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免疫介导的脊髓运动神经元损伤过程中细胞周期素依赖蛋白激酶5的表达及意义 被引量:1
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作者 刘亚玲 郭艳苏 +3 位作者 许蕾 任爱兵 霍会永 李春岩 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期203-206,共4页
目的:研究免疫介导的神经元损伤过程中细胞周期素依赖蛋白激酶5(CDK5)表达的特征,探讨其损伤机制。方法:建立免疫介导的脊髓前角运动神经元损伤的模型,利用免疫组化方法观察脊髓前角运动神经元CDK5及p35/ p25的表达特征。结果:对照组豚... 目的:研究免疫介导的神经元损伤过程中细胞周期素依赖蛋白激酶5(CDK5)表达的特征,探讨其损伤机制。方法:建立免疫介导的脊髓前角运动神经元损伤的模型,利用免疫组化方法观察脊髓前角运动神经元CDK5及p35/ p25的表达特征。结果:对照组豚鼠脊髓运动神经元CDK5及p35/p25主要在细胞核及细胞膜下表达,胞质着色淡;注射牛脊髓前角匀浆而无肢体瘫痪的豚鼠,脊髓运动神经元CDK5及p35/p25表达在数量上增加,强度上增强;有明显肢体瘫痪的豚鼠CDK5及p35/p25免疫反应阳性神经元数量明显减少,部分胞质内无着色。结论:CDK5及p35/ p25在神经元胞质内的易位表达,在免疫介导的神经元损伤过程中具有重要的作用。 展开更多
关键词 实验性自身免疫性灰质病 细胞周期依赖蛋白激酶5 p35/p25
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周期素依赖性蛋白激酶5及其激动剂在神经系统发育中的作用 被引量:1
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作者 李红丽 蔡文琴 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期825-827,共3页
周期素依赖性蛋白激酶5(cyclin dependent kinase5,CDK5)是CDKs家族的成员之一,属于丝氨酸/苏氨酸激酶家族,具有与其他的CDKs成员同源的序列。CDK5最早是从Hela细胞中分离并克隆,并且发现是一种PSSALRE激酶与cdc2和CDK2的基因序... 周期素依赖性蛋白激酶5(cyclin dependent kinase5,CDK5)是CDKs家族的成员之一,属于丝氨酸/苏氨酸激酶家族,具有与其他的CDKs成员同源的序列。CDK5最早是从Hela细胞中分离并克隆,并且发现是一种PSSALRE激酶与cdc2和CDK2的基因序列有57%的同源性,故又称为edc2相关的蛋白激酶。近年的研究表明CDK5并不像其他家族成员(CDKs)主要参与细胞周期的调控, 展开更多
关键词 周期依赖性蛋白激酶5 神经系统发育 激动剂 HELA细胞 家族成员 CDKS CDK5 基因序列
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苓甘五味姜辛汤对哮喘大鼠环腺苷酸、环腺苷酸依赖性蛋白激酶A及水通道蛋白5的影响 被引量:17
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作者 李岩 李荣科 +2 位作者 王燕 段云燕 朱向东 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2015年第10期67-69,共3页
目的观察苓甘五味姜辛汤对寒饮伏肺型哮喘大鼠环腺苷酸(c AMP)、环腺苷酸依赖性蛋白激酶A(PKA)及水通道蛋白5(AQP5)含量的影响,探讨其对寒饮伏肺型哮喘的作用机制。方法采用卵清蛋白腹腔注射和雾化激发+寒冷刺激建立哮喘模型。将90只大... 目的观察苓甘五味姜辛汤对寒饮伏肺型哮喘大鼠环腺苷酸(c AMP)、环腺苷酸依赖性蛋白激酶A(PKA)及水通道蛋白5(AQP5)含量的影响,探讨其对寒饮伏肺型哮喘的作用机制。方法采用卵清蛋白腹腔注射和雾化激发+寒冷刺激建立哮喘模型。将90只大鼠随机分为空白组、模型组、地塞米松组及苓甘五味姜辛汤低、中、高剂量组,各治疗组给予相应药物干预,ELISA检测大鼠c AMP、PKA、AQP5含量。结果与空白组比较,模型组大鼠c AMP、PKA、AQP5含量降低(P<0.05);与模型组比较,各治疗组大鼠c AMP、PKA、AQP5含量升高(P<0.05),其中苓甘五味姜辛汤高剂量组作用显著(P<0.05)。结论苓甘五味姜辛汤可调节寒饮伏肺型哮喘大鼠c AMP、PKA、AQP5正常分泌,增加气道液体分泌,降低黏蛋白浓度,从而起到治疗哮喘的作用。 展开更多
关键词 支气管哮喘 苓甘五味姜辛汤 环腺苷酸 环腺苷酸依赖性蛋白激酶A 水通道蛋白5 大鼠
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周期素依赖性蛋白激酶-5在不同成年牛皮肤中的表达
