细胞分裂周期蛋白42通过钙池操纵钙通道调控肺动脉高压内皮-间充质转化的机制研

1

作者 秦立龙 王晓彤 +2 位作者 汪丽静 臧蕾蕾 程玉生 《中国病理生理杂志》 北大核心 2025年第10期1900-1909,共10页

目的:探讨细胞分裂周期蛋白42(cell division cyclin 42,Cdc42)在肺动脉高压(pulmonary hyperten⁃sion,PH)中调控内皮-间充质转化(endothelial-mesenchymal transition,EndMT)的可能机制。方法:采用Sugen-5416联合低氧构建PH模型,将24只... 目的:探讨细胞分裂周期蛋白42(cell division cyclin 42,Cdc42)在肺动脉高压(pulmonary hyperten⁃sion,PH)中调控内皮-间充质转化(endothelial-mesenchymal transition,EndMT)的可能机制。方法:采用Sugen-5416联合低氧构建PH模型,将24只C57BL/6小鼠随机分为常氧对照(CON)组、常氧+ML141(CON+ML141)组、Sug⁃en-5416+低氧(SuHx)组及SuHx+ML141组,每组6只。4周后检测右心室收缩压(right ventricular systolic pressure,RVSP)和心脏超声指标,并取肺组织进行免疫荧光染色。使用磁珠分选小鼠肺微血管内皮细胞(pulmonary micro⁃vascular endothelial cells,PMVECs),通过Ca^(2+)成像技术检测Ca^(2+)信号,Western blot检测EndMT相关蛋白及基质相互作用分子1(stromal interaction molecule 1,STIM1)和钙释放激活钙调节蛋白1(calcium release-activated calcium mod⁃ulator 1,Orai1)表达。结果:SuHx组小鼠RVSP、Fulton指数(右室/左室+室间隔)、舒张末期右室游离壁厚度(enddiastolic right ventricular free wall thickness,RVEDWT)和收缩末期右室游离壁厚度(end-systolic right ventricular free wall thickness,RVESWT)显著升高(P<0.01);肺动脉血流加速时间/射血时间(pulmonary artery acceleration time/pul⁃monary artery ejection time,PAT/PET)、三尖瓣环收缩位移(tricuspid annulus plane systolic excursion,TAPSE)显著降低(P<0.01),Cdc42抑制剂ML141可改善上述指标。SuHx组小鼠肺血管内皮细胞CD31荧光强度显著降低(P<0.01),平滑肌细胞α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)荧光强度显著增强(P<0.01),且出现CD31/α-SMA共定位,ML141可逆转此现象。低氧诱导PMVECs发生EndMT,表现为CD31和血管内皮钙黏蛋白(vascular endothelial cadherin,VE-cadherin)降低,α-SMA和波形蛋白(vimentin)升高(P<0.01),ML141可抑制EndMT(P<0.01)。低氧激活钙池操纵钙通道(store-operated calcium entry,SOCE),增加内钙释放、外钙内流及基础钙水平(P<0.01),并上调STIM1和Orai1表达(P<0.01),ML141可逆转上述变化。ML141及敲减STIM1可抑制EndMT转录因子Snail和Twist的升高(P<0.05)。结论:Cdc42可能通过调控PMVECs中钙池操纵钙通道参与PH中的EndMT。 展开更多

关键词 肺动脉高压 细胞分裂周期蛋白42 内皮-间充质转化 钙池操纵钙通道 基质相互作用分子1

在线阅读 下载PDF 职称材料

内皮细胞分裂周期蛋白42在急性肺损伤所致肺血管屏障受损中的机制研究

2

作者 徐雯 李家飞 +2 位作者 王芳 吴南林 秦立龙 《中国病理生理杂志》 北大核心 2025年第4期704-713,共10页

目的:探讨细胞分裂周期蛋白42(cell division cycle protein 42,Cdc42)在急性肺损伤(acute lung injury,ALI)所致肺血管屏障受损中的可能机制。方法:(1)通过GEO(Gene Expression Omnibus)数据库分析ALI中Cdc42和含IQ基序GTP酶激活蛋白1(... 目的:探讨细胞分裂周期蛋白42(cell division cycle protein 42,Cdc42)在急性肺损伤(acute lung injury,ALI)所致肺血管屏障受损中的可能机制。方法:(1)通过GEO(Gene Expression Omnibus)数据库分析ALI中Cdc42和含IQ基序GTP酶激活蛋白1(IQ motif-containing GTPase-activating protein 1,IQGAP1)的表达。(2)收集2022年1月至2023年12月期间在呼吸与危重症医学科及重症医学科确诊为ALI的30例患者和30名健康体检者的血浆样本,同时收集ALI患者的支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)。动物实验选取18只雄性C57小鼠,随机分为对照(control,CON)组、脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)组和LPS+ML141(Cdc42抑制剂)组,每组6只。各组小鼠在72 h后处死,收集BALF,计数BALF细胞数目,BCA法测定BALF中蛋白浓度,酶联免疫吸附实验检测人血浆及小鼠BALF中Cdc42及炎症因子白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)、IL-1β和肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)水平,通过小鼠肺组织切片HE染色评估肺损伤程度。(3)内皮磁珠分选小鼠肺微血管内皮细胞(pulmonary microvascular endothelial cells,PMVECs),细胞实验分为CON组、LPS组和LPS+ML141组。采用血管成环实验检测各组PMVECs的血管成环能力,细胞Ca^(2+)成像技术测定PMVECs的Ca^(2+)水平,活性氧(reactive oxygen species,ROS)检测试剂盒检测PMVECs的ROS水平,并通过Western blot分析各组PMVECs中Cdc42、血管内皮钙黏蛋白(VE-cadherin)、细胞间黏附分子1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)、肌球蛋白轻链(myosin light chain,MLC)、磷酸化MLC(phosphorylated MLC,p-MLC)和IQGAP1的蛋白水平。结果:(1)GEO数据库分析显示,ALI模型中Cdc42的表达水平显著升高(P<0.01)。(2)ALI患者血浆中Cdc42及炎症因子(IL-6、IL-1β和TNF-α)水平显著升高(P<0.01),BALF中性粒细胞显著增多;治疗后上述指标显著下降(P<0.05)。ALI动物模型显示,BALF细胞计数、蛋白浓度、炎症因子及肺组织损伤评分均显著升高(P<0.01);ML141处理后,上述指标显著改善(P<0.05)。(3)体外细胞实验结果显示,LPS组PMVECs中Cdc42、ICAM-1、p-MLC、IQGAP1、ROS及Ca^(2+)水平均显著升高(P<0.01),而VE-cadherin和血管成环能力则显著下降(P<0.01);ML141处理后上述指标显著改善(P<0.05)。结论:Cdc42可能通过调节PMVEC中Ca^(2+)通量影响IQGAP1,从而参与ALI所致肺血管屏障损伤。 展开更多

