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UPLC法测定CHO细胞培养液中17种氨基酸的含量及其变化规律
1
作者 周杰 蔡俊 《化学与生物工程》 北大核心 2025年第4期64-68,共5页
采用超高效液相色谱(UPLC)法对CHO细胞培养液中17种氨基酸进行定量分析。结果表明,17种氨基酸色谱分离度均大于1.5,半胱氨酸在2~20μg·mL^(-1)浓度范围内相关系数R^(2)为0.9956,其他16种氨基酸在0.1~20μg·mL^(-1)浓度范围内... 采用超高效液相色谱(UPLC)法对CHO细胞培养液中17种氨基酸进行定量分析。结果表明,17种氨基酸色谱分离度均大于1.5,半胱氨酸在2~20μg·mL^(-1)浓度范围内相关系数R^(2)为0.9956,其他16种氨基酸在0.1~20μg·mL^(-1)浓度范围内相关系数R^(2)均不低于0.9987;方法检出限为0.02~1μg·mL^(-1),定量限为0.1~2μg·mL^(-1);精密度、重复性和稳定性相对标准偏差(RSD)均小于4%,适用于CHO细胞培养液中氨基酸的定量分析。根据CHO细胞培养液中氨基酸的含量变化,可推断酪氨酸、半胱氨酸可能为细胞生长的营养限制性成分,对CHO细胞基础培养基或补料培养基中氨基酸种类及含量的调控具有一定的指导意义。 展开更多
关键词 超高效液相色谱(UPLC) 氨基酸 CHO细胞培养液
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柱前衍生化高效液相色谱法测定细胞培养液中的前列腺素E_2 被引量：2
2
作者 吴涛 叶笃筠 +2 位作者 张力 周晓燕 吴萍 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期104-104,共1页
关键词 柱前衍生化(precolumn derivatization) 高效液相色谱法(high performance liquid chromatography HPLC) 前列腺素E2(prostaglandin E2) 细胞培养液(cell supernatant)
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骨髓成纤维细胞条件培养液对巨核系细胞体外增殖和血小板体内生成的影响 被引量：4
3
作者 黄艳红 周小莹 +3 位作者 谭孟群 程腊梅 卢光琇 王绮如 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期726-728,共3页
关键词 骨髓成纤维细胞 条件培养液 巨核细胞 血小板 小鼠
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蜕膜细胞条件培养液对滋养细胞侵袭调节基因表达的影响 被引量：13
4
作者 张曦倩 庞战军 +1 位作者 陈士岭 邢福祺 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2002年第7期588-591,共4页
目的　探讨蜕膜细胞条件培养液（DCM）对滋养细胞侵袭调节基因表达的影响。方法　用体外培养早孕、晚孕蜕膜细胞的方法制备DCM,然后将其处理体外培养的早孕滋养细胞。用半定量反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）分析早孕滋养细胞侵袭调节基... 目的　探讨蜕膜细胞条件培养液（DCM）对滋养细胞侵袭调节基因表达的影响。方法　用体外培养早孕、晚孕蜕膜细胞的方法制备DCM,然后将其处理体外培养的早孕滋养细胞。用半定量反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）分析早孕滋养细胞侵袭调节基因表达的变化。结果　正常培养的早孕滋养细胞中基质金属蛋白酶（MMP）-2、MMP-9、基质金属蛋白酶抑制物（TIMP-1）、尿激酶型纤溶酶原激活因子（u-PA）mRNA均有表达;而TIMP-2、纤溶酶原激活因子抑制因子（PAI-1）mRNA未见表达。早孕和晚孕DCM均能下调滋养细胞MMP-2、MMP-9、u-PAmRNA的表达,而上调TIMP-1mRNA的表达。早孕、晚孕DCM均能诱导滋养细胞PAI-1mRNA的表达,但对TIMP-2mRNA的表达未见有影响。结论　蜕膜细胞可能通过调节滋养细胞中MMP-2、MMP-9与TIMP-1之间的平衡以及u-PA与PAI-1之间的平衡,而影响滋养细胞的侵袭能力。 展开更多