4
作者 刘晋冀 杨洁鸿 《湖北畜牧兽医》 2017年第3期5-6,共2页
采用不同毛色的牛皮作为研究对象,运用免疫组织化学法对周期素依赖性蛋白激酶-5(CDK-5)在成年牛皮肤中的表达进行定位和定性研究。结果表明,CDK-5在牛皮肤毛囊的外根鞘和毛球部呈阳性表达,说明CDK-5可能与牛毛色形成有关。
关键词 周期依赖性蛋白激酶-5(CDK-5) 毛囊 毛色 免疫组织化学
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TFP5对高糖诱发的细胞周期素依赖性激酶过度激活及胰岛β细胞凋亡的影响
5
作者 张霞 付海霞 郑亚莉 《中华老年多器官疾病杂志》 2014年第2期127-130,共4页
目的:探讨TFP5对高糖诱发的细胞周期素依赖性激酶5(Cdk5)活性的抑制作用及其对胰岛β细胞的保护作用。方法体外培养小鼠胰岛细胞株Min6。将TFP5转染Min6细胞,分别用免疫印迹和免疫荧光观察其表达。实验分3组:低糖(5mmol/L)组,... 目的:探讨TFP5对高糖诱发的细胞周期素依赖性激酶5(Cdk5)活性的抑制作用及其对胰岛β细胞的保护作用。方法体外培养小鼠胰岛细胞株Min6。将TFP5转染Min6细胞,分别用免疫印迹和免疫荧光观察其表达。实验分3组:低糖(5mmol/L)组,高糖(25mmol/L)+空病毒载体(EV)组和高糖(25mmol/L)+TFP5组,分别用同位素标记法测定3组细胞内Cdk5激酶活性;用酶联免疫吸附法测定3组细胞胰岛素分泌水平;用免疫印迹法测定胰岛β细胞凋亡。结果(1)表明TFP5来源和它的分子序列;(2)TFP5在Min6细胞内表达良好;(3)在高糖+TFP5组Cdk5的活性明显低于高糖+EV组( P<0.01),而且在高糖+TFP5组胰岛素分泌明显高于高糖+EV组(P<0.01);(4)在高糖组Min6细胞的Bax表达增加,Bcl-2表达减少,Bax/Bcl-2比值升高,细胞凋亡增加(P<0.01,vs 低糖组),而加入TFP5后,Bax表达减少,Bcl-2表达增加,Bax/Bcl-2的比值减低(P<0.01,vs 高糖组),细胞的凋亡减少。结论 TFP5可抑制高糖诱发的Cdk5激酶的过度活性、减少高糖刺激下胰岛细胞凋亡,从而恢复胰岛素分泌,具有潜在的以Cdk5为靶点治疗2型糖尿病的前景。 展开更多
关键词 TFP5 细胞周期依赖性激酶5 葡萄糖 胰岛素 细胞凋亡
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急性肾损伤组织中细胞周期调控蛋白的表达变化及其意义 被引量:1
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作者 曹雷 郑灼 +2 位作者 李宁 赵讯 张颖轩 《山东医药》 CAS 北大核心 2017年第27期82-84,共3页
目的观察细胞周期蛋白B1(Cyclin B1)、细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶4(CDK4)、p21在不同原因所致急性肾损伤(AKI)组织中的表达变化,并探讨其意义。方法选择行肾穿刺活检术的患者纳入研究,包括AKI患者108例和无器质性肾脏病变的肾功能异常... 目的观察细胞周期蛋白B1(Cyclin B1)、细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶4(CDK4)、p21在不同原因所致急性肾损伤(AKI)组织中的表达变化,并探讨其意义。方法选择行肾穿刺活检术的患者纳入研究,包括AKI患者108例和无器质性肾脏病变的肾功能异常的患者(对照组)39例。AKI患者中,肾毒性AKI 63例(肾毒性AKI组)、缺血性AKI 45例(缺血性AKI组)。取各组肾穿刺活检标本,采用免疫组织法检测Cyclin B1、CDK4、p21蛋白。结果肾毒性AKI组、缺血性AKI组的肾小管细胞和肾间质中p21、Cyclin B1、CDK4蛋白表达积分均高于对照组(P均<0.05)。肾毒性AKI组及缺血性AKI组肾组织中Cyclin B1、CDK4、p21蛋白表达积分相比,P均>0.05。结论 AKI组织中p21、Cyclin B1、CDK4蛋白表达上调,在肾毒性AKI和缺血性AKI中三种细胞周期调控蛋白表达变化的趋势一致;细胞周期调控蛋白的表达与AKI病因无关。 展开更多
关键词 急性肾损伤 细胞周期调控蛋白 细胞周期蛋白B1 细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶 细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶抑制剂 P21蛋白
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CRNDE介导miR-33a-5p/CDK6轴影响细胞周期调控人体肝癌细胞增殖的实验研究
7
