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以DNA免疫和细胞抗原加强制备抗DAF单克隆抗体及特性分析
1
作者
潘娜
石琳
+3 位作者
黄丽华
周立
何大水
张宇光
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第7期652-656,共5页
目的:联合应用DNA免疫和细胞抗原加强制备抗DAF单克隆抗体(mAb)并鉴定其特性。方法:利用分子克隆的方法构建重组质粒pcDNA3.1/DAF。以其免疫BALB/c小鼠股四头肌3次,并在融合前用表达DAF分子的HPB-ALL细胞为抗原加强免疫1次,制备抗DAFmA...
目的:联合应用DNA免疫和细胞抗原加强制备抗DAF单克隆抗体(mAb)并鉴定其特性。方法:利用分子克隆的方法构建重组质粒pcDNA3.1/DAF。以其免疫BALB/c小鼠股四头肌3次,并在融合前用表达DAF分子的HPB-ALL细胞为抗原加强免疫1次,制备抗DAFmAb。以ELISA法测定mAb的Ig亚类。采用流式细胞术和Westernblot鉴定mAb的特异性和结合活性。以非免疫竞争法测定mAb的亲和常数。结果:成功地获得2株可识别DAF分子不同抗原表位的mAbB6E和2B6B,其Ig亚类均为IgG2a。mAb2B6E的亲和常数为1.81×10-7mol/L,与天然的细胞膜蛋白、变性的膜蛋白以及重组DAF蛋白都有良好的结合活性和特异性。结论:先以pcDNA3.1/DAF肌肉内免疫,再应用细胞抗原加强免疫的方法制备特异性的mAb,为在无法获得纯化蛋白质的情况下开拓了研制特异性抗体的新途径,也为日后改造抗DAFmAb进行靶向治疗研究打下了基础。
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关键词
DAF
DNA
免疫
细胞抗原加强免疫
单克隆抗体
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题名
以DNA免疫和细胞抗原加强制备抗DAF单克隆抗体及特性分析
1
作者
潘娜
石琳
黄丽华
周立
何大水
张宇光
机构
中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第7期652-656,共5页
文摘
目的:联合应用DNA免疫和细胞抗原加强制备抗DAF单克隆抗体(mAb)并鉴定其特性。方法:利用分子克隆的方法构建重组质粒pcDNA3.1/DAF。以其免疫BALB/c小鼠股四头肌3次,并在融合前用表达DAF分子的HPB-ALL细胞为抗原加强免疫1次,制备抗DAFmAb。以ELISA法测定mAb的Ig亚类。采用流式细胞术和Westernblot鉴定mAb的特异性和结合活性。以非免疫竞争法测定mAb的亲和常数。结果:成功地获得2株可识别DAF分子不同抗原表位的mAbB6E和2B6B,其Ig亚类均为IgG2a。mAb2B6E的亲和常数为1.81×10-7mol/L,与天然的细胞膜蛋白、变性的膜蛋白以及重组DAF蛋白都有良好的结合活性和特异性。结论:先以pcDNA3.1/DAF肌肉内免疫,再应用细胞抗原加强免疫的方法制备特异性的mAb,为在无法获得纯化蛋白质的情况下开拓了研制特异性抗体的新途径,也为日后改造抗DAFmAb进行靶向治疗研究打下了基础。
关键词
DAF
DNA
免疫
细胞抗原加强免疫
单克隆抗体
Keywords
DAF
DNA immunization
cell antigen boost
monoclonal antibody
分类号
R392.11 [医药卫生—免疫学]
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作者
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1
以DNA免疫和细胞抗原加强制备抗DAF单克隆抗体及特性分析
潘娜
石琳
黄丽华
周立
何大水
张宇光
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007
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