关键词 急性肺损伤 细胞分裂周期蛋白42 钙黏蛋白 含IQ基元GTP酶激活蛋白1 血管生成

在线阅读 下载PDF 职称材料

血管内皮生长因子A通过Cdc42/Wnt/β-catenin信号通路影响子宫平滑肌瘤进展的机制研究

3

作者 李晓银 何辉 +1 位作者 吴翠松 闻先萍 《中国病理生理杂志》 北大核心 2025年第7期1325-1333,共9页

目的:本研究通过观察子宫平滑肌瘤中血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGFA)的水平,探讨其是否通过细胞分裂周期蛋白42(cell division cycle protein 42,Cdc42)/Wnt/β-catenin信号通路影响子宫平滑肌瘤的进展... 目的:本研究通过观察子宫平滑肌瘤中血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGFA)的水平,探讨其是否通过细胞分裂周期蛋白42(cell division cycle protein 42,Cdc42)/Wnt/β-catenin信号通路影响子宫平滑肌瘤的进展。方法:选取2022年1月至2023年12月在池州市人民医院接受子宫肌瘤切除手术的36例患者的临床资料及组织样本,选取5例行子宫全切术的子宫肌瘤患者的手术标本,将子宫肌瘤旁正常平滑肌组织作为对照组,子宫肌瘤组织作为子宫平滑肌瘤组。根据不同类型的子宫肌瘤组织,将其分为肌壁间组、黏膜下组和浆膜下组,每组选取5例。通过免疫组化和Western blot技术检测VEGFA和Cdc42在子宫肌瘤中的表达情况。在体外实验中,提取子宫平滑肌细胞和子宫平滑肌瘤细胞,利用CCK-8实验筛选VEGF受体抑制剂阿昔替尼(axitinib)的最适浓度,并通过质粒转染平滑肌瘤细胞过表达VEGFA。根据实验目的分别处理细胞。采用CCK-8和EdU细胞增殖流式检测法评估axitinib对子宫平滑肌瘤细胞活力和增殖的影响,并通过Western blot分析axitinib、Cdc42抑制剂ML141和过表达VEGFA对子宫平滑肌瘤细胞中VEGFA、Cdc42、β-catenin及其下游cyclin D1、c-Myc蛋白表达的影响。结果:免疫组化和Western blot分析显示,子宫肌瘤组织中VEGFA和Cdc42的表达水平显著高于正常组织(P<0.01),且肌壁间子宫肌瘤中的VEGFA和Cdc42表达水平显著高于黏膜下及浆膜下肌瘤(P<0.01)。CCK-8和EdU染色实验结果表明,axitinib对子宫平滑肌细胞活力实验的适宜浓度为5μmol/L,axitinib浓度为5μmol/L时能有效抑制子宫平滑肌瘤细胞的活力和增殖(P<0.05)。Western blot结果显示,子宫平滑肌瘤细胞中VEGFA、Cdc42、β-catenin及其下游cyclin D1、c-Myc的表达显著增加(P<0.01)。axitinib和ML141显著抑制了β-catenin及其下游蛋白的表达(P<0.05),VEGFA能显著抑制Cdc42的表达(P<0.01),但ML141未抑制VEGFA表达(P>0.05)。过表达VEGFA后,VEGFA、Cdc42、β-catenin及其下游cyclin D1、c-Myc的表达显著增加(P<0.01)。结论:VEGFA可能通过Cdc42/Wnt/β-catenin信号通路参与子宫平滑肌瘤的进展。 展开更多

关键词 子宫平滑肌瘤 血管内皮生长因子A 细胞分裂周期蛋白42 阿昔替尼

在线阅读 下载PDF 职称材料

细胞分裂周期蛋白42在肿瘤发生发展和治疗中作用的最新进展

4

作者 张宇 杨德君 颜荣林 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期752-756,共5页

细胞分裂周期蛋白42(Cdc42)是一类广泛表达的小三磷酸鸟苷(GTP)酶,因其具有GTP酶活性,因而又被称为Rho GTP酶。Cdc42可以调节细胞骨架的形态学改变,并调节诸如细胞生长和增殖、细胞活力、细胞极性等生理过程中涉及的膜运输功能。Cdc42... 细胞分裂周期蛋白42(Cdc42)是一类广泛表达的小三磷酸鸟苷(GTP)酶,因其具有GTP酶活性,因而又被称为Rho GTP酶。Cdc42可以调节细胞骨架的形态学改变,并调节诸如细胞生长和增殖、细胞活力、细胞极性等生理过程中涉及的膜运输功能。Cdc42在多种恶性肿瘤中呈现高表达,并和肿瘤的发生、侵袭和转移密切相关,提示Cdc42可能为肿瘤治疗的潜在靶点。该文拟从Cdc42的形态结构、功能、信号通路上下游效应分子以及在人类肿瘤侵袭和转移中的作用等方面进行综述。 展开更多

关键词 RHO GTP酶 细胞分裂周期蛋白42 信号通路 微小RNA 肿瘤

在线阅读 下载PDF 职称材料

细胞分裂周期蛋白42通过内皮-间充质转化参与动脉型肺动脉高压小鼠右心室纤维化 被引量：6

5

作者 王晓彤 秦立龙 +2 位作者 王寒黎 汪丽静 程玉生 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期1756-1764,共9页