作者 梅小平 姚明 +3 位作者 周清河 许浏 周鸿鲲 李彦 《浙江临床医学》 2023年第8期1117-1120,共4页
目的探讨CRNDE介导miR-33a-5p/CDK6轴影响细胞周期,调控人体肝癌细胞增殖的作用机制。方法运用细胞转染技术构建稳定干扰CRNDE/低表达CRNDE的人体肝癌细胞模型shRNA-CRNDE-HuH-7;RT-qPCR及Western blotting技术检测HL-7702人体肝细胞株... 目的探讨CRNDE介导miR-33a-5p/CDK6轴影响细胞周期,调控人体肝癌细胞增殖的作用机制。方法运用细胞转染技术构建稳定干扰CRNDE/低表达CRNDE的人体肝癌细胞模型shRNA-CRNDE-HuH-7;RT-qPCR及Western blotting技术检测HL-7702人体肝细胞株、HuH-7人体肝癌细胞株及shRNA-CRNDE-HuH-7细胞株中CRNDE、miR-33a-5p及CDK6的表达情况,评估其相关性及miR-33a-5p/CDK6轴随CRNDE表达量变化的相关程度;对上述三组细胞株进行细胞增殖实验(CCK8)、细胞凋亡检测、细胞侵袭测试及细胞周期检测,评估在不同CRNDE表达情况下三组细胞株的增殖、凋亡、侵袭能力及细胞周期的变化。结果RT-qPCR及Western blotting技术检测shRNA-CRNDE-HuH-7细胞株中CRNDE表达低于HuH-7人体肝癌细胞株(P<0.05);当控制位点为CDK6时,三组细胞株中CRNDE表达量与其呈正相关(r=0.856,P<0.05);当控制位点为miR-33a-5p时,三组细胞株中miR-33a-5p表达量与CDK6及CRNDE均呈负相关(r=-0.883,P<0.05;r=-0.937,P<0.05);在三组细胞株中,随CRNDE表达下调,细胞增殖、侵袭能力及细胞周期均受到抑制(P<0.05),shRNA-CRNDE-HuH-7细胞株中肿瘤细胞凋亡高于HuH-7细胞株(P<0.05)。结论CRNDE与miR-33a-5p存在靶向关系,CRNDE以靶向调节作用抑制miR-33a-5p的表达,进而介导CDK6的升高,通过miR-33a-5p/CDK6轴促进肝细胞肝癌的增殖,其可能成为肝细胞肝癌的新肿瘤标志物和分子生物治疗靶点。 展开更多
关键词 CRNDE miR-33a-5p 细胞肝癌 细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶6
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转染ELF5基因的人卵巢癌干细胞增殖、周期、凋亡及成瘤能力变化 被引量:2
8
作者 谢肖磊 闫洪超 《山东医药》 CAS 北大核心 2017年第3期32-35,共4页
目的观察转染ELF5基因的人卵巢癌干细胞增殖、周期、凋亡及成瘤能力变化。方法将人卵巢癌干细胞(具有CD133+、CD117+特征的人卵巢癌细胞株HO8910)分为重组质粒组、空质粒组和空白对照组,重组质粒组转染真核细胞表达载体pc DNA3.1-ELF5+E... 目的观察转染ELF5基因的人卵巢癌干细胞增殖、周期、凋亡及成瘤能力变化。方法将人卵巢癌干细胞(具有CD133+、CD117+特征的人卵巢癌细胞株HO8910)分为重组质粒组、空质粒组和空白对照组,重组质粒组转染真核细胞表达载体pc DNA3.1-ELF5+EGFP,空质粒组转染空载质粒pc DNA3.1-EGFP,空白对照组不做转染;分别于培养24、48、72、96 h后采用CCK-8法观察细胞增殖能力,于培养48 h后采用流式细胞仪观察细胞周期分布情况、测算细胞凋亡率,于培养48 h后采用Western blotting法检测各组细胞中的p21、Caspase-3蛋白。将重组质粒组、空质粒组和空白对照组细胞分别接种于雌性裸鼠右腋窝皮下制作卵巢癌移植瘤,每组接种5只;待移植瘤形成后取肿瘤组织,测量肿瘤最大直径及质量,测算细胞凋亡率,检测细胞中的p21、Caspase-3蛋白。结果重组质粒组培养24、48、72、96 h后细胞增殖能力较空质粒组和空白对照组明显下降(P均<0.05)。重组质粒组中阻滞于G0/G1期的细胞比例、细胞凋亡率及细胞中p21、Caspase-3蛋白相对表达量均高于空质粒组和空白对照组(P均<0.05)。重组质粒组移植瘤最大直径和肿瘤质量小于空质粒组、空白对照组(P均<0.05)。重组质粒组移植瘤组织中细胞凋亡率及p21、Caspase-3蛋白相对表达量高于空质粒组和空白对照组(P均<0.05)。结论转染ELF5基因的人卵巢癌干细胞增殖受抑制、细胞周期阻滞、细胞凋亡增多、成瘤能力减弱,机制可能与p21、Caspase-3蛋白表达上调有关。 展开更多
关键词 卵巢癌 肿瘤干细胞 细胞周期 细胞凋亡 ELF5基因 细胞周期依赖性蛋白激酶抑制因子1A 含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3
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条件性恐惧大鼠边缘下区Cdk5激酶活性、caspase-3表达以及突触结构的变化 被引量:3
