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Matrigel三维细胞培养方法培养的原代乳腺癌细胞生长情况及对阿霉素敏感性观察
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作者 张震 齐晓敏 +3 位作者 张薇 张培 曹旭晨 肖春花 《山东医药》 CAS 北大核心 2017年第19期17-20,共4页
目的观察Matrigel三维细胞培养方法培养的原代乳腺癌细胞生长情况及其对阿霉素的敏感性。方法分别采用二维单层培养法、Matrigel三维细胞培养方法培养原代乳腺癌细胞。在培养的第1、3、5、7天,采用Olympus Ⅸ70倒置显微镜观察二维单层... 目的观察Matrigel三维细胞培养方法培养的原代乳腺癌细胞生长情况及其对阿霉素的敏感性。方法分别采用二维单层培养法、Matrigel三维细胞培养方法培养原代乳腺癌细胞。在培养的第1、3、5、7天,采用Olympus Ⅸ70倒置显微镜观察二维单层培养及三维培养条件下的原代乳腺癌细胞形态,采用CellTiter-Glo~发光法观察细胞生长增殖情况及其对阿霉素的敏感性,绘制原代乳腺癌细胞生长曲线及药敏曲线。结果二维单层培养的原代乳腺癌细胞贴壁生长,癌细胞聚集成巢状,呈多种形态。三维细胞培养的原代乳腺癌细胞聚集成紧密的多肿瘤细胞微球。二维单层培养第1、3、5、7天原代乳腺癌细胞的增殖倍数分别为1.00±0.00、1.39±0.29、2.08±0.25、3.26±0.41;三维培养第1、3、5、7天原代乳腺癌细胞的增殖倍数分别为1.00±0.00、1.25±0.08、1.79±0.10、1.58±0.02。随阿霉素浓度升高,二维单层培养及三维培养下的原代乳腺癌细胞增殖抑制率增高。但三维细胞培养的原代乳腺癌细胞增殖抑制率均低于二维细胞培养。结论 Matrigel三维细胞培养的原代乳腺癌细胞可聚集成紧密的球形,细胞增殖速度变慢,对阿霉素的敏感性降低。Matrigel三维细胞培养原代乳腺癌细胞效果较好。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 乳腺癌 Matrigel三维细胞培养方法 细胞形态 细胞增殖 药物敏感性
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大鼠骨髓单个核细胞诱导扩增为内皮祖细胞的细胞分离方法、接种数目、培养瓶包被条件
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作者 孙白羽 陈静依 姜志超 《山东医药》 CAS 2024年第21期44-48,共5页
目的筛选大鼠骨髓单个核细胞(BMMNCs)诱导扩增为内皮祖细胞(BM-EPCs)的细胞分离方法、接种数目、培养瓶包被条件,构建一个高效、高产量、高纯度的骨髓来源BM-EPCs分离培养诱导扩增方法。方法取2周龄雄性SD大鼠,脱颈处死后分离大鼠双侧... 目的筛选大鼠骨髓单个核细胞(BMMNCs)诱导扩增为内皮祖细胞(BM-EPCs)的细胞分离方法、接种数目、培养瓶包被条件,构建一个高效、高产量、高纯度的骨髓来源BM-EPCs分离培养诱导扩增方法。方法取2周龄雄性SD大鼠,脱颈处死后分离大鼠双侧胫骨和股骨,收集骨髓细胞悬液。配制30%、50%、60%和70%浓度的Percoll细胞分离液,通过Percoll密度梯度离心法分离出大鼠BMMNCs种子细胞,并计算活细胞比例。将获得的BMMNCs分为1×10^(5)、5×10^(5)、1×10^(6)、2.5×10^(6)、5×10^(6)、1×10^(7)六个组别,分别接种于25 cm^(2)无菌培养瓶中,培养7 d后镜下观察各组细胞集落形成数目,并计算每10^(6)细胞的集落形成数。运用Graphpad prism9.5软件进行Logistic拟合曲线,根据相关系数R^(2)确定相关性,根据其P值将有统计学差异的接种数目纳入范围,随后使用R语言编程定义计算函数,根据已知种子细胞总数及相关性函数限制下,通过迭代寻找最佳的BMMNCs细胞接种数目。分别配制20、50、100 nmol/L浓度的人纤连蛋白(FN)溶液,以不添加FN的空白溶液为对照,分别包被空白培养瓶2、6、12、24 h,将收集的48 h未贴壁BMMNCs接种于FN包被的各培养瓶中,静置培养3 d后计算各组集落形成数目,确定FN包被的最佳浓度与时间。接种48 h未贴壁BMMNCs于25 cm^(2)培养瓶底,使用EGM-2完全培养基定向诱导,于显微镜下观察集落形成及诱导扩增进程。取培养14 d的BM-EPCs,分别采用双阳性染色法和流式细胞术鉴定BM-EPCs的纯度。结果使用Percoll分离法可把BMMNCs细胞清晰的分为5层,其中30%与50%Percoll细胞分离层之间为BMMNCs活细胞比率最高。BMMNCs的最优接种数目为2.5×10^(6)个。以50 nmol/L的FN溶液包被24 h或以100 nmol/L的FN溶液包被6 h皆可有效促进细胞集落形成。细胞接种7 d后获得形态良好的铺路石样细胞并建立生长优势,表明BMMNCs已经诱导成为形态良好的BM-EPCs。Dil-Ac-LDL/FITC-UEA-1双阳性细胞占比为91.89%±5.77%,CD31+KDR阳性率为90.73%±0.61%、CD14阳性率为0.53%±0.17%、CD45阳性率0.77%±0.34%,说明获得的BM-EPCs纯度良好。结论大鼠BMMNCs诱导扩增为BM-EPCs过程中,可使用Percoll密度梯度离心法分离BMMNCs,BMMNCs的最优细胞接种数目为2.5×10^(6)个,细胞培养瓶包被条件为以50 nmol/L的FN溶液包被24 h或以100 nmol/L的FN溶液包被6 h,分离培养诱导获得的BM-EPCs形态和纯度均良好。 展开更多
关键词 内皮祖细胞 骨髓来源内皮祖细胞 单个核细胞 骨髓单个核细胞 Percoll密度梯度离心法 人纤连蛋白 骨组织工程 细胞分离方法 细胞培养方法
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人胚胎肾小球系膜细胞培养与鉴定 被引量:4
