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茶树CsWAK8克隆及其在响应冷胁迫过程中的功能分析
1
作者
焦小雨
吴琼
+4 位作者
刘丹丹
孙明慧
阮旭
王雷刚
王文杰
《生物技术通报》
北大核心
2025年第2期210-220,共11页
【目的】细胞壁关联蛋白激酶(wall associated kinase,WAK)是一类特殊的类受体激酶(receptor like kinase,RLK),其在调节植物生长和应对生物或非生物胁迫等方面发挥着重要作用。探究CsWAK8在响应冷胁迫过程中的功能,为今后解析茶树抗寒...
【目的】细胞壁关联蛋白激酶(wall associated kinase,WAK)是一类特殊的类受体激酶(receptor like kinase,RLK),其在调节植物生长和应对生物或非生物胁迫等方面发挥着重要作用。探究CsWAK8在响应冷胁迫过程中的功能,为今后解析茶树抗寒机理提供理论依据。【方法】从茶树叶片中克隆了CsWAK8。采用实时荧光定量PCR(qPCR)分析CsWAK8在不同组织以及越冬期不同抗寒性茶树品系中的表达模式。通过农杆菌介导法在拟南芥中异源表达CsWAK8,并对转基因植株进行冷处理表型观察、酶活测定和冷响应相关基因表达检测。【结果】CsWAK8的CDS全长2307 bp,编码768个氨基酸,具有WAK家族特征保守结构域。CsWAK8在茶树成熟叶片中高表达,在越冬期,冷敏感型茶树品系叶片和根中CsWAK8表达量多显著高于冷耐受型茶树品系。通过异源过表达获得了9株转CsWAK8拟南芥纯合株系,对其中3个株系进行了耐冷性分析,发现在冷胁迫下,转基因株系的根长和存活率显著低于野生型,盆栽苗莲座叶的枯死程度较野生型更高,且转基因株系L48在冷冻处理6 h时的MDA含量显著高于野生型。此外,q PCR分析结果显示,在冷胁迫下,转CsWAK8拟南芥中AtCBFs的相对表达量大多显著低于野生型。【结论】转CsWAK8拟南芥相较于野生型拟南芥对冷处理更敏感。CsWAK8可能通过CBF介导的冷信号途径在响应和耐受冷胁迫过程中起负调节作用。
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关键词
茶树
细胞壁
关联
蛋白
激酶
(WAK)
基因克隆
功能验证
冷胁迫
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题名
茶树CsWAK8克隆及其在响应冷胁迫过程中的功能分析
1
作者
焦小雨
吴琼
刘丹丹
孙明慧
阮旭
王雷刚
王文杰
机构
安徽省农业科学院茶叶研究所
出处
《生物技术通报》
北大核心
2025年第2期210-220,共11页
基金
国家自然科学基金联合基金项目(U23A20213)
安徽省茶叶产业技术体系(AHCYJSTX-11)
安徽省农业科学院成果转化项目(2024YL041)。
文摘
【目的】细胞壁关联蛋白激酶(wall associated kinase,WAK)是一类特殊的类受体激酶(receptor like kinase,RLK),其在调节植物生长和应对生物或非生物胁迫等方面发挥着重要作用。探究CsWAK8在响应冷胁迫过程中的功能,为今后解析茶树抗寒机理提供理论依据。【方法】从茶树叶片中克隆了CsWAK8。采用实时荧光定量PCR(qPCR)分析CsWAK8在不同组织以及越冬期不同抗寒性茶树品系中的表达模式。通过农杆菌介导法在拟南芥中异源表达CsWAK8,并对转基因植株进行冷处理表型观察、酶活测定和冷响应相关基因表达检测。【结果】CsWAK8的CDS全长2307 bp,编码768个氨基酸,具有WAK家族特征保守结构域。CsWAK8在茶树成熟叶片中高表达,在越冬期,冷敏感型茶树品系叶片和根中CsWAK8表达量多显著高于冷耐受型茶树品系。通过异源过表达获得了9株转CsWAK8拟南芥纯合株系,对其中3个株系进行了耐冷性分析,发现在冷胁迫下,转基因株系的根长和存活率显著低于野生型,盆栽苗莲座叶的枯死程度较野生型更高,且转基因株系L48在冷冻处理6 h时的MDA含量显著高于野生型。此外,q PCR分析结果显示,在冷胁迫下,转CsWAK8拟南芥中AtCBFs的相对表达量大多显著低于野生型。【结论】转CsWAK8拟南芥相较于野生型拟南芥对冷处理更敏感。CsWAK8可能通过CBF介导的冷信号途径在响应和耐受冷胁迫过程中起负调节作用。
关键词
茶树
细胞壁
关联
蛋白
激酶
(WAK)
基因克隆
功能验证
冷胁迫
Keywords
Camellia sinensis
wall associated kinase(WAK)
gene cloning
functional verification
cold stress
分类号
S571.1 [农业科学—茶叶生产加工]
Q943.2 [生物学—植物学]
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作者
出处
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1
茶树CsWAK8克隆及其在响应冷胁迫过程中的功能分析
焦小雨
吴琼
刘丹丹
孙明慧
阮旭
王雷刚
王文杰
《生物技术通报》
北大核心
2025
0
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