9
作者 李培培 张丽丽 +1 位作者 韦美 李敏 《心理学报》 CSSCI CSCD 北大核心 2011年第5期544-552,共9页
探讨条件性恐惧大鼠内侧前额叶皮层边缘下区(IL区)Cdk5激酶活性、凋亡因子caspase-3表达和突触结构的变化。采用声音结合足底电击的方法对大鼠建立条件性恐惧模型后,在不同时间点测定IL区Cdk5激活剂P35和P25的蛋白表达水平、Cdk5激酶活... 探讨条件性恐惧大鼠内侧前额叶皮层边缘下区(IL区)Cdk5激酶活性、凋亡因子caspase-3表达和突触结构的变化。采用声音结合足底电击的方法对大鼠建立条件性恐惧模型后,在不同时间点测定IL区Cdk5激活剂P35和P25的蛋白表达水平、Cdk5激酶活性、caspase-3的阳性细胞数,并观察突触结构的变化。结果发现,大鼠在条件性恐惧建立后第2、4和8天,IL区的P25蛋白表达和Cdk5激酶活性均明显高于正常;caspase-3的免疫反应阳性细胞数在3个时间点也均多于正常;透射电镜下观察到:在恐惧建立后的第8天,IL区突触的突触后致密物质(PSD)厚度变薄,在恐惧建立后第22天突触数密度减少、PSD厚度仍小于正常。推测条件性恐惧的建立,使大鼠IL区的P25水平和Cdk5活性高于正常,引起IL区的突触结构发生改变,导致大鼠的恐惧反应持续存在。 展开更多
关键词 条件性恐惧 边缘下区 细胞周期依赖性蛋白激酶5 突触结构
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lpa-miR-nov-66调控羊驼黑色素细胞CDK5磷酸化作用的研究
10
作者 张俊珍 姬凯元 +3 位作者 石占全 刘彧 胡帅鹏 范瑞文 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期290-295,共6页
旨在研究lpa-miR-nov-66在调控羊驼黑色素细胞产生黑色素颗粒过程中对细胞周期依赖性激酶5(CDK5)磷酸化作用的影响。在体外培养的黑色素细胞中转染lpa-miR-nov-66后,采用实时定量PCR、免疫细胞化学、Western blotting、免疫共沉淀等方... 旨在研究lpa-miR-nov-66在调控羊驼黑色素细胞产生黑色素颗粒过程中对细胞周期依赖性激酶5(CDK5)磷酸化作用的影响。在体外培养的黑色素细胞中转染lpa-miR-nov-66后,采用实时定量PCR、免疫细胞化学、Western blotting、免疫共沉淀等方法检测功能性CDK5作用。结果显示:与阴性对照相比,黑色素细胞被转染lpa-miR-nov-66后,CDK5基因和蛋白表达量均下降,差异极显著(P<0.01);CDK5激活子是P35,CDK5磷酸化水平及其磷酸化底物——酪氨酸羟化酶(TH)的表达量均被上调,分别呈差异极显著(P<0.01)和差异显著(P<0.05)。结果表明:lpa-miR-nov-66过量表达可通过CDK5的激活子P35上调黑色素细胞CDK5发生磷酸化。该功能性CDK5激酶对底物TH发生磷酸化,是lpa-miR-nov-66调控黑色素生成分子机制的中间环节。 展开更多
关键词 lpa-miR-nov-66 细胞周期依赖性激酶5(CDK5) 酪氨酸羟化酶(TH) 黑色素细胞
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RNA干扰技术沉默星形胶质细胞Cdk5模型的建立 被引量:1
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作者 龙根 谢敏杰 +2 位作者 王伟 徐沙贝 刘晨辰 《生物医学工程与临床》 CAS 2018年第3期315-319,共5页
目的建立星形胶质细胞细胞周期蛋白依赖性激酶5(Cdk5)沉默模型。方法新生24 h内无特定病原(SPF)级SD雄性大鼠乳鼠240只。培养及鉴定SD雄性大鼠星形胶质细胞。设计合成针对星形胶质细胞Cdk5的小干扰RNA(siRNA)3种(Si-r-Cdk5-001、Si-r-Cd... 目的建立星形胶质细胞细胞周期蛋白依赖性激酶5(Cdk5)沉默模型。方法新生24 h内无特定病原(SPF)级SD雄性大鼠乳鼠240只。培养及鉴定SD雄性大鼠星形胶质细胞。设计合成针对星形胶质细胞Cdk5的小干扰RNA(siRNA)3种(Si-r-Cdk5-001、Si-r-Cdk5-002及Si-r-Cdk5-003),将3种siRNA分为SiT1组、SiT2组、SiT3组,在Lipofectamine 2000介导下转染星形胶质细胞;阴性对照组加入阴性对照si RNA。应用荧光染色观察转染效率,通过实时聚合酶链反应(PCR)和Western blot检测沉默效率。结果成功将Cdk5 siRNA转染入星形胶质细胞,转染效率为85%。与阴性对照组相比,SiT1组、SiT2组及SiT3组Cdk5 mRNA及蛋白表达均降低(P<0.01),其中SiT3组沉默效果最佳,分子水平沉默效率为68%,蛋白水平沉默效率为79%。结论成功通过RNA干扰技术建立星形胶质细胞Cdk5特异性沉默模型。 展开更多