目的:探讨细胞分裂周期蛋白42(Cdc42)是否通过内皮-间充质转化(EndMT)参与动脉型肺动脉高压(PAH)小鼠右心纤维化。方法:健康雄性C57BL/6小鼠(5~8周龄)18只,随机分成常氧对照(NC)组、PAH模型[SU5416(血管内皮生长因子受体2抑制剂)+低氧,S... 目的:探讨细胞分裂周期蛋白42(Cdc42)是否通过内皮-间充质转化(EndMT)参与动脉型肺动脉高压(PAH)小鼠右心纤维化。方法:健康雄性C57BL/6小鼠(5~8周龄)18只,随机分成常氧对照(NC)组、PAH模型[SU5416(血管内皮生长因子受体2抑制剂)+低氧,SuHx]组和SuHx+ML141(Cdc42抑制剂)组,每组6只。所有存活小鼠在4周后用异氟烷麻醉,行心脏超声检查及右心室收缩压(RVSP)监测,之后处死小鼠。用HE和Masson染色观察小鼠右室心肌细胞改变及纤维化程度。使用磁珠分选小鼠心脏内皮细胞并用不同条件处理。通过Western blot检测小鼠心脏组织Cdc42表达水平及内皮细胞Cdc42和EndMT相关蛋白[波形蛋白(vimentin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、血小板内皮细胞黏附分子1(PECAM-1/CD31)、血管内皮钙黏蛋白(VE-cadherin)和锌指蛋白Snail]表达水平,同时用倒置显微镜观察各组内皮细胞形态。结果:体内实验结果显示,与NC组相比,SuHx组小鼠心脏组织Cdc42表达水平显著升高(P<0.05);预防给予ML141(8 mg/kg)可降低小鼠RVSP,增大三尖瓣环平面收缩期位移(TAPSE),减轻心脏(尤其是血管旁)纤维化(P<0.01)。体外实验结果显示,SuHx组和低氧72 h组小鼠心脏内皮细胞Cdc42表达水平显著升高,EndMT增强,EndMT相关蛋白vimentin和α-SMA的表达显著增加,CD31和VE-cadherin的表达显著降低(P<0.05);预防给予ML141(10μmol/L)后可缓解低氧72 h诱导的EndMT。结论:Cdc42可能通过上调EndMT参与PAH小鼠右心纤维化。 展开更多

关键词 动脉型肺动脉高压 细胞分裂周期蛋白42 内皮-间充质转化 低氧

在线阅读 下载PDF 职称材料

细胞极性相关蛋白CDC42和PAR3在小鼠牙胚发育过程中的表达 被引量：3

6

作者 李媛 史册 +8 位作者 张雪 赵欢 郝新青 胡月 刘苍维 周怡君 闫广兴 张颖丽 孙宏晨 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期41-44,共4页

目的:研究细胞极性相关蛋白CDC42和PAR3在小鼠牙胚发育过程中的表达,探讨其在牙胚发育中的可能作用。方法:取13.5、14.5、16.5和18.5d(E13.5、E14.5、E16.5和E18.5)的小鼠胚胎以及出生后1和5d(PN1和PN5)的小鼠,分离头部,固定、脱钙、脱... 目的:研究细胞极性相关蛋白CDC42和PAR3在小鼠牙胚发育过程中的表达,探讨其在牙胚发育中的可能作用。方法:取13.5、14.5、16.5和18.5d(E13.5、E14.5、E16.5和E18.5)的小鼠胚胎以及出生后1和5d(PN1和PN5)的小鼠,分离头部,固定、脱钙、脱水、石蜡包埋、切片,HE染色观察牙胚的组织形态表现,采用免疫组织化学染色方法观察CDC42及PAR3在牙胚发育过程中的表达。结果:HE染色观察,E13.5~E18.5分别为小鼠牙胚发育的蕾状期、帽状期、钟状早期和钟状晚期,PN1小鼠的牙胚中可见分化成熟的成牙本质细胞和成釉细胞,PN5小鼠牙胚可见牙冠部发育完成。免疫组织化学染色,CDC42在E13.5、E14.5和E16.5小鼠牙胚中有广泛表达,在E18.5小鼠牙胚中表达较E13.5、E14.5和E16.5减少,在PN1和PN5小鼠牙胚中主要表达于成牙本质细胞和成釉细胞的分泌端;PAR3弱表达于E13.5和E14.5小鼠牙胚,在E16.5和E18.5小鼠牙胚上皮处表达明显增强,在PN1和PN5小鼠牙胚中表达较E18.5减弱。结论:CDC42和PAR3参与小鼠牙发育的过程,在牙胚发育早期可能参与小鼠牙胚的增殖及迁移,在牙胚发育晚期可能参与了成牙本质细胞和成釉细胞的分化,尤其在成牙本质细胞和成釉细胞极性的形成与维持中可能具有重要作用。 展开更多

关键词 细胞极性相关蛋白 cdc42 PAR3 牙胚发育 成牙本质细胞 成釉细胞

在线阅读 下载PDF 职称材料

miR-185通过靶向调控CDC42基因表达抑制骨肉瘤MG63细胞的增殖和迁移 被引量：2

7

作者 王磊 邱明宪 +3 位作者 张慧荣 张金萍 赵静 康肖 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期114-119,共6页