关键词 滋养细胞 基因表达调节 蜕膜细胞条件培养液 体外培养 RT-PCR 早孕
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间充质干细胞条件培养液对人脐静脉内皮细胞增殖、迁移和黏附的影响 被引量：3
5
作者 郑飞 李霞 +6 位作者 张蕾 孔霞 郭凌陨 杨建业 黄永章 唐俊明 王家宁 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期154-158,共5页
本研究探索间充质干细胞(MSC)条件培养液对人脐静脉内皮细胞增殖、迁移和黏附能力的影响及其可能的机制。采用经典全骨髓贴壁法培养MSC,用流式细胞术鉴定MSC表面标志特征。收集MSC条件培养液(MSC-CM),过表达基质细胞细胞衍生因子1(SDF-1... 本研究探索间充质干细胞(MSC)条件培养液对人脐静脉内皮细胞增殖、迁移和黏附能力的影响及其可能的机制。采用经典全骨髓贴壁法培养MSC,用流式细胞术鉴定MSC表面标志特征。收集MSC条件培养液(MSC-CM),过表达基质细胞细胞衍生因子1(SDF-1)的MSC条件培养液(Ad-SDF-1-MSC-CM),以2%FBS-DMEM、15%FBS-DMEM培养液为对照,将MSC-CM、Ad-SDF-1-MSC-CM等条件培养液加入人脐静脉内皮细胞株(CRL1730)作用24 h后,用MTT法检测CRL1730细胞的增殖情况,利用划痕法和黏附模型评价MSC-CM对CRL1730细胞迁移能力和黏附能力的影响。结果表明,与MSC-CM相比,Ad-SDF-1-MSC-CM处理的CRL1730细胞表现出更强的增殖能力,加入阻断剂AMD3100后,MSC-CM所介导的促增殖效应明显降低。MSC-CM、Ad-SDF-1-MSC-CM促进CRL1730细胞的迁移,AMD3100明显抑制其所介导的CRL1730细胞迁移。与MSC-CM相比,Ad-SDF-1-MSC-CM处理的CRL1730细胞黏附能力明显增强,AMD3100能显著降低其增强CRL1730黏附能力的作用。结论:MSC-CM对CRL1730细胞的促增殖、迁移和黏附能力与其分泌的细胞因子SDF-1密切相关。 展开更多
关键词 间充质干细胞 条件培养液 脐静脉内皮细胞 细胞增殖 细胞黏附 细胞迁移
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不同培养液对体外培养的小鼠胸腺上皮细胞增殖的影响 被引量：4
6
作者 李英 马勇江 +2 位作者 刘健红 张媛 李玉谷 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第10期229-231,共3页
分离纯化小鼠胸腺上皮细胞(mTEC),以DMEM、DMEM/F12、RPMI 1640 3种基础培养液加10%胎牛血清完全培养液进行培养,MTT法和流式细胞术分别检测mTEC的增殖及细胞周期,筛选出最适合mTEC生长的培养液。结果表明,DMEM培养的mTEC增殖快,细胞增... 分离纯化小鼠胸腺上皮细胞(mTEC),以DMEM、DMEM/F12、RPMI 1640 3种基础培养液加10%胎牛血清完全培养液进行培养,MTT法和流式细胞术分别检测mTEC的增殖及细胞周期,筛选出最适合mTEC生长的培养液。结果表明,DMEM培养的mTEC增殖快,细胞增殖指数明显高于DMEM/F12、RPMI 1640培养液,表明DMEM是mTEC体外培养的最佳培养液。 展开更多