关键词 星形胶质细胞 细胞周期蛋白依赖性激酶5(Cdk5) RNA干扰 特异性模型
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多囊卵巢综合征不孕患者血清CMKLR1 P15INK4b与炎症氧化应激胰岛素抵抗的关系
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作者 王晗 孙晓娜 王丽元 《安徽医学》 2024年第9期1124-1128,共5页
目的探讨多囊卵巢综合征(PCOS)不孕患者血清趋化因子样受体1(CMKLR1)、细胞周期素依赖性蛋白激酶抑制因子(P15INK4b)水平与炎症、氧化应激、胰岛素抵抗的相关性。方法选取2022年1~12月在平煤神马医疗集团总医院门诊就诊的92例PCOS不孕... 目的探讨多囊卵巢综合征(PCOS)不孕患者血清趋化因子样受体1(CMKLR1)、细胞周期素依赖性蛋白激酶抑制因子(P15INK4b)水平与炎症、氧化应激、胰岛素抵抗的相关性。方法选取2022年1~12月在平煤神马医疗集团总医院门诊就诊的92例PCOS不孕患者为研究组,选取同期92例在本院进行健康体检者为对照组。采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清CMKLR1、P15INK4b水平;测定并比较两组对象糖代谢指标[空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)和服糖2 h血糖(2 h PG)]、炎症指标[单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-18(IL-18)]、氧化应激指标[超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)]的差异;采用Pearson法分析PCOS不孕患者血清CMKLR1、P15INK4b表达水平与炎症指标、氧化应激指标以及胰岛素抵抗的相关性。结果研究组FPG、WHR、2 h PG、BMI、FINS、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)水平均高于对照组(P<0.05);研究组CMKLR1、P15INK4b均高于对照组(P<0.05);研究组血清MCP-1、IL-18、IL-6、TNF-α、MDA水平均高于对照组,血清GSH-Px、SOD水平均低于对照组(P<0.05);PCOS不孕患者血清CMKLR1、P15INK4b与BMI、WHR、FPG、2 h PG、FINS、HOMA-IR、MCP-1、IL-18、IL-6、TNF-α、MDA呈正相关(P<0.05),血清CMKLR1、P15INK4b与SOD、GSH-Px呈负相关性(P<0.05)。结论PCOS不孕患者血清CMKLR1、P15INK4b表达水平显著升高,且与炎症、氧化应激反应、胰岛素抵抗、糖代谢异常有着紧密联系,可能参与PCOS不孕的发生、发展进程。 展开更多
关键词 多囊卵巢综合征 趋化因子样受体1 细胞周期依赖性蛋白激酶抑制因子 炎症 氧化应激 胰岛素抵抗
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Cdk5抑制剂Roscovitine对神经病理性疼痛大鼠痛行为学的影响及机制
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作者 钟妤 陈佳林 +1 位作者 谢玉波 陈静 《山东医药》 CAS 2018年第48期41-44,共4页
目的观察Cdk5抑制剂Roscovitine对神经病理性疼痛大鼠痛行为学的影响,并探讨其机制。方法选择SD大鼠64只,随机分为正常对照组(N组)8只、假手术组(S组)8只、坐骨神经结扎(CCI)组(I组)8只、CCI+溶剂组(D组)8只,剩余32只作为CCI+给药组(R组... 目的观察Cdk5抑制剂Roscovitine对神经病理性疼痛大鼠痛行为学的影响,并探讨其机制。方法选择SD大鼠64只,随机分为正常对照组(N组)8只、假手术组(S组)8只、坐骨神经结扎(CCI)组(I组)8只、CCI+溶剂组(D组)8只,剩余32只作为CCI+给药组(R组)。I组、D组和R组行鞘内置管7天后,采用CCI法建立神经病理性疼痛模型,N组不做任何处理,S组暴露坐骨神经但不予结扎。术后第7天,D组鞘内注射5%二甲基亚砜20μL,R组鞘内注射Cdk5抑制剂Roscovitine 100μg,N组、S组和I组不注射药物。分别于术前(T_0)、术后3天(T_1)、术后5天(T_2)、术后7天(T_3)以及给药后0.5(T_4)、2(T_5)、6(T_6)、12 h(T_7),检测各组机械性缩足阈值(PWMT)、热缩足潜伏期(PWTL)。腹腔注射麻醉后,取各组脊髓腰膨大处(L_4~L_6)组织,采用Western blotting法检测脊髓星形胶质细胞胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达。结果与N组、S组比较,I组、D组和R组术后各时间点PWMT、PWTL均明显降低(P均<0.05);与I组相比,R组给药后T_5~T_7时PWMT、PWTL均明显升高(P均<0.05)。与S组比较,I组、D组和R组T_4~T_7时脊髓星形胶质细胞GFAP表达均明显上调(P均<0.05);与D组比较,R组给药后T_5~T_7时脊髓星形胶质细胞GFAP表达均明显下调(P均<0.05)。结论Cdk5抑制剂Roscovitine可减轻大鼠神经病理性疼痛,其机制可能与抑制脊髓星形胶质细胞GFAP表达有关。 展开更多