目的:分析miR-185以及细胞分裂周期蛋白42(CDC42)在骨肉瘤组织和细胞中的表达情况,初步探究miR-185是否通过调控CDC42影响骨肉瘤MG63细胞的增殖与迁移。方法:选取2020年1月至2021年1月于衡水市第四人民医院经病理确诊为骨肉瘤的的28例... 目的:分析miR-185以及细胞分裂周期蛋白42(CDC42)在骨肉瘤组织和细胞中的表达情况,初步探究miR-185是否通过调控CDC42影响骨肉瘤MG63细胞的增殖与迁移。方法:选取2020年1月至2021年1月于衡水市第四人民医院经病理确诊为骨肉瘤的的28例患者的癌组织及癌旁组织,采用免疫组化法检测骨肉瘤组织中CDC42的表达,采用qPCR法检测骨肉瘤组织中miR-185的表达。双荧光素酶报告基因实验验证CDC42基因与miR-185间的靶向关系。根据转染物不同,将MG63细胞分为miR-185 mimic组、miR-NC组、miR-185 inhibitor组、NC-inhibitor组、CDC42组(转染CDC42过表达载体)及阴性对照(NC)组,采用划痕愈合实验、CCK-8法和流式细胞术分别检测miR-185和CDC42表达对MG63细胞迁移、增殖和周期的影响。构建骨肉瘤MG63细胞裸鼠移植瘤模型,采用免疫组化法、qPCR法和WB法检测过表达或敲降miR-185对移植瘤组织中Ki67与CDC42表达的影响。结果:与癌旁组织相比,骨肉瘤组织中miR-185表达明显降低,而CDC42表达显著升高(均P<0.01)。CDC42是miR-185的靶基因。与对照组相比,miR-185 mimic组MG63细胞的迁移和增殖能力均受到抑制(均P<0.01),而CDC42组MG63细胞的迁移和增殖能力均升高、细胞周期阻滞于S期(均P<0.01);与miR-185组相比,miR-185+CDC42组MG63细胞的迁移和增殖能力均升高、S期细胞比例升高(均P<0.01)。与对照组相比,miR-185 mimic组移植瘤组织中Ki67、CDC42表达均显著降低(均P<0.01),而miR-185 inhibitor组则相反(均P<0.01)。结论:在骨肉瘤组织中,miR-185呈低表达而CDC42呈高表达,miR-185能够通过负调控CDC42的表达,从而抑制骨肉瘤MG63细胞的增殖和迁移。 展开更多

关键词 骨肉瘤 miR-185 细胞分裂周期蛋白42 MG63细胞 增殖 迁移

在线阅读 下载PDF 职称材料

半滑舌鳎细胞分裂周期蛋白42基因克隆与结构预测

8

作者 刘厚孚 谭静 +3 位作者 胡秀彩 管振国 吕爱军 孙敬锋 《天津农学院学报》 CAS 2022年第3期36-42,共7页

细胞分裂周期蛋白42(Cdc42)是Rho超家族酶中的一个亚类,具有调节细胞骨架和肌动蛋白作用,并参与免疫与炎症反应。设计半滑舌鳎Cdc42基因(即CsCdc42)特异性引物,采用RT-PCR方法、生物信息学方法等进行CsCdc42基因克隆及结构预测。结果获... 细胞分裂周期蛋白42(Cdc42)是Rho超家族酶中的一个亚类,具有调节细胞骨架和肌动蛋白作用,并参与免疫与炎症反应。设计半滑舌鳎Cdc42基因(即CsCdc42)特异性引物,采用RT-PCR方法、生物信息学方法等进行CsCdc42基因克隆及结构预测。结果获得CsCdc42基因片段长度为847 bp,推测编码191个氨基酸,含有7个抗原表位(27-28、61-63、90-92、120-122、131-133、164-166和181-183 aa)、1个RHO结构域(6-179 aa),其中含有1个ATP/GTP结合位点和1个酰基化位点;蛋白结构预测主要为α螺旋(30.9%)、β折叠(24.6%)和无规则卷曲(44.5%)。序列比对结果表明,CsCdc42与斑马鱼、青鳉、虹鳟、大菱鲆和虾等氨基酸序列同源性分别为99.43%、97.91%、95.81%、94.76%和91.10%;构建系统发育树显示CsCdc42与斑马鱼、人和海水鱼类Cdc42亲缘关系最近,自然聚为一支。以上结果为研究半滑舌鳎细胞分裂周期蛋白相关基因功能提供科学参考。 展开更多

关键词 半滑舌鳎 细胞分裂周期蛋白42 基因克隆 结构预测

在线阅读 下载PDF 职称材料

miR-29a对胶质瘤细胞CDC42表达及迁移和侵袭的影响 被引量：9

9

作者 王影 孙静 +7 位作者 李艳艳 于士柱 孙翠云 程德刚 王虔 石翠娟 安同岭 温艳军 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期629-633,共5页

目的:探讨胶质瘤miR-29a与CDC42表达的相互关系及其对肿瘤细胞侵袭迁移的影响。方法:采用组织微阵列及锁定寡核苷酸原位杂交技术,检测60例不同级别胶质瘤及10例非肿瘤对照脑组织中miR-29a的表达水平,采用qRT-PCR、Westernblot及Transwel... 目的:探讨胶质瘤miR-29a与CDC42表达的相互关系及其对肿瘤细胞侵袭迁移的影响。方法:采用组织微阵列及锁定寡核苷酸原位杂交技术,检测60例不同级别胶质瘤及10例非肿瘤对照脑组织中miR-29a的表达水平,采用qRT-PCR、Westernblot及Transwell培养,分别检测U251及其稳定表达miR-29a和无义对照序列的亚细胞系(U251-miR-29a及U251-scr)miR-29a、CDC42 mRNA及蛋白的表达及其迁移和侵袭能力,并分析其相互关系。结果:各级别胶质瘤miR-29a表达水平均显著低于对照脑组织,并随肿瘤级别升高而减少,差异均有统计学意义(P<0.01)。U251-miR-29a的miR-29a表达量明显高于U251和U251-scr(P<0.001),其CDC42 mRNA和蛋白表达量明显降低(P<0.05);CDC42 mRNA与其蛋白表达量呈正相关(r=0.834,P<0.01),而与miR-29a表达量呈负相关(r=-0.979,P<0.01)。U251-miR-29a的迁移和侵袭能力明显低于U251和U251-scr(P<0.001),并均与CDC42蛋白表达量呈正相关(r=0.828,P<0.01)。结论:miR-29a表达水平是评价胶质瘤良恶性的重要参考指标,胶质瘤细胞miR-29a表达异常减少是CDC42上调及迁移侵袭能力增强的重要因素,补充外源性miR-29a可抑制靶基因CDC42表达,阻止其侵袭迁移,提示恶性胶质瘤基因治疗中具有重要的潜在应用价值。 展开更多

