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小麦细胞增殖核抗原基因启动子的克隆及活性分析
1
作者
于永昂
张改生
+6 位作者
张姣
宋瑜龙
朱启迪
巨岚
牛娜
王军卫
马守才
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第5期527-534,共8页
细胞增殖核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)基因是DNA聚合酶δ的辅助因子,在真核细胞DNA复制及其损伤修复中发挥着重要的作用.采用高效热不对称交互PCR法(highefficiency thermal asymmetric interlaced PCR,hi TAIL-PCR...
细胞增殖核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)基因是DNA聚合酶δ的辅助因子,在真核细胞DNA复制及其损伤修复中发挥着重要的作用.采用高效热不对称交互PCR法(highefficiency thermal asymmetric interlaced PCR,hi TAIL-PCR)从小麦西农1 376基因组中扩增得到小麦PCNA基因启动子片段,并命名为Ta PCNA启动子.Plant CARE启动子在线分析软件预测含有光应答调控元件(Box I)、脱落酸应答元件(ABRE)、花粉发育应答元件(GGTT motif,GTGA motif)及细胞周期转换结合位点(E2F-binding site)等.为了分析其启动子活性,通过替换p BI121载体上的Ca MV35S启动子,构建了Ta PCNA启动子与β-葡糖醛酸酶(GUS)基因的融合表达载体,通过农杆菌介导法在烟草叶片中进行瞬时表达.GUS组织化学染色结果表明,Ta PCNA基因启动子能够驱动GUS基因在烟草叶片中表达,证实了所获得的启动子序列具有启动活性.本研究通过hi TAILPCR法克隆得到Ta PCNA基因的启动子,为深入研究该基因的功能奠定了基础.
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关键词
小麦
细胞增殖核抗原基因
启动子
顺式作用元件
瞬时表达
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职称材料
镉胁迫对拟南芥幼苗形态生理和错配修复相关基因表达的影响研究
被引量：
13
2
作者
韩艳萍
刘宛
+3 位作者
李艳芝
李培军
张巧丽
郭艳丽
《农业环境科学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第6期1246-1252,共7页
以拟南芥为供试材料,从形态指标、生理指标、分子指标3个层次研究了镉(Cd)的毒理效应,筛选Cd敏感生物标记物。分子指标的研究以18SrRNA为看家基因,错配修复基因MutS2homolog(atMSH2),atMSH3,atMSH7,细胞增殖核抗原1和2(atPCNA1和atPCNA2...
以拟南芥为供试材料,从形态指标、生理指标、分子指标3个层次研究了镉(Cd)的毒理效应,筛选Cd敏感生物标记物。分子指标的研究以18SrRNA为看家基因,错配修复基因MutS2homolog(atMSH2),atMSH3,atMSH7,细胞增殖核抗原1和2(atPCNA1和atPCNA2)为检测目的基因,采用半定量反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术研究Cd胁迫对上述错配修复相关基因表达的影响。结果表明,不同浓度(0、0.125、0.25、1.0、3.0mg·L-1)Cd处理7d后,根长随Cd胁迫强度的增加而降低;0.125mg·L-1Cd处理下,地上部可溶性蛋白含量显著增加,而在0.25、1.0和3.0mg·L-1Cd时降低,但仍高于对照;幼苗叶片数、地上部鲜重、叶绿素含量变化与对照相比差异均不显著。地上部atMSH2,atPCNA1,atPCNA2基因表达量的变化与Cd胁迫浓度呈明显的倒U字型关系,分别在0.125,0.25和0.125mg·L-1Cd时达到最大值。以上结果表明,地上部可溶性蛋白含量变化与上述3个错配修复相关基因表达量的改变趋势相符,且均对Cd污染胁迫较敏感,可以作为检测Cd污染及其相关生物学效应的潜在生物标记物。
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关键词
镉
错配修复
基因
细胞增殖核抗原基因
生物标记物
半定量RT—PCR
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职称材料
题名
小麦细胞增殖核抗原基因启动子的克隆及活性分析
1
作者
于永昂
张改生
张姣
宋瑜龙
朱启迪
巨岚
牛娜
王军卫
马守才
机构
西北农林科技大学国家杨凌农业生物技术育种中心/国家小麦改良中心杨凌分中心/小麦育种教育部工程研究中心/陕西省作物杂种优势研究与利用重点实验室
出处
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第5期527-534,共8页
基金
国家高技术研究发展计划(863计划
No.2011AA10A106)
+2 种基金