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作者 赵湘 周永列 +4 位作者 茅夏娃 祝正明 谢月英 金李君 郭俊华 《中国中西医结合肾病杂志》 2006年第8期409-410,i0002,共3页
关键词 肾小球系膜细胞增生 系膜细胞培养 人胚胎 鉴定 细胞培养方法 cells 肾小球疾病 肾小球硬化 免疫病理学 细胞生物学
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转瓶变速培养对微胶囊肝细胞聚集体形成及活性的影响
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作者 陈滟珊 喻成波 +1 位作者 曹红翠 李兰娟 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期403-409,共7页
目的:观察匀速与变速旋转培养对微胶囊HepLL永生化人肝细胞、HepG2肝细胞聚集体形成和活性的影响。方法:一步法海藻酸钠—壳聚糖( AC)微胶囊包裹HepG2及HepLL细胞,随机分为两大组,每组按转速分3小组。动态观察并测量各组聚集体大... 目的:观察匀速与变速旋转培养对微胶囊HepLL永生化人肝细胞、HepG2肝细胞聚集体形成和活性的影响。方法:一步法海藻酸钠—壳聚糖( AC)微胶囊包裹HepG2及HepLL细胞,随机分为两大组,每组按转速分3小组。动态观察并测量各组聚集体大小、数目变化,ELISA动态检测各组白蛋白合成量,比色法检测氨的清除量,高效液相色谱法检测安定转化功能。结果:与匀速旋转培养组相比,变速旋转培养组微胶囊细胞第6、8、10、12、14、16天聚集体平均个数、平均最大径、白蛋白合成量、氨清除量以及安定转化量均明显提高(均P<0.01),微胶囊HepLL各组在各个时间点的白蛋白合成量、氨清除量及安定转化功能均优于HepG2(均P<0.01)。结论:微胶囊转瓶变速培养显著加快微胶囊HepLL、HepG2细胞聚集体形成并提高细胞活性,未来HepLL有可能代替HepG2用于人工肝治疗。 展开更多
关键词 壳聚糖 胶囊 细胞/细胞 培养 细胞 培养的/细胞 细胞培养技术/方法 旋转
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Effects of mechanical vibration on root development of Actinidia chinensis plantlet
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作者 阳小成 《Journal of Chongqing University》 CAS 2007年第4期227-230,共4页
The root development of Actinidia chinensis planUets was studied in exposure to environmental stress of mechanical vibration at respectively 1 Hz, 2 Hz, 3 Hz, 4 Hz and 5 Hz. The plantlets exposed to vibration stimuli ... The root development of Actinidia chinensis planUets was studied in exposure to environmental stress of mechanical vibration at respectively 1 Hz, 2 Hz, 3 Hz, 4 Hz and 5 Hz. The plantlets exposed to vibration stimuli at all those frequencies have a larger total number and a larger total length of roots and a smaller permeability of root plasma-membrane, compared with those cultivated in an environment without vibration stress. Vibration at respectively 1 Hz, 2 Hz, 3 Hz and 4 Hz enhances root activity and the 3 Hz vibration is the most favorable. There is an obvious negative correlation between root activity and permeability of root plasma-membrane. The effects may be explained by the likelihood that mechanical Vibration at an appropriate frequency facilitates roots' absorbing water and minerals which are indispensable to inducing and synthesizing in roots some active substances favorable to growth. Nevertheless, overstress damages the integrity of root plasm-membrane, increases the permeability, and results in the disability of protecting root cells. 展开更多
关键词 mechanical vibration Actinidia chinensis plantlet root activity
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