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细胞外钾对HERG基因无义突变L539fs/47表达的调控 被引量:1
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作者 吕颖 张军波 +6 位作者 刘仲伟 张爱峰 潘军强 王军奎 潘硕 韩稳琦 孙超峰 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期228-233,共6页
目的:研究持续细胞外钾对野生型HERG与其突变体L539fs/47蛋白表达的影响。方法:用脂质体转染法将野生型HERG(WT)及其突变体HERG-L539fs/47(MT)分别转染HEK293细胞36 h后,0.8、4.3及10mmol/L的钾干预6 h,流式细胞术检测HERG蛋白表达量;干... 目的:研究持续细胞外钾对野生型HERG与其突变体L539fs/47蛋白表达的影响。方法:用脂质体转染法将野生型HERG(WT)及其突变体HERG-L539fs/47(MT)分别转染HEK293细胞36 h后,0.8、4.3及10mmol/L的钾干预6 h,流式细胞术检测HERG蛋白表达量;干预12 h用激光共聚焦成像和免疫印迹法进行HERG蛋白定位及表达量检测。结果:用激光共聚焦成像检测发现野生型HERG蛋白主要分布在细胞膜上;而HERG突变体L539fs/47蛋白大部分滞留胞浆;并且HERG蛋白的表达均随细胞外钾浓度升高而增多。流式细胞术结果显示细胞外高钾组荧光增多(P<0.01),WT组荧光阳性细胞百分比和荧光强度均高于MT组(P<0.05)。免疫印迹显示,不同于野生型HERG 135 kD及155 kD 2个条带,突变体仅60 kD 1个条带,3个条带均受细胞外钾影响(P<0.05)。结论:细胞外高钾增强细胞膜上野生型和突变型HERG通道蛋白的稳定性,持续低钾干预时间依赖性地减少HERG通道蛋白的表达。 展开更多
关键词 HERG基因 无义突变 细胞外钾 HEK293细胞
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