国家自然科学基金(No.31171611
No.31371697)
陕西省科技统筹创新工程计划课题(No.2014KTZB02-02)项目资助~~
文摘
细胞增殖核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)基因是DNA聚合酶δ的辅助因子,在真核细胞DNA复制及其损伤修复中发挥着重要的作用.采用高效热不对称交互PCR法(highefficiency thermal asymmetric interlaced PCR,hi TAIL-PCR)从小麦西农1 376基因组中扩增得到小麦PCNA基因启动子片段,并命名为Ta PCNA启动子.Plant CARE启动子在线分析软件预测含有光应答调控元件(Box I)、脱落酸应答元件(ABRE)、花粉发育应答元件(GGTT motif,GTGA motif)及细胞周期转换结合位点(E2F-binding site)等.为了分析其启动子活性,通过替换p BI121载体上的Ca MV35S启动子,构建了Ta PCNA启动子与β-葡糖醛酸酶(GUS)基因的融合表达载体,通过农杆菌介导法在烟草叶片中进行瞬时表达.GUS组织化学染色结果表明,Ta PCNA基因启动子能够驱动GUS基因在烟草叶片中表达,证实了所获得的启动子序列具有启动活性.本研究通过hi TAILPCR法克隆得到Ta PCNA基因的启动子,为深入研究该基因的功能奠定了基础.
关键词
小麦
细胞增殖核抗原基因
启动子
顺式作用元件
瞬时表达
Keywords
wheat
proliferating cell nuclear antigen gene
promoter
cis-acting elements
transient expression
分类号
Q51 [生物学—生物化学]
Q946.1 [生物学—植物学]
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职称材料
题名
镉胁迫对拟南芥幼苗形态生理和错配修复相关基因表达的影响研究
被引量：
13
2
作者
韩艳萍
刘宛
李艳芝
李培军
张巧丽
郭艳丽
机构
中国科学院沈阳应用生态研究所陆地生态过程重点实验室
中国科学院研究生院
济宁医学院药学院
出处
《农业环境科学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第6期1246-1252,共7页
基金
中国科学院沈阳应用生态研究所陆地生态过程重点实验基金
中科院知识创新重大项目(KZCX1-YW-06-03)
+1 种基金
国家重点基础研究发展计划(2004CB418506)
中俄自然资源与生态环境联合研究中心资助
文摘
以拟南芥为供试材料,从形态指标、生理指标、分子指标3个层次研究了镉(Cd)的毒理效应,筛选Cd敏感生物标记物。分子指标的研究以18SrRNA为看家基因,错配修复基因MutS2homolog(atMSH2),atMSH3,atMSH7,细胞增殖核抗原1和2(atPCNA1和atPCNA2)为检测目的基因,采用半定量反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术研究Cd胁迫对上述错配修复相关基因表达的影响。结果表明,不同浓度(0、0.125、0.25、1.0、3.0mg·L-1)Cd处理7d后,根长随Cd胁迫强度的增加而降低;0.125mg·L-1Cd处理下,地上部可溶性蛋白含量显著增加,而在0.25、1.0和3.0mg·L-1Cd时降低,但仍高于对照;幼苗叶片数、地上部鲜重、叶绿素含量变化与对照相比差异均不显著。地上部atMSH2,atPCNA1,atPCNA2基因表达量的变化与Cd胁迫浓度呈明显的倒U字型关系,分别在0.125,0.25和0.125mg·L-1Cd时达到最大值。以上结果表明,地上部可溶性蛋白含量变化与上述3个错配修复相关基因表达量的改变趋势相符,且均对Cd污染胁迫较敏感,可以作为检测Cd污染及其相关生物学效应的潜在生物标记物。
关键词
镉
错配修复
基因
细胞增殖核抗原基因
生物标记物
半定量RT—PCR
Keywords
Cd
mismatch repair genes
proliferating cell nuclear antigen（PCNA ） genes
biomarker
semi-quantitative RT-PCR
分类号
X503.233 [环境科学与工程—环境工程]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
小麦细胞增殖核抗原基因启动子的克隆及活性分析
于永昂
张改生
张姣
宋瑜龙
朱启迪
巨岚
牛娜
王军卫
马守才
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
镉胁迫对拟南芥幼苗形态生理和错配修复相关基因表达的影响研究
韩艳萍
刘宛
李艳芝
李培军
张巧丽
郭艳丽
《农业环境科学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009
13
在线阅读
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职称材料
已选择
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