关键词 胶质瘤 微小RNA 细胞分裂周期蛋白42 侵袭 迁移

在线阅读 下载PDF 职称材料

四君子汤含药血清通过抑制RhoA/Rac1/Cdc42通路影响卵巢癌细胞的上皮间质转化 被引量：5

10

作者 李凡 张学林 +2 位作者 冯静茹 郝洁 周蕾 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2021年第8期29-37,共9页

目的探索四君子汤含药血清对卵巢癌细胞增殖迁移、侵袭及上皮间质化的影响,并初步研究其作用机理。方法体外培养人卵巢癌细胞(SKOV3)和人卵巢上皮细胞,随机分为空白对照组、舒尼替尼组、四君子汤Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅲ组。噻唑蓝法检测各组SKOV... 目的探索四君子汤含药血清对卵巢癌细胞增殖迁移、侵袭及上皮间质化的影响,并初步研究其作用机理。方法体外培养人卵巢癌细胞(SKOV3)和人卵巢上皮细胞,随机分为空白对照组、舒尼替尼组、四君子汤Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅲ组。噻唑蓝法检测各组SKOV3细胞和人卵巢上皮细胞增殖变化情况;划痕实验和侵袭(transwell)实验检测各组SKOV3细胞迁移和侵袭能力;蛋白免疫印迹分析法检测各组SKOV3细胞上皮型钙粘蛋白(Ecadherin)、神经性钙黏附蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、Ras同源基因家族成员A(RhoA)、Ras相关的C3肉毒素底物1(Rac1)和细胞分裂周期蛋白42(Cdc42)蛋白表达情况;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测各组SKOV3细胞RhoA、Rac1和Cdc42 mRNA表达变化。结果各组人卵巢上皮细胞存活率差异无统计学意义(P>0.05)。与空白对照组相比,舒尼替尼组SKOV3细胞存活率、划痕愈合率、侵袭数量、N-cadherin、Vimentin蛋白、RhoA、Rac1、Cdc42 mRNA和蛋白表达显著降低(P<0.05),E-cadherin蛋白表达显著升高(P<0.05)。四君子汤Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组SKOV3细胞存活率、划痕愈合率、侵袭数量、N-cadherin、Vimentin蛋白、RhoA、Rac1、Cdc42 mRNA和蛋白表达依次降低(P<0.05),E-cadherin蛋白表达依次升高(P<0.05),呈剂量依赖性。四君子汤Ⅲ组上述指标和舒尼替尼组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论四君子汤含药血清能够抑制人卵巢癌细胞增殖、迁移、侵袭和上皮间质化,可能与RhoA/Rac1/Cdc42信号通路激活受阻相关。 展开更多

关键词 四君子汤含药血清 人卵巢癌细胞 Ras同源基因家族成员A Ras相关的C3肉毒素底物1 细胞分裂周期蛋白42 上皮间质化

在线阅读 下载PDF 职称材料

VAV2蛋白DH结构域与CDC42蛋白相互作用的亲和力和热力学参数研究

11

作者 何诗雨 串俊兰 杨正林 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第12期1492-1496,共5页

目的:利用等温滴定量热技术研究VAV2蛋白的DH结构域(VAV2-DH)与CDC42的相互作用。方法 :首先分别将VAV2-DH和CDC42蛋白的编码基因克隆至pGEX-6p-1和pET28a载体上,构建VAV2-DH和CDC42蛋白的重组表达载体。再将重组表达载体转入大肠杆菌... 目的:利用等温滴定量热技术研究VAV2蛋白的DH结构域(VAV2-DH)与CDC42的相互作用。方法 :首先分别将VAV2-DH和CDC42蛋白的编码基因克隆至pGEX-6p-1和pET28a载体上,构建VAV2-DH和CDC42蛋白的重组表达载体。再将重组表达载体转入大肠杆菌中诱导表达蛋白,并亲和层析、凝胶过滤层析纯化得到VAV2-DH和CDC42蛋白,最后利用鸟嘌呤核苷酸交换试验来验证VAV2-DH的鸟苷酸交换活性,并采用等温滴定量热技术检测这2种蛋白质相互作用的亲和力和热力学参数。结果:VAV2-DH和CDC42蛋白的平衡解离常数K_(D)=(11.44±2.12)μmol/L,其中摩尔结合焓DH=(-224.33±95.48) kJ/mol、-TDS=(195.97±95.95) kJ/mol、吉布斯自由能DG=(-28.30±0.49) kJ/mol。结论:VAV2-DH和CDC42蛋白属于中等强度的相互作用,是一个焓驱动的结合过程。 展开更多

关键词 VAV2 cdc42 鸟嘌呤核苷酸交换因子 蛋白相互作用 等温滴定量热法

在线阅读 下载PDF 职称材料

斑节对虾CDC42基因的克隆及其在不同胁迫条件下的表达分析 被引量：2

12

作者 李丽丽 赵超 +3 位作者 范嗣刚 王鹏飞 闫路路 邱丽华 《南方水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期37-45,共9页

细胞分裂周期蛋白42(CDC42)是一类广泛表达的小三磷酸鸟苷(GTP)酶,是Ras家族内Rho亚家族的成员之一,具有GTP酶活性。CDC42在细胞吞噬和炎症发生等先天免疫中发挥着不可替代的功能。该研究通过RACE技术克隆得到了斑节对虾(Penaeus monod... 细胞分裂周期蛋白42(CDC42)是一类广泛表达的小三磷酸鸟苷(GTP)酶,是Ras家族内Rho亚家族的成员之一,具有GTP酶活性。CDC42在细胞吞噬和炎症发生等先天免疫中发挥着不可替代的功能。该研究通过RACE技术克隆得到了斑节对虾(Penaeus monodon)细胞分裂周期蛋白42(Pm CDC42)基因c DNA全长。生物信息学分析结果表明Pm CDC42全长2 233 bp,包括59 bp的5'非编码区(UTR)、1 598 bp的3'UTR和576 bp的开放阅读框(ORF),编码191个氨基酸。通过实时定量PCR技术,研究了Pm CDC42在斑节对虾各组织的表达模式,并研究了其在不同p H、盐度、重金属镉(Cd)和哈维弧菌(Vibrio harveyi)胁迫下的表达情况。结果显示,Pm CDC42基因在各组织中均有表达,在血淋巴中的表达量最高。在p H和Cd胁迫下Pm CDC42表达量显著升高;在高盐胁迫下Pm CDC42表达量上调,低盐胁迫下Pm CDC42表达量变化不显著;在哈维弧菌的刺激下PmCDC42上调表达极显著。这表明Pm CDC42在斑节对虾先天免疫中起重要作用。 展开更多