关键词 神经病理性疼痛 星形胶质细胞 细胞周期依赖性蛋白激酶5 大鼠
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CDK5、p35/p25在血管性认知损害患者血液中的表达 被引量:1
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作者 翁改志 刘强 +2 位作者 赵昭 吴道澄 倪宁 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期702-705,共4页
目的探讨细胞周期素依赖性蛋白激酶5(CDK5)、p35及p25在血管性认知损害(VCI)患者血液中的表达及可能作用。方法收集VCI病例91例,其中非痴呆性血管性认知损害(VCIND)49例,血管性痴呆(VAD)42例;同时收集脑卒中认知功能正常(NC)及健康人(N)... 目的探讨细胞周期素依赖性蛋白激酶5(CDK5)、p35及p25在血管性认知损害(VCI)患者血液中的表达及可能作用。方法收集VCI病例91例,其中非痴呆性血管性认知损害(VCIND)49例,血管性痴呆(VAD)42例;同时收集脑卒中认知功能正常(NC)及健康人(N)各30例;应用RT-qPCR检测血液中CDK5mRNA的相对表达,Western blot法检测各组血液中CDK5、p35及p25的蛋白表达。结果各组CDK5mRNA相对表达及CDK5、p35、p25蛋白表达从高到低分别为VAD组>VCIND组>NC组>N组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 CDK5、p35及p25可能参与了VCI的发生,血管性认知功能损害程度与其表达水平呈正相关关系。 展开更多
关键词 血管性认知损害 细胞周期依赖性蛋白激酶5(CDK5) p25 P35
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氧化应激通过激活Cdk5抑制FOXO1的神经元损伤及其机制 被引量:8
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作者 杨慧丽 陈星宇 郑维红 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期399-405,共7页
目的探究氧化应激通过激活细胞周期蛋白依赖性激酶5(cyclin-dependent kinase 5, Cdk5)抑制叉头框转录因子O亚家族蛋白1(forkhead box O1, FOXO1)的神经元损伤的具体机制。方法在HEK细胞中,共同转染过表达P39/Cdk5和FOXO1-WT或者FOXO1-S... 目的探究氧化应激通过激活细胞周期蛋白依赖性激酶5(cyclin-dependent kinase 5, Cdk5)抑制叉头框转录因子O亚家族蛋白1(forkhead box O1, FOXO1)的神经元损伤的具体机制。方法在HEK细胞中,共同转染过表达P39/Cdk5和FOXO1-WT或者FOXO1-S249A突变体,利用特异性磷酸化抗体pS249-FOXO1能够特异识别FOXO1的Ser249位点磷酸化特点,通过Western blot检测Cdk5/p39对FOXO1的磷酸化。通过体外培养HEK细胞中过表达Cdk5、p39和FOXO1,免疫共沉淀探究Cdk5和FOXO1以及Cdk5和p39的相互作用。在原代神经元过表达不同的Cdk5激活因子(p25、p35、p39)以及Cdk5激酶复合物,使用双荧光素酶实验探究其不同组合对FOXO1转录活性的影响。用Cdk5抑制剂rocovitine干预,观察其对FOXO1出入的影响;同时通过核质分离的方法对比了Cdk5杂合小鼠和野生型大脑皮层组织的FOXO1核质定位。分别用H_2O_2、glutamate处理神经元,通过Western blot观察氧化应激对Cdk5的活性调节,同时用双荧光素酶实验探究其对FOXO1转录因子的影响;最后通过caspase-3染色观察H_2O_2、glutamate的不同时间梯度处理对神经元凋亡的影响。结果 Cdk5和p39能够直接与FOXO1相互作用,并磷酸化FOXO1的Ser249位点。激活Cdk5能够显著抑制FOXO1的转录活性,而用Cdk5抑制剂(roscovitine)能够显著提高FOXO1的转录活性并诱导FOXO1入核。与野生型对比,在Cdk5杂合子中,FOXO1蛋白在细胞核中定位显著提高。H_2O_2和glutamate处理诱导p35切割形成p25,同时抑制FOXO1的转录活性,而敲低Cdk5能够缓解H_2O_2和glutamate对FOXO1的转录活性的抑制。通过H_2O_2和glutamate处理的原代神经元,caspase3染色显著增加。结论 Cdk5/p39可以磷酸化FOXO1-ser249位点,并抑制FOXO1的转录活性;而氧化应激能够通过激活Cdk5,抑制FOXO1的转录活性,并诱导神经元凋亡。 展开更多