关键词 小鼠胸腺上皮细胞 培养液 细胞增殖 细胞周期
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条件培养液对兔骨髓基质细胞向成骨细胞分化的影响 被引量：8
7
作者 武和明 邢树忠 张晓旻 《医学研究生学报》 CAS 2002年第1期65-67,共3页
目的 :观察条件培养液对兔骨髓基质细胞向成骨细胞分化的影响。　方法 :分离兔骨髓 ,培养骨髓基质细胞 ,传代细胞分别用标准培养液和加入 β 甘油磷酸钠 ,地塞米松和抗坏血酸制成的条件培养液培养 ,观察不同培养液下骨髓基质细胞碱性磷... 目的 :观察条件培养液对兔骨髓基质细胞向成骨细胞分化的影响。　方法 :分离兔骨髓 ,培养骨髓基质细胞 ,传代细胞分别用标准培养液和加入 β 甘油磷酸钠 ,地塞米松和抗坏血酸制成的条件培养液培养 ,观察不同培养液下骨髓基质细胞碱性磷酸酶活性和骨钙素含量。　结果 :在条件培养液下 ,骨髓基质细胞碱性磷酸酶活性和骨钙素含量明显高于标准培养液下的含量。　结论 展开更多
关键词 骨髓基质细胞 培养 条件培养液
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细胞来源和培养液成分对大鼠神经前体细胞增殖和分化的影响 被引量：4
8
作者 王艳霞 李莹 +1 位作者 陆佩华 富赛里 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期607-612,共6页
在成功建立体外分离培养大鼠胚胎脑和脊髓神经前体细胞(neuron precursor cells,NPCs)的基础上,本研究设计了三种培养液组合:DF/N2、DF/B27和DF/(N2+B27),观察在不同培养液成分对胚胎脑和脊髓NPCs增殖和分化的影响。结果显示:与NF/N2組... 在成功建立体外分离培养大鼠胚胎脑和脊髓神经前体细胞(neuron precursor cells,NPCs)的基础上,本研究设计了三种培养液组合:DF/N2、DF/B27和DF/(N2+B27),观察在不同培养液成分对胚胎脑和脊髓NPCs增殖和分化的影响。结果显示:与NF/N2組和DF/B27组相比,脑来源的NPCs在DF/(N2+B27)中增殖最快、最稳定(P<0.01),而脊髓来源的NPCs在三种培养液组合中的增殖速度无明显差异。脑和胚胎15 d脊髓来源的NPCs在DF/B27和DF/(N2+B27)中分化为神经元的比例明显高于DF/N2组合(P<0.01);取自胚胎15 d的脊髓NPCs分化为神经元和少突胶质细胞的比例均显著高于胚胎16 d的NPCs(P<0.05)。以上结果提示:(1)在培养液中同时添加N2和B27不仅可以提高体外培养的NPCs的增殖速度,同时可显著增加神经元分化的比例;(2)NPCs的分化潜能可因NPCs来源(脑或脊髓)和发育阶段的不同而有差异。 展开更多
关键词 神经前体细胞 增殖 分化 培养液成分 大鼠
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骨髓成纤维细胞条件培养液对体外巨核系细胞生成的促进作用 被引量：4
9
作者 周小莹 黄艳红 +2 位作者 王绮如 卢光琇 谭孟群 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期658-661,共4页
目的 :探讨骨髓成纤维细胞条件培养液对体外巨核系细胞生成的促进作用。方法 :制备骨髓成纤维细胞条件培养液 (bonemarrowfibroblastsconditionedmedium ,BMF CM) ,分别观察BMF CM或BMF CM联合IL 11对体外培养条件下成熟巨核细胞生成的... 目的 :探讨骨髓成纤维细胞条件培养液对体外巨核系细胞生成的促进作用。方法 :制备骨髓成纤维细胞条件培养液 (bonemarrowfibroblastsconditionedmedium ,BMF CM) ,分别观察BMF CM或BMF CM联合IL 11对体外培养条件下成熟巨核细胞生成的影响及BMF CM对巨核系祖细胞生成的影响 ,并用RT PCR的方法检测Meg 0 1人巨核细胞系细胞NF E2mRNA的表达。结果 :BMF CM促进成熟巨核细胞生成。BMF CM联合IL 11促进成熟巨核细胞生成的效果更佳。BMF CM能促进巨核系祖细胞的生成。将 30 %BMF CM加入Meg 0 1人巨核细胞系培养体系培养 4h ,与对照组相比 ,NF E2表达增强。结论 展开更多