关键词 斑节对虾 细胞分裂周期蛋白42 PH 盐度 镉 哈维弧菌

在线阅读 下载PDF 职称材料

CDC28蛋白激酶调节亚基2对卵巢癌A2780细胞丝足形成的影响及其机制研究 被引量：1

13

作者 孙倩玲 董梦梦 +6 位作者 易祎 胡锦辉 张米妮 朱琳 黄石榴 孙贤青 袁成福 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期618-623,共6页

目的探讨CDC28蛋白激酶调节亚基2(CKS2)对A2780细胞丝足形成的影响及其可能机制。方法采用慢病毒介导的sh RNA敲除A2780细胞的CKS2基因,显微镜下观察细胞丝足的变化;采用细胞划痕实验检测A2780细胞迁移能力的变化;采用real time PCR检测... 目的探讨CDC28蛋白激酶调节亚基2(CKS2)对A2780细胞丝足形成的影响及其可能机制。方法采用慢病毒介导的sh RNA敲除A2780细胞的CKS2基因,显微镜下观察细胞丝足的变化;采用细胞划痕实验检测A2780细胞迁移能力的变化;采用real time PCR检测CKS2敲除对CDC42两种剪接变异体(CDC42-V1和CDC42-V2)表达的影响,以及不同卵巢癌标本中CKS2、CDC42-V1和CDC42-V2剪接变异体的表达情况。结果 CKS2表达抑制后,A2780细胞丝足明显减少,细胞迁移能力明显减弱(P<0.05),CDC42-V1 m RNA表达降低,而CDC42-V2 m RNA表达升高(P<0.05)。Real time PCR结果显示,卵巢癌组织标本中CKS2及CDC42-V1的表达高于对应的正常卵巢组织,而CDC42-V2的表达低于对应的正常卵巢组织(P<0.05)。结论 CKS2通过调控CDC42的选择性剪接而影响细胞丝足的形成,进而影响卵巢癌细胞A2780的迁移能力。 展开更多

关键词 cdc28蛋白激酶调节亚基2 cdc42 GTP结合蛋白质 卵巢肿瘤 伪足 选择性剪接

在线阅读 下载PDF 职称材料

有氧运动对青年期小鼠海马体Cdc42及DNA损伤反应相关因子的短期和长期影响 被引量：1

14

作者 骆远 宋诗语 +3 位作者 赵格 彭爽 李良鸣 刘淑靖 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期1956-1963,共8页

目的:探讨有氧运动对青年期小鼠海马体细胞分裂周期蛋白42(cell division cycle protein 42,Cdc42)及DNA损伤反应(DNA-damage response,DDR)相关因子的短期和长期影响。方法:构建运动小鼠模型,将40只8周龄SPF级C57BL/6雄性小鼠随机分为... 目的:探讨有氧运动对青年期小鼠海马体细胞分裂周期蛋白42(cell division cycle protein 42,Cdc42)及DNA损伤反应(DNA-damage response,DDR)相关因子的短期和长期影响。方法:构建运动小鼠模型,将40只8周龄SPF级C57BL/6雄性小鼠随机分为安静组和运动组,每组20只,均使用普通饲料喂养。运动组小鼠进行12周的中等强度(75%VO_(2)max)跑台运动,安静组小鼠在不跑步的情况下暴露于跑步机噪声和振动中。12周训练结束后,从安静组和运动组中随机选取小鼠各10只(5月龄),分别为安静青年期小鼠(Sed-young)组和运动青年期小鼠(Exe-young)组;剩余的10只安静组小鼠和10只运动组小鼠继续喂养至老年期(18月龄),作为安静老年期小鼠(Sed-old)组和运动老年期小鼠(Exe-old)组。所有小鼠均收集Y迷宫、体成分数据及海马体组织,通过Cdc42活性检测和Western blot法比较各组小鼠海马体Cdc42-GTP活性及Cdc42蛋白表达情况,通过RT-qPCR比较各组小鼠海马体Cdc42、Pak4、Pak5、Cofilin、Chk2、Atm和P53等DDR相关因子的mRNA水平。结果:与安静组比较,有氧运动可显著降低青年期小鼠脂肪百分比(P<0.05),显著提高空间识别记忆能力(P<0.05),并维持至老年期(P<0.05)。与安静组比较,运动青年期小鼠和运动老年期小鼠海马体Cdc42表达及活性均显著降低(P<0.05)。与安静组比较,有氧运动显著降低青年期小鼠海马体Cdc42、Pak4、Pak5、Cofilin、Atm、Chk2和P53的转录水平(P<0.05);其中,Cdc42、Pak4、Pak5、Cofilin、Chk2和P53的转录水平下降可维持至老年期(P<0.05)。结论:青年期进行的有氧运动可持续抑制小鼠海马体Cdc42及DDR相关因子的表达,保护海马体神经元细胞免受DNA损伤而死亡或衰老直至老年期。 展开更多