关键词 氧化应激 激活细胞周期蛋白依赖性激酶5(Cdk5) 叉头框转录因子O亚家族蛋白1(FOXO1) caspase-3
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miR-130b对宫颈癌细胞修复TNF-α诱导性基因组双链DNA断裂作用的影响及机制 被引量:5
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作者 杨磊 刘涛 +1 位作者 段继惠 穆红 《山东医药》 CAS 2019年第2期28-31,共4页
目的观察miR-130b对宫颈癌细胞修复基因组双链DNA断裂作用的影响,并探讨其机制。方法将宫颈癌细胞Siha分成6组,分别转染细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶抑制物1A(CDKN1A)基因过表达质粒pc DNA3. 1-CDKN1A(CDKN1A组)、pc DNA3. 1空载质粒(pc ... 目的观察miR-130b对宫颈癌细胞修复基因组双链DNA断裂作用的影响,并探讨其机制。方法将宫颈癌细胞Siha分成6组,分别转染细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶抑制物1A(CDKN1A)基因过表达质粒pc DNA3. 1-CDKN1A(CDKN1A组)、pc DNA3. 1空载质粒(pc DNA3. 1组)、miR-130b mimics (miR-130b组)、miR-130b阴性对照核酸(NC组),共转染pc DNA3. 1-CDKN1A和miR-130b mimics (CDKN1A+miR-130b组)、pc DNA3. 1和miR-130b mimics (pc DNA3. 1+miR-130b组)。TNF-α刺激细胞,用彗星试验测定基因组DNA尾距,流式细胞术测定磷酸化组蛋白2A变异体(γ-H2AX)蛋白; Real-time PCR、Western blotting法检测CDKN1A mRNA及其蛋白。分别将pc DNA3. 1/EGFP、pc DNA3. 1/EGFP-CDKN1A-wtUTR(野生型)、pc DNA3. 1/EGFP-CDKN1A-mutUTR(突变型)与miR-130b mimics或NC共转染Siha细胞,测定报告基因荧光相对活性;以TNF-α和DNA损伤增强剂AZD2461刺激各组细胞,用流式细胞术测定细胞凋亡水平。结果与pc DNA3. 1组比较,CDKN1A组细胞DNA尾距、γ-H2AX蛋白表达水平降低(P均<0. 05);与NC组比较,miR-130b组细胞DNA尾距、γ-H2AX蛋白表达水平、细胞凋亡率升高,CDKN1A mRNA、蛋白表达水平下降(P均<0. 05);与pc DNA3. 1+miR-130b组比较,CDKN1A+miR-130b组细胞DNA尾距、γ-H2AX蛋白表达水平、细胞凋亡率下降(P均<0. 05);与共转染NC细胞相比,共转染miR-130b mimics使野生型细胞荧光相对活性降低(P <0. 05),而未改变突变型细胞荧光相对活性。结论 miR-130b通过直接靶定CDKN1A mRNA抑制其表达干扰宫颈癌细胞修复双链DNA断裂位点,从而促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 宫颈癌 微小核糖核酸 DNA修复 细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶抑制物1A 磷酸化组蛋白2A变异体 细胞凋亡
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成釉细胞瘤组织CyclinD1、CDK4的表达及意义 被引量:1
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作者 张秋红 赵培荣 刘进忠 《山东医药》 CAS 北大核心 2005年第24期60-61,共2页
关键词 成釉细胞 CYCLIND1 CDK4 瘤组织 依赖性蛋白激酶 免疫组化SP法 细胞周期蛋白 口腔黏膜组织 细胞周期
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环腺苷酸结合蛋白在心脏功能及相关心脏疾病中的作用研究进展 被引量:2