关键词 巨核细胞 骨髓 成纤维细胞 细胞生成 体外 条件培养液 IL—1 RNA RT—PcR 表达
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猪肺动脉缺氧内皮细胞条件培养液和DDPH对肺动脉平滑肌细胞增殖的影响 被引量：7
10
作者 江向宁 袁永辉 +1 位作者 张婉蓉 车东媛 《同济医科大学学报》 CSCD 北大核心 1995年第6期405-407,共3页
用３Ｈ－胸腺嘧啶核苷和３Ｈ－尿嘧啶核苷掺入法及流式细胞术，观察猪肺动脉缺氧内皮细胞条件培养液（ＨＥＣＣＭ）和１－（２，６－二甲基苯氧基）－２－（３，４－二甲氧基苯乙氨基）丙烷盐酸盐（ＤＤＰＨ）对猪肺动脉平滑肌细胞（Ｐ... 用３Ｈ－胸腺嘧啶核苷和３Ｈ－尿嘧啶核苷掺入法及流式细胞术，观察猪肺动脉缺氧内皮细胞条件培养液（ＨＥＣＣＭ）和１－（２，６－二甲基苯氧基）－２－（３，４－二甲氧基苯乙氨基）丙烷盐酸盐（ＤＤＰＨ）对猪肺动脉平滑肌细胞（ＰＡＳＭＣｓ）ＤＮＡ、蛋白质合成及细胞周期的影响。结果显示：ＨＥＣ－ＣＭ可促进ＰＡＳＭＣｓ的ＤＮＡ合成，促进ＰＡＳＭＣｓ由静止期（Ｇ０／Ｇ１）进入ＤＮＡ合成期（Ｓ期）及有丝分裂期（Ｇ２＋Ｍ期），但对其蛋白质合成无明显影响。ＤＤＰＨ对ＨＥＣＣＭ引起ＰＡＳＭＣｓ的ＤＮＡ合成增高的抑制率为５９．７１％，对Ｇ０／Ｇ１期细胞进入Ｓ期增高的抑制率为２２．５８％，此外，ＤＤＰＨ对ＰＡＳＭＣｓ蛋白质的合成也有抑制作用，抑制率为２４．９３％。 展开更多
关键词 肺动脉 缺氧症 内皮细胞 平滑肌 培养液 DDPH
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ERK1/2信号转导通路对骨髓基质细胞条件培养液诱导大鼠中脑神经干细胞分化作用的影响 被引量：3
11
作者 顾平 王彦永 +5 位作者 马芹颖 温雅 崔冬生 刘力 王铭维 张振清 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期589-592,共4页
目的:探讨ERK1/2信号转导通路在骨髓基质细胞条件培养液(BMSCs-CM)诱导大鼠中脑神经干细胞(NSCs)分化中的作用。方法:将神经干细胞球种植干预先包被多聚赖氨酸的35 mm的培养皿中.神经干细胞球约30 min后贴壁.自然分化组将培养液换为含2%... 目的:探讨ERK1/2信号转导通路在骨髓基质细胞条件培养液(BMSCs-CM)诱导大鼠中脑神经干细胞(NSCs)分化中的作用。方法:将神经干细胞球种植干预先包被多聚赖氨酸的35 mm的培养皿中.神经干细胞球约30 min后贴壁.自然分化组将培养液换为含2%B27的neurobasal培养液,对照组换为BMSCs-CM.抑制剂组将培养液换为含有信号转导通路抑制剂PD98059(5μmol/L)的BMSCs-CM.7 d后采用免疫荧光染色方法观察NSCs后代细胞中神经元和星形胶质细胞的数量比例与形态差别。结果:用成年大鼠BMSCs-CM体外培养新生大鼠中脑NSCs.自然分化组NSCs分化的神经元为(15.7±10.3)%[低干对照组的(51.17±10.30)%.P<0.05],星形胶质细胞为(66.9±14.8)%[明显高于对照组的(23.26±5.60)%.P<0.05]。而抑制剂组神经元所占比例为(39.48±7.29)%[明显低于对照组.P<0.01].星形胶质细胞的比例为(31.01±8.96)%[明显高干对照组,P<0.01]。结论:BMSCs-CM可以提高神经干细胞分化为神经元的比例.并且同时降低了其分化为星形胶质细胞的比例,这两种作用很可能是通过ERK1/2信号转导通路实现的。 展开更多
