的46个寡核苷酸片段拼接成BMP-7基因,并克隆到测序载体中测序鉴定。... 目的:利用AdEasyTMsystem构建携带大鼠BMP-7基因的重组腺病毒,并鉴定其在原代肾小管上皮细胞中的表达。方法:将BMP-7全长序列分为46个片段分段合成,再采用PCR方法将合成的46个寡核苷酸片段拼接成BMP-7基因,并克隆到测序载体中测序鉴定。经NotI和HindⅢ双酶切后接入pShuttle-CMV穿梭载体,构建重组腺病毒的穿梭质粒pShuttle-BMP-7。EcoRI酶切重组pShuttle-BMP-7,与pAdEasyTMDNA电穿孔共转化BJ5183感受态菌,抽提重组AdBMP-7质粒,PacI酶切线性化重组质粒AdBMP-7后,转染Ad293细胞进行病毒包装和扩增,腺病毒荧光检测试剂盒测定其滴度。用AdBMP-7感染大鼠肾小管上皮细胞,以ELISA法和W estern-blot法检测BMP-7在大鼠肾小管上皮细胞中的表达。RT-PCR方法检测-αSMA mRNA的表达水平,以鉴定重组腺病毒AdBMP-7的生物学活性。结果:构建了BMP-7基因的重组腺病毒载体,并制备出高滴度重组腺病毒保存液。该重组腺病毒在体外能有效转染大鼠肾小管上皮细胞并高表达BMP-7蛋白,所表达的BMP-7蛋白能有效逆转由TGF-β1诱导的α-SMA表达增高。结论:成功地构建了携带大鼠BMP-7基因的重组腺病毒,并初步证实其具有一定的抗肾纤维化功能。 展开更多

关键词 骨形态发生蛋白质类/遗传学 重组 遗传 转染 遗传载体 腺病毒科/遗传学 肾小管/细胞学 上皮细胞/代谢 肾硬化症/治疗

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原发性肝癌的营养代谢特点及意义 被引量：22

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作者 赵文昊 刘雪莲 +3 位作者 李宏伟 王旭 刘相良 李薇 《临床肝胆病杂志》 CAS 北大核心 2019年第4期905-907,共3页

营养代谢与肿瘤的治疗密切相关,一方面,以营养代谢通路分子作为治疗靶点,成为生物医学领域研究的新方向;另一方面,肿瘤患者营养状态较差,将导致患者无法进行治疗、副作用较大或预后较差。肝肿瘤代谢具有区别于其他部位肿瘤的营养代谢特... 营养代谢与肿瘤的治疗密切相关,一方面,以营养代谢通路分子作为治疗靶点,成为生物医学领域研究的新方向;另一方面,肿瘤患者营养状态较差,将导致患者无法进行治疗、副作用较大或预后较差。肝肿瘤代谢具有区别于其他部位肿瘤的营养代谢特点,因此,肝癌患者的营养代谢研究尤为重要。对原发性肝癌患者糖、脂肪、蛋白质和氨基酸代谢的变化及分子机制进行阐述,以期为肝癌患者营养代谢通路的选择、肝癌特异性标志物的确定以及治疗中的营养支持等问题提供解决思路,为肝癌的营养代谢研究提供参考。 展开更多

关键词 癌 肝细胞 碳水化合物代谢 脂类代谢 蛋白质代谢 综述

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