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题名保存条件对恒河猴CD8^(+)T细胞活性的影响
被引量:2
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作者
罗嘉慧
卢秋翰
李国萃
张京京
丛喆
魏强
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机构
北京协和医学院比较医学中心
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出处
《中国比较医学杂志》
CAS
北大核心
2021年第4期33-37,共5页
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基金
国家自然科学基金(81971944)
中国医学科学院医学与健康科技创新工程重大协同创新项目(2017-I2M-1-014)
+1 种基金
十三五传染病科技重大专项(2017ZX10304402,2018ZX10101001,2018ZX10301103)
基础医学学科建设项目——病原生物学。
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文摘
目的通过细胞内细胞因子染色(intracellular cytokine staining,ICS)检测CD8^(+)T细胞反应强度,探究不同保存条件对CD8+T细胞活性影响。方法采集9只恒河猴外周血,分离外周血单个核细胞(PBMC),一部分新鲜细胞直接用于检测,剩余细胞冻存至-80℃和液氮,冻存1周和1年再用于检测,检测时用阳性刺激物进行刺激,流式分析活细胞比例,MIP-1β、TNF-α、IL-2、IFN-γ四种细胞因子分泌情况和细胞脱粒标志物CD107a的表达情况。结果随着冻存时间的增加,细胞存活率降低,且液氮冻存比-80℃冻存有更高的存活率。在细胞因子分泌和细胞脱粒标志物CD107a的表达情况中,冻存一年的细胞MIP-1β、TNF-α分泌量显著高于正常细胞,细胞状态发生了改变,冻存一周的细胞与新鲜细胞状态更为相近。结论想要保持低的细胞死亡率和正常的CD8+T细胞反应,应使用新鲜细胞或短期冻存的细胞进行测量CD8^(+)T细胞反应水平的实验。
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关键词
细胞内细胞因子染色
CD8^(+)T细胞
细胞活性
恒河猴
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Keywords
CD8^(+)T cells
intracellular cytokine staining
cell viability
rhesus monkeys
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分类号
R-33
[医药卫生]
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