关键词 ERKl/2信号转导通路 骨髓基质细胞 条件培养液 神经干细胞
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条件培养液对人视网膜前体细胞分化的诱导 被引量：3
12
作者 马静 唐仕波 +1 位作者 罗燕 林少芬 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2006年第1期65-68,共4页
目的：研究各种培养液对人视网膜前体细胞（RPC）的诱导分化作用。方法：分离培养3～5个月人胚胎RPC，分别用胎牛血清（FBS组）、视网膜组织培养上清（RE组）、视网膜色素上皮培养上清（RPE组）诱导分化。采用免疫组化SP法检测细胞诱导... 目的：研究各种培养液对人视网膜前体细胞（RPC）的诱导分化作用。方法：分离培养3～5个月人胚胎RPC，分别用胎牛血清（FBS组）、视网膜组织培养上清（RE组）、视网膜色素上皮培养上清（RPE组）诱导分化。采用免疫组化SP法检测细胞诱导前后Nestin、微管相关蛋白-2（MAP-2）、胶质纤维酸性蛋白（GFAP）、视紫红质（Rhodopsin）及蛋白激酶C（PKC）和钙结合蛋白（Calbindin）的表达情况，流式细胞术检测诱导后MAP-2、GFAP及Rhodopsin阳性细胞数。结果：原代及传代培养的RPC表达Nestin，能分裂增殖，形成子代细胞团。RE组和FBS组细胞诱导分化后形态多样，连接广泛；RPE组细胞呈圆形，不贴壁。诱导分化后RE组细胞MAP-2的表达高于RPE组和FBS组（P〈0．01）．而Rhodopsin的表达低于RPE组（P〈0．01）；GFAP的表达在RPE组最低，RE组较高，FBS组最高（P〈0．05）。结论：不同培养基诱导呵使人RPC的分化产生差异。 展开更多
关键词 视网膜前体细胞 培养 分化 神经干细胞 培养液
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不同状态的大鼠星形胶质细胞条件培养液对脑微血管内皮细胞血脑屏障特征性酶的影响 被引量：9
13
作者 朱元 李澎涛 +3 位作者 李卫红 贾静 盖聪 刘洋 《世界科学技术-中医药现代化》 北大核心 2012年第2期1393-1398,共6页
目的:探讨不同状态下大鼠星形胶质细胞(AS)条件培养液对脑微血管内皮细胞(BMEC)活性和血脑屏障特征性酶的影响,以及通络救脑注射液对此过程的干预作用。方法:收集正常、激活、激活合并通络救脑注射液处理、损伤、损伤合并通络救脑注射... 目的:探讨不同状态下大鼠星形胶质细胞(AS)条件培养液对脑微血管内皮细胞(BMEC)活性和血脑屏障特征性酶的影响,以及通络救脑注射液对此过程的干预作用。方法:收集正常、激活、激活合并通络救脑注射液处理、损伤、损伤合并通络救脑注射液处理5种不同状态的星形胶质细胞条件培养液,分别作用于拟缺血损伤的脑微血管内皮细胞,采用MTT法检测细胞活性,微量酶标仪法和上机比色法检测碱性磷酸酶(AKP)、γ-谷氨酰胺转肽酶(γ-GT)的活性。结果:正常星形胶质细胞条件培养液能明显提高受损内皮细胞活性,诱导AKP、γ-GT活性增强,激活的星形胶质细胞条件培养液上述作用下降,而损伤后的星胶条件培养液对受损内皮细胞几乎无作用。通络救脑注射液作用于激活和损伤星形胶质细胞后,其条件培养液提高内皮细胞活性和AKP、γ-GT活性的作用显著增强。结论:正常AS的分泌产物对提高BMEC的活性和维持血脑屏障特性具有重要意义,AS受损后,该作用减弱或消失,通络救脑注射液可显著提高AS对受损BMEC活性和功能的保护作用,这可能是该药物发挥脑缺血性损伤后血脑屏障稳定作用的内在机制之一。 展开更多
关键词 星形胶质细胞条件培养液 脑微血管内皮细胞 AKP Γ-GT 通络救脑注射液
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两种未成熟卵母细胞体外成熟培养液的运用效果比较 被引量：5
14