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作者 王鑫 董六一 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 北大核心 2018年第7期764-768,共5页
3,5-环磷酸腺苷(cAMP)是心血管系统中细胞对于外界刺激反应的关键信号分子。它控制很多生物效应,如细胞增殖、变异和凋亡等。cAMP是ATP通过跨膜腺苷酸环化酶激活的G蛋白偶联受体^([1])。细胞内cAMP不仅由腺苷酸环化酶产生,而且由cAM... 3,5-环磷酸腺苷(cAMP)是心血管系统中细胞对于外界刺激反应的关键信号分子。它控制很多生物效应,如细胞增殖、变异和凋亡等。cAMP是ATP通过跨膜腺苷酸环化酶激活的G蛋白偶联受体^([1])。细胞内cAMP不仅由腺苷酸环化酶产生,而且由cAMP的磷酸二酯酶调控其降解,催化cAMP水解成5-AMP。 展开更多
关键词 心脏病 3′ 5′-环AMP磷酸二酯酶 环AMP依赖性蛋白激酶 鸟嘌呤核苷酸交换因子类
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细胞分裂素与细胞的分裂增殖 被引量:3
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作者 吴晓霞 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2007年第36期11755-11756,共2页
细胞分裂素对细胞的分裂增殖起着重要的调节作用,在细胞周期中的G1/S期,细胞分裂素促进D型细胞周期蛋白CycD的表达;在G2/M期,其作用与CDK的磷酸化有关。植物通过体内细胞分裂素的代谢影响细胞分裂素水平,调节植物生长发育调控基因,影响... 细胞分裂素对细胞的分裂增殖起着重要的调节作用,在细胞周期中的G1/S期,细胞分裂素促进D型细胞周期蛋白CycD的表达;在G2/M期,其作用与CDK的磷酸化有关。植物通过体内细胞分裂素的代谢影响细胞分裂素水平,调节植物生长发育调控基因,影响植物的根尖、茎尖等器官的生长发育。 展开更多
关键词 细胞分裂素 细胞周期蛋白 细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶 细胞分裂素氧化酶
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HR-HPV感染对宫颈阴道微生态、miR-21、CDK5表达的影响
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作者 马灵云 张汝倩 +2 位作者 赵君 张然 闫冰 《临床误诊误治》 CAS 2023年第10期112-116,共5页
目的分析高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)感染对宫颈阴道微生态与宫颈脱落细胞miR-21、细胞周期蛋白依赖性激酶5(CDK5)表达的影响。方法选取2020年1月—2022年12月250例宫颈炎为研究对象,根据HR-HPV感染情况分为HR-HPV阴性组(n=160)和HR-HP... 目的分析高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)感染对宫颈阴道微生态与宫颈脱落细胞miR-21、细胞周期蛋白依赖性激酶5(CDK5)表达的影响。方法选取2020年1月—2022年12月250例宫颈炎为研究对象,根据HR-HPV感染情况分为HR-HPV阴性组(n=160)和HR-HPV阳性组(n=90)。检测HR-HPV阳性组HPV感染亚型,比较2组宫颈阴道微生态情况。采用实时荧光定量PCR法检测2组宫颈脱落细胞miR-21、CDK5表达情况。采用Spearman法分析HR-HPV感染与miR-21、CDK5表达水平和阴道微生态的关系,以及宫颈细胞miR-21、CDK5水平与宫颈阴道微生态的关系。结果HR-HPV阳性组HR-HPV感染以HPV16亚型检出率最高,占53.33%。HR-HPV阳性组阴道微生态失衡率、解脲脲原体阳性率、衣原体阳性率、乳酸杆菌异常率、细菌性阴道炎发生率均高于HR-HPV阴性组(P<0.01)。HR-HPV阳性组宫颈脱落细胞miR-21、CDK5相对表达量均高于HR-HPV阴性组(P<0.01)。宫颈脱落细胞miR-21、CDK5表达水平与细菌性阴道炎发生率、解脲脲原体阳性率、乳酸杆菌异常率、衣原体阳性率均呈正相关(P<0.01)。结论HR-HPV感染可加重宫颈阴道微生态紊乱,增加宫颈病变严重程度,使宫颈脱落细胞miR-21、CDK5表达明显升高。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒 高危型 宫颈炎 宫颈阴道微生态 MIR-21 细胞周期蛋白依赖性激酶5 相关性 宫颈脱落细胞
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