关键词 运动 海马体 细胞分裂周期蛋白42 DNA损伤反应 衰老

在线阅读 下载PDF 职称材料

CDC42在与衰老相关的炎症和动脉粥样硬化中的重要作用

15

作者 丁蕾 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期169-169,共1页

细胞分裂周期蛋白42（cell division cycle 42,CDC42）是Rho GTP酶家族的一员,主要负责调节肌动蛋白细胞骨架的结构以及与极化、增殖、运动有关的膜的变化。CDC42信号通路与内皮细胞衰老相关并且介导慢性炎症反应的发生,它的异常激活可... 细胞分裂周期蛋白42（cell division cycle 42,CDC42）是Rho GTP酶家族的一员,主要负责调节肌动蛋白细胞骨架的结构以及与极化、增殖、运动有关的膜的变化。CDC42信号通路与内皮细胞衰老相关并且介导慢性炎症反应的发生,它的异常激活可以导致很多病理状态。为了探究CDC42在促进慢性炎症和斑块形成方面的机制,来自日本千叶大学医学院的研究团队在人类衰老的内皮细胞、CDC42敲除小鼠模型和nol-6线虫变异体模型中研究了在与衰老相关的炎症和动脉粥样硬化中CDC42的重要作用。 展开更多

关键词 cdc42 千叶大学 慢性炎症反应 内皮细胞 细胞分裂周期 信号通路 变异体 酶家族 CYCLE 炎性因子

在线阅读 下载PDF 职称材料

ACK1在子痫前期孕妇胎盘中的表达及其对滋养细胞侵袭功能的调控 被引量：6

16

作者 刘洋铭 车平 +4 位作者 袁雨 谭彬 王平珍 漆洪波 单楠 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期728-733,共6页

目的:研究活化的Cdc42结合激酶(activated Cdc42 associated kinase,ACK1)在正常足月孕妇胎盘与子痫前期(preeclampsia,PE)孕妇胎盘组织中的表达差异及其对滋养细胞功能的调控作用,探讨其在子痫前期发病机制中的作用。方法:收集2015年1... 目的:研究活化的Cdc42结合激酶(activated Cdc42 associated kinase,ACK1)在正常足月孕妇胎盘与子痫前期(preeclampsia,PE)孕妇胎盘组织中的表达差异及其对滋养细胞功能的调控作用,探讨其在子痫前期发病机制中的作用。方法:收集2015年10月至2016年10月在重庆医科大学附属第一院产科行计划性剖宫产手术的23例正常足月孕妇胎盘和23例PE孕妇胎盘组织,使用免疫组化(immunohistochemistry,IHC)及蛋白免疫印迹法(Western blot,WB)检测胎盘组织中ACK1的表达及差异情况。滋养细胞株(HTR8/SVneo)分为3组:常氧对照组(N组)、缺氧/复氧组(H/R组)及ACK1基因序列慢病毒敲降组(ACK1 shRNA组),使用Transwell实验分析检测各组细胞的侵袭情况,采用流式细胞仪检测各处理组细胞凋亡率。使用Western blot检测各组细胞中ACK1蛋白,金属蛋白质酶(matrix metalloproteinase,MMP)-9及其特异性抑制因子(the tissue inhibitor of metalloproteinase,TIMP)-2的蛋白表达差异。结果:与正常足月孕妇胎盘比较,ACK1在人类子痫前期胎盘中表达明显降低(t=3.890,P=0.018)。细胞学实验中,与N组比较,ACK1 shRNA组和H/R组ACK1蛋白表达明显降低(t=12.260,P=0.000;t=10.740,P=0.000),ACK1 shRNA组和H/R组MMP9蛋白表达均明显降低(t=8.071,P=0.000;t=7.745,P=0.001),TIMP1蛋白表达显著升高(t=10.690,P=0.000;t=14.330,P=0.000)。ACK1 shRNA组和H/R组细胞迁移至下室的细胞数明显减少(t=12.260,P=0.000;t=11.320,P=0.000),H/R组细胞凋亡率显著升高(t=2.260,P=0.000),但ACK1 shRNA组细凋亡率无明显改变(t=8.317,P=0.088)。结论:ACK1的表达下调可抑制滋养细胞的侵袭,可能在子痫前期发病机制中有重要的作用。 展开更多

关键词 活化的cdc42结合激酶 侵袭 金属蛋白质酶 子痫前期

在线阅读 下载PDF 职称材料

东方蜜蜂微孢子虫RCDP42基因的分子克隆与生物信息学分析

17

作者 郭睿 张凯遥 +6 位作者 张佳欣 郭思佳 张浩宇 何旭江 赵红霞 付中民 陈大福 《福建农林大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2023年第4期527-532,共6页

对东方蜜蜂微孢子虫RCDP 42基因进行分子克隆,并通过生物信息学解析RCDP 42蛋白的分子特性,进而对东方蜜蜂微孢子虫和其他物种的RCDP 42蛋白进行保守基序和结构域预测及分析。结果表明,成功克隆到东方蜜蜂微孢子虫RCDP 42基因的CDS区,RC... 对东方蜜蜂微孢子虫RCDP 42基因进行分子克隆,并通过生物信息学解析RCDP 42蛋白的分子特性,进而对东方蜜蜂微孢子虫和其他物种的RCDP 42蛋白进行保守基序和结构域预测及分析。结果表明,成功克隆到东方蜜蜂微孢子虫RCDP 42基因的CDS区,RCDP 42基因在孢子中真实表达,含有540个核苷酸,可编码179个氨基酸;RCDP 42蛋白的分子质量约为20.3 ku,分子式为C_(915)H_(1416)N_(230)O_(274)S_(10),脂溶系数为86.03,等电点为6.57;包含的亲水氨基酸数量多于疏水氨基酸,但不含信号肽与跨膜结构域,说明RCDP 42可能为亲水性蛋白、胞内蛋白和非跨膜蛋白,可能包含16个磷酸化位点、63个α-螺旋、43条延长链、11个β-转角及62个无规则卷曲。在东方蜜蜂微孢子虫、蚱蜢脑炎微孢子虫和肠脑炎微孢子虫的RCDP 42蛋白中均鉴定到3个保守基序(motif 1、motif 2和motif 3)与1个结构域(Rho)。 展开更多