作者 冯婷 王守林 +2 位作者 刘嘉茵 钱晓乔 蔡令波 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期121-127,共7页
目的:通过比较自行研配的培养液与商品化培养液在卵母细胞体外成熟中的运用效果,为进一步优化体外成熟培养体系提供依据。方法:分别选择使用自行配制培养液的(IVM-A组)110个周期和使用商品化(IVM-B组)培养液的99个周期,并以同期行ICSI... 目的:通过比较自行研配的培养液与商品化培养液在卵母细胞体外成熟中的运用效果,为进一步优化体外成熟培养体系提供依据。方法:分别选择使用自行配制培养液的(IVM-A组)110个周期和使用商品化(IVM-B组)培养液的99个周期,并以同期行ICSI的治疗周期为对照(ICSI-C1和ICSI-C2),比较两组在体外成熟、胚胎发育、胚胎种植、临床妊娠及结局等方面的差异。结果:在两对照ICSI-C1和ICSI-C2各项指标无差异的情况下,IVM-A组体外成熟和胚胎发育等方面均高于IVM-B组,且可移植胚胎率、优质胚胎率明显提高(P<0.05或P<0.01),可移植胚胎率已达到ICSI组水平。虽然表面上IVM-A组在胚胎种植率、妊娠率(临床妊娠率)、活产率等指标低于IVM-B组,但不同阶段的对照组其指标明显改变,ICSI-C2(2006年以后)明显好于ICSI-C1。这种差异可能与近年来的临床治疗方案的改善及宫腔镜的使用有关。值得注意的是,IVM-A的流产率只有10.53%,显著低于其他3组,而同期的对照(ICSI-C1)却明显高于ICSI-C2,提示使用自行配制培养液培养的胚胎可显著降低流产的发生。但由于样本量还不够大,结果尚待进一步验证。结论:自行配制的培养液具有较好的运用效果,可能与其中额外添加的mHFF及E2等有关。但系统尚需进一步优化,以保证其高效、安全、价廉。 展开更多
关键词 培养液 人成熟卵泡液 卵母细胞体外成熟(IVM) 胚胎发育 妊娠
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羊膜上皮细胞培养液抑制角膜基质细胞凋亡的实验研究 被引量：3
15
作者 马翔 赵贵阳 +1 位作者 沈健 于晓沁 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2003年第4期383-387,共5页
目的 对羊膜上皮细胞培养液抑制由肿瘤坏死因子(TNF-α)诱发的角膜基质细胞凋亡进行研究。方法 体外培养兔角膜基质细胞(RCK),30ng/ml TNF-α诱发角膜基质细胞凋亡。实验分为对照组、羊膜上皮细胞培养液组(羊膜组)和阴性对照组。应用FIT... 目的 对羊膜上皮细胞培养液抑制由肿瘤坏死因子(TNF-α)诱发的角膜基质细胞凋亡进行研究。方法 体外培养兔角膜基质细胞(RCK),30ng/ml TNF-α诱发角膜基质细胞凋亡。实验分为对照组、羊膜上皮细胞培养液组(羊膜组)和阴性对照组。应用FITC-dUTP-TUNEL和DAPI染色检测RCK细胞凋亡发生率,分别测定经24h培养后各组细胞凋亡特异性DNA梯形降解。Western blot检测细胞凋亡保护性因子Bcl-2、促进因子Bax在经羊膜上皮细胞培养液处理后于细胞中表达强度及Bcl-2/Bax比值变化。结果 羊膜上皮细胞培养液明显抑制由TNF-α诱发的兔角膜基质细胞凋亡,DAPI染色显示24h对照组,羊膜培养液组和阴性对照组细胞凋亡发生率分别为:42.4％±4.3％,2.2％±0.3％和2.7％±0.4％。DNA降解实验显示羊膜上皮细胞培养液明显抑制TNF-α诱导的DNA片段降解。Western blot显示羊膜上皮细胞培养液明显刺激RCK细胞Bcl-2蛋白的表达和分泌。结论 羊膜培养液中可能释放的多种细胞因子对TNF-α诱发的角膜基质细胞调亡具有明显的抑制作用,其作用机制之一是刺激Bcl-2在RCK细胞的表达,并使Bcl-2/Bax比值上调。 展开更多
关键词 羊膜 上皮细胞 培养液 角膜基质 细胞凋亡 实验研究
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星形胶质细胞条件培养液对缺氧损伤神经元的保护作用 被引量：8
16
作者 严稽文 黄其林 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期277-282,共6页
为了探讨星形胶质细胞条件培养液(ACM)对缺氧损伤神经元的保护作用,本实验将新生的KM小鼠的皮层星形胶质细胞分离、纯化并传代培养第三代第5d后,将星形胶质细胞(Ast)条件培养液,加入到缺氧损伤的神经元细胞培养液中,观测其对缺氧神经元... 为了探讨星形胶质细胞条件培养液(ACM)对缺氧损伤神经元的保护作用,本实验将新生的KM小鼠的皮层星形胶质细胞分离、纯化并传代培养第三代第5d后,将星形胶质细胞(Ast)条件培养液,加入到缺氧损伤的神经元细胞培养液中,观测其对缺氧神经元的存活及其合成和释放一氧化氮(NO)、乳酸脱氢酶(LDH)和胞膜ATP酶(ATPase)的影响。结果显示:10%和20%ACM对神经元存活有明显促进作用;与对照组相比,20%ACM还有效地减少了缺氧神经元NO、LDH的生成和分泌,保护和提高了ATPase的活性。以上结果提示ACM促进缺氧神经元的存活,其机制可能与减少NO、LDH合成释放及保护细胞膜上ATPase的活性有关。 展开更多
关键词 星形胶质细胞条件培养液 神经元 神经营养因子 细胞缺氧
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星形胶质细胞正常条件培养液对体外脑缺氧/复氧损伤神经元的影响 被引量：3
17
作者 宋岳涛 唐一鹏 洪庆涛 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期870-873,共4页
目的 :探讨星形胶质细胞正常条件培养液 (NCMA)对体外脑缺氧 /复氧 (H/R)损伤神经元的营养性作用。方法 :先行大鼠大脑皮质星形胶质细胞和神经元的分离纯化培养 ,然后用NCMA以不同的浓度培养正常及脑H/R损伤的神经元 ,通过MTT法测定其... 目的 :探讨星形胶质细胞正常条件培养液 (NCMA)对体外脑缺氧 /复氧 (H/R)损伤神经元的营养性作用。方法 :先行大鼠大脑皮质星形胶质细胞和神经元的分离纯化培养 ,然后用NCMA以不同的浓度培养正常及脑H/R损伤的神经元 ,通过MTT法测定其神经元的活性和存活率。结果 :NCMA能提高正常及脑H/R损伤神经元的活性和存活率。结论 :NCMA对培养的神经元具有营养性支持作用。 展开更多
关键词 星形细胞 神经元 缺氧 脑 条件培养液
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视网膜色素上皮细胞条件培养液促进视网膜神经胶质细胞增生 被引量：4
18
作者 富名水 张皙 +2 位作者 张喜梅 王方 顾青 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2002年第6期486-488,共3页
目的 观察体外培养的视网膜色素上皮细胞条件培养液对视网膜神经胶质细胞生长的影响。 方法 用不同稀释度的视网膜条件培养液培养视网膜神经胶质细胞,细胞计数法观察细胞数量的变化;MTT法测定对细胞增生活性(吸光度A值)的影响;流式细胞... 目的 观察体外培养的视网膜色素上皮细胞条件培养液对视网膜神经胶质细胞生长的影响。 方法 用不同稀释度的视网膜条件培养液培养视网膜神经胶质细胞,细胞计数法观察细胞数量的变化;MTT法测定对细胞增生活性(吸光度A值)的影响;流式细胞仪观察细胞周期的变化。结果 随着视网膜条件培养液稀释度的增加,视网膜胶质细胞的数量明显增加:稀释度为1:32时,细胞数为(40 854±427)/ml,稀释度为1:2时,细胞数为(59 360±491)/ml;吸光度A值升高(稀释度为1:16、1:8、1:2时,细胞增殖率分别为13.8%、32.9%、41.4％);进入S期的细胞明显增加(稀释度为1:32时,S期细胞数为30.72％,稀释度为1:32时,S期细胞数为56.50％),显示体外培养视网膜色素上皮细胞条件培养液促进视网膜神经胶质细胞增生。结论视网膜色素上皮细胞条件培养液促进视网膜神经胶质细胞增生,细胞间的相互作用对于PVR等的产生和发展是非常重要的。 展开更多