关键词 东方蜜蜂微孢子虫 ras相关细胞分裂蛋白42样蛋白 分子克隆 分子特性 系统进化

在线阅读 下载PDF 职称材料

胶质瘤miR-29c表达异常减少及其对肿瘤细胞增殖的影响 被引量：7

18

作者 石翠娟 王影 +8 位作者 于士柱 孙翠云 王虔 徐慧 安同岭 温艳军 徐金玲 刘静 李慧凝 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期47-52,共6页

目的：探讨microRNA-29c（miR-29c）在胶质瘤中的表达及其对细胞分裂周期蛋白42（CDC42）的调控作用和对细胞增殖的影响。方法：用锁定寡核苷酸原位杂交法和免疫组织化学法检测60例不同级别胶质瘤及10例非肿瘤对照脑组织中miR-29c和CDC4... 目的：探讨microRNA-29c（miR-29c）在胶质瘤中的表达及其对细胞分裂周期蛋白42（CDC42）的调控作用和对细胞增殖的影响。方法：用锁定寡核苷酸原位杂交法和免疫组织化学法检测60例不同级别胶质瘤及10例非肿瘤对照脑组织中miR-29c和CDC42的表达水平，实时荧光定量RT-PCR、Western blot及MTS法分别检测U87MG细胞中miR-29c瞬时表达、CDC42 mRNA和蛋白表达及其对胶质瘤细胞增殖的影响。结果：各级别胶质瘤的miR-29c表达水平均明显低于非肿瘤对照脑组织，且随肿瘤级别升高而显著降低，各组间的差异均有统计学意义（P〈0.001）。而CDC42表达水平则呈相反趋势，其表达水平随胶质瘤良恶性级别增加相应升高，除Ⅰ～Ⅱ级组与非肿瘤对照组之间外，其余各组间的差异均有统计学意义（P〈0.001）。与对照组相比， miR-29c转染组的CDC42 mRNA（P〈0.001）和蛋白表达水平（P〈0.01）均明显降低。miR-29c转染组细胞的增殖能力明显低于U87MG空白对照组和Scr转染组（P〈0.05）。结论：miR-29c是胶质瘤的抑瘤miRNA，其表达水平可作为评价胶质瘤良恶性级别的重要参考指标。miR-29c在胶质瘤中表达减少解除了其对靶基因CDC42转录后水平的抑制作用，并导致肿瘤细胞无限增殖。表明miR-29c表达异常减少可能是引起胶质瘤发生、发展的关键事件。 展开更多

关键词 胶质瘤 微小RNA-29c 细胞分裂周期蛋白42 细胞增殖

在线阅读 下载PDF 职称材料

丁苯酞对SD大鼠脑出血后血脑屏障的影响及其机制 被引量：13

19

作者 邱珂 邓淑文 +3 位作者 刘慧 游红 雷强 卢伟 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期1321-1329,共9页

目的:探讨SD大鼠脑出血后高尔基体和血脑屏障的变化及丁苯酞的干预作用和机制。方法:SD大鼠随机分为正常对照组、假手术组、脑出血组及丁苯酞组。造模48 h后测量各组的伊文思蓝含量,采用蛋白质印迹法及real-time PCR检测Cdc42,GM130,ZO-... 目的:探讨SD大鼠脑出血后高尔基体和血脑屏障的变化及丁苯酞的干预作用和机制。方法:SD大鼠随机分为正常对照组、假手术组、脑出血组及丁苯酞组。造模48 h后测量各组的伊文思蓝含量,采用蛋白质印迹法及real-time PCR检测Cdc42,GM130,ZO-1和Occludin蛋白灰度比值及mRNA相对表达量,免疫荧光观察Cdc42和GM130是否存在共定位及脑出血后丁苯酞干预的荧光强度,免疫组织化学观察ZO-1和Occludin在血肿周围内皮细胞上的分布。结果:脑出血组的神经功能评分及伊文思蓝含量明显高于假手术组(P<0.05);丁苯酞组的神经功能评分及伊文思蓝含量较脑出血组明显降低(P<0.05)。脑出血组Occludin,ZO-1,GM130及Cdc42蛋白灰度比值及mRNA相对表达量较假手术组降低(P<0.05);丁苯酞组中Occludin,ZO-1及Cdc42蛋白灰度比值及mRNA相对表达量较脑出血组升高(P<0.05),而GM130 mRNA差异无统计学意义(P>0.05)。免疫组织化学发现脑出血组中Occludin和ZO-1在血肿周围的表达较假手术组降低(P<0.05),而丁苯酞组则增加(P<0.05)。结论:脑出血后高尔基体形态发生改变,血脑屏障受到破坏;丁苯酞能减轻神经功能缺损及血脑屏障破坏程度,其机制与Cdc42的上调相关,而与GM130可能无关。 展开更多

关键词 脑出血 丁苯酞 GM130 cdc42 血脑屏障 紧密连接蛋白

在线阅读 下载PDF 职称材料

p21活化激酶在肿瘤中的作用 被引量：6

20

作者 满枋霖 赵良智 孙新 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期579-585,共7页

p21活化激酶(p21-activated kinase,PAKs)是小G蛋白Rac和细胞分裂调控蛋白42(Cdc42)的一类效应蛋白质.PAKs是一类进化保守的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,在细胞骨架重排、细胞增生、细胞存活及增殖等方面发挥重要作用.在哺乳动物中根据结构... p21活化激酶(p21-activated kinase,PAKs)是小G蛋白Rac和细胞分裂调控蛋白42(Cdc42)的一类效应蛋白质.PAKs是一类进化保守的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,在细胞骨架重排、细胞增生、细胞存活及增殖等方面发挥重要作用.在哺乳动物中根据结构特征可将PAKs分为2个亚家族I类(A组)和Ⅱ类(B组):I类包括PAK1、PAK2和PAK3,Ⅱ类包括PAK4,PAK5和PAK6.近年来,对PAKs在肿瘤发生发展中作用的研究成为焦点.本文对PAKs中各成员的结构功能,及其在肿瘤发生发展过程中的作用等方面进行简要综述. 展开更多

关键词 P21活化激酶 RAC 细胞分裂调控蛋白42(cdc42) 肿瘤

在线阅读 下载PDF 职称材料