关键词 视网膜色素上皮细胞 RPE RG 视网膜神经胶质细胞 条件培养液 细胞增生 流式细胞仪 细胞周期 MTT法 增生性玻璃体视网膜病变 PVR
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人早孕滋养细胞条件培养液对外周血单个核细胞的趋化效应 被引量：1
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作者 黄煜 崔竹梅 +2 位作者 刘玉涛 于洁 李大金 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期703-707,共5页
目的:探讨人早孕滋养细胞在蜕膜免疫细胞选择性募集中的可能机制。方法:分离纯化人早孕滋养细胞进行原代培养,制备滋养细胞条件培养液(CM);将CM倍比稀释加入Transwell下室,分离的人外周血单个核细胞加入上室进行趋化实验,流式细胞术分... 目的:探讨人早孕滋养细胞在蜕膜免疫细胞选择性募集中的可能机制。方法:分离纯化人早孕滋养细胞进行原代培养,制备滋养细胞条件培养液(CM);将CM倍比稀释加入Transwell下室,分离的人外周血单个核细胞加入上室进行趋化实验,流式细胞术分析CM对PBMC各型免疫细胞的趋化效应。结果:4倍稀释的CM即显示对外周CD56+CD16-NK细胞、CD56+CD16+NK细胞、单核细胞的趋化活性,随CM浓度上升,各细胞的趋化活性也升高(P<0.001);CM原液也可明显趋化外周T细胞和γδT细胞(P<0.05);各浓度CM对NKT细胞均不表现趋化作用。CM趋化后的免疫细胞组成与趋化前显著不同,而与蜕膜免疫细胞的组成相似。结论:人早孕滋养细胞能够分泌多种趋化因子,募集外周血免疫细胞到达母胎界面,帮助形成蜕膜独特的免疫微环境,并维持母胎免疫耐受。 展开更多
关键词 滋养细胞 条件培养液 外周血单个核细胞 趋化
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条件培养液改进小鼠胚胎干细胞嵌合体制备效率的观察 被引量：1
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作者 何志颖 王新民 +2 位作者 李建秀 李文林 胡以平 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期294-297,共4页
目的:探讨如何通过改善小鼠胚胎干细胞(embryonic stem cell,ES)的培养条件来维持其未分化状态,提高嵌合体的制备效率。方法:以普通ES细胞培养液为对照,以TX WES培养液为ES细胞条件培养液分别对15 代以上的未工程化ES细胞和糖皮质激素受... 目的:探讨如何通过改善小鼠胚胎干细胞(embryonic stem cell,ES)的培养条件来维持其未分化状态,提高嵌合体的制备效率。方法:以普通ES细胞培养液为对照,以TX WES培养液为ES细胞条件培养液分别对15 代以上的未工程化ES细胞和糖皮质激素受体(GR)工程化ES细胞进行培养并筛选,通过囊胚注射制作嵌合体来比较2种不同培养液培养ES细胞后嵌合体制备效率的差别。结果:未工程化ES细胞以普通培养液培养其嵌合率为25.0%,以TX WES培养液培养其嵌合率提高到53.8%(P< 0.05);GR工程化ES细胞以普通培养液培养其嵌合率为15.0%,以TX WES培养液培养其嵌合率提高到52.3%(P<0.05)。结论:应用TX WES培养液改善小鼠ES细胞的培养条件可提高嵌合体的制备效率,该方法为基因剔除小鼠研究的顺利开展奠定了良好的基础。 展开更多
关键词 胚胎干细胞 TX-WES培养液 